小花棘豆中毒对和田羊瘤胃纤毛虫数量的影响

小花棘豆(Oxytropis glabra)在新疆分布广泛,可引起放牧牲畜中毒。本文研究小花棘豆中毒和田羊瘤胃纤毛虫数量的变化,分析小花棘豆中毒对绵羊瘤胃内环境的影响,为小花棘豆中毒的防治及安全利用提供基础。     

微生物发酵饲料对肉牛瘤胃液pH值和微生物数量的影响

为了研究微生物发酵饲料对肉牛瘤胃液微生物(黄色瘤胃球菌、白色瘤胃球菌、乳酸杆菌和牛链球菌)数量的影响,将90头育肥肉牛[体重为(373.40±42.53)kg]分为3组,即对照组、试验1组和试验2组,每组5个重复,每个重复6头牛,对照组饲喂100%基础精料,试验1,2组分别用25%和40%微生物发酵饲料替代基础精料。试验结束时每个重复选3头牛屠宰后取瘤胃液测定瘤胃液p H值,并用Real-Time PCR方法测定瘤胃内黄色瘤胃球菌、白色瘤胃球菌、乳酸菌和牛链球菌数量。结果表明:1)各组瘤胃液p H值差异不显著(p H值为6.24~6.29,P0.05);2)与对照组相比,试验1组黄色瘤胃球菌数量提高,但差异不显著(P0.05),试验2组极显著提高(P0.01);3)与对照组相比,试验1,2组白色瘤胃球菌、乳酸杆菌、牛链球菌数极显著提高(P0.01)。说明肉牛精料中添加微生物发酵饲料对瘤胃p H值无显著影响,能增加瘤胃内黄色瘤胃球菌、白色瘤胃球菌、乳酸杆菌和牛链球菌数量,且随着微生物发酵饲料添加量的增加有增加的趋势。     

小花棘豆中毒对和田羊丘脑-垂体-性腺轴α-甘露糖苷酶的影响

探讨小花棘豆中毒对和田羊丘脑-垂体-性腺轴α-甘露糖苷酶(AMA)的影响,进一步揭示小花棘豆的毒性作用机理。将12只和田羊随机分为3组,即对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组。试验组分别按10 g/kg和20 g/kg的剂量饲喂小花棘豆,饲喂至典型中毒症状出现为止。屠宰后每组随机采集试验羊的丘脑、垂体和性腺,检测和田羊丘脑-垂体-性腺轴AMA活性及表达的变化。结果表明:和田羊丘脑-垂体-性腺轴高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(AMA1)和溶酶体α-甘露糖苷酶(AMA2)均有表达,但各试验组表达转录水平与对照组差异显著,试验Ⅰ组与试验Ⅱ组和田羊丘脑-垂体-性腺轴的AMA2的表达均与对照组差异不显著(P﹥0.05),试验Ⅱ组和田羊丘脑-垂体-性腺轴AMA1的表达极显著低于对照(P﹤0.01)。结果显示,小花棘豆中毒可影响和田羊丘脑-垂体-性腺轴AMA的活性及其基因的转录表达。     

热应激对奶牛瘤胃液微生物数量的影响

本试验采用实时荧光定量PCR技术研究热应激对不同泌乳阶段奶牛瘤胃液微生物数量的影响。采用2×3交叉试验设计,根据胎次、平均泌乳天数和产奶量相近的原则,选择18头经产中国荷斯坦奶牛,分为泌乳前期(产后15～100 d)组、泌乳中期(产后112～175 d)组、泌乳后期(产后200～230 d)组,每组6个重复,根据实测的牛场温湿指数(THI)变化,采用热应激与非热应激的自身对照试验。结果表明:与非热应激期相比,热应激极显著提高了泌乳前期组奶牛瘤胃液各类微生物数量(P<0.01),极显著提高了泌乳后期组奶牛瘤胃液黄化瘤胃球菌数量和泌乳中期组的产琥珀酸拟杆菌数量(P<0.01),极显著降低了泌乳中、后期组的总细菌数量、白色瘤胃球菌数量和泌乳后期组的产琥珀酸拟杆菌数量(P<0.01)。整个热应激期THI与泌乳前期组奶牛瘤胃液总细菌数量(P<0.01)、厌氧真菌数量(P<0.05)、白色瘤胃球菌数量(P<0.01)和黄化瘤胃球菌数量(P<0.05)有较强的相关性,而THI与泌乳中、后期组奶牛的这些指标相关性较差。综上所述:1)泌乳前期组奶牛热应激期的瘤胃液各类微生物数量均极显著高于非热应激期,但对泌乳中、后期组的各类微生物数量影响无规律性。2)泌乳前期组奶牛瘤胃液微生物数量对热应激的反应更敏感。     

