防腐生肌膏对创伤愈合的影响试验

防腐生肌膏是由中药血竭、乳香、没药、三七、紫草、黄柏、冰片等组成的。本试验目的研究防腐生肌膏在大鼠皮肤缺损模型中对伤口愈合的影响。将25只SD大鼠进行皮肤缺损造模,每日涂抹防腐生肌膏。计算创面愈合率以及创面愈合时间,记录愈后瘢痕面积。通过H.E.染色的方法检测新生皮肤样本。结果表明,防腐生肌膏能够促进创口收缩,创口瘢痕组织面积显著小于对照组(P<0.01)。H.E.染色结果显示,防腐生肌膏处理的创口有更少的炎性细胞浸润,同时伴随成纤维细胞的增殖,促进肉芽组织形成。该结果证明防腐生肌膏促进伤口愈合,为临床治疗提供依据。     

防腐生肌膏对创伤组织中VEGF及bFGF mRNA表达水平的影响

试验以Wistar大鼠为研究对象,通过对皮肤缺损模型大鼠创面组织中VEGF及bFGF mRNA表达水平等指标的检测,初步揭示防腐生肌膏促进创伤愈合的作用机制。试验结果表明,防腐生肌膏能提高创面组织VEGF和bFGF mRNA表达水平,从而可以促进血管内皮细胞和成纤维细胞的增殖和分化,促进创伤愈合。     

TNF-α对仔猪睾丸支持细胞中Fas/FasL表达的调节作用

本研究旨在探索TNF-α对睾丸支持细胞(SCs)中Fas/FasL表达的影响及机制。用不同质量浓度的TNF-α(0.0,0.1,1.0,10.0,25.0,50.0,100.0,200.0μg/L)处理SCs不同时间(0,6,12,24,36,48,72h)后,采用CCK-8细胞增殖检测试剂盒检测细胞的增殖;通过流式细胞术检测细胞周期进程和细胞凋亡;用Western blot和荧光定量PCR技术检测Fas/FasL、MMP-2/MMP-9和TIMP-2/TIMP-1蛋白水平及其mRNA丰度;利用ELISA试剂盒检测IL-1β、IL-6、IGF-1、TGF-β1等细胞因子水平。结果显示,当TNF-α质量浓度为50.0μg/L、作用时间为36h时,细胞的增殖活力最低;这一条件显著促进了Fas/FasL、MMP-2/MMP-9蛋白及mRNA的表达(P0.05),极显著降低了TIMP-1和TIMP-2mRNA与蛋白表达(P0.01),且极显著促进了细胞促炎性因子IL-1β和IL-6分泌(P0.01),显著抑制了促生长因子IGF-1和TGF-β1分泌(P0.05)。结果表明:TNF-α以剂量和时间依赖方式诱导SCs中Fas/FasL mRNA及蛋白表达,从而诱发SCs凋亡,且Fas/FasL表达受到MMP-2/MMP-9、TIMP-2/TIMP-1以及细胞因子水平的影响。     

大肠埃希氏菌诱导小鼠乳腺纤维化模型中瘦素及其受体、MMPs和TIMPs表达的研究

为探究Leptin、Ob-R、MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2对小鼠乳腺组织纤维化的作用,用奶牛乳腺炎大肠埃希氏菌感染小鼠乳腺后,分别于感染后1、3、7、14、21 d采集小鼠乳腺组织,应用免疫组化染色检测Leptin、Ob-R、MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2在小鼠乳腺组织细胞中的表达与分布,应用qPCR、Western blot方法检测小鼠乳腺组织中Leptin、Ob-R、MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2 mRNA转录水平和蛋白表达水平。结果显示,小鼠感染E.coli前期(1～7 d),Leptin、Ob-R、MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2主要在上皮细胞,炎性细胞中表达,感染后期(14～21 d)主要在上皮细胞、成纤维细胞和炎性细胞中表达。qPCR检测mRNA转录水平,E.coli感染1～14 d, Leptin、Ob-R、MMP-2和MMP-9的转录水平均显著上升,TIMP-2的mRNA转录水平极显著下降,感染后期(14～21 d)Leptin、Ob-R、MMP-2、TIMP-1和TIMP-2的mRNA转录...     

