枣树越冬期内生真菌的分离鉴定及抑菌研究

为了明确越冬期枣树组织中内生真菌的种类和分布情况,并从中筛选出对枣缩果病病原有拮抗作用的内生菌株,从越冬期健康枣树的树皮、枣股、枝条中分离获得内生真菌225株,共鉴定出12个真菌属,其优势属为茎点霉属、链格孢属、毛壳菌属和镰刀菌属。研究结果表明:越冬期健康枣树组织中内生真菌分布普遍,种类丰富;不同品种、不同部位中内生真菌的种类和数量都有差异。室内平板对峙实验结果表明:在225株内生真菌中,有25株内生真菌对枣缩果病病原茎点霉菌1-2有抑制作用,最高抑菌率为85.45%;有14株内生真菌对病原壳梭孢菌1-5有抑制效果,最高抑菌率为76.00%;内生真菌F7和F8对两种病原菌均有抑菌效果,而且均有明显的抑菌带,这说明上述两株菌均可产生抗菌代谢物质。     

新疆野苹果根围木霉分离鉴定及生防特性研究

为了给防治新疆野苹果病害提供生防性能优良的木霉菌株,利用孟加拉红平板分离法进行新疆巩留县野苹果根围木霉菌株分离,通过形态特征和ITS rDNA序列比对进行菌种鉴定,利用平板对峙试验检测分离木霉抑菌能力,用NBT染色和根部观察检验木霉诱导后新疆野苹果幼苗叶片活性氧含量、抗病和促生能力。结果表明:分离鉴定出俄罗斯木霉22株,渐绿木霉13株,哈茨木霉4株。从长势和产孢量等特性上看,俄罗斯木霉T7和哈茨木霉T2为新疆野苹果根围优势生防木霉菌种。哈茨木霉T2对尖孢镰刀菌的抑菌率为75.47%,对链格孢菌的抑菌率为78.17%。俄罗斯木霉T7对尖孢镰刀菌的抑菌率为79.66%,对链格孢菌的抑菌率为91.53%;NBT染色发现木霉处理后野苹果苗叶片活性氧含量降低,叶片染色颜色更浅。总之,木霉能有效抑制病原菌生长,能有效减少新疆野苹果幼苗中活性氧含量,促进和保护根系生长。本研究为防治新疆野苹果病害防治提供生防性能优良的木霉菌株,为苹果病害的生物防治提供可以借鉴的方法。     

古侧柏鳞叶内生真菌分离及其抑菌活性研究

为探明古侧柏鳞叶内生真菌的多样性及其抑菌活性,分别以夏季、秋季的古侧柏健康鳞叶为材料,分离内生真菌,共获得311株,经形态学和分子生物学鉴定,隶属于21属。进一步采用平板对峙法和生长速率法分别测定了优势菌株C-3(Chaetomium sp.),C-6(Nigrospora sp.),C-14(Trichoderma sp.),C-19(Bipolaris sp.)和C-30(Alternaria sp.)对金黄壳囊孢菌Cytospora chrysosperma、尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum、胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides、葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea的抑制作用,结果表明,这5株内生真菌对4种病原菌均表现出不同程度的抑菌活性,其中C-14表现最强,抑菌率分别为79.55%,59.82%,75.67%和62.82%,显著高于其它菌株(P0.05)。     

云南榧内生菌的分离及抗植物病原菌活性筛选

采用内生菌常规分离法从云南榧的新鲜茎与叶中分离得到10株内生真菌和5株内生放线菌,通过滤纸片扩散法研究了内生菌对小麦雪腐病菌、辣椒炭疽病菌、三七丝核病菌等10种植物病害病原真菌的抑菌活性。结果显示,云南榧内生真菌粗提物对10种植物病原真菌具有较广泛的抑制作用,其中,菌株TY3对棉花枯萎病菌具有较强的抑菌活性;菌株TY7对辣椒炭疽病菌、三七丝核病菌及番茄灰霉病菌具有较强的抑菌活性。5株内生放线菌中,菌株FTY1、 FTY5、 FTY7无抑菌活性,而菌株FTY2对10株植物病原真菌均表现出了较强的抑菌活性, FTY6对辣椒炭疽病菌、棉花枯萎病菌、梨黑星病菌表现出了很强抑菌活性。该实验结果为云南榧内生菌的进一步开发利用奠定了基础。     

