连翘提取物FS-4体外诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡作用的研究

为了探讨连翘提取物FS-4体外对胃癌细胞SGC-7901的促凋亡作用,试验采用MTT比色法观察了FS-4对胃癌细胞SGC-7901增殖的抑制情况,AO/EB双荧光染色法和透射电子显微镜观察了细胞凋亡的形态学变化,并通过流式细胞术测定细胞的凋亡率。结果表明：FS-4对胃癌细胞SGC-7901增殖的抑制作用具有剂量和时间依赖性,其36 h的半数抑制浓度(IC₅₀)仅为3.23μg/mL;FS-4作用后细胞均出现典型的凋亡细胞形态;FS-4对细胞的诱导凋亡作用呈现明显的浓度依赖性。说明FS-4可抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖并具有诱导其凋亡的作用。     

旋毛虫ES抗原致鼠胸腺淋巴细胞凋亡的初步研究

本试验首次以体外培养的小鼠胸腺淋巴细胞为实验对象,加入旋毛虫(Trichinella spiralis)肌幼虫ES抗原做刺激物,通过(AO/EB)双荧光染色法和流式细胞术对鼠胸腺淋巴细胞的凋亡水平的检测,进而证明旋毛虫肌幼虫ES抗原能够诱导鼠淋巴细胞发生凋亡.     

JA1体外诱导HCC细胞凋亡的实验研究

采用噻唑蓝(MTT)还原法,测定了梯度浓度的某植物种子粗提物JA1对人肝癌细胞株HCC增殖作用的影响;同时采用流式细胞术、DNA凝胶电泳和透射电子显微镜技术,在体外观察了JA1对HCC细胞凋亡的诱导作用。结果显示,JA1可显著抑制肝癌细胞HCC的增殖,而且这种抑制有浓度依赖性和时间依赖性;流式细胞仪分析表明,经JA1作用后的肝癌细胞HCC检测标本中有明显的DNA低含量颗粒(“亚G1期”峰);凝胶电泳呈现出典型的DNA梯形条带;电镜下出现细胞凋亡典型的形态学改变。     

藏药秦艽花黄酮体外诱导肿瘤细胞凋亡的研究

探讨藏药秦艽花体外抗肿瘤作用,为藏药开发利用提供科学依据。以秦艽花黄酮为材料,小鼠S180、Hepa1-6、L1210、B16-F10、SP2/0瘤细胞株为研究对象,Cell counting kit-8(CCK-8)法、AO/EB、Annexin V/PI结合流式细胞术为研究手段,细胞生长抑制率、细胞凋亡形态和凋亡率为检测指标,研究藏药秦艽花黄酮体外抗肿瘤作用。CCK-8法结合AO/EB结果表明,小鼠SP2/0瘤细胞为秦艽花黄酮敏感瘤细胞;Annexin V/PI双染法结合流式细胞术结果表明,250μg/mL～750μg/mL秦艽花黄酮对SP2/0瘤细胞的早期凋亡率无明显差异,但晚期凋亡率均显著高于氟尿嘧啶(fluorouracil,5-FU)和1000μg/mL的黄酮浓度;750μg/mL黄酮浓度的晚期凋亡率为42.54%,总细胞凋亡或死细胞率为58.27%。研究结果表明,秦艽花黄酮(750μg/mL)通过诱导SP2/0瘤细胞晚期凋亡达到接近阳性药物5-FU的诱导凋亡作用。     

AO/EB双重染色法检测紫杉醇体外诱导犬乳腺肿瘤细胞凋亡

以体外培养犬乳腺肿瘤系CHMm株为模型,用0.1μmol/L的紫杉醇对细胞处理后,用台盼蓝排斥实验和MTT法检测细胞活性,AO/EB双荧光染色荧光显微镜下观察犬乳腺肿瘤细胞凋亡及形态学变化.结果显示,紫杉醇作用后,CHMm细胞生长受到不同程度的抑制,并引起细胞凋亡,出现典型的凋亡形态.表明紫杉醇能抑制CHMm生长,引起...     

