蛹虫草菌种复壮方法探讨

针对蛹虫草生产中菌种退化问题,研究了转接次数对蛹虫草菌种退化的影响;比较组织分离法与活蚕蛹回接法在保持菌种优良性状、延缓菌种退化、退化菌种复壮效果。结果表明,转接3次或更多蛹虫草菌种会逐步表现出退化性状;活蚕蛹回接复壮法对退化菌种的复壮效果明显好于组织分离法;选用出菇后20 d内的子座组织分离,可有效延缓菌种退化,并在一定时期内保持菌种优良性状;提出了活蚕蛹回接法与组织分离法相结合的蛹虫草菌种综合复壮生产模式。     

交配型基因作为分子标记鉴定蛹虫草退化菌株的核相初步研究

根据蛹虫草(Cordyceps militaris)交配型基因的序列设计3对特异性引物,对收集到的14株蛹虫草正常菌株和退化菌种进行PCR鉴定.结果表明,3株正常菌株含有MAT-HMG和MAT-alpha两类交配型基因,判定为异核体;11株退化菌株仅仅含有MAT-HMG或者MAT-alpha交配型基因,判定为同核体.笔者推测,蛹虫草发生不形成子实体的菌种退化的原因之一是核相发生了改变,即异核体变成了同核体.     

蛹虫草菌种退化的探讨

蛹虫草具有与冬虫夏草极相似的药理药效,可以作为冬虫夏草的代用品,但其菌株在继代培养过程中极易退化导致产量急剧下降,是影响行业发展的核心技术问题。对蛹虫草退化菌种形态学、遗传学及子实体变化,并对当前研究中存在问题及解决菌种退化的方法进行探讨。     

不同类型菌种与栽培主料栽培蛹虫草对比试验

以温室大棚为栽培场地，研究固体菌种和液体菌种及不同栽培主料栽培蛹虫草对其产量和品质的影响。结果表明，液体菌种栽培蛹虫草比固体菌种栽培蛹虫草的产量高10%，且产量较稳定；以大米为栽培主料时蛹虫草子实体产量和质量均较好。     

用液体菌种栽培蛹虫草的效果观察

当前,蛹虫草栽培中普遍存在出草(子实体)难或出草不整齐的问题,我们用液体菌种栽培蛹虫草取得了较好效果。现将有关试验情况介绍如下:1 材料与方法1.1试验材料①供试菌株:我所自育的渝草1号。②液体     

用液体菌种栽培蛹虫草的效果豌察

当前，蛹虫草栽培中普遍存在出草(子实体)难或出草不整齐的问题，我们用液体菌种栽培蛹虫草取得了较好效果。现将有关试验情况介绍如下：     

蛹虫草米饭栽培工艺要领

蛹虫草又称北虫草和蛹草,是虫草属的模式种。据检测,蛹虫草的主要化学成分、药理和临床效果与野生冬虫夏草基本一致,而其最主要的活性物质虫草素、虫草多糖等均超过冬虫夏草,因此蛹虫草的开发应用受到了医药界和美食界的重视,蛹虫草的栽培热也在国内迅速掀起。但在栽培实践中往往出现只长菌丝不出草,或即使出草而质量低劣,子实体短、细,构不成产量,致使栽培失败或达不到预期效果。究其原因,主要是忽视了菌种的选育,或经继代培养后引起种性衰     

蛹虫草菌种退化机理及预防措施研究进展

蛹虫草作为虫草资源和健康食品,已人工栽培并实现产业化生产.其菌种在继代培养过程中的频繁退化不仅导致其产量急剧下降,经济损失严重,而且直接影响行业的发展.根据前人的研究,总结、阐述其退化的形态和机理及预防措施,为规范化栽培提供一定的理论基础和指导.     

