封面说明:新蚜虫疠霉Pandora neoaphidis

新蚜虫疠霉是蚜虫专性病原真菌,是流行潜力极大的昆虫种群自然调节因子,在桃蚜蚜群中大量流行。为了研究昆虫与虫霉的相互关系以及虫霉病在昆虫种群中的流行规律,陈相波等(正文731~735页)通过对不同来源的新蚜虫疠霉样品的DNA提取测试,建立Lysis提取结合Chelex-100方法的PCR检测技术体系,并以此方法为支撑进行了田间麦蚜新蚜虫疠霉流行病的调查验证。改良的Chelex方法不仅为昆虫病原真菌的田间流行学调查提供了一个快速、准确的评价方法,而且在其他真菌的核酸快速、痕量检测方面也可能具有重要的应用潜力。     

新蚜虫疠霉感染致病蚜虫的空间分布特征及其理论抽样技术

[目的]探明新蚜虫疠霉的空间分布特点,为进一步研究蚜虫新蚜虫疠霉病害流行规律及田间释放病原菌防治桃蚜提供依据.[方法]调查甘蓝田新蚜虫疠霉感染致病桃蚜密度,采用Taylor幂法与Iwao回归法分析新蚜虫疠霉的空间分布特征.[结果]新蚜虫疠霉在甘蓝田呈聚集分布中的负二项分布,公共K值为2.87.Iwao直线回归方程拟合式为(m*)=0.12+1.36 m(R=0.99),Taylor幂公式为lg(v)=0.35+1.69 lgm (R=0.96).在不同季节,其空间分布的拥挤度差异显著(F=5.34,p＜0.01),7-9月平均拥挤度最高,而1-3月和10-12月最低.精度分别为0.1、0.2、0.3和0.5时的理论抽样数公式分别为n=430.26/x+138.30、n=107.56/x+34.57、n=47.81/x+15.37和n=17.21/x+5.53.当被新蚜虫疠霉感染罹病桃蚜密度较低,即低于每样方5头时,以模型n=17.21/x+5.53较为适宜,在较高密度,即每样方10头/株以上时,以模型n=107.56/x+34.57较宜.[结论]新蚜虫疠霉在甘蓝田均呈聚集分布中的负二项分布,聚集原因是新蚜虫疠霉生物学特性和环境因素.在6-8月,对该菌侵染蚜虫的总体理论抽样以抽查20株左右样方为宜,而在其他季节,抽查30株左右样方为宜.     

有翅桃蚜蚜群中新蚜虫疠霉和烟蚜茧蜂的互作关系初探

虫霉目真菌和蚜茧蜂是蚜虫的重要专性生防因子，在田间生态系统中存在“共位共处”的现象。本文开展了以新蚜虫疠霉和烟蚜茧蜂为代表的虫霉目真菌和蚜茧蜂在有翅蚜蚜群中的互作研究。有翅蚜“孢子浴”接种新蚜虫疠霉后不同时间间隔（0 d，1 d，2 d）再进行蚜茧蜂处理，试验结果表明：各处理间的蚜虫感病率差异显著，且均高于60%；处理间的僵蚜率则差异不显著，且均低于15%。而有翅蚜先经寄生再“孢子浴”接种的5组不同间隔时间（1 d，2 d，3 d，4 d，5 d）处理试验的结果表明，组间有翅蚜的僵蚜率呈极显著差异，感病率也呈极显著差异，且僵蚜率和感病率在间隔4 d组出现明显分界。因此，在实验室条件下的有翅蚜蚜群中，新蚜虫疠霉的侵染比烟蚜茧蜂的寄生更具竞争优势，但它们之间的互作关系不是取代关系，而是迭代关系。本试验为蚜虫专性病原真菌（特别是虫霉目真菌）更好地联合蚜茧蜂在蚜虫生物防治中开展应用提供科学依据。     

不同温度下新蚜虫疠霉对桃蚜的毒力测定

在15、18、21、25、28℃温度下,将新蚜虫疠霉应用孢子浴法对1～2龄桃蚜进行毒力测定,各处理温度分别设10个剂量,每剂量处理蚜虫60～120头,逐日观察记载蚜虫死亡数量。结果表明,新蚜虫疠霉具有较强杀蚜虫特性,其致病性在25℃时达最佳效果。接种后的前2d为新蚜虫疠霉的潜伏期,接种后3～4d为对桃蚜的致死高峰期。在温度15、18、21、25、28℃下,接种60min后,新蚜虫疠霉对桃蚜的LT₅₀值分别为3.0、3.7、2.8、2.53、.9 d。     