红曲霉与中药合生素对延边黄牛瘤胃内环境的影响

本实验研究红曲霉与中药合生素对延边黄牛瘤胃内环境的影响。选择3只安有永久性瘤胃瘘管的成年延边黄牛母牛为试验动物(315±30kg),采用3×3完全拉丁方设计试验。分别测定瘤胃液PH值、纤毛虫数、NH3-N浓度、和微生物蛋白质(BCP)浓度。试验结果表明:采食后各组pH值无显著影响(p0.05)。瘤胃内NH3-N浓度均处于合成瘤胃微生物的最佳浓度范围内,红曲霉+中药组与对照组、红曲霉组相比差异显著(P0.05)。6h纤毛虫数量对照组显著高于红曲酶组和红曲酶+中药组(p0.05)。其他时间差异不显著。红曲霉加中药组BCP含量显著高于其他两组(p0.05)。说明红曲霉加中药组中的信息有提高延边黄牛瘤胃微生物合成的作用,因而可促进瘤胃内养分消化代谢。     

“前胃灵”散剂对奶牛瘤胃pH值及纤毛虫活力的试验研究

目的通过"前胃灵"散剂对奶牛投药后的比试验观察,探明"前胃灵"散剂对奶牛瘤胃内环境的影响。方法250g/200kg.bw,1次/d,口服,分别在给药前、给药后2h、给药后4h进行检测奶牛瘤胃液的pH值,纤毛虫的活力及纤毛虫的数量。结论"前胃灵"散剂能调整瘤胃液的pH值,中和瘤胃内的酸性产物,使瘤胃液的pH值恢复到健康水平,pH值在7.3-7.4的水平。"前胃灵"散剂能提高瘤胃纤毛虫的活力,明显增加了纤毛虫的数量。     

红曲霉合生素对延边黄牛瘤胃内环境的影响

试验研究红曲霉合生素对延边黄牛瘤胃内环境的影响。选择6只安装永久性瘤胃瘘管的成年延边黄牛母牛为试验动物[(325±25)kg],采用3×3完全拉丁方设计试验。分别测定瘤胃液pH值、纤毛虫数、NH3-N浓度和BCP浓度。试验结果表明:采食后各组pH值无显著影响(P0.05)。瘤胃内NH3-N浓度均处于合成瘤胃微生物的最佳浓度范围内,红曲霉+中药组与对照组、红曲霉组相比差异显著(P0.05)。6h纤毛虫数量对照组显著高于红曲酶组和红曲酶+中药组(P0.05)。其它时间差异不显著。红曲霉+中药组BCP含量显著高于其它两组(P0.05)。说明红曲霉+中药组有提高延边黄牛瘤胃微生物合成的作用,因而可促进瘤胃内养分消化代谢。     