瓦雷兹芽孢杆菌YH-20发酵液的抑菌特性初探

为掌握瓦雷兹芽孢杆菌YH-20发酵液的抑菌稳定性及其抑菌物质,采用生长速率法测定菌株YH-20发酵液对12株病原菌的抑制作用,以葡萄座腔菌为病原指示真菌测定发酵液在不同条件下抑菌稳定性,根癌农杆菌为病原指示细菌测定提取物质的抑菌活性;采用硫酸铵沉淀法和酸沉淀法提取发酵液中的蛋白类物质和脂肽类物质,并以特定培养基检测菌株产蛋白酶和纤维素酶的能力,以正丁醇、乙酸乙酯和石油醚对发酵液中的活性物质进行萃取。结果表明,菌株YH-20发酵液对供试的11种病原真菌和1株病原细菌均具有较好的抑制能力,该发酵液经普通光照和紫外光照处理后,发酵液的抑菌率保持稳定,经80℃处理120min后,抑菌率仍可达到49.24%,在pH6-9处理后,仍可保持较高的抑菌率。在4℃最少可储存30d而抑菌能力不发生改变。菌株YH-20可产生抑菌性蛋白和脂肽、蛋白酶、纤维素酶及嗜铁素。以极性较高的正丁醇和乙酸乙酯可萃取出发酵液中的抑菌活性物质。菌株YH-20对植物病原菌具有广谱抑菌能力和较好的抑菌稳定性,可产生多种抑菌物质。     

苹果腐烂病菌拮抗放线菌的分离与鉴定

采用常规方法对广东省中山市采集的土样进行分离,得到放线菌293株。以苹果腐烂病菌为指示菌,通过平板对峙法和管碟法对分离菌株进行筛选。对峙法获得有拮抗效果的放线菌61株,抑菌率在50%以上的有13株,其中Z-6的抑菌率达87.2%;进一步应用管碟法对上述作用明显的菌株进行复筛,抑菌圈直径大于20 mm的菌株6株,其中Z-6菌株产生抑菌圈直径最大,为32.87 mm。抑菌谱测定结果表明,该菌株对小麦全蚀病菌、番茄灰霉病菌和稻瘟病菌抑菌效果最强,抑制率在70%以上。离体枝条测定试验中,该菌株同样表现了一定的防治效果,抑制率达32.9%。最后,本试验还对Z-6的形态特征、培养特征及生理生化特性作了研究,初步鉴定为链霉菌属(Streptomyces)的金色类群(Aureus)。     

杨树烂皮病菌颉颃菌株的初步筛选与分子鉴定

对杨树烂皮病菌的平板对峙试验结果表明,6种颉颃真菌中木霉的抑菌率最高为51%,而颉颃细菌4个菌株的抑菌率均在60%左右,说明颉颃细菌的抑菌效果明显高于颉颃真菌;对B137等4株颉颃细菌的分子鉴定认为,1株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),2株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),还有1株为苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt);解淀粉芽孢杆菌和苏云金杆菌对杨树烂皮病菌有较好的颉颃效果。     

华山松叶栖内生真菌的分离鉴定及筛选

用常规内生真菌分离方法从健康华山松Pinus armandii Franch.针叶上分离到17种内生真菌,其中子囊菌1种、酵母菌1种、半知菌15种。通过对峙培养初步筛选出抗真菌活性的内生真菌优势种:绿木霉Trichoderma viridePers.:Fr.、拟康宁木霉T.pseudok ningiiRifai,并对这2种木霉培养滤液的抑菌作用进行初步研究。结果表明,这2种木霉培养滤液对来自于针叶的拟盘多毛孢PestalotiopsisStey.和针叶树散斑壳Lophodermium conigenum(Brunaud)Hilitz菌落生长只有较弱抑制作用,对来自于枝干的拟茎点霉Phomopsis(Sacc.)Bubak有很强的抑制作用,对拟盘多毛孢孢子萌发有不同程度抑制作用。     

西南桦苗木猝倒病生防菌的筛选及鉴定研究

采用组织分离法和稀释平板法对西南桦猝倒病发生区健康苗木组织、根际土壤及咖啡壳堆肥化基质进行菌种分离和分子鉴定。将分离获得的17株菌株与西南桦苗木猝倒病病原菌尖孢镰刀菌和腐皮镰刀菌进行平板对峙实验,筛选病原拮抗菌。结果表明,筛选出的真菌5#、7#及细菌BJ、JCl对西南桦苗木猝倒病原菌尖孢镰刀菌和腐皮镰刀菌具有较强抑制效果。其中真菌5#和7#的抑菌率分别为91．30％和90．12％;细菌BJ和JCl抑菌带较宽,对峙4天分别达0．4cm和0．5cm,抑菌率分别为80．4％和78．6％,且BJ抑菌效果更好;真菌与细菌比较,拈抗真菌5#和7#比拮抗细菌BJ和JCl抑制热区西南桦苗木猝倒病菌效果更好。通过对峙实验筛选出的5#、7#、BJ和JCl拮抗菌,对热区防治苗木猝倒病及生防制剂的开发应用具有参考价值。     