人参皂苷Rh2对MSB-1细胞的增殖抑制作用及其机理

以不同质量浓度的人参皂苷Rh2与马立克氏病肿瘤细胞系MSB-1细胞共同作用,利用改良MTT法测定了人参皂苷Rh2对MSB-1细胞的增殖抑制作用,并通过流式细胞术、荧光检测和电镜形态学观察等方法探讨其抑制机理.结果显示:人参皂苷Rh2对MSB-1细胞的增殖存在押制作用,并呈剂量依赖性,人参皂苷Rh2与MSB-1细胞培养72 h后的半敷抑制质量浓度为0.65 mg/L;流式细胞术测定表明,人参皂苷Rh2可阻滞MSB-1细胞于S期;荧光检测和透射电镜观察表明,人参皂苷Rh2可以诱导部分MSB-1细胞发生凋亡.     

顺铂诱导体外犬乳腺肿瘤细胞凋亡影响

为研究顺铂诱导体外犬乳腺肿瘤细胞CHMp凋亡影响,本试验采用不同浓度的顺铂以不同作用时间处理细胞,用MTT法检测细胞活性,通过透射电镜观察CHMp细胞形态学变化,用流式细胞仪研究CHMp细胞凋亡和周期。结果显示,CHMp细胞生长受浓度和时间双重依赖,浓度越高,时间越长,抑制越明显,在电镜下观察细胞出现明显的凋亡形态,同时5μmol/L顺铂作用24 h后细胞阻滞于G1/S期,比例高达75.12%。结果表明,顺铂能抑制CHMp增殖,诱导细胞凋亡,阻滞细胞G1/S期。     

蚯蚓寡肽对伪狂犬病毒感染细胞和 HeLa细胞凋亡的影响

利用细胞病变抑制法测定了蚯蚓寡肽的体外抗伪狂犬病毒（PRV）作用，分别用AO／EB染色法和DNA琼脂糖凝胶电泳法测定了蚯蚓寡肽对HeLa细胞凋亡的影响。结果显示，蚯蚓寡肽可以抑制PRV感染细胞，同时存在剂量效应和时间效应。蚯蚓寡肽浓度越大细胞病变程度越轻，各处理组在72h的细胞病变程度最轻。蚯蚓寡肽可以诱导HeLa细胞凋亡，且具有浓度效应，1．5mg／mL组、0．75mg／mL组的细胞凋亡率分别为60．20％和48．12％。     

紫杉醇诱导犬乳腺肿瘤细胞凋亡和细胞ROS及SOD失衡的研究

为研究紫杉醇诱导犬乳腺肿瘤细胞(CHMm)凋亡及对氧化还原平衡的影响,本实验以不同浓度的紫杉醇处理细胞,采用台盼蓝排斥试验和MTT法检测细胞活性,并进行丫啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)双荧光染色以及在透射电镜下观察CHMm细胞凋亡和形态学变化,并检测细胞内活性氧(ROS)、超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和丙二醛(MDA)等反映细胞内氧化还原功能的指标。结果显示:在紫杉醇的作用下,CHMm生长受到不同程度的抑制,引起细胞凋亡,出现典型的凋亡形态;ROS和MDA含量增加,SOD和CAT酶活性降低,细胞内出现氧化还原失衡。表明紫杉醇能够抑制CHMm细胞生长,打破氧化还原平衡,诱导细胞凋亡并呈浓度和时间依赖性。     

水貂阿留申病毒诱导猫肾细胞(CrFK)凋亡

为研究水貂阿留申病毒(AMDV)在体外诱导猫肾细胞(CrFK)凋亡情况,用AMDV-G株感染CrFK细胞,采用CCK-8法检测CrFK细胞感染后的细胞存活率,用AO/EB染色法检测CrFK细胞核的形态变化,用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率,并通过分光光度计法检测细胞凋亡执行分子Caspase-3活性。结果显示,AMDV-G株感染可导致CrFK细胞增殖率下降,产生明显的形态学凋亡特征;流式细胞术检测结果显示,AMDV-G株感染可引起CrFK细胞凋亡并随着感染时间的延长凋亡率增加,同时Caspase-3活性显著升高。上述结果表明,AMDV-G株在体外能够诱导CrFK细胞凋亡,为进一步研究AMDV致病机理奠定基础。     