长沙地区蔬菜蚜虫上虫霉菌研究初报

1984～1988年初,对长沙地区蔬菜蚜虫上的虫霉菌资源作初步调查,现已鉴定出诺氏史疫霉、新蚜虫疫霉、圆孢虫疫霉等13个种,并对其中的优势种作了田间自然流行情况考察。     

广东省飞虱虫疠霉的初步研究

对在广东省昆虫病原真菌资源调查中发现的一种经常在褐飞虱种群中引发流行病的昆虫病原真菌进行了研究.经鉴定,该菌为飞虱虫疠霉(Pandora detphacis),并就其感染飞虱后对褐飞虱主要生化指标的影响以及该菌初生分生孢子萌发率进行了测定.为开发利用该菌防治褐飞虱提供科学依据.     

蚜虫上虫霉的鉴定

虫霉目Entomophthorales真菌在合适的条件下能引起广泛的流行病,是不少害虫种群自然调节的主要因素。迄今已知的160多种虫霉中,有120多种是昆虫病原。据初步统计,约40种侵染同翅目昆虫,其中20种侵染蚜虫类;约37种侵染双翘目,其中16种侵染蝇类;约19种侵染鳞翅目,13种侵染鞘翅目。由此可见,蚜虫是虫霉的重要寄主。虫霉研究在国外已有百余年历史。如今美国和法国已成功地进行了试验性生产~(13),法、美、英、苏联、澳大利亚和我国已对某些蚜虫进行了田间防治试验。在20种侵染蚜虫的虫霉中,有15种已可人工培养。在我国,蚜虫上的虫霉近年来已陆续有所采集报道,但由于虫霉目分类混乱,命名变动大,再加上资料及实验技术所限,目前在鉴定中困难不少,且有些鉴定尚有疑问。因此有必要将侵染蚜虫的20种虫霉做以介绍。     

芋疫霉重组聚合酶扩增结合侧流层析试纸条快速检测方法的建立及应用

为建立芋疫霉Phytophthora colocasiae快速准确的分子检测方法,基于Ypt1基因特异序列,设计芋疫霉的特异性引物与探针,建立一种快速、准确、可视化的芋疫霉重组聚合酶扩增结合侧流层析试纸条（recombinase polymerase amplification-lateral flow dipstick,LFD-RPA）检测方法,对该检测方法进行优化,评估其特异性与灵敏度,并对田间疑似样品进行检测。结果表明,优化后的芋疫霉LFD-RPA检测方法最适反应条件为39℃恒温反应30 min。LFD-RPA检测方法能够特异性地检测出芋疫霉,而对其他卵菌近缘种和常见植物病原真菌均未检出,且该检测方法对芋疫霉DNA的检测灵敏度达到1 pg/μL。对田间带病组织检测发现,LFD-RPA检测方法能够快速准确地从田间自然发病植株中检测出芋疫霉。表明本研究所建立的芋疫霉LFD-RPA快速可视化检测方法特异性好、灵敏度高、简单快捷,可用于芋疫病的田间快速诊断。     

12种田间常用杀虫剂对两种蚜虫虫霉菌孢子萌发的影响

在2种浓度(田间推荐使用浓度R和0.2R浓度)下研究了12种田间常用杀虫剂对努利虫疠霉和块耳霉孢子萌发的影响。研究表明:杀虫剂对虫霉菌孢子萌发的影响随浓度的降低而减弱,不同种类杀虫剂的影响程度各异;在R浓度下所有的杀虫剂均完全抑制努利虫疠霉孢子萌发,块耳霉孢子仅在6种杀虫剂处理平板上有不同程度的萌发;即使在0.2R浓度下,仍有5种杀虫剂能完全抑制努利虫疠霉和块耳霉孢子萌发。可见,杀虫剂对田间蚜霉菌的发生与流行的影响作用不容忽视。同时,结合对12种杀虫剂依据Hassan的标准划分的抑制等级,对田间实际抑菌效果进行了初步探讨。     

蔬菜田常用农药对诺氏虫疠霉生长和产孢的影响

研究了17种蔬菜田常用杀虫剂、杀菌剂对诺氏虫疠霉生长及产孢的影响。结果表明，在10种杀虫剂中，恶二嗪类杀虫剂安打对菌落生长和产孢的影响最小，抑菌率仅为15．78％，产孢量与对照无显著差异。新烟碱类杀虫剂吡虫啉对诺氏虫疠霉抑制作用最强，抑菌率达到100％。7种杀菌剂对诺氏虫疠霉生长和产孢影响都很显著，其中取代苯基类杀菌剂乙霉威对其影响最小，抑菌率为31．51％，但产孢量不到对照的1／3。有机硫类杀菌剂代森锰锌对诺氏虫疠霉生长、产孢的影响最大，抑菌率为100％。     