生肌玉红膏对深Ⅱ度烧伤大鼠血清中炎症介质含量的影响

目的:考察生肌玉红膏对深Ⅱ度烧伤大鼠血清中炎症因子含量的影响,探讨其治疗烧伤的作用机理。方法:将深Ⅱ度烧伤大鼠模型按体质量随机分为模型组、生肌玉红膏组和湿润烧伤膏组,每组24只。烧伤创面涂以相应药物,1次/d,连续给药14 d,并于给药后第3、7、14天分别采集各组8只大鼠血清,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测血清中促炎细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的含量。结果:与正常对照组比较,给药后第3天,模型组血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高(P0.05)。与模型组比较,给药后第3天、第7天,生肌玉红膏组血清中IL-1β、TNF-α含量下降(P0.05或P0.01),给药后第7天,生肌玉红膏组血清中IL-6含量下降(P0.05)。生肌玉红膏组与湿润烧伤膏组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:生肌玉红膏促进烧伤创面愈合的机制可能与其抑制炎症因子产生、减轻炎症反应有关。     

无乳链球菌对奶牛乳腺成纤维细胞金属蛋白酶及uPA系统表达的影响

为研究无乳链球菌(Streptococcus agalactiae,S. agalactiae)作用奶牛乳腺成纤维细胞(BMFBs)后对MMPs/TIMPs与uPA系统(uPA/PAI-1)表达的影响,以进一步阐明MMPs/TIMPs与uPA系统在调控细胞外基质(ECM)代谢的作用,将107 cfu/mL热灭活S. agalactiae菌液作用于BMFBs,在作用后不同时间点(6、12、24、48 h)通过RT-qPCR和Western Blot检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2、uPA、PAI-1 mRNA转录水平和相应蛋白表达水平,并用明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9的酶活性。结果显示:热灭活S. agalactiae作用后,MMP-9、TIMP-2、uPA、PAI-1 mRNA转录水平均有不同程度下降趋势,但MMP-2 mRNA水平上调,TIMP-1mRNA水平呈先上升后下降趋势;明胶酶谱法检测MMP-2的酶活性较MMP-9明显,二者均在作用6 h、48 h活性最强;MMP-2和MMP-9蛋白表达水平与对照组相比主要呈先升高后下降趋势,但在作用后期MMP-2蛋白表达又出现了回升趋势;TIMP-1蛋白水平与对照组相比主要呈先下降后上升趋势,在作用前期与MMP-9蛋白表达相反,TIMP-2蛋白表达与对照组相比呈上升趋势;uPA和PAI-1蛋白水平与对照组相比均呈先降低后升高再降低趋势,均在24h达到峰值,随后呈下降趋势。研究表明,热灭活S. agalactiae菌液可诱导BMFBs中MMPs/TIMPs表达,影响uPA系统参与调控MMPs的表达及活性。     

肌抑素对PK15细胞MMP-2/7/9表达的影响

本研究旨在揭示肌抑素(MSTN)与基质金属蛋白酶(MMPs)的调控关系,探明MSTN对PK15细胞MMP-2/7/9表达的影响。对MSTN单等位基因敲除猪背膘组织进行转录组测序分析,复苏前期制备的MSTN基因敲除PK15细胞系:单等位基因敲除的PK3108细胞系和双等位基因敲除的L18细胞系,通过实时荧光定量PCR和Wesrern blotting分别检测PK15、PK3108和L18细胞系中MSTN、MMP-2/7/9基因的mRNA和蛋白表达水平。结果发现,与野生型猪相比,MSTN单等位基因敲除猪背膘组织转录因子C/EBPδ、MMP-2/7基因mRNA表达量均极显著下调(P0.01);细胞外基质中纤连蛋白(FN)和层连接蛋白(LN)含量均极显著增加(P0.01)。复苏的PK3108和L18细胞呈现绿色荧光。实时荧光定量PCR结果显示,PK3108和L18细胞中MSTN、MMP-2/7/9的mRNA表达量均极显著低于PK15细胞(P0.01);Western blotting结果显示,PK3108和L18细胞中MSTN、MMP-2/7/9的蛋白表达量均明显低于PK15细胞。本研究结果表明,在MSTN基因敲除的PK15细胞中,MSTN功能缺失能显著降低MMP-2/7/9的表达,且MMP-2/7/9蛋白表达降低的趋势与MSTN蛋白表达的趋势相一致。     

