嗜酸乳杆菌发酵乳饮料的研究与开发

研究和开发了一种嗜酸乳杆菌发酵乳饮料.对嗜酸乳杆菌单菌发酵和与保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌的混菌发酵工艺进行了研究,确定了最佳混合菌种组合比为2∶1∶1.同时对工艺条件及稳定性影响因素进行了研究,得出活菌型最佳发酵终点为90-95°T灭菌型最佳发酵终点为75-80°T;通过正交试验确定稳定剂的最佳组合配方.对活菌型产品进行了4℃下,18 d的储藏试验,产品中的嗜酸乳杆菌的活菌数大于1×106 cfu/mL.     

酸浆中嗜酸乳杆菌发酵豆腐废水发酵条件的研究

从酸浆中分离得到一株嗜酸乳杆菌,并对其发酵豆腐废水条件进行研究。试验结果表明:温度、初始pH值、发酵时间等都影响嗜酸乳杆菌发酵产酸。采用正交试验确定了其发酵豆腐废水的最佳条件为:温度37℃;初始pH值6.0;接种量6%;时间48h,在最佳条件下的产酸量可达到0.5514g/100ml。     

嗜酸乳杆菌高密度发酵研究进展

嗜酸乳杆菌是一种具有重要商业价值的益生菌,嗜酸乳杆菌的高密度发酵技术对于该菌的工业化生产有重要应用价值。本文对嗜酸乳杆菌的营养需求、冷冻环境适应策略以及高密度发酵探索等方面的研究进行综述,旨在为嗜酸乳杆菌的生产提供理论参考。     

嗜酸乳杆菌的生理特性及应用

嗜酸乳杆菌可以在肠道中存活、定植，具有重要的生理功能。本文论述了嗜酸乳杆菌的营养需求、应用及保健作用。     

发酵乳中嗜酸乳杆菌的计数法

介绍了一种发酵乳中嗜酸乳杆菌的计数法.M17培养基能计数嗜热链球菌,MRS培养基能计数所有的乳杆菌,在MRS培养基中加入克林霉素,嗜酸乳杆菌能够生长,保加利亚乳杆菌不能生长,用这种方法可以专一地测出嗜酸乳杆菌数.     

蜡样芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌发酵条件的优化

研究旨在对动物饲料中添加的蜡样芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌的发酵条件进行优化。利用正交试验对两种杆菌的生长条件进行优化并验证。研究结果表明:蜡样芽孢杆菌培养的最佳条件为葡萄糖1.5%、蔗糖1.5%、淀粉0.5%、牛肉粉0.5%、蛋白胨1.5%、酵母粉1%、硫酸铵0.5%、培养时间18～20 h,活菌数可达1.3×10¹²CFU/mL,较优化之前的8×10¹¹CFU/mL提高了62.5%。嗜酸乳杆菌最佳生长条件为MRS液体培养基中添加1%大豆蛋白胨、2%葡萄糖、20%番茄汁、发酵时间22 h,最大活菌数达1.9×10¹¹CFU/mL,较优化之前的1.3×10¹¹CFU/mL提高了46.15%。使用优化的条件进行蜡样芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌进行发酵,可以极大地提高发酵水平和活菌数,有效降低生产成本。     

嗜酸乳杆菌发酵培养工艺研究

嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）属于乳杆菌属,是肠道重要的益生菌,对维持胃肠道的生理功能有重要作用,被广泛用于发酵食品与微生态制剂。在20世纪末,世界各地就开始了对嗜酸乳杆菌的研究和开发,并越来越受到重视,是目前乳酸菌家族中极为重视研究与开发的益生菌之一,被视为第三代酸乳发酵剂菌种。     

嗜酸乳杆菌、双歧杆菌和干酪乳杆菌的选择性计数

LC培养基只能计数干酪乳杆菌，MRS－水杨素（或山梨醇）培养基可以计数嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌，而MRS培养基可以计数嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌和双歧杆菌，于是通过减法原则就能从混合物中单独计数它们。另外，MRS－NNLP培养基也可用于选择性计数双歧杆菌。     