蛹虫草优良菌株的筛选

本试验通过对8株蛹虫草菌株的菌丝生长速度、菌落平均直径、液体发酵菌丝体干重、培养周期以及子实体形态、重量、粗多糖含量的对比研究,筛选出优良的蛹虫草菌株。试验结果表明,蛹虫草菌株CC-8液体培养菌丝生物量明显高于其他菌株,子实体出草整齐均匀,出草率高,形态好,产量高,颜色为橘黄,子实体粗多糖含量高于其他菌株,表明菌株CC-8具有较高的经济价值,可以作为栽培菌种进行产业化生产。     

蛹虫草不同栽培菌株产虫草素及腺苷差异性研究

目的：测定不同栽培菌株蛹虫草子实体中虫草素和腺苷的含量,为人工蛹虫草的质量评价提供依据。方法：采用高效液相色谱法测定11个栽培菌株人工蛹虫草样品中虫草素和腺苷的含量。结果：所测定的不同栽培菌株人工蛹虫草的腺苷含量为0.1%-0.17%,虫草素含量为0.06%-0.39%,表明蛹虫草不同栽培菌株的虫草素含量变化较大,腺苷含量则相对稳定。     

滇中蛹草拟青霉活性成分分析

试验对来自于云南和辽宁8个不同居群的蛹虫草进行菌种分离,共获得72株蛹草拟青霉菌株,对其在人工栽培条件下菌丝体的虫草多糖和虫草酸含量进行测定分析,以野生蛹虫草及冬虫夏草的虫草多糖和虫草酸含量为对比,比较其差异性。分析和统计表明:云南蛹虫草居群菌丝体虫草多糖和虫草酸平均含量,普遍高于我国东北蛹虫草居群菌丝体的;云南嵩明居群菌丝体虫草多糖和虫草酸平均含量最高,与其他居群菌丝体相比差异显著,其中云南嵩明居群cmilSM5号菌株菌丝体虫草多糖和虫草酸含量在所有菌株菌丝体中最高,与其他菌株相比差异显著。     

蚕蛹虫草栽培方法优化试验

不同菌种、培养基配方、接种方法对蛹虫草人工栽培的影响不同。对蚕蛹虫草菌种、培养基配方、接种方法三因素进行优化，以接种后蚕蛹感菌率、出草整齐程度、转色情况等为评价指标进行试验。通过菌株活性检测，筛选出性状稳定的蚕蛹虫草菌种；通过液体菌种培养基配方筛选试验，筛选出发菌快的液体菌种培养基配方；分别采用喷洒、浸泡、注射的方式接种蚕蛹虫草液体菌种，筛选出最优接种方法为注射。     

蛹虫草菌种五种保藏条件的保藏效果对比试验

为了改进蛹虫草菌种容易退化的问题,增强蛹虫草保藏的稳定性,试验研究了蛹虫草在五种保藏条件下,经过保藏半年、一年后菌丝活化的情况以及菌丝活化后的深层培养和固体培养长势和情况,筛选出蛹虫草最佳保藏温度为（4±2）℃。     

人工培植蛹虫草技术要点

蛹虫草富含虫草素、虫草酸、虫草多糖等多种活性成分 ,有多种医疗和滋补功能 ,是冬虫夏草的代用品。近年来还用于保健食品开发 ,有多种产品问世 ,现在我国河南、辽宁、湖南、山西等已形成一定规模的商品生产。但蛹虫草在栽培过程中 ,若技术要领掌握不好 ,常导致产量低 ,畸形草多 ,甚至不出草等问题。笔者根据多年栽培经验 ,将其人工栽培技术要点介绍如下 :1　优质菌种　菌种要从正规科研部门购买 ,我系从中科院微生物研究所引进菌种 ,为子囊类的麦角菌目 ,麦角菌科的蛹虫草 ,该菌种具有抗性强 ,生长旺盛 ,容易出草 ,出草均匀 ,转化率高 ,出…     

蛹虫草继代培养后主要生物学性状的变化

本研究观察了野生和栽培蛹虫草菌株在继代培养过程中主要生物学性状的变化。结果显示,随着培养代数的增加,蛹虫草的生物学性状发生了明显的改变,表现为菌丝生长速率逐渐下降,菌落颜色逐渐变淡并有角突变出现,产孢量明显减少,子实体形成能力也逐渐减弱甚至不能产生。为防止蛹虫草菌株的退化,应尽量减少在人工培养基上的培养代数。     