茶皂素对奶牛瘤胃发酵及瘤胃微生物区系的影响

本试验旨在研究茶皂素对奶牛瘤胃发酵及瘤胃微生物区系的影响。试验选用12头健康状况良好,体重相近的荷斯坦奶牛,随机分为4组,均饲喂基础饲粮,各组分别灌服0(对照)、20、30、40 g/d茶皂素,茶皂素与水混匀灌服,进行预试期14 d,正试期35 d的饲养试验。正试期期间每隔7 d,在晨饲前1 h用口腔采样器采集瘤胃液测定瘤胃发酵指标,用实时定量PCR(qRT-PCR)法测定瘤胃微生物含量。结果表明:1)与对照组相比,茶皂素显著降低了瘤胃液p H(30、40 g/d组)、氨态氮的浓度(20、30、40 g/d组)(P0.05),但均未超过正常范围值;茶皂素显著提高了微生物蛋白(30、40 g/d组)、丙酸(20、30、40 g/d组)和丁酸浓度(20、30、40 g/d组)(P0.05),30 g/d组的微生物蛋白浓度提高了20.20%;但茶皂素对总挥发性脂肪酸和乙酸浓度的影响不显著(P0.05)。2)与对照组相比,茶皂素各组的瘤胃液原虫、溶纤维丁酸弧菌含量均显著降低(P0.05),甲烷菌、白色瘤胃球菌、产琥珀酸丝状杆菌、黄色瘤胃球菌、真菌含量没有显著变化(P0.05)。综上所述,补饲茶皂素改善了奶牛瘤胃发酵模式,并显著影响了奶牛瘤胃微生物区系,30 g/d的剂量对奶牛较为适宜。     

前胃驰缓牛瘤胃内环境的检测与分析

用胃导管插入前胃驰缓牛的瘤胃，吸取胃液，测定胃液的ＰＨ和其中的纤毛虫活率数量。发现前胃驰缓牛瘤胃液的ＰＨ值多数降低，部分牛升高。纤维毛虫的活力明显降低（２０－４０％）。纤毛虫数量明显减少。     

假蒟提取物对山羊瘤胃主要微生物含量的影响

为了研究日粮中长期添加假蒟提取物对山羊瘤胃主要微生物的影响,该试验选用40只体重相近的海南黑山羊(9.90±1.13 kg),随机分为4个日粮处理组,分别在精料补充料中添加0、300、600和1 200 mg/kg假蒟提取物,正试期56 d,分别于正试期第14、28、42和56天晨饲前用口腔采样器采集瘤胃液,用实时定量PCR法测定瘤胃原虫、真菌和细菌含量。结果表明,日粮中添加300 mg/kg假蒟提取物显著提高了海南黑山羊的平均日增重,并降低了料重比(P0. 05);日粮添加假蒟提取物显著降低了山羊瘤胃液原虫、真菌、黄色瘤胃球菌、白色瘤胃球菌、甲烷菌、溶纤维丁酸弧菌含量(P0.05),而对产琥铂酸丝状杆菌含量无显著影响(P0.05)。试验结果表明,日粮中添加300 mg/kg假蒟提取物可提高山羊生长性能,添加假蒟提取物可显著降低山羊瘤胃主要微生物数量。     

小花棘豆中毒对和田羊血清蛋白和血脂的影响

12 Hetian sheeps were randomly and equally divided into 3 groups (the control group, experimental groupⅠ,groupⅡ) to investigate the effect of Oxytropis glabra DC poisoning on serum protein and blood fat, then reveal the toxicity mechanism of Oxytropis glabra DC. These experimental groups of sheeps were fed daily contents of 10 or 20 g/（kg·BW） until typical symptoms were observed. The contents of serum protein and blood fat were determined respectively before challenge test and at intervals of 7 days in this test. Meanwhile, the serum proteins were analysed by electrophoresis. After 42 days test, the results demonstrated that the contents of serum TP, GLO, α-globulin and HDL-C did not significantly change in each group (P>0.05); the contents of β-globulin, TC, LDL-C and VLDL-C in experimental groups were higher than normal control group, the contents of ALB, γ-globulin and TG in experimental groups were lower than normal control group, with significant differences between the experimental groups （P <0.05 or P <0.01）; the content ratio of albumin to globulin(A/G) in test groups were decreased. The results showed that the sheeps’ liver displayed different degrees of damage by poisoning of Oxytropis glabra DC.     