嗜酸乳杆菌发酵棉籽粕对黄羽肉鸡肌肉营养成分和风味特性的影响

本试验旨在研究嗜酸乳杆菌发酵棉籽粕对黄羽肉鸡肌肉营养成分和风味特性的影响。试验选取360只21日龄(449.66±6.01)g的健康黄羽肉鸡公鸡,随机分为6个组,每组6个重复,对照组(Ⅰ组、Ⅲ组和Ⅴ组)饲粮中分别添加3%、6%和9%棉籽粕,试验组(Ⅱ组、Ⅳ组和Ⅵ组)饲粮中分别添加3%、6%和9%发酵棉籽粕,进行42 d的饲养试验后从每组随机选取6只鸡屠宰、采样,并对样本的常规营养成分、脂肪酸、氨基酸及肌苷酸含量等指标进行测定和分析。结果表明:1)与对照组相比,饲粮添加发酵棉籽粕对黄羽肉鸡肌肉中常规营养成分含量均无显著影响(P0.05);2)Ⅱ组肌肉中亚油酸含量比Ⅰ组显著提高了13.91%(P0.05),Ⅳ组肌肉中亚麻酸含量比Ⅲ组显著提高了21.51%(P0.05),Ⅱ组、Ⅳ组肌肉中多不饱和脂肪酸含量比Ⅰ组、Ⅲ组分别显著提高了14.22%和9.04%(P0.05);3)Ⅵ组肌肉中总游离氨基酸含量较Ⅴ组显著提高了13.85%(P0.05);Ⅳ组、Ⅵ组肌肉中风味氨基酸(FAA)含量较Ⅲ组、Ⅴ组分别显著提高了6.04%和9.27%(P0.05),Ⅳ组、Ⅵ组肌肉中FAA比Ⅱ组分别显著提高了5.55%和5.39%(P0.05);4)Ⅵ组肌肉中肌苷酸含量较Ⅴ组显著提高了10.81%(P0.05),其他各组相比均无显著差异(P0.05)。由以上结果可知,饲粮中添加发酵棉籽粕可以改善黄羽肉鸡肌肉的风味特性,按6%或9%比例添加效果较好。     

丁酸梭菌与嗜酸乳杆菌固态发酵豆粕的工艺优化

试验以丁酸梭菌和嗜酸乳杆菌固态发酵豆粕为研究对象,以多肽含量为指标,应用响应面法(RSM)对其工艺条件进行优化。首先对5个因素进行单因素试验,通过Plackett-Burman设计确定了三个显著性因素,分别是接种量、接种比例和水料比。经过Box-Behnken设计试验,建立二次回归模型,得到最佳发酵参数。结果表明,最佳发酵条件为丁酸梭菌与嗜酸乳杆菌的接种比例为1∶1,水料比为0.8∶1,接种量为12.2%,发酵时间为48 h,发酵温度为37℃。验证试验结果表明,在此条件下,发酵豆粕中多肽含量为9.64%。     

酸奶中嗜酸乳杆菌计数检测方法的研究

嗜酸乳杆菌在肠道中的生理功能已受到人们的高度关注,在生产过程中越来越多的具有特殊益生功能的乳酸菌被添加到乳品中,因此乳品中检测嗜酸乳杆菌含量显得尤为重要。在采用4菌种联合发酵的过程中,各菌在酸奶体系中的生长情况比较复杂。寻找如何准确、快捷的检测方法是我们研究的课题,通过实验,认为在MRS培养基中添加一定量的克林霉素和环丙沙星,使嗜酸乳杆菌能够生长,保加利亚乳杆菌、双岐杆菌和嗜热链球菌都不能生长,使检测更准确而有效,为今后生产、研究提供理论依据。     