基于Ypt1靶标的大豆疫霉环介导等温扩增技术的研究

大豆疫霉侵染大豆引起的根腐病是大豆生产上的毁灭性病害之一。本研究以Ypt1基因作为靶标,利用环介导等温扩增(LAMP)技术,设计了特异性检测体系,整个过程仅需60 min,即可通过肉眼直接目测检测结果。反应后经浊度仪验证浊度变化、琼脂糖凝胶进行电泳验证和在扩增前加入染料HNB(羟基蔡酚蓝)作为反应指示剂验证扩增结果。特异性检测中,111个大豆疫霉菌株均能产生浊度曲线和扩增到梯形状的条带,同时HNB显色观察到天蓝色的阳性反应,而其它疫霉、腐霉和真菌供试菌株中均没有观察到这些现象;在灵敏度检测中,PsYpt1-LAMP技术最低检测限达到100 pg·μL~(-1),比普通PCR技术的最低检测限高出10倍;在田间应用方面,PsYpt1-LAMP检测技术明显提高了检测效率。本研究建立的LAMP检测体系可用于口岸和田间对大豆疫霉的快速检测。     

江西主要蔬菜害虫天敌调查研究初报

几年来作者在省内主要菜区对疏菜害虫天敌进行了调查研究。现将结果整理如下: 一、田间蔬菜主要害虫天敌发生概况(一)寄生性天敌昆虫1.蚜虫类的天敌蚜虫类的天敌以菜蚜茧蜂Diaeretiella rapae Mintosh为主,春秋两季蚜虫大发生的季节,蚜茧蜂数     

北京温室白粉虱上蜡蚧轮枝菌的自然流行

蜡蚧轮枝菌Verticillium lecanii(Zimm)Viegas是一种分布极广的昆虫病原真菌,国外早有用于控制蚜虫和介壳虫的报道。近年,英国已生产Mycotal可湿性粉剂用于防治温室白粉虱。该菌自然大流行仅在热带和亚热带地区的常见寄主介壳虫、蚜虫上观察     

冬生疫霉(Phytophthora hibernalis)的快速分子检测

 由冬生疫霉(Phytophthora hibernalis)引起的疫病是一类植物检疫性病害。为建立该病原菌的快速检测技术,本文比较分析了冬生疫霉和其它疫霉的ITS序列,在此基础上设计了一对检测冬生疫霉的特异性引物751F/752R,该对引物从冬生疫霉中扩增得到一条616bp的条带,而其它19种疫霉和其它真菌菌株均无扩增条带,表明该对引物对冬生疫霉具有特异性。在25μL PCR反应体系中,引物751F/752R检测灵敏度为10龟基因组DNA;而以卵菌ITS区通用引物ITS1/ITS4和751F/752R进行套式PCR扩增,能够检测到10ag的基因组DNA,使检测灵敏度提高了1000倍。该检测体系对灭菌水中游动孢子的检测灵敏度可达0.5个游动孢子。结合快速碱裂解法提取发病组织的DNA,采用该PCR检测技术,在1个工作日内即可从人工接种发病的植物组织中特异性的检测到该病原菌。表明本研究建立的检测方法可用于冬生疫霉的快速分子检测。     

非洲菊疫霉根腐病的快速分子诊断

 隐地疫霉引起的根腐病是非洲菊生产上的主要病害,为发展该病的快速诊断技术,本文比较了卵菌核糖体基因ITS的序列,在此基础上设计了2条针对隐地疫霉的特异性PCR引物PC1和PC2。供试的23种不同真菌和疫霉菌的46个菌株中,利用这对引物能从隐地疫霉基因组DNA中扩增出一条分子量为620bp的特异性条带,该引物的检测灵敏度可达10pg。采用快速组织碱裂解法提取发病植物组织的DNA,结合PCR检测技术,4h内可从发病的非洲菊根部组织中特异性地检测到隐地疫霉菌。结果表明,建立的非洲菊疫霉根腐病菌分子检测方法可用于该病害的快速分子诊断。     