Effects of Oxytropis glabra DC Poisoning on the Reproductive Organs in Hetian Sheep Ewes

The study was aimed to research the effects of Oxytropis glabra DC (O.glabra DC) poisoning on reproductive organs coefficent, reproductive performance and related gene expression in Hetian sheep ewes. The sera, hypothalamus, pituitary and ovary of Hetian sheep ewes cases poisoning of O. glabra DC were collected, the organ exponent and contents of GnRH, FSH, LH, E₂ and P₄ in serum were measured, then the mRNA expression of reproductive genes were measured. The result demonstrated that the index of hypothalamus, pituitary and ovary were extremely significantly higher than normal sheep (P < 0.01),the follicle number on the surface of the ovaries in poisoning groups were significantly lower than normal sheep (P < 0.05). The result of hematoxylin-eosin staining showed that the nuclear of neuronal cells in hypothalamus were pyknosis and hyperchromatic; The nuclear of cells in pituitary deformation and hyperchromatic, cytoplasm decreased; The primary oocyte in ovary dissolved, disappeared, interstitial blood vessel expanded. The content of GnRH, FSH, LH, E₂ and P₄ in serum in poisoned Hetian sheep ewes were extremely significantly lower than normal sheep (P < 0.01). The mRNA expression levels of Kiss-1, GPR54, ERα in hypothalamus, GnRHR in pituitary and FSHR and LHR in ovary were extremely significantly lower than normal sheep (P < 0.01). The result showed that O. glabra DC poisoning could affect Hetian sheep ewes reproductive system by affecting microstructure and ultrastructure of hypothalamus-pituitary-ovarian axis.     

小花棘豆中毒对和田羊母羊繁殖器官的影响

试验旨在探讨小花棘豆（Oxytropis glabra DC）中毒对和田羊母羊繁殖器官指数、性激素水平和相关基因mRNA表达量的影响。以小花棘豆中毒和田羊母羊为研究对象,采集血清后屠宰,采集试验羊的丘脑、垂体和卵巢组织,测定其脏器系数,检测血清中促性腺激素释放激素（GnRH）、促卵泡素（FSH）、促黄体素（LH）、雌二醇（E₂）和孕酮（P₄）含量的变化,并检测各组织中相关繁殖基因的表达。结果显示,小花棘豆中毒和田羊母羊丘脑、垂体和卵巢指数均极显著升高（P < 0.01）,且卵巢表面卵泡数显著下降（P < 0.05）,HE染色表明丘脑神经元细胞固缩、浓染;垂体中细胞核变形、浓染,胞浆减少;卵巢中初级卵母细胞溶解、消失,间质血管扩张。小花棘豆中毒和田羊母羊血清中GnRH、FSH、LH、E₂和P₄含量均极显著下降（P < 0.01）,丘脑中Kiss-1、GPR54、ERα mRNA,垂体中GnRHR mRNA和卵巢中FSHR、LHR mRNA表达量均极显著下降（P < 0.01）。结果表明,小花棘豆毒性成分可通过丘脑-垂体-性腺轴影响和田羊母羊的生殖系统。     

新疆和田羊小花棘豆中毒实验室检测

为深入研究小花棘豆对绵羊的影响,收购自然放牧条件下中毒的和田羊2只,进行临床症状、血液项目、酶类含量、微量元素及组织病理学切片等方面实验研究,并与正常和田羊进行对比。结果表明,中毒和田羊与正常和田羊相比,红细胞数量减少;天冬氨酸转氨酶（AST）和碱性磷酸酶（AKP）含量升高;Cu、Mn含量差异显著（P〈0.05）,Fe、Zn含量差异不显著（P〉0.05）;各组织器官形态病变显著。     

苦马豆素抗血清治疗家兔小花棘豆中毒

通过检测苦马豆素（swainsonine,SW）抗血清治疗小花棘豆中毒家兔血清免疫和生化指标变化,评价SW抗血清对家兔小花棘豆中毒的治疗效果。将18只家兔随机分为对照组（6只）、攻毒组（6只）和攻毒治疗组（6只）,攻毒试验兔按干重拌料饲喂10g／（kg·d）小花棘豆草粉,攻毒组试验兔出现死亡时（第70天）停止攻毒。攻毒第21天,攻毒治疗组试验兔注射SW抗血清,每只兔每天0．5mL,连续注射4d。以攻毒试验开始进行首次采血,试验开始后每7d采血1次,进行血清免疫和生化指标测定。结果显示,攻毒第7天时攻毒家兔血清AKP活性和SW含量显著高于对照家兔（P〈0．05）;第14天时攻毒家兔血清AST和LDH活性显著高于对照家兔（P〈0．05）,血清AMA活性和E-玫瑰花环率均显著低于对照家兔（P〈0．05）;第21天时攻毒家兔血清BUN、CRE和GLU含量显著高于对照家兔（P〈0．05）。攻毒治疗组家免注射SW抗血清后血清AKP、LDH、AST、ALT活性及BuN、CRE、GLU、SW含量较攻毒家兔显著下降,AMA活性和E～玫瑰花环率显著上升。结果表明,SW抗血清可有效治疗家兔小花棘豆中毒。     