德氏乳杆菌保加利亚亚种冷冻干燥活力影响因素的研究

研究了复原脱脂乳中添加生长因子与中和剂对德氏乳杆菌保加利亚亚种Lb18生长的影响,添加1%生长因子和1%碳酸钙可使Lb18的对数生长期延长,活菌数达109cfu/mL以上。研究了菌龄、冻干保护剂组成和冻干前预处理等因素对Lb18冷冻干燥存活率和活力的影响。最佳收获菌龄为4.5h,具有较好的冷冻干燥抗性;保护剂实验表明,3%复原脱脂乳、3%乳糖、3%甘油组成的冻干保护剂的冻干存活率达到68.9%,具有较快的产酸能力;确定在42℃预处理1h,Lb18的存活率可达75.9%。根据以上优化条件制备得到的冻干发酵剂使复原脱脂乳发生凝乳所需要的时间为4.5h,基本可以满足酸乳工业生产的要求。研究结果对于高活力酸奶发酵剂的开发和应用具有一定的指导和应用价值。     

Study on Physicochemical Properties of Lactobacillus plantarum DSM20174 Bacteriocin from Koumiss

To study the physicochemical properties extracted from koumiss of Lactobacillus plantarum DSM20174 bacteriocin,we purified the Lactobacillus plantarum DSM20174 bacteriocins and got the bacteriocin crude extractions after ammonium sulfate precipitation and dialysis.After purification with Sephadex G-100 gel column chromatography,bacteriocin specific activity apparently increased,reaching 154.70 AU/mL,yield was 43.5%.We detected the effects of purified Lactobacillus plantarum DSM20174 bacteriocin on bacteriostatic action of wild bovine pathogenic E.coli O78 by Oxford cup method under 3 different treatments.The results showed that:①In five groups of temperature treatments,the bacteriostatic action decreased with the increase of temperature,bacteriostatic actions of all groups were significantly different (P<0.05).Even after treatment at 121 ℃ 30 min,antimicrobial diameter was 14.90 mm.② After Lactobacillus plantarum DSM20174 bacteriocin were treated with pH 2.0 to pH 12.0,the higher of pH,the smaller of antibacterial diameter.The inhibitory effect of groups were significantly different (P<0.05) except pH 9.0 and pH 10.0.③Lactobacillus plantarum DSM20174 bacteriocins were treated by trypsin,pepsin and papain,antibacterial diameter apparently changed,bacteriostatic action was significantly different (P<0.05) before and after treatment.The results suggested that Lactobacillus plantarum DSM20174 bacteriocins were better antibacterial substances,but not thermal stability substances.It had a relatively wide pH range,and the smaller of pH,the stronger of its antibacterial activity,the antibacterial activity had been enhanced at optimum growth pH.It was not protease stability substances.     

酸马奶提取植物乳杆菌DSM20174细菌素的理化特性研究

为研究从酸马奶中提取的植物乳杆菌DSM20174细菌素的理化特性,本试验提纯植物乳杆菌DSM20174细菌素,经过硫酸铵沉淀、透析后得到细菌素粗提液,再利用SephadexG-100凝胶柱层析进行纯化后,细菌素的比活力明显增加,达到154.70 AU/mL,得率为43.5%.采用牛津杯法测定纯化的植物乳杆菌DSM20174细菌素在3种不同方式处理下对牛源野生致病性大肠杆菌O78抑菌效果的影响.结果显示:①植物乳杆菌DSM20174细菌素在5组温度处理下,随着温度的升高抑菌作用降低,各组抑菌作用差异显著(P<0.05).即使121 ℃处理30 min后,抑菌直径仍达14.90 mm.②植物乳杆菌DSM20174细菌素在pH 2.0~12.0由低到高的11组酸碱处理下,pH越大抑菌直径越小,且除了pH 9.0和pH 10.0之间差异不显著(P>0.05)外,其余各组抑菌作用均差异显著(P<0.05). ③植物乳杆菌DSM20174细菌素经胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶3种酶处理后抑菌直径变化明显,处理前后抑菌作用均差异显著(P<0.05).结果表明植物乳杆菌DSM20174细菌素是较好的抑菌活性物质,但不是热稳定性物质;具有较广泛的pH适用范围,且pH越小时其抑菌活性越强,在最适生长pH时抑菌活性有所增强;不是蛋白酶稳定性物质.     