黄山风景区亮壮异蝽病原真菌及高毒菌株筛选

该文对黄山风景区亮壮异蝽UrocheladistinctaDistant的病原真菌进行了详细的调查 ,共鉴定出 5种病原真菌 :球孢白僵菌Beauveriabassiana (Bals.)Vuill.、粉拟青霉Paecilomycesfari nosus (Holm .exGray .)Brown&Smith、蜡蚧轮枝孢Verticillumlecanii(Zimmermann)Viegas、芽枝状枝孢霉Cladosporiumcladosporioides(Fres .)deVries和一种顶孢霉Acremoniumsp .,其中球孢白僵菌为绝对优势种群 ,占 92 %。选用 10株不同来源的球孢白僵菌菌株对亮壮异蝽成虫进行了毒力测定 ,结果表明Bb35 7菌株毒力最强 ,是可用于林间防治的生产菌株     

木霉菌对松枯枝病的抑制作用

为探明绿色木霉和哈茨木霉的提取物对松枯枝病的抑制作用机制,通过绿色木霉（Trichoderma viride）和哈茨木霉（Trichoderma harzianum）提取物对松枯枝病病原菌（Cenangium ferruginosum Fr.）进行平板表面涂抹法和混合培养基法抑制生长试验,观察松枯枝病病原菌生长情况,结果表明,2种木霉菌的提取物对松枯枝病病原菌均有抑制作用,且效果比较明显,抑制效果最佳的为绿色木霉,病原菌的被抑制率达53.54%,混合培养基法中哈茨木霉菌20%提取物对枯枝病原菌的抑制率高达31.67%。     

板栗壳提取物抑菌作用研究

研究了板栗(Castanea mollissima Blume)壳的乙醇水溶液提取物对2种细菌、2种酵母菌和2种霉菌的抑制作用，并对其有效成分进行了初步鉴定。结果表明，板栗壳提取物中含有黄酮类物质和可水解单宁；一定浓度的提取物对供试的大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、啤酒酵母、赤酵母、黑曲霉和桔青霉等都有较明显的抑制作用，对上述供试菌的最低抑菌浓度(MIC)依次为3％、3％、0．5％、0．5％、2％和2％；热处理对提取物的抑菌效果无影响；提取物对食品有一定的防腐效果，可以作为天然食品防腐剂进行开发和利用。     

绿色木霉代谢产物抗菌活性研究

对绿色木霉产生的代谢产物进行了抑菌活性的初步研究，生测结果表明：离体条件下发酵液对尖孢镰刀菌、棒盘孢、茄链格孢、出芽短梗霉、灰葡萄孢均有较强的抑制作用，其对以上不同病原菌的抑制率分别为76．6％、86．5％、94．8％、91．4％、86．3％，抑菌活性成分在80℃以下较为稳定，pH值在6-7之间抑菌效果最好。     

Seasonal variations in location and population structure of endophytes in buds of Scots pine

We studied the location and distribution of a bacterial isolate, a Mycobacterium sp., in buds of Scots pine (Pinus sylvestris L.). Using a probe specific for the 16S rRNA of the Mycobacterium sp., the bacterium was found by in situ hybridization in the meristematic tissues of 40% of all bud samples examined. Because we had previously found other bacterial and fungal endophytes in the meristematic tissues of Scots pine buds, we studied their occurrence in buds during shoot development and dormancy. Using probes targeted to the 16S or 18S rRNA of the endophytes Mycobacterium sp., Methylobacterium spp., Pseudomonas spp. and Rhodotorula minuta, endophytes were found in association with growing tissues, with Methylobacterium spp. being the dominant species. Endophytes were detected in abundance before elongation or differentiation of a bud, but once a tissue was fully developed, endophytes were no longer detected. Metabolic activity of the endophytes was suppressed at the onset of, and during, dormancy of Scots pine, but recovered before the following growing season.     