鸡皮肤创伤愈合过程中成纤维细胞生长因子和表皮细胞生长因子的免疫组化动态观察

运用免疫组织化学方法对成年鸡创伤愈合过程中成纤维生长因子(FGF)和表皮生长因子(EGF)的变化规律进行观察。结果:鸡正常的皮肤组织中FGF阳性表达较少,从创伤后2 d开始,创伤部位FGF阳性表达开始增强,并在创伤后7 d达到峰值,至创伤后14 d与正常组比较无显著差异(P0.05);EGF从创伤后2 d开始阳性反应即开始增强,至创伤后4 d阳性细胞数量达到高峰,此后开始缓慢下降,创伤后30 d与正常组比较无显著差异(P0.05)。结果表明,以上2种生长因子主要参与了创伤愈合过程中早期肉芽组织的形成。     

子宫内膜胶原代谢与奶牛不孕症关系的研究

为了探讨胶原代谢与奶牛不孕症的关系,选取中国荷斯坦奶牛20头,其中健康奶牛10头为对照组,屡配不孕奶牛10头为试验组,采用免疫组化方法分析子宫内膜胶原的表达特征,荧光定量PCR方法分析基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9、PGR、ESR mRNA的相对表达量。结果表明:试验组子宫内膜Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原的表达量均不显著升高(P0.01);试验组MMP-2、MMP-9、PGR mRNA的表达量均显著低于对照组(P0.05)。表明屡配不孕奶牛子宫内膜MMP-2、MMP-9 mRNA的低表达,使MMP-2、MMP-9对胶原的降解减少,导致胚泡发育不良及着床失败,子宫内膜孕酮受体的低表达可能是MMP-2、MMP-9低表达的影响因素之一。     

前列腺素F2α对奶牛产后子宫机能的影响

为了探讨外源前列腺素F2α(PGF2α)对奶牛产后子宫机能的影响,试验将产后中国荷斯坦奶牛20头随机分成对照组和试验组(肌注氯前列烯醇),每组10头,采集血液样品,用ELISA和荧光法检测激素、一氧化氮(NO)、S-亚硝基硫醇(RSNO)浓度,用全自动氨基酸分析仪检测氨基酸含量,用荧光定量PCR方法分析子宫组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA的相对表达量。结果表明:与对照组相比,试验组17β雌二醇、皮质醇、NO和RSNO浓度均降低;试验组3-甲基组氨酸、羟脯氨酸浓度及MMP-2、MMP-9 mRNA表达量极显著高于对照组(P0.01)。说明外源性前列腺素能够降低奶牛产后应激,改善皮质醇和NO对子宫收缩的抑制,促进子宫胶原的代谢,从而利于子宫的复旧。     

子宫内膜基质金属蛋白酶-2、-9 mRNA表达与奶牛子宫内膜炎关系的研究

为探讨基质金属蛋白酶(MMPs)-2、MMP-9在奶牛子宫内膜炎中的作用机制,选用产后6～10d健康及患急性化脓性子宫内膜炎的中国荷斯坦奶牛各10头,分别为对照组和试验组,通过ELISA检测PGF2a、孕酮浓度;免疫组化检测子宫内膜Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原的表达;SYBR Green I荧光定量PCR检测子宫内膜MMP-2和MMP-9mRNA表达。结果表明:试验组PGF2a浓度极显著低于对照组(P<0.01),孕酮含量显著高于对照组(P<0.05),PGF2a与孕酮浓度呈显著负相关(r=0.893);试验组子宫内膜中Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原的表达量均高于对照组,差异极显著(P<0.01);MMP-2和MMP-9mRNA水平则显著低于对照组(P<0.01)。结果提示:产后子宫内膜炎病牛子宫内膜MMP-2、MMP-9低表达,导致Ⅰ型和Ⅳ型胶原降解受阻,使细胞外基质为子宫内膜细胞提供的刺激信号不足,子宫分泌PGF2a量少,黄体消退障碍,血清孕酮含量高;说明子宫内膜MMP-2、MMP-9mRNA表达对产后子宫内膜炎的发生和发展起促进作用。     