小花棘豆对卡拉库尔羊瘤胃内环境的影响

试验将9只健康的卡拉库尔公羊分为3组,每组3只,分别为对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组,研究不同的小花棘豆添加量对卡拉库尔羊瘤胃内环境及微生物发酵参数的影响。结果表明,日粮中添加小花棘豆可降低卡拉库尔羊瘤胃液pH;随着小花棘豆添加量的增加,卡拉库尔羊瘤胃液氨氮含量升高,菌体蛋白含量下降;日粮中添加小花棘豆有促进瘤胃液总挥发性脂肪酸含量升高和乙酸/丙酸比降低的趋势。     

膨化秸秆微生物发酵饲料对杜寒杂交肉羊生长性能和胃肠道发育的影响

[目的] 研究膨化秸秆微生物发酵饲料对杜寒杂交肉羊生长性能和胃肠道发育的影响。[方法] 选择81只3月龄、体重为（23.0±1.0）kg的杜寒杂交羔羊,随机分为对照组（70%精料+30%干秸秆）、试验Ⅰ组（70%精料+30%膨化秸秆微生物发酵饲料）和试验Ⅱ组（70%精料+30%膨化秸秆微生物发酵饲料,添加占日粮总蛋白浓度10%的膨化缓释尿素,NPN≥100%）。试验期为75 d,预饲期为15 d,正饲期为60 d。分析育肥羊的增重,胃肠道组织重量和表观形态。[结果] 膨化秸秆微生物发酵饲料极显著（P<0.01）提高试验组羊的采食量和日增重。试验组羊的大肠重,消化道总重和瘤胃容积均显著（P<0.05）高于对照组,试验Ⅱ组羔羊瘤胃内壁颜色优于其他组。[结论] 膨化秸秆微生物发酵饲料促进了育肥羊生长性能和胃肠道发育,试验Ⅱ组的作用更明显。     

饲粮蛋白质水平对藏系绵羊瘤胃真菌菌群结构及功能的影响北大核心CSCD

本研究旨在探究饲粮蛋白质水平对藏系绵羊瘤胃真菌菌群结构及功能的影响。试验选取18只12月龄健康、平均体重为(31.71±0.72)kg的藏系绵羊羯羊,随机分为3组,每组6只,分别饲喂代谢能相近而蛋白质含量不同(LP组,10.06%CP;MP组,12.10%CP;HP组,14.12%CP)的饲粮,试验为期120 d,包括15 d的预饲期和105 d的正试期。结果表明:1)LP组藏系绵羊的终末体重、平均日增重和平均日采食量均显著低于MP组和HP组(P<0.05),而料重比显著高于MP组和HP组(P<0.05)。2)3组18个瘤胃液样品共产生1547415条有效序列,聚类后共得到4073个OTUs。饲粮蛋白质水平并没有对藏系绵羊瘤胃真菌多样性指数产生显著性影响(P>0.05)。3)在门分类水平上,藏系绵羊瘤胃真菌优势菌门为子囊菌门、担子菌门、被孢霉亚门和新美鞭菌门等;在属分类水平上,瘤胃真菌优势菌属为青霉属、无茎真菌属、枝孢属、镰孢霉属和链格孢属等。4)采用LEfSe方法对各个分类水平上丰度有显著差异的微生物进行比较分析,共筛选到33个符合生物标记物的真菌菌群。5)基于FUNGuid对藏系绵羊瘤胃真菌群落的营养型进行功能预测,发现腐生营养型是最主要的营养型。以上结果表明,适当提高饲粮中蛋白质水平可以显著提高藏系绵羊的生长性能,但对瘤胃真菌菌群的多样性和结构组成并未产生明显的影响。     

