草莓外源LEA3基因的导入

 以草莓(Fragaria ananassa Duch．)品种‘Darslect’的花药为试材，以MS培养基为基本培养基，进行愈伤组织的诱导。通过基因枪法将来源于大麦的胚胎发生晚期丰富蛋白基因LEA₃ 导入愈伤组织细胞，经过除草剂PFF的4次筛选培养，获得了抗性愈伤组织及再生植株。通过地高辛标记的探针进行Southern杂交分析，检测到了杂交带，表明LEA₃ 基因整合到草莓染色体基因组中。     

GhMADS3基因组成型表达对矮牵牛花形和花色的影响

 利用农杆菌介导法将GhMADS3基因转入矮牵牛。对14株转基因植株进行分析鉴定, GUS染 色表明外源基因在转基因植株中表达, PCR检测显示GhMADS3整合到矮牵牛的基因组中, RT-PCR分析表 明GhMADS3在转基因植株中表达。转基因植株花器官普遍较野生型小, 花萼膨大、顶尖向内弯翘, 花冠深 裂且边缘伴有不规则褶皱, 柱头裸露在外, 花器官颜色较野生型变淡甚至完全白化。测定花瓣、花萼中花 色素苷和花萼中叶绿素含量, 结果表明转基因植株均较对照偏低。说明GhMADS3的导入使得矮牵牛花形、 花色发生改变。     

Na2CO3胁迫对野生蒲公英种子萌发的影响

用种子萌发法通过不同浓度的Na2CO3溶液对蒲公英种子进行胁迫处理,以探讨Na2CO3胁迫对蒲公英种子萌发的影响。结果表明,50 mmol/L的Na2CO3溶液对蒲公英种子发芽率有显著和极显著影响,5 mmol/L的Na2CO3溶液对蒲公英种子发芽势、发芽指数和活力指数均有显著和极显著抑制作用。5～150 mmol/L的Na2CO3溶液胁迫下蒲公英种子仍能萌发,说明蒲公英种子有一定的耐盐能力,复水试验也表明蒲公英种子对Na2CO3胁迫具有一定的耐受能力。该特性为充分利用新疆地区盐碱地进行蒲公英的种植奠定理论基础。     

Differential roles of Gβ/Gαq-PI3K-PKC signaling pathway in the regulation of 3T3-L1 pre-adipocyte differentiation

AIM:To investigate the role of individual protein isoforms in the regulation of 3T3-L1 adipocyte development through detecting temporal patterns of Gβ, Gα/q, phosphorylated phosphoinositide 3-kinase IA and IB isoforms and activated protein kinase C α and ζ subtypes involved in Gβ/Gαq-PI3K-PKC signaling pathway during 3T3-L1 preadipocyte differentiation. METHODS:The cells were induced by 1-methyl-3-isobutylxanthine, dexamethasone and insulin in vitro, and harvested at indicated time points (0 d, 6 h,12 h, 1 d, 3 d, 6 d, 9 d), then the total proteins of these cells were extracted. The expressions of Gβ, Gα/q, p101, phosphorylated p85, p55, p110γ, PKCα and ζ were assayed by Western blotting. RESULTS:(1) Gαq/11 and Gβ increased after induction of differentiation, reaching maxima respectively at 3 d and 1 d when cellular level of Gβ was 1.97±0.16-fold higher and expression of Gαq/11 was 2.34±0.22-fold higher than that in just-confluent (0 d) cells. Subsequently the expression declined. (2) Compared to 0 d, phosphorylated p110γ, p55 and p85 elevated slightly at 12 h, and decreased significantly by the end of the treatment period (9 d) which coincided with maximal differentiation. While the expression of p101 elevated slightly at 12 h, no statistical significance through differentiation was found. (3) Phosphorylated PKCα increased significantly, peaking at 3 d of differentiation. Expression of phosphorylated PKCζ decreased during differentiation and its level 45.52% lower in adipocytes than that in preadipocyte was observed. CONCLUSION:The protein levels elevating at the early stage of differentiation correlate with the time point at which clonal expansion of cells is observed. Phosphorylated p55 and PKCζ decrease in adipocytes than that in preadipocyte, indicating an inhibitory influence upon the late differentiation process.     