玉屏风多糖对草鱼肠黏膜形态结构及主要免疫与吸收相关基因表达的影响

本试验旨在探讨不同比例玉屏风多糖对草鱼肠黏膜形态结构及主要免疫与吸收相关基因表达的影响。试验选择750尾平均体重为(74.50±2.50)g的健康草鱼,随机分为5组,每组6个重复,每个重复25尾。对照组(Ⅰ组)投喂基础饲料,试验组(Ⅱ~Ⅴ组)投喂在基础饲料基础上分别添加0.8、1.2、1.6、2.0 g/kg玉屏风多糖的试验饲料。预试期7 d,正试期28 d。结果表明:1)与对照组相比,在试验第14天时,Ⅴ组的隐窝深度显著降低(P0.05),而绒腺比则显著提高(P0.05)。2)对照组相比,在试验第7天时,Ⅲ和Ⅳ组头肾中白介素-2(IL-2)mRNA相对表达量显著或极显著提高(P0.05或P0.01),Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组头肾中干扰素γ(IFN-γ)mRNA相对表达量均极显著提高(P0.01),Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组肠道中钠葡萄糖转运蛋白1(SG LT-1)和葡萄糖转运蛋白2(GLUT-2)mRNA相对表达量显著或极显著提高(P0.05或P0.01))。3)与对照组相比,在试验第14天时,Ⅳ和Ⅴ组头肾中IL-2 mRNA相对表达量极显著提高(P0.01),Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组头肾中IFN-γmRNA相对表达量显著或极显著提高(P0.05或P0.01),Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组肠道中SG LT-1和G LUT-2 mRNA相对表达量极显著提高(P0.01)。4)与对照组相比,在试验第21天时,Ⅳ组头肾中IL-2 mRNA相对表达量显著提高(P0.05),Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组头肾中IFN-γmRNA相对表达量极显著提高(P0.01),Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组肠道中SG LT-1和G LUT-2 mRNA相对表达量显著或极显著提高(P0.05或P0.01)。5)与对照组相比,在试验第28天时,Ⅳ和Ⅴ组头肾中IL-2 mRNA相对表达量极显著提高(P0.01),Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组头肾中IFN-γmRNA相对表达量显著或极显著提高(P0.05或P0.01),Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组肠道中SGLT-1 mRNA相对表达量显著或极显著提高(P0.05或P0.01)。综上所述,在草鱼饲料中添加一定量的玉屏风多糖能够改善肠黏膜形态结构,促进肠道中SGLT-1和GLUT-2基因的表达,调控头肾中IL-2和IFN-γ基因的表达,从而提高肠道吸收功能、增强机体免疫力。从节约饲养成本出发,草鱼饲料中玉屏风多糖最适添加量为1.6 g/kg。     

秦川牛ACTC1基因的表达特性分析

试验旨在揭示ACTC1基因在秦川牛中的时空表达规律,为进一步研究ACTC1基因在肉牛肌肉发育和脂肪沉积等方面的功能奠定基础。利用实时荧光定量PCR技术检测了ACTC1基因在24月龄成年秦川牛13种组织和4日龄新生秦川牛12种组织中的表达规律,同时研究分析了该基因在秦川牛成肌细胞和前体脂肪细胞不同分化阶段(0、2、4、6、8 d)的表达特性。结果显示,ACTC1基因在秦川牛心脏中的表达量最高,骨骼肌中次之;除瘤胃和肾脏外,24月龄成年牛各组织中的表达量显著或极显著高于4日龄新生牛(P0.05;P0.01);ACTC1基因在成肌细胞中的表达随着分化程度的增加呈现先升高后降低的趋势,在成肌细胞分化第2、4、6和8天ACTC1基因的表达量与第0天相比差异极显著(P0.01),分别是第0天的2.6、4.7、5.6和4.2倍,这与成肌细胞的分化速率一致;在脂肪细胞中ACTC1基因的表达趋势为先降后升,第2、4天的表达量与第0天相比差异极显著(P0.01),从分化第2天开始表达量随脂肪细胞分化程度增加而增加。ACTC1基因在不同年龄牛肌肉组织(心肌和骨骼肌)中的表达量最高,且其表达特性与肌细胞分化整体趋势一致;另外,ACTC1基因在脂肪细胞中的表达也有一定的规律。综上所述,推测ACTC1基因可能会影响牛肌肉组织的生长发育和脂肪沉积。     

