油茶12个物种花药愈伤组织诱导及继代培养

选择12个油茶物种进行花药愈伤组织的诱导,以小果油茶、普通油茶、短柱油茶、浙江红花油茶、茶陵红花油茶、多齿红花油茶诱导率较高,在40％～70％之间,其中小果油茶、普通油茶的愈伤组织诱导率高达70％。红皮糙果油茶、广西糙果油茶、茶陵红花油茶、多齿红花油茶、攸县油茶花药褐化较严重。继代培养中6-BA和KT均有较好的促进作用,小果油茶、普通油茶、短柱油茶、浙江红花油茶、茶陵红花油茶、多齿红花油茶的愈伤组织均增殖较好。油茶花药培养应以小果油茶、普通油茶、短柱油茶、浙江红花油茶、茶陵红花油茶、多齿红花油茶作为进一步试验的基本材料,开展下一步的愈伤组织增殖和脱分化试验。     

滇牡丹愈伤组织继代培养中的褐化防治

以滇牡丹Paeonia delavayi Franch成熟种胚诱导出的愈伤组织为试验材料,研究了PVP、VC、结冷胶、AgNO3、水解乳蛋白(LH)5种抗褐化剂在牡丹愈伤组织继代培养过程中的褐化控制作用和对愈伤组织生长量的影响。结果表明:愈伤组织褐化主要发生在第一次继代转接后的10 d内;在愈伤组织两次继代培养过程中,3.5g/L的结冷胶处理抗褐化效果最好,LH和AgNO3在整个继代过程中也表现了一定的抗褐化性,PVP和VC抗褐化性能相对较差。AgNO3对愈伤组织生长具有明显的促进作用。     

油茶两物种花药培养愈伤组织诱导试验

对小果油茶和广宁红花油茶的花药进行离体培养,并诱导形成愈伤组织。试验结果表明,广宁红花油茶花药具有很强的愈伤组织诱导能力,而小果油茶褐化严重,诱导率很低。培养基及其激素种类与浓度组合对愈伤组织诱导有很大影响,且两种油茶表现出一致性,在最好的MS+2,4-D0.6mg·L-1+NAA0.4mg·L-1和B5+2,4-D1.2mg·L-1+6-BA0.4mg·L-1培养基中,广宁红花油茶诱导率高达94.67%和91.00%,小果油茶则分别为8.00%和3.34%。低温预处理6～12d有助于提高诱导率。MS培养基有利于愈伤组织生长增殖。还就小果油茶花药褐化等问题进行了讨论。     

不同培养条件对油茶花药愈伤组织形成的影响

为了提高油茶花药培养的愈伤组织诱导率,以普通油茶、小果油茶、浙江红花油茶、广宁红花油茶为试验材料,初步研究了不同蔗糖质量浓度、培养基类型、琼脂用量、取材时期、是否光照培养及培养基是否添加活性炭等不同的培养条件对油茶花药愈伤组织形成的影响,来筛选较为适宜的培养条件．研究结果表明,在盛花初期所采样品的愈伤组织诱导率高于盛花末期所采样品的诱导率;以MS琼脂固化培养基、蔗糖质量浓度30～40g·L~(-1)为最佳的油茶花药愈伤组织的诱导培养基配方;在黑暗条件下培养可以提高油茶花药愈伤组织的诱导率．     

不同激素水平下橡胶树品种云研77-2脱分化培养及污染褐化情况研究

为了优化橡胶树脱分化培养体系,以橡胶树品种云研77-2的花药和胚珠作为外植体,在不同激素水平下对其花药和胚珠进行愈伤组织诱导研究,进一步观察其污染与褐化情况。结果表明,2,4-D对花药愈伤组织培养起主导性的作用,橡胶树云研77-2花药愈伤培养最适培养基为改良MS+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L NAA+1.5 mg/L KT。花药、胚珠污染与褐化试验中,胚珠培养污染和褐化率高于花药培养,且细菌、真菌污染率高于褐化率。     

低温预处理对油茶花药愈伤组织诱导的影响

以普通油茶、小果油茶、越南油茶、攸县油茶、腾冲红花油茶、宛田红花油茶、浙江红花油茶、广宁红花油茶8个油茶物种为实验材料,初步研究了低温(4℃)预处理方法对油茶花药愈伤组织诱导效率的影响.结果得出,低温预处理有利于油茶花药愈伤组织的诱导,但不同的油茶物种最适宜的预处理时间不同,普通油茶为10 d左右,攸县油茶为5～10 d,越南油茶为15 d左右,浙江红花油茶为10 d左右,广宁红花油茶为15 d左右,腾冲红花油茶为10 d左右,宛田红花油茶为15 d;小果油茶经过低温预处理诱导率没有明显提高;普通油茶和小果油茶的花药愈伤组织诱导效率均达到了70%以上,可以作为花药培养的桥梁物种在以后的研究及技术推广中加以应用.     