GA3 和PP333调控苹果花芽孕育机理的研究

 连续3 年用多效唑(PP₃₃₃) 1 000 mg/L 和赤霉素(GA₃) 1 000 mg/L 处理‘首红’苹果, 结果表明, PP₃₃₃处理降低了芽内吲哚乙酸( IAA) 和赤霉素( GAS) 含量, 增加了玉米素核苷(ZR) 和脱落酸(ABA) 含量, 提高了ZR/ IAA、ZR/ GAS、ABA/ IAA 和ABA/ GAS 比值,从而促进了花芽形成。GA₃ 处理则增加了IAA、GAS 含量, 降低了ZR、ABA 含量, 降低了ZR/IAA、ZR/ GAS、ABA/ IAA 和ABA/ GAS 比值, 从而抑制了花芽形成。PP₃₃₃和GA₃ 在花芽孕育临期内应用效果显著, 在其它时期无效。     

非洲菊组织培养中La3+的应用初探

 以非洲菊‘Sunbird’品种的花托、幼叶、幼芽为外植体, 研究不同浓度La³⁺对愈伤组织形成、生长、幼芽分化增殖的影响。结果表明, 低浓度La³⁺对花托愈伤组织形成、生长及芽的分化有促进作用,最佳处理浓度为10 mg/L , 处理浓度大于10 mg/L 时抑制芽的分化, 并明显引起褐化。La³⁺对离体叶片愈伤组织形成生长的促进作用亦随处理浓度的提高而增大, 但愈伤组织的褐化率也增大, 最佳处理浓度为15 mg/L。幼芽的增殖系数在La³⁺ 0～50 mg/L 范围内随浓度的提高而增大, 50 mg/L 时最大, 达20. 8 , 但浓度大于30 mg/L 时增殖过程易出现玻璃化苗并引起叶畸形, 增殖的最佳浓度为30 mg/L。     

ERF转录因子新成员JERF3提高百合的耐盐性

以麝香百合鳞片愈伤组织为受体，通过对农杆菌浓度、培养时间及抗生素敏感性的比较试验，建立了农杆菌介导的麝香百合愈伤组织遗传转化的优化体系，并利用该体系将ERF转录因子JERF3基因导入百合中，通过PCR、RT-PCR及Southern blot检测，证明JERF3已整合到百合基因组中并在转录水平上表达。对T0代转基因株系耐盐性鉴定表明，与未经转化的对照相比，转基因百合的耐盐性能明显提高，说明JERF3基因的超表达能有效提高转基因百合抵抗盐害的能力。     

茄子3个Aux/IAA基因的克隆及表达分析

以茄子单性结实品系‘D-7-1’为材料,克隆到3个新的Aux/IAA基因,分别命名为SmIAA3、SmIAA4和SmIAA9,其CDS长度分别为573、564和915 bp,分别编码190、187和304个氨基酸;系统进化树分析表明,3个蛋白均属于Aux/IAA家族蛋白,与番茄亲缘关系较近,且均具有Aux/IAA家族蛋白的DomainⅠ、Ⅱ、Ⅲ 和 Ⅳ 保守结构域;其分子量分别为21.50、20.95和32.67 kD,理论等电点分别为7.62、6.02和8.57。实时定量PCR分析表明：SmIAA9基因在单性结实和非单性结实品系茄子中的表达量差异明显,开花前单性结实品系的表达量显著高于非单性结实品系,推测其与茄子单性结实相关。     