母体铅暴露对仔鼠肝脏MMP-2和MMP-9 mRNA表达的影响

为探讨母体铅暴露对仔鼠肝脏MMP-2和MMP-9 mRNA表达的影响,采用自由饮水模式建立铅暴露动物模型,将40只雌性小鼠自妊娠第1天开始经饮水染铅(1.0,5.0,10.0g/L,对照组饮蒸馏水)至仔鼠出生后21d,随机分为低、中、高剂量染毒组和对照组,仔鼠21日龄,分别测其血液和肝脏中铅的含量,然后取其肝脏组织,通过实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术检测各组仔鼠肝脏中MMP-2和MMP-9mRNA的表达情况。结果显示,21d后,铅暴露组仔鼠血液和肝脏中铅水平均明显高于对照组(P<0.05);与对照组相比,低、中和高剂量铅暴露组仔鼠肝脏内MMP-2mRNA的表达量明显增高,且差异具有统计学意义(P<0.05)。中、高剂量铅暴露组仔鼠肝脏组织中MMP-9mRNA的表达明显高于对照组(P<0.05),但低剂量铅暴露组仔鼠肝脏组织中MMP-9mRNA的表达与对照组相比差异不显著(P>0.05)。结果表明,母体铅暴露可能通过改变仔鼠肝脏中MMP-2 mRNA的表达进而造成肝脏损伤。母体铅暴露使铅在仔鼠体内蓄积,铅暴露可能通过增强仔鼠肝脏中MMP-9mRNA的表达进而造成肝脏损伤,从而引起组织发生病变。     

共轭亚油酸对C2C12肌细胞生脂和生肌分化的影响

本研究分析了共轭亚油酸(CLA)对C2C12肌细胞生脂转分化和生肌分化的影响。分别培养并诱导C2C12鼠源肌细胞生脂转分化和正常的生肌分化,同时分别使用终浓度为50μmol/L的c9,t11-CLA和t10,c12-CLA处理细胞,并设对照组,取生脂转分化第10天和生肌分化第8天的细胞用于实时定量PCR检测,观察c9,t11-CLA和t10,c12-CLA对C2C12肌细胞不同分化的影响。结果表明:1)与对照组相比,c9,t11-CLA促进了C2C12肌细胞的生脂转分化,显著增加了细胞内甘油三酯(TG)含量(P0.05),显著上调了细胞内脂肪酸合成酶(FAS)、CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPARγ)和脂肪酸结合蛋白4(FABP4)基因的表达水平(P0.05);与对照组相比,t10,c12-CLA则抑制了C2C12肌细胞的生脂转分化,显著减少了细胞内TG含量(P0.05),显著下调了细胞内C/EBPα、PPARγ和FA BP4基因的表达水平(P0.05)。免疫印迹杂交结果显示FAS和FABP4的蛋白质表达水平也发生了与基因表达相一致的变化。2)与对照组相比,t10,c12-CLA抑制了C2C12肌细胞的生肌分化,显著减少了细胞内肌管数/细胞数(P0.05),显著下调了细胞内肌细胞生成素(MYOG)和成肌分化抗原(MYOD)基因的表达水平(P0.05);与对照组相比,c9,t11-CLA则显著上调了细胞内MYOG基因的表达水平(P0.05),对C2C12肌细胞的生肌分化有一定程度的促进作用。免疫印迹杂交结果显示MYOG和MYOD的蛋白质表达水平也发生了与基因表达相一致的变化。以上结果表明,CLA对动物骨骼肌细胞的正常生肌分化和生脂转分化都具有重要的调节作用。     