人参总皂苷对MSB-1细胞的增殖抑制作用及其机理初探

以不同浓度的人参总皂苷与马立克氏病肿瘤细胞系MSB-1细胞共同作用,利用改良MTT法测定了人参总皂苷对MSB-1细胞的增殖抑制作用,并通过琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术、荧光检测和电镜形态学观察等方法探讨其抑制机理。实验结果表明:人参总皂苷对MSB-1细胞的增殖存在抑制作用,并呈剂量-时间依赖性,人参总皂苷与MSB-1细胞培养72 h后的半数抑制浓度为:340.41μg/mL,其95%可信限为:(340.41±33.7)μg/mL。流式细胞术测定表明,人参总皂苷抑制了MSB-1细胞DNA的合成。琼脂糖凝胶电泳分析、荧光检测和透射电镜观察表明,人参总皂苷可以诱导部分MSB-1细胞发生凋亡。     

桦木酸对胸腺淋巴细胞凋亡的影响研究

研究桦木酸(betulinic acid,BA)对淋巴细胞凋亡的影响。采用体外培养的方法,以地塞米松(Dexamethasone,Dex)诱发胸腺淋巴细胞凋亡为模型,实验分为空白对照组、Dex组和BA(5μg/m L)组,用荧光显微镜进行细胞形态学观察,通过琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡过程中DNA的裂解,用流式细胞仪分析并测定细胞凋亡率。结果表明,BA可降低Dex诱导的淋巴细胞凋亡。提示BA对Dex诱导的淋巴细胞凋亡具有干预作用,在一定程度上起到预防性的保护作用。     

华蟾毒精对胃腺癌细胞MGC-803作用的研究

研究华蟾毒精（cinobufagin,CBG）体外对人胃腺癌细胞MGC-803的抑制作用,并初步探讨其抗肿瘤的作用机制。MTT法测定CBG对胃腺癌MGC-803细胞的生长抑制情况;采用光镜观察CBG对人胃腺癌细胞MGC-803形态的影响;流式细胞术检测CBG对MGC-803细胞的抑制作用、细胞周期及细胞早期凋亡的影响。一定浓度范围内CBG对MGC-803细胞的增殖有剂量、时间依赖性抑制作用;光镜下可见细胞形态明显发生变化,细胞变圆,分泌颗粒增多,细胞折光性下降,大部分细胞脱壁;流式细胞仪检测MGC-803细胞,G1期细胞减少,大量细胞停滞在G2/M期,凋亡细胞增多。CBG对MGC-803细胞的抑制作用与诱导其细胞阻滞及凋亡密切相关。     

龙葵生物碱诱导HeLa细胞凋亡的研究

用MTT法观察龙葵生物碱的体外抗肿瘤作用,用TUNEL染色法检测龙葵生物碱对HeLa细胞凋亡的影响,用免疫细胞化学方法研究龙葵生物碱对HeLa细胞PCNA和突变型P53蛋白表达的影响。浓度为100μg/mL～800μg/mL的龙葵生物碱对HeLa细胞的生长均表现出一定的抑制作用;TUNEL染色结果提示400μg/mL的龙葵生物碱处理HeLa细胞48 h后,能够诱导更多的细胞出现凋亡;免疫细胞化学分析结果显示,400μg/mL的龙葵生物碱处理HeLa细胞48 h后,会使HeLa细胞中PCNA蛋白和突变型P53蛋白表达量显著下调。结果表明,龙葵生物碱在体外具显著抗宫颈癌活性,其作用机制是通过诱导更多的细胞出现凋亡而实现的。     

光动力学疗法诱导犬乳腺肿瘤细胞凋亡及细胞Caspase-3和Caspase-8活性的变化

本文研究了光动力学疗法(PDT)促进犬乳腺肿瘤细胞凋亡的变化.通过不同剂量的光敏剂(HMME)和不同剂量的氦氖激光照射,用MTT法测定细胞的抑制率,确定抑制细胞生长的光敏感剂和激光照射的最佳剂量.采用最佳剂量组合作用细胞,对照射后不同时间点的细胞通过荧光显微镜(AO/EB染色)及透射电镜观察细胞的形态学变化;采用DNA LADDER法检测细胞凋亡;采用分光光度法测量照射后不同时间点的细胞内Caspase-3,Caspase-8的变化.研究表明光动力学的最佳剂量组为光敏感剂为20μg/mL,激光功率为2.8 J/cm2.光动力学疗法作用细胞后,在荧光显微镜下观察出典型的细胞形态,并且随着光照时间的加长凋亡率逐渐增加,在透射电镜下细胞呈典型的凋亡形态,并且随着光照时间的延长凋亡的程度逐渐增加;细胞内Caspase-3,Caspase-8活性随照射后时间的增加其活性逐渐增强.由此可见光动力学疗法可有效的诱导犬乳腺肿瘤细胞凋亡,Caspase-3参与了细胞的凋亡过程,在细胞凋亡过程中起到一定的作用.     