葡萄EIN3/EIL转录因子家族成员鉴定及表达特征分析

【目的】探究葡萄EIN3/EIL家族的进化特性及其在逆境胁迫及不同激素处理下的表达模式。【方法】通过Blast比对鉴定EIN3/EIL转录因子家族成员,对该家族进行生物信息学分析,利用qRT-PCR分析该转录因子家族成员在不同激素及逆境胁迫下的表达情况。【结果】EIN3/EIL家族主要分布在6号染色体上,定位在细胞核中,蛋白质二级结构以α-螺旋和不规则卷曲为主。对顺式作用元件分析发现,EIL基因的启动子序列中包含许多激素应答、胁迫响应、植物防御及与植物生长相关的元件。组织芯片数据显示,不同组织中EILs基因的表达量由低到高依次为根、叶、茎且VvEIL2基因在所有组织中高表达。qRT-PCR分析表明,逆境胁迫下,VvEILs基因在NaCl诱导下的表达量较高且根系中VvEIL1基因的表达量最高,是对照的18倍;激素处理下,EILs基因均被不同程度地诱导表达,且在250 mg·L~(-1)乙烯利处理下,VvEIL6基因的表达量极显著高于对照,是对照的93倍;随着处理浓度的增加,乙烯利诱导下VvEIL2和VvEIL5基因下调表达,乙烯抑制剂处理下上调表达。【结论】葡萄EIN3/EIL基因家族在非生物逆境胁迫应答过程中具有重要作用,VvEIL2和VvEIL5在乙烯信号通路中可能是负调控因子。     

3个甜瓜品种果实香气成分的HS-SPEM/GC-MS比较分析

【目的】探究不同香味类型甜瓜品种成熟果实的特征香气成分。【方法】采用HS-SPME/GC-MS技术对香气成分进行测定分析。【结果】检测到网纹甜瓜‘C51’、‘C52’以及薄皮甜瓜‘白玉满堂’3个甜瓜品种香气成分种类分别为92种、58种、54种,以酯类为主。其中三者共有香气成分10种,为乙酸丁酯、乙酸-2-甲基-1-丁醇酯、乙酸己酯、(Z)-乙酸-3-己烯-1-醇酯、2,3-丁二醇二乙酸酯、乙酸辛酯、乙酸苯甲酯、苯基乙醇、(E)-6,10-二甲基-5,9-十一烷二烯-2-酮、十三烷,其中以乙酸苯甲酯含量最高。厚皮甜瓜‘C51’、‘C52’共有成分为8种,分别为丙酸-2-甲基丙酯、丁酸-2-甲基丙酯、乙酸庚酯、(Z)-乙酸-3辛烯-1-醇酯、丙酸-2-戊醇、2,4-壬二烯-1-醇、(E,Z)-2,6-壬二烯醛、(Z,Z)-3,5-辛二烯。氯乙酸-2-苯乙酯、丙酸-2-甲-3-苯乙酯为‘C51’果实所特有,含量分别高达16.58%和2.09%。(Z)-3-壬烯-1-醇、(E,Z)-3,6-壬二烯-1-醇、(E)-6-壬烯醛是‘C52’果实的特征香气成分,含量分别为2.57%、3.14%、4.29%。薄皮甜瓜‘白玉满堂’含硫化合物种类和含量远高于2个供试厚皮甜瓜品种,并且甲基硫代醋酸乙酯、2-甲基硫代乙酸甲酯、3-甲硫基丙酸乙酯、甲基硫丙杂环、烯丙基甲硫醚为其所独有,占其香气总含量的9.02%,其中烯丙基甲基硫醚、甲基硫丙杂环在甜瓜果实中未见报道,推测含硫化合物可能是薄皮甜瓜的特征香气成分之一。【结论】呼吸跃变型甜瓜香气成分种类最为丰富。不同类型甜瓜果实特征香气存在一定差异。     

GA3结合有机肥管理对柑橘裂果的影响

裂果是柑橘生产中常见的一种生理性病害,果皮与果肉生长不一致以及果园的粗放管理是造成裂果的原因之一。本研究以易裂果的宫川温州蜜柑为对象,在施用有机肥的基础上,设置了不同浓度的赤霉酸（GA3）喷雾处理,结果表明,在6-7月份,使用2次20 mg/L的GA3喷雾果实,可降低温州蜜柑果实的裂果数量,对果实的外观品质没有显著影响。因此,合理使用GA3有助于柑橘裂果的大面积发生。     