肠炎沙门菌感染对济宁百日鸡盲肠TLR2、TLR4、NOD1、NALP3基因表达的影响

为分析肠炎沙门菌感染后不同时间点济宁百日鸡盲肠TLR2、TLR4、NOD1和NALP3基因表达的变化规律,试验选用2日龄肠炎沙门菌阴性济宁百日鸡为试验动物,接种肠炎沙门菌,应用荧光定量PCR分别检测接种后第1、3、7、14、21、28和35天试验组与对照组盲肠组织TLR2、TLR4、NOD1、NALP3 4个基因的表达变化。结果:肠炎沙门菌感染后第3、7、21、28和35天,试验组和对照组盲肠TLR2的表达量差异显著(P0.05),除感染后第3天TLR2的表达量显著降低外,其他各时间点TLR2的表达量均显著升高(P0.05);感染后第3、21、28天TLR4的表达量显著升高,分别为对照组的1.79、1.52、1.21倍(P0.05);感染后第7天,试验组NOD1和NALP3的表达量均显著低于对照组,分别为对照组的0.37和0.61倍(P0.05);感染后第21天,试验组NALP3基因的表达量显著升高,为对照组的1.27倍(P0.05)。研究结果表明:TLRs和NLRs基因在肠炎沙门菌感染后被激活,且表现出协同调控作用,这种协同调控在感染后第7天最为明显。     

福美双诱导的肉鸡胫骨软骨发育不良软骨细胞凋亡

为研究肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)软骨细胞的凋亡分布及凋亡相关基因的表达水平,将80羽1日龄健康AA肉鸡基础日粮饲养1周后,随机分为对照组和处理组,处理组饲喂添加100mg·kg-1福美双的日粮,采用HE染色和TUNEL法分别对肉鸡胫骨生长板软骨细胞的形态学和凋亡情况进行观察,同时采用Real-time PCR方法和免疫组化技术分别对软骨细胞中凋亡相关基因的mRNA转录水平及蛋白质表达水平进行检测。结果显示,福美双诱发TD后第1、2、4和6天,肉鸡生长板软骨栓形成逐渐增大,异常软骨细胞增加,TD病变区软骨细胞,尤其是肥大区软骨细胞凋亡程度明显增加。Real-time PCR检测结果显示,与对照组比较,TD生长板促凋亡基因Bax在试验第1、2、4和6天表达量极显著上调(P0.01);Caspase-3在第1、2和4天表达量极显著增加(P0.01);抗凋亡基因BAG-1表达下调,在试验第1和2天差异极显著(P0.01)。免疫组化结果显示,第1和4天处理组Bax的蛋白表达量明显高于对照组。本研究提示肉鸡TD生长板软骨细胞凋亡与促凋亡基因的表达增强和抗凋亡基因的表达下降有关。     