酸马奶源发酵乳杆菌对致病性大肠杆菌O8的体外抑菌研究

为了探究天然发酵酸马奶中发酵乳杆菌对致病性大肠杆菌O₈（E.coli O₈）的抑菌机理,本试验从酸马奶中分离筛选出抑菌效果最佳的菌株,对其进行16S rDNA序列鉴定,经NCBI网站BLAST对比鉴定菌种;对菌株进行培养发酵,制备无细胞发酵上清液（CFS）;通过排酸、排过氧化氢（H₂O₂）、不同蛋白酶处理等方法初步确定CFS中的抑菌活性物质性质及其含量;采用牛津杯法和二倍稀释法确定CFS对致病性E.coli O₈ 24 h生长曲线的最佳抑菌浓度;试剂盒法测定CFS对致病性E.coli O₈的细胞膜和细胞壁通透性的影响。结果显示,从酸马奶中分离出22株对致病性E.coli O₈有抑制作用的菌株,对抑菌作用最好的菌株进行16S rDNA序列鉴定及系统进化树分析后确定其为发酵乳杆菌属;CFS中主要的抑菌物质为蛋白,含量为399.5 μg/mL;最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）分别为25.0和49.9 μg/mL;CFS能使致病性E.coli O₈的碱性磷酸酶（AKP）含量在1 h内快速升高,之后呈缓慢增长趋势,且使致病菌培养液中的蛋白含量明显升高。综上所述,发酵乳杆菌CFS的主要抑菌物质为蛋白,蛋白浓度越高抑菌能力越强;CFS通过破坏或改变致病性E.coli O₈细胞膜和细胞壁的通透性,使其释放出AKP和胞内蛋白,从而在短时间内起到抑制致病性E.coli O₈生长的作用。     

嗜酸乳杆菌ZH-1在复原脱脂奶中的生长和存活模式

研究了嗜酸乳杆菌ZH-1在复原脱脂奶中的生长和存活模式：在不同温度下嗜酸乳杆菌ZH-1在复原脱脂乳中的生长遵循Bolzman模型；在不同贮藏温度和pH下，嗜酸乳杆菌ZH-1遵循对数死亡规律，在4℃、10℃和15℃下的死亡速率常数分别是8．21、4．31和2．86；在pH6．8、6、0和5．0条件下的死亡速率常数为175、53和17.温度是影响存活的主要因素；在实验条件pH值对嗜酸乳杆菌ZH-1的存活影响不大。     

停乳链球菌内蒙分离株抗原基因MIG的克隆

停乳链球菌是引起奶牛乳房炎的主要病原菌,根据GenBank中登陆的停乳链球菌表面蛋白MIG基因序列,设计一对引物,采用PCR的方法从临床分离的停乳链球菌内蒙分离株基因组DNA中扩增出MIG基因,得到一条1900bp的片段。将其连入PMD-19T载体中,经酶切,PCR及序列测定法进行鉴定。经DNA测序分析,证实与GenBank中停乳链球菌MIG基因(AF354651)序列同源性为95%,具有高度保守性。     