饲用甜高粱和全株玉米青贮对肉羊前胃微生态的影响

本试验旨在探究饲用甜高粱青贮（sweet sorghum silage, SS）和全株玉米青贮（whole-plant corn silage, CS）对肉羊前胃微生态的影响。选择健康的3~4月龄杜泊母羊［（33.40±1.68） kg］14只,随机分为2组,每组7只羊,每只羊为1个重复,分别喂甜高粱青贮（SS组）和玉米青贮（CS组）,单栏饲喂并自由饮水。预饲期15 d,正试期90 d,在正试期测定并计算生长性能指标,正试期结束后,每组选取4只羊进行屠宰,采集前胃（瘤胃、网胃和瓣胃）食糜和组织样品,对前胃发酵参数、微生物表达量、上皮颜色和组织结构进行观察和测定。结果表明：1）CS组肉羊的干物质采食量显著高于SS组（P<0.05）。2）甜高粱青贮和玉米青贮育肥肉羊90 d后,对前胃的pH值未产生显著影响（P>0.05）;在网胃内容物中,SS组肉羊氨氮浓度显著高于CS组（P<0.05）,CS组肉羊丁酸含量显著高于SS组（P<0.05）;SS组肉羊瘤胃总挥发性脂肪酸含量显著高于CS组（P<0.05）。3）SS组肉羊瘤胃内短普雷沃氏菌、栖普雷沃氏菌、产琥珀酸丝状杆菌和黄色瘤胃球菌的表达量显著高于CS组（P<0.05）。4）饲粮处理显著影响前胃颜色,CS组肉羊的前胃上皮颜色比SS组深（P<0.05）。5）SS组肉羊瘤胃乳头宽度显著高于CS组（P<0.05）,饲喂甜高粱青贮和玉米青贮对肉羊网胃黏膜厚度、黏膜下层厚度和肌层厚度并未产生显著影响（P>0.05）,CS组肉羊的瓣胃黏膜上皮厚度显著高于SS组（P<0.05）。综上所述,在本试验条件下,和饲用玉米青贮相比,饲用甜高粱青贮肉羊的采食量较低,且这两种青贮料饲喂对肉羊的微生态有影响,甜高粱青贮组肉羊的瘤胃总挥发性脂肪酸含量、前胃内纤维分解菌的表达量以及瘤胃乳头宽度等指标显著高于玉米青贮组,且甜高粱青贮组肉羊的前胃上皮颜色较浅,角质化程度低,有利于肉羊的胃肠道健康。     

不同NFC/NDF比对奶山羊瘤胃微生物及瘤胃pH值变化的影响

试验研究了在不同非纤维性碳水化合物/中性洗涤纤维（NFC/NDF）比饲粮条件下诱发奶山羊亚急性瘤胃酸中毒（subacute rumen acidosis,SARA）过程中瘤胃微生物区系和瘤胃pH值的变化。该试验选用6只安装了永久性瘤胃瘘管的泌乳期关中奶山羊为试验动物,采用自身对照试验法,共分4期进行,每期10d,依次饲喂NFC/NDF比为1.02（Ⅰ期）、1.24（Ⅱ期）、1.63（Ⅲ期）、2.58（Ⅳ期）的4种饲粮,以逐渐增加饲粮精料的方法诱导奶山羊发生SARA。结果表明,随着饲粮NFC/NDF比的增大,瘤胃pH值显著降低（P〈0.05）,并且瘤胃pH值下降幅度也随之加快;随着饲粮NFC/NDF比的增加,淀粉分解菌的数量增幅最显著（P〈0.01）;饲粮NFC/NDF比为1.63时,瘤胃细菌总数、乳酸杆菌及坏死梭形杆菌的数量显著增加（P〈0.05）,当该比值为2.58时,埃氏巨型球菌和反刍兽新月单胞菌的数量出现显著增多（P〈0.05）;原虫数量在Ⅳ期降至最低,而牛链球菌的数量在整个试验期并未出现明显的波动。饲粮NFC/NDF比为1.63时,瘤胃内与碳水化合物分解有关的多数细菌的数量明显增加,SARA期时增幅更为明显,而此时原虫数量为最低。