Fungal root endophytes of Quercus robur subjected to flooding

In August 2011, fungal endophytes were isolated from fine (0.1–0.5 cm diameter) and structural (0.6–2.0 cm) roots from eighteen Q. robur trees at six sites in a Q. robur‐dominated forest displaying symptoms of oak decline. Five sites were subjected to periodic flooding for 3 months in 1997 and 1 month in 2010. Fungal colonization was detected in 94% of 1296 root fragments examined. Fungi representing 126 taxa from Zygomycota (four species), Ascomycota (117 species) and Basidiomycota (five species) were isolated using culture‐based methods and identified by morphotyping and sequencing of the ITS 1 and 2 rDNA. The most frequent eudominants (with colonization frequencies ≥10%) were Aspergillus spp., Cosmospora sp., Ilyonectria radicicola, Pezicula radicicola, Pyrenochaeta cava and six species of Trichoderma. Species composition did not vary greatly between sites, but only 3% of species occurred in all sites. Number of species was higher in roots subjected to floods. Eudominants and dominants present only on flooded sites included Aspergillus spp., Chaetomium globosum, Cosmospora sp., I. radicicola, Sporothrix inflata, Trichoderma harzianum, T. pubescens and T. virens. Structural roots were usually colonized by a higher number of species than fine roots. The majority of species detected belong to Class 2 NC‐endophytes. Pezicula radicicola and Phialocephala fortinii belong to Class 4 NC‐endophytes.     

松材线虫入侵的黑松内栖真菌区系初步研究

松材线虫（Bursaphelenchus xylophilus（Steiner ＆ Buhrer）Nickle）是毁灭性森林病害——松材线虫病的病原物，主要危害针叶树种，尤其是松属（Pinus spp．）树种。黑松（Pinus thunbergii Pad．）原产日本及朝鲜半岛东部沿海地区，因其耐海雾、抗海风、可在海滩上生长等特性，在我国辽宁、山东、河北、江苏、安徽、浙江、福建、湖北、广东等省大量栽植，总面积约159300hm^2。研究证明，黑松是松材线虫病的高度感病树种，一旦松材线虫入侵，后果是毁灭性的，将给森林造成严重的、不可挽回的损失。     

桑叶总黄酮的提取及其抑菌活性研究

以抑菌活性为评价指标,对桑叶总黄酮的提取工艺进行了优化,并对优化条件下得到的粗提物采用不同溶剂进行分级提取和定性分析,测定了各萃取物的总黄酮含量,考察了萃取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径、最低抑菌浓度,选取抑菌效果最佳的萃取物进行了稳定性实验。结果表明,桑叶总黄酮提取的最佳条件为:温度70℃,乙醇体积分数70%,提取时间4 h,固液比1∶30(g∶mL);抑菌效果最佳的为乙酸乙酯萃取物,且乙酸乙酯部分对温度和紫外线照射的影响均具有良好的稳定性。     

四川马尾松木居真菌数量与松材线虫病发生的可能性分析

通过对四川马尾松枯萎林分木居真菌和线虫种类分析结果,在健康木、衰弱木和枯死木中均能分离出多种真菌,但健康木木居真菌数量较少。分离出的真菌种类主要有木霉属（Trichoderma sp．）、镰孢霉属（Fusarizn sp．）、多毛孢属（Pestalotia sp．）、砖格孢属（Steganosporium sp．）和曲霉属（Asperigllus sp．）。分离出的线虫为伞滑刃属（Bursaphelenchus sp．）线虫,未分离到松材线虫和拟松材线虫,分离出的木霉、多毛孢属、砖格孢属均可培养松材线虫,说明四川马尾松林区目前还属于松材线虫非疫区,但有发生松材线虫的可能性。     

香荚兰根腐病主要病原的生防因子作用比较

尖镰孢香荚兰专化型是香荚兰根腐病的主要病原。本实验用木霉,枯草芽孢杆菌,荧光假单孢菌对尖镰孢菌香荚兰专化型进行实验室的拮抗作用测定,并进行了比较。结果表明:木霉对尖镰孢香荚兰专化型的的抑制作用最强,抑制率可达78.57%,枯草芽孢杆菌对尖镰孢香荚兰专化型的的抑制作用较强,抑制率可达78.12%,而荧光假单孢菌Ph002对该菌抑制效果则很弱,最高才有39.13%。总之,三种生防菌的抑制效果是:木霉>枯草芽孢杆菌>荧光假单孢菌。     

Colonization of Phellinus weirii-infested stumps by Trichoderma viride.

Douglas-fir [Pseudotsuga menziesii (Mirb.) Franco] stumps infested with Phellinus weirii (Murr.) Gilb. were inoculated with pellets formulated from fermented barley and spores of three isolates of Trichoderma viride Pers.: Fr. After one year, Trichoderma spp. were isolated from stumps inoculated in June less frequently (12 %) than those inoculated in February (23 %) or in October (29 %). Isolations of Trichoderma spp. from stumps with advanced decay were more frequent (46 %) than from stained stumps (12 %) or from sound stumps (2 %). Isolation success was directly related to wood decay at point of sampling, nearness to source of inoculum, and nearness to stump surface.