TNF-α对培养大鼠脂肪细胞凋亡的影响

以5、10、15ng／mL 3种剂量TNF—α作用体外培养的大鼠脂肪细胞0、12、24、36h和48h，采用荧光染色计数、流式细胞仪检测脂肪细胞凋亡率；透射电镜观察脂肪细胞超微结构变化；琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂情况。结果表明，TNF—α对脂肪细胞具有诱导凋亡作用，凋亡率在一定范围内具有剂量和时间依赖性，以10ng／mL TNF—α作用36h为最佳；电镜下观察可见脂肪细胞形态改变，出现染色质凝聚、边集和凋亡小体形成等特征性变化；DNA电泳检测可见处理24h以后出现“梯状”条带，作用0h和12h未见“梯状”条带。     

Let-7a对犬流感病毒诱导细胞凋亡调控作用的初步研究

犬流感(CI)是由犬流感病毒(CIV)感染犬引起的传染性疾病,感染犬主要表现为急性呼吸道症状。为了探究犬microRNA let-7a对CIV诱导细胞凋亡的调控作用,在体外用CIV对MDCK细胞进行感染,通过AO/EB染色和流式细胞术检测是否能引起细胞凋亡,并用荧光定量PCR测定let-7a的转录水平,最后通过转染let-7a来评价其对于细胞凋亡的影响。结果表明,CIV能够引起MDCK细胞发生凋亡且被感染细胞内let-7a转录下调,而过转录细胞内let-7a则能够有效地抑制病毒诱导的凋亡。研究结果显示,犬let-7a在CIV感染细胞中起着抗凋亡作用,而let-7a的低转录促进了细胞凋亡,并且这一机制可能在CIV感染犬的呼吸道损伤中扮演了一定的角色。     

紫草素对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

为了研究紫草素对肝癌细胞增殖和凋亡的影响,试验以SMMC-7721为研究对象,利用倒置显微镜观察细胞的形态变化,通过体外细胞毒性试验(MTT)比色法和流式细胞仪检测紫草素处理前后对肝癌细胞株SMMC-7721增殖和诱导细胞凋亡的作用。结果表明:在紫草素作用下,SMMC-7721形态发生改变,细胞增殖受到抑制,细胞凋亡率为(19.00±1.31)%和(23.04±1.25)%。说明紫草素对肝癌细胞株SMMC-7721具有明显的凋亡诱导作用,为抗肿瘤药物的研究提供了理论基础。     

冬虫夏草菌丝水提液对SP2／0细胞凋亡的影响

在冬虫夏草菌丝水提液诱导下，采用Hoechst33342荧光染色、MTT、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪等方法，观察和分析了SP2／0细胞的凋亡情况。结果显示，冬虫夏草菌丝水提液可抑制SP2／0细胞增殖，在荧光显微镜下，凋亡细胞呈亮绿色，DNA琼脂糖电泳可见典型的“阶梯状”条带，Annexin—V—FITC和碘化丙啶（PI）双染后流式细胞仪分析显示，细胞凋亡数量明显增多。表明，冬虫夏草菌丝水提液对SP2／0细胞增殖的抑制作用可能与诱导其凋亡有关。     

C_(17)-吡唑琳基甾体衍生物诱导Hela细胞凋亡研究

通过电镜、AO/EB染色检测细胞形态学变化,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率,通过检测Caspase活性及相关凋亡蛋白的变化确定C17-吡唑琳基甾体衍生物1诱导细胞凋亡的机制。经化合物1处理后的Hela细胞出现典型的凋亡特征,细胞凋亡率与处理时间呈正相关,同时Caspase-3与Caspase-9活性也逐渐增加,而促凋亡蛋白Bax表达量上升,抑凋亡蛋白分子Bcl-2表达量显著下降。说明C17-吡唑琳基甾体衍生物1通过线粒体通路诱导Hela细胞凋亡。