地涌金莲组织培养中的褐化抑制

地涌金莲组织培养中的褐化问题一直是其优良品种选育及规模化生产的技术瓶颈。为解决这一问题,以地涌金莲未成熟雄花为试材,研究了外植体消毒方式、植物生长调节剂种类及配比和不同抗褐化剂对愈伤组织褐化的影响。结果表明,未经消毒的外植体其污染率为0%,且褐化率和褐化指数均显著低于消毒后的外植体;6-BA在地涌金莲愈伤组织诱导中起主要作用,浓度为2 mg·L-1、3 mg·L-1时有利于愈伤组织的诱导,能显著降低褐化指数;添加柠檬酸+抗坏血酸(VC)混合液、表面添加VC均对地涌金莲褐化未起到明显抑制作用,姜汁和阿魏酸对抑制愈伤组织褐化有较好的效果,48.5 mg·L-1的阿魏酸能显著降低愈伤组织的褐化,使愈伤组织分化率达17.9%,较对照的2.9%提高了15%。     

三个菊花品种花器官愈伤组织辐射效应的研究

用辐射剂量为10、15、20Gy的60Coγ射线对金莲、白矮生和矮红3个小花型夏菊品种的舌状花和管状花产生的愈伤组织进行辐射处理,研究了辐射处理对愈伤组织褐化率、分化率以及分化芽的数量的影响.结果表明:γ射线对3个品种不同来源愈伤组织的褐化、分化能力均有影响.随着辐射剂量的增加,不同来源的愈伤组织的褐化程度均加重,而分化能力则减弱.此外,不同基因型和不同来源的愈伤组织,对γ射线敏感性也有差异,矮红品种的愈伤组织最敏感,舌状花产生的愈伤组织比管状花产生的愈伤组织辐射敏感性强.     

抗氧化剂和吸附剂促进银杏愈伤组织生长及防止褐化作用研究

探讨了抗氧化剂柠檬酸、抗坏血酸(VC)、植酸(PA)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP),吸附剂活性炭(AC)对银杏愈伤组织继代培养中细胞生长和褐化的影响,结果表明:柠檬酸0.2 g.L-1对银杏继代细胞生长速率促进最大,可达11.354%;15 mg.L-1VC抗褐化效果最好,叶绿素含量可达0.248%。综合细胞生长和抗褐化效果,最佳处理为柠檬酸0.2 g.L-1。     

蒙古扁桃组织培养中愈伤组织褐化机理初探

选取不同培养时间及不同培养条件下的15个样品,通过分光光度法测量其总酚含量、多酚氧化酶(PPO)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性,发现除总酚含量与愈伤组织褐化情况相关外,较高的SOD酶活性与较低的POD酶活性也是导致愈伤组织褐化的重要因素。     

银杏愈伤组织诱导与继代培养的研究

以银杏种子子叶、幼叶片、茎段为外植体,对银杏进行愈伤组织诱导及继代培育．结果表明：不同外植体的愈伤组织的诱导能力有差异,其诱导率高低顺序依次是子叶、叶片、茎段;愈伤组织质地、颜色、生长速度与基本培养基、外源激素及培养条件有很大关系,基本培养基以高含量无机盐的Ｍ Ｓ培养基为最好;最佳诱导培养基不适合继代保存,褐变极为严重;在培养基中附加抗氧化剂并调整激素种类,可以消除褐变现象,使细胞保持旺盛生长     

Changes in cellular structures and enzymatic activities during browning of Scots pine callus derived from mature buds

Visible browning is a typical feature of callus cultures derived from shoot tips of mature Scots pine (Pinus sylvestris L.). Because the ability of callus to regenerate is low, we determined the effect of browning on growth and changes in cellular structure during culture. Striking alterations in cellular structure were detected by LM (light microscopy), EM (electron microscopy) and SEM (scanning electron microscopy). Accumulation of phenolic substances was shown by histochemical staining. Staining for beta-glucosidase activity of soluble proteins that had been subjected to polyacrylamide gel electrophoresis indicated lignification of cells. The measured growth rate of callus was low compared with a hypothetical growth curve. Peroxidase activity increased rapidly soon after the start of the culture period, but especially between the second and third weeks of culture. At this time, the degradation of cell membranes and browning began coincident with the loss of chlorophyll. We conclude that browning is associated with cell disorganization and eventual cell death, making tissue culture of mature pine especially difficult.     