血红素铁对妊娠母鼠繁殖成绩及组织铁调基因表达的影响

本试验旨在探索血红素铁与硫酸亚铁(FeSO_4)对妊娠母鼠繁殖成绩,妊娠母鼠组织与胎鼠铁含量,妊娠母鼠组织铁调素(hepcidin)、膜铁转运蛋白(Fpn)、猫白血病病毒C亚类受体(Flvcr)、转铁蛋白受体1(Tfr1)、转铁蛋白受体2(Tfr2)、二价金属转运体1(DMT1)和血红素转运蛋白(HCP)表达的影响。随机选取2月龄体况接近的昆明小鼠母鼠80只,随机分为8组,分别为对照组、缺铁组、血红素铁组(15、60、90 mg/kg血红素铁)、FeSO_4组(75、300、450 mg/kg FeSO_4),每组10只。配种受孕起对照组饲喂正常饲粮(基础饲粮中添加400 mg/kg FeSO_4);其他各组均饲喂基础饲粮,妊娠第10~13天注射40 mg/kg去铁胺(DFO),诱导妊娠母鼠缺铁模型;妊娠第14天血红素铁组和FeSO_4组开始在基础饲粮中添加血红素铁或FeSO_4,缺铁组不添加。试验期为妊娠后1~20 d。结果表明:1)60 mg/kg血红素铁组胎鼠重最高,极显著高于对照组与缺铁组(P0.01)。2)60 mg/kg血红素铁组与450 mg/kg FeSO_4组母鼠血液血红蛋白(HGB)含量、红细胞数(RBC)和红细胞容积(HCT)极显著高于缺铁组(P0.01)。3)60 mg/kg血红素铁组胎鼠铁含量最高,极显著高于对照组与FeSO_4组(P0.01);450 mg/kg FeSO_4组母鼠肝脏、脾脏和胎盘铁含量均为最高。4)90 mg/kg血红素铁组和450 mg/kg FeSO_4组母鼠肝脏hepcidin表达量较高,极显著高于缺铁组与对照组(P0.01);15 mg/kg血红素铁组母鼠肝脏Fpn、Tfr2表达量较高,极显著高于对照组和缺铁组(P0.01);60 mg/kg血红素铁组母鼠肝脏Tfr1、Flvcr表达量较高,极显著高于对照组和缺铁组(P0.01);75 mg/kg FeSO_4组母鼠肝脏Tfr1表达量较高,极显著高于对照组和缺铁组(P0.01)。5)缺铁组母鼠十二指肠Fpn、HCP、DMT1、Flvcr表达量均极显著高于对照组(P0.01)。6)缺铁组母鼠胎盘Fpn、Tfr1、DMT1、Flvcr、HCP表达量极显著高于对照组(P0.01);90 mg/kg血红素铁组和450 mg/kg FeSO_4组母鼠胎盘hepcidin表达量较高,极显著高于缺铁组与对照组(P0.01)。7)饲粮血红素铁添加量为61.00 mg/kg或FeSO_4添加量为336.11 mg/kg时,胎鼠铁含量最高;饲粮血红素铁添加量为93.49 mg/kg时,母鼠肝脏铁含量最高。综合得出,母鼠饲粮中添加适宜量的血红素铁或FeSO_4均可显著促进胎鼠增重,诱导母鼠靶组织铁调基因的表达,提高母鼠组织和妊娠20 d胎鼠机体铁含量;HCP和Flvcr在母鼠肠道对血红素铁吸收或胎盘转运起至关重要的作用,但肠道吸收或胎盘转运FeSO_4主要以DMT1和Tfr2为主。关键词:妊娠母鼠;血红蛋白;铁含量;铁调素;血红素铁     

MYOD基因家族在鸭小肠组织发育中的表达研究

为研究生肌调节因子MYOD家族对鸭小肠发育的影响,利用QRT-PCR法检测了MYOD家族各成员mRNA在鸭胚第10、14、18、22、27天及出生后1周小肠平滑肌发育过程中的相对表达量。结果表明,4个基因在鸭小肠发育过程中均有表达,且各自的表达量呈现一定的规律性变化。其中MYF5在第10天的表达量最高,之后总体呈下降趋势,到第27天时又达到一个高峰;MYOD1在第10天时表达量最高,之后急剧下降;MYOG的表达量从第10天开始曲折上升,到第22天时达到高峰,之后逐步下降;MYF6在第10天时表达量最高,之后急剧下降。初步推测,MYOD基因家族可能参与了小肠的发育或功能的调控。     

IBDV感染对雏鸡法氏囊纤维增生及TGF-β1、MMP-9表达的影响

试验通过Masson染色、免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)等方法研究雏鸡感染传染性法氏囊病病毒(IBDV)过程中法氏囊内纤维形成、转化生长因子β-1(TGF-β1)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达及分布规律,探讨雏鸡IBDV感染后TGF-β1和MMP-9的表达变化与纤维增生之间的相互关系。结果表明:雏鸡IBDV感染后,法氏囊内黏膜下层、滤泡周围的固有层纤维大量增生,在感染后4 d(4 dpi)达到最高,随后逐渐减少。同时,法氏囊内TGF-β1的蛋白表达水平逐渐增高至7 dpi达到最大值,且3～7 dpi显著高于对照组(P0.05)。TGF-β1基因转录水平呈现先增高后降低趋势,且2～5 dpi均显著高于对照组,4 dpi达到最高。MMP-9的蛋白表达和基因转录均呈现先增高后降低的趋势。蛋白表达水平在4 dpi最高,且在1～4 dpi显著高于对照组(P0.05),基因转录水平在2～7 dpi显著高于对照组且在5 dpi时最高(P0.05)。结论:雏鸡IBDV感染导致法氏囊中纤维增生和TGF-β1、MMP-9的表达基本一致,提示TGF-β1和MMP-9可能对IBDV感染雏鸡法氏囊中纤维的发生、发展发挥一定作用。