无蔓南瓜对外源GA3 处理的生理反应

 研究了0.6 mmol·L ^{- 1}赤霉素GA₃对无蔓南瓜叶片的叶绿素含量以及叶片和节间的过氧化氢酶、愈创木酚过氧化物酶、超氧化物歧化酶、α - 淀粉酶和酸性磷酸酯酶的活性的影响。结果表明, 处理后的前3天, 叶片中叶绿素含量没有明显改变; 第6天处理的叶片中叶绿素含量极显著低于对照的。赤霉素处理对无蔓南瓜节间中α - 淀粉酶活性、过氧化氢酶活性和超氧化物歧化酶活性影响在第3天(或第1～3天) 提高显著; 到第6天, 酸性磷酸酯酶活性逐渐增强; 第9天, 过氧化物酶活性开始逐渐提高。     

GA3处理对柑橘果皮色素变化的影响

 研究外源GA₃ 处理对柑橘‘红柿柑’果皮内源激素、叶绿素、类胡萝卜素含量变化的影响,并探讨其与色泽变化的关系。结果表明: 外源GA₃ 处理较对照提高了果皮GA₃ 、ZT 的水平, 抑制了叶绿素下降和类胡萝卜素、β-隐黄质的合成与积累, 最终表现为柑橘果实色泽发育受阻。     

外源蔗糖对NO3- 胁迫下叶用莴苣生长及品质的影响

采用水培方法,以常规营养液（7.5 mmol·L^-1 NO₃^-）、叶面喷施清水作为对照, 在75 mmol·L^-1 NO₃^-胁迫下,通过叶面喷施0 mmol·L^-1（T1）、1 mmol·L^-1（T2）、5 mmol·L^-1（T3）的蔗糖,研究外源蔗糖对NO₃^-胁迫下叶用莴苣生长及品质的影响。结果表明：T1 处理叶用莴苣的生长受到显著抑制,同时显著降低了VC 含量。外源蔗糖处理可以缓解NO3- 胁迫对叶用莴苣生长的抑制作用,提高VC 含量,同时可略降低硝酸盐含量,其中T2 处理效果较好。与对照相比,T2 处理和T3 处理均可降低叶用莴苣可溶性蛋白含量,T3 处理可提高可溶性糖含量,但差异均不显著。     

NH_4/ NO_3及温度对结球生菜硝酸盐含量的影响

叶菜类蔬菜均有累积硝酸盐的特性。吸收到植物体内的一部分硝酸盐会转化为亚硝酸盐,成为有害物质。为此,笔者进行了为期5年降低叶菜类蔬菜硝酸盐含量的试验。材料采用7个结球生菜品种,分别在不同季节利用营养液膜栽培法(NFT)种植。营养液中的氮素一硝态氮100%,或硝态氮80%、铵态氮20%,以10mmol/L为基准。结果,氮素全为NO3(硝态氮)时,结球生菜中硝酸盐的含量较高,若把氮素中NO3(硝态氮)的20%转换成NH4(铵态氮),硝酸盐的含量就较低。采收前 2～3周再把NH4(铵态氮)的比例增加到50%或80%,结果叶球鲜重没有减少,而叶的硝酸盐含量有所下降。 …     

龙眼叶面喷施KClO3近季调控试验效果研究

龙眼近季产期调控是指在龙眼接近正季且已具备花芽分化的物候期和气候条件下,采用措施促进龙眼提前启动花芽分化,提前抽发花穗、早结果、早成熟,拉长鲜果供应期和增加经济效益。从2007年起,在总结以往龙眼反季节栽培的基础上,我们进行了龙眼叶面喷施KClO3近季产期调控试验,并获得较好的     

Destruction of autophagy marker LC3 rhythm is involved in β1-AA-induced H9c2 rat cardiomyocyte death