大叶榉愈伤组织诱导与继代培养的影响因素

以大叶榉种子的子叶、胚轴、顶芽、嫩枝叶片和茎段等为外植体 ,对大叶榉进行愈伤组织诱导及继代培养研究 .结果表明 :不同外植体的愈伤组织诱导能力有差异 ,其诱导率按高低顺序排列依次为子叶、胚轴、叶片、茎段和顶芽 ;愈伤组织质地、颜色、生长速度与基本培养基、外源激素有很大的关系 ,基本培养基以 WPM培养基最好 ;最佳诱导培养基不适合继代保存 ;在培养基中附加抗氧化剂并调整激素种类 ,可较好地防止褐变现象     

板栗组培过程中褐变研究初探

通过研究板栗组织培养过程中愈伤组织过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)的活性，结果表明，在板栗愈伤组织培养过程中多酚氧化酶(PPO)的活性与培养材料的褐变程度有一定的相关性，酶活性高，愈伤组织褐变严重。但过氧化物酶(POD)与褐变的关系不明显。通过在培养基中添加不同浓度的活性炭、抗坏血酸，以及培养于不同光照条件和不同培养温度，能够有效抑制多酚氧化酶的活性，减轻褐变程度，提高愈伤组织的产量和质量。     

落叶松不同类型胚性和非胚性愈伤落叶松不同类型胚性和非胚性愈伤

以华北落叶松继代、增殖培养的不同类型的胚性及非胚性愈伤组织为材料，测定其氨基酸、糖类、酚酸、激素以及离子的含量，结果表明氨基酸含量的差异十分明显，质地硬的非胚性愈伤组织中18种游离氨基酸含量为胚性愈伤组织的2倍以上，经ABA处理后，胚性愈伤组织中多糖及邻苯二酚含量急剧升高；三糖含量与不同基因型密切相关；乙烯释放量在非胚性愈伤组织中高于胚性愈伤组织；金属离子CO     

杂种落叶松连续繁殖与插穗生根关系的生理研究

观察了日×长杂种落叶松连续繁殖插穗不定根发育进程,研究了连续繁殖对插穗生根力衰退的阻滞效应,并分析了一轮采穗圃与原株采穗圃插穗不定根发育期内源激素含量的动态变化。结果表明:扦插后13 31 d是愈伤组织形成和不定根原始体分化发育的关键期,此时一轮分生株愈伤组织形成和不定根发育均优于原株。连续繁殖对插穗生根性状有显著作用,尤其是生根率很低的原株,经过一轮繁殖后,生根性状有极显著提高。连续繁殖影响插穗自身激素含量,尤其是IAA,经过一轮繁殖后,含量明显高于原株。从不定根发育过程中激素的动态变化看,一轮分生株插穗(IAA+GA3+ZR)/ABA比值在不定根发育前期明显高于原株,与生根率的变化一致,可用来衡量不同繁殖次数插穗生根性状的优劣。     

Effects of sodium nitroprusside on callus browning of Ficus religiosa: an important medicinal plant

Tissue browning is a major problem in tissue culturing of woody plants, especially for Ficus religiosa which occurs by the accumulation and oxidation of phenolic compounds. This study aimed to determine the effect of different concentrations of sodium nitroprusside on the appearance of callus browning from leaf explants. The results indicate that callus browning was significantly reduced by supplementation of sodium nitroprusside to the MS medium and supplemented with 2.26μM of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid and 0.22μM of 6-benzyl amino purine. The accumulation of hydrogen peroxide and phenolic compounds in the callus tissues decreased at the 50 μM concentration of sodium nitroprusside. Although catalase and peroxidase activities decreased at the 50μM concentration, the activity of superoxide dismutase and polyphenol oxidases, as well as proline content, increased exponentially. Sodium nitroprusside could be useful for the formation of non-embryogenic callus with high levels of metabolic activity for the production and isolation of secondary metabolites.