高寒地区蛹虫草大米培养基的优化

以引进西藏的6株蛹虫草为试材,对比研究了其菌丝生长速率、出草产出及长势,筛选优良的蛹虫草菌株,并通过正交实验筛选对蛹虫草大米培养基营养成分的最优水平组合。结果表明:蛹虫草"TAAAS1"的菌丝生长速率虽不是最快的,但出草整齐均匀,出草产出高于其它菌株,表明"TAAAS1"菌株是适宜在高寒地区栽培生产的好品种;蛹虫草大米培养基的最优水平组合为蛹粉4g/L,葡萄糖20g/L,硫酸镁2g/L,磷酸二氢钾1.5g/L。     

北冬虫夏草菌种退化原因及防控方法

北冬虫夏草（Cordyceps militaris）又名蛹虫草,简称北虫草。系子囊菌亚门、核菌纲、球壳目、麦角菌科、虫草属真菌。主要寄生在鳞翅目昆虫的蛹体上,是昆虫蛹体和虫草子实体构成的复合体。通常蛹虫体为黑褐色,子座呈橙黄色或橘红色。蛹虫草具有多种药用价值和滋补功能,可与人参、鹿茸相媲美,是冬虫夏草的最佳替代品。营养学研究表明它富含多种有意人体的营养成分,其特色成分为虫草酸、虫草素和虫草多糖等。药理学研究表明它具有调节机体免疫、补肝益肺、补肾壮阳、抑制癌细胞分裂与增长、延缓衰老及美容的功效。近年来蛹虫草人工栽培技术取得了突飞猛进的发展,虫草的规模化生产得到顺利实施,但生产中蛹虫草的菌种退化问题给生产带来的损失也是非常巨大,为帮助生产和减少损失,作者根据近年的实践操作、观察和分析,为读者提供参考和帮助。     

野生蛹虫草的分离与高产菌株的筛选

人工栽培蛹虫草时，往往遇到出草率下降的情况。着重阐述野生蛹虫草菌株的分离和高产菌株的筛选。     

继代培养对蛹虫草菌丝生长速度及酯酶同工酶的影响

以蛹虫草菌株为试材,通过垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳和菌丝生长速度测定,对不同代次蛹虫草菌丝生长速度和菌株酯酶同工酶表现型进行比较分析,旨在寻找蛹虫草菌种退化机理。结果表明:不同代次蛹虫草的菌丝生长速度差异不显著,而酯酶同工酶酶谱发生较大变异。9个菌株共有3条迁移率不同的条带,分别为0.63、0.65和0.67,其中F1、F3、F4和F5代菌株出现第2、3条酶带,迁移率分别为0.65和0.67,而F2、F6、F7、F8、F9代菌株发生变异,迁移率为0.67的条带消失,菌株酶谱条带中产生了迁移率为0.63的新条带。     

蛹虫草退化菌株的生理生化特征

为了初步鉴定蛹虫草(Cordyceps militaris)退化菌株的生理生化特征,采用倒置显微镜、扫描电子显微镜观察蛹虫草退化菌株与正常菌株的形态特征,分别用高效液相色谱(HPLC)、氟硼二吡咯(BODIPY)脂滴染色、荧光定量PCR测定腺苷与虫草素含量、脂质含量、细胞自噬相关基因的表达水平。结果表明:蛹虫草退化菌株的菌丝体分枝多、畸形,呈弯曲的不规则状;退化菌株的菌丝中腺苷含量比正常菌株的低30.23%,两者发酵液中的腺苷含量无差异,而退化菌株的菌丝和发酵液中均未检测到虫草素;退化菌株的荧光亮度明显低于正常菌株;细胞自噬相关基因Atg13、Atg18、Atg22、Atg22-2表达量在退化菌株中上升,退化菌株比正常菌株分别上升了432.19%、170.45%、336.06%、61.01%;Atg17呈下调表达,退化菌株比正常菌株下调了65.28%,两者Atg28的表达量无差异。