AIM To investigate the effect of β₁-adrenergic receptor autoantibodies （β₁-AA） on the rhythm of autophagy marker microtubule-associated protein 1 light chain 3 （LC3）, and the underlying mechanism of cardiomyocyte death. METHODS The test materials were Sprague-Dawley （SD） rats and H9c2 rat cardiomyocytes. The SD rats were randomly divided into immunization group and control group with 6 rats in each group. The H9c2 cells were randomly divided into control group, β₁-AA group, lentivirus （LV）-NC group, and LV-shPer2 group （n=6）. Affinity chromatography was used for purification of β₁-AA from rat serum. CCK-8 assay was used to observe the viability of cardiomyocytes treated with β₁-AA for 24 h. The cells were synchronized by dexamethasone and then treated with β₁-AA. The mRNA and protein levels of LC3 at different time points were determined by real-time PCR and Western blot, respectively. The Per2 protein level at different time points was also determined by by Western blot. JTK_CYCLE algorithm was used to estimate the circadian rhythm parameters. After destruction of LC3 circadian rhythm via LV-shPer2, CCK-8 assay was used to measure the viability of H9c2 cells. RESULTS High level of β₁-AA in rat serum was found after active immunization compared with control group （P<0.05）. The viability of H9c2 cells in β₁-AA group was significantly lower than that in control group （P<0.05）. The LC3 and Per2 rhythms were both disrupted in H9c2 cells induced by β₁-AA （JTK_CYCLE P<0.05）. After LV-shPer2 infection, the LC3 rhythm was disrupted （JTK_CYCLE P<0.05） and the cell viability was reduced （P<0.05）. CONCLUSION β₁-AA may induce the destruction of autophagy marker LC3 rhythm in rat cardiomyocytes and then promote cell death.     

Effects of ClC-3 knockdown-induced TNF-α/IL-10 imbalance in rat DRG on voltage-gated sodium channel expression and mechanical allodynia

AIM To investigate the effect of ClC-3 chloride channel/antiporter knockdown in rat dorsal root ganglion (DRG) on voltage-gated sodium channel expression in neurons and mechanical allodynia in rats. METHODS Adeno-associated virus carrying ClC-3 shRNA (AAV-ClC-3 shRNA) was injected intrathecally to knock down ClC-3 expression in DRG tissues of adult SD rats. The mRNA and protein expression levels of ClC-3, cytokines and voltage-gated sodium channels were detected by RT-qPCR, immunofluorescence and Western blot. The mechanical sensitivity was assessed using von Frey hairs and up-down method. RESULTS Intrathecal injection of AAV-ClC-3 shRNA decreased ClC-3 expression in the DRG tissues and induced mechanical allodynia in the rats. Knockdown of ClC-3 up-regulated the expression levels of Nav1.3, Nav1.7, Nav1.8 and Nav1.9 in the DRG tissues. Knockdown of ClC-3 increased tumor necrosis factor-α (TNF-α) and decreased interleukin-10 (IL-10) levels in the DRG tissues. CONCLUSION Knockdown of ClC-3 in rat DRG tissues induces TNF-α/IL-10 imbalance and increases expression of voltage-gated sodium channels, thus contributing to mechanical allodynia.     

不同浓度NO3- 胁迫下黄瓜幼苗根系分生区细胞内Ca2+分布变化的差异

 以‘新泰密刺’黄瓜为试材, 采用焦锑酸钙沉淀的电镜细胞化学方法, 研究不同浓度NO₃^- 胁迫下黄瓜幼苗根系分生区细胞内Ca²⁺的分布变化, 以期为探讨不同浓度NO₃^- 胁迫下细胞Ca²⁺行为特征与黄瓜对NO₃^- 适应性之间的关系。结果表明, 对照生长条件下(14 mmol·L^-1 NO₃^- ) , 黄瓜根系分生区细胞内Ca²⁺主要出现在细胞膜和小液泡内, 线粒体、细胞质和细胞核及核仁内也有少量的较小颗粒钙沉淀。而其它浓度NO₃^- 胁迫下, 其根系分生区细胞Ca²⁺定位分布变化明显。在56和140 mmol·L ^-1NO₃^- 浓度下, Ca²⁺有向细胞基质分布的趋势, 其细胞间隙、细胞质和线粒体中亦出现大量钙沉淀颗粒。且不同处理浓度下, 线粒体和小液泡数量及结构变化较大。而当NO₃^- 浓度达182 mmol·L ^-1时, 根系分生区各细胞器内钙沉淀颗粒明显减少, 此时Ca²⁺的变化是各细胞器及膜系统遭严重破坏的结果。综上可知, 黄瓜幼苗可通过根系分生区液泡内Ca²⁺向细胞基质分布变化, 来增加对高浓度NO₃^- 胁迫的抗性。