酸马奶中分离到的乳酸菌耐酸性及抗霉菌活性的研究

从锡林郭勒盟正蓝旗采集的3份酸马奶样品中分离得到30株菌株,未分离到球菌,均为杆菌,分别鉴定为:Lactobacillus coryniformis subsp.Torquens、Lb.bifermentans、Lb.amylophilus、Lb.helueticus和Lb.delbrueckii subsp.Bulgarcus。并从这5种乳酸菌中选出6株菌株进行了耐酸实验及抗霉菌活性测定。结果为:所测菌株均对酸的耐受性良好。选出的菌株Lb.coryniformis subsp.Torquens1、Lb.bifermentans2、Lb.amylophilus3、Lb.helueticus5对本试验中使用的6株霉菌具有较广的抗霉菌活性,其抗霉菌效果一般;菌株Lb.helueticus4、Lb.helueticus5虽然是从同一类群中选出来的,但其抗霉菌效果明显不同;菌株Lb.delbrueckii subsp.Bulgarcus6其抗霉菌活性不是最广的,但对Fusarium oxysporum f.sp.Cucumerinum JCM9284具有较强抗性。     

Study on the Drug-resistance of Escherichia coli Isolated from Sheep in Inner Mongolia

In order to determine the drug resistance phenotype and prevalence of drug resistance genes in Escherichia coli (E.coli) isolated from sheep in Inner Mongolia, the minimum inhibitory concentrations (MICs) of the isolates to antibiotics commonly used in veterinary clinical were detected by micro-dilution method in vitro. The results showed that the highest resistance rates of the isolates to amoxicillin,cephalothin,sulfamethoxazole and polymyxin were up to 100.0%,respectively.To amoxicillin-clavulanic, tetracycline and ciprofloxacin were 50% to 80%. These isolates were sensitive to cefotaxime, meropenem trihydrate, neomycin, and their resistance rates were all less than 10%. Among the 108 strains of E.coli from sheep, 94.4% of them were resistant to more than 7 antimicrobial agents,15.6% of them were resistant to 13 antimicrobial agents, only one strain was sensitive to all antimicrobial agents. Six kinds of resistance genes among the 108 E.coli isolates were detected by PCR method.The results showed that detection rates of 4 kinds of drug resistance genes including bla_TEM, proP-2, sul-Ⅰ and ampG were all over 50%,the detection rate of resistance gene aph (3')-Ⅰ was up to 40%, only resistance gene aac(3)-Ⅱ detection rate was 5.5%. Thus, the sheep E.coli isolates in Inner Mongolia produced various degrees of resistance to 13 kinds of antibiotics, and their multi-drug resistances were very serious. They carried aph(3')-Ⅰ, sul-Ⅰ, ampG, bla_TEM, proP-2 and aac(3)-Ⅱ resistance genes.     

内蒙古地区羊源大肠杆菌耐药性研究

为确定内蒙古地区羊源大肠杆菌的耐药表型及其耐药基因的流行情况,本研究采用微量稀释法测定了内蒙古地区108株羊源大肠杆菌对13种临床常用抗菌药物的最小抑菌浓度。结果显示,分离菌株对阿莫西林、头孢噻吩、磺胺甲唑、黏菌素的耐药率最高,均达100.0%,对阿莫西林/克拉维酸、四环素、环丙沙星的耐药率在50%~80%之间,对头孢噻肟、美洛培南、新霉素的耐药率均低于10%,较为敏感。108株羊源大肠杆菌中耐7种以上药物的菌株占94.4%,其中15.6%菌株对13种抗菌药物耐药,只有1株菌对所有抗菌药物敏感。采用PCR方法对羊源大肠杆菌分离株所携带的6种相关耐药基因进行检测,结果显示,6种耐药基因中的4种耐药基因bla_TEM、proP-2、sul-Ⅰ、ampG检出率超过50%,耐药基因aph（3'）-Ⅰ携带率达40%,只有耐药基因aac（3）-Ⅱ检出率仅为5.5%。由此可见,内蒙古地区羊源大肠杆菌对13种抗菌药物产生了不同程度的耐药性,且存在严重的多重耐药情况,羊源大肠杆菌分离株携带aph（3'）-Ⅰ、sul-Ⅰ、ampG、bla_TEM、proP-2、aac（3）-Ⅱ耐药基因。