杀菌剂对昆虫病原真菌块耳霉孢子萌发的影响

研究了10种杀真菌剂在田间使用浓度的中间浓度及其10倍稀释液下,对昆虫病原真菌块耳霉孢子萌发的影响。结果表明各杀菌剂对块耳霉孢子萌发有不同程度的抑制,浓度愈高,抑制作用愈大。多菌灵、普力克对孢子的抑制作用最小,与块耳霉表现出良好的相容性,是与块耳霉实施菌药合用的候选药剂。施保功、大生、达科宁3种杀菌剂对块耳霉孢子的杀伤力最大,在两种浓度下孢子萌发率均为0。施佳乐、速克灵和敌力脱在低浓度下,与块耳霉的相容性良好,处理后24～48 h与对照无显著性差异;但在中间浓度水平下,处理后48 h孢子萌发率分别为12.45％,0,0。其余药剂随处理时间和浓度不同,对块耳霉孢子萌发有不同程度的抑制。     

广东省白背飞虱病原真菌的分离鉴定和培养

［目的］ 了解广东省白背飞虱（Sogatella furcifera）的昆虫病原真菌资源及其生物学特性。［方法］ 对从广东韶关市曲江区感染真菌病的白背飞虱中分离出的2种昆虫病原真菌进行了形态学鉴定,并测定了不同温度（10、15、20、25、30、35 ℃和37 ℃）和光周期（L∥D=24 h∥0 h和 L∥D=0 h∥24 h）对2种虫生真菌生长的影响。〖JP+1〗［结果］ 寄生白背飞虱的2种虫生真菌经鉴定为大孢巴科霉（Batkoa major）和冠耳霉（Conidiobolus coronatus）,对它们的形态特征进行了描述。生物学试验表明,2种真菌在15～30 ℃均可生长,生长速度随着温度升高而加快。在35 ℃冠耳霉生长速度开始下降,在37 ℃其生长速率接近于0。L∥D=24 h∥0 h和L∥D=0 h∥24 h 2种光周期对2种真菌生长影响不显著。［结论］ 寄生白背飞虱的虫生真菌分别为大孢巴科霉和冠耳霉,其生长主要受温度影响。     

小麦赤霉病菌对多菌灵抗药性监测技术研究

比较了在离体和活体条件下5种用于小麦赤霉病菌对多菌灵抗药性监测的方法。结果表明,活体麦穗法对抗药性菌株的鉴别与其它几种离体监测方法得到的结论一致。根据不同的目的,可采用不同的抗药性监测方法。挑取病穗上的霉层在含临界剂量药剂的培养基上直接测定,是进行大规模的田间抗药性监测的快速、简便技术;早春测定自然界子囊孢子抗药性频率,可以中、短期预测田间抗药性小麦赤霉病的流行程度。     

细菌素Echcin防治作物真菌病害、细菌病害的研究

 细菌素Echcin是本研究室从来自水稻的菊欧氏菌(Erwinia chrysanthemi)中分离提取的一种抗菌物质。本试验报道了Echcin防治作物细菌病害、真菌病害的研究。采用纸碟法测定了Echcin对5个属植物病原细菌共14个菌株的抑制作用,琼脂稀释法测定了Echcin对12种植物病原真菌的抑制作用,在此基础上开展了Echcin对番茄早疫病和稻白叶枯病的温室盆栽试验,同时开展了Echcin对小麦纹枯病的田间小区试验。研究结果表明:Echcin对5个属植物病原细菌、辣椒疫霉、苎麻疫霉、番茄早疫等病原真菌具有很强的抑制作用。Echcin喷雾2次,对番茄早疫病的盆栽防病效果为75.8%。Echcin拌种或后期喷雾1次,对小麦纹枯病的田间防效达60%以上,优于井冈霉素。     

细菌素Echcin防治作物真菌病害、细菌病害的研究

 细菌素Echcin是本研究室从来自水稻的菊欧氏菌(Erwinia chrysanthemi)中分离提取的一种抗菌物质。本试验报道了Echcin防治作物细菌病害、真菌病害的研究。采用纸碟法测定了Echcin对5个属植物病原细菌共14个菌株的抑制作用,琼脂稀释法测定了Echcin对12种植物病原真菌的抑制作用,在此基础上开展了Echcin对番茄早疫病和稻白叶枯病的温室盆栽试验,同时开展了Echcin对小麦纹枯病的田间小区试验。研究结果表明:Echcin对5个属植物病原细菌、辣椒疫霉、苎麻疫霉、番茄早疫等病原真菌具有很强的抑制作用。Echcin喷雾2次,对番茄早疫病的盆栽防病效果为75.8%。Echcin拌种或后期喷雾1次,对小麦纹枯病的田间防效达60%以上,优于井冈霉素。