MEF2C基因RNA干扰质粒的构建及干扰效率测定

为了构建猪MEF2C基因的RNA干扰重组质粒,并筛选出最佳干扰效率的序列,本试验采用RNAi技术,设计并合成了3条针对猪MEF2C基因的RNA干扰序列,构建了RNA干扰重组质粒(命名为siRNA-1,siRNA-2,siRNA-3),将其转染到小鼠C2C12细胞,并用实时定量PCR检测细胞中MEF2C基因mRNA的表达,Western blot测定细胞中MEF2C基因蛋白的表达。结果表明:重组质粒经PCR扩增后显示产物大小与预期一致,产物经双酶切及测序鉴定该序列与NCBI提供的序列一致。重组质粒转染C2C12细胞后,MEF2C基因mRNA表达受到不同程度抑制,抑制率分别为(33.67±2.51)%、(21.00±3.60)%、(71.67±4.04)%。Western blot结果表明MEF2C基因蛋白表达受到不同程度抑制,抑制率分别为(47.33±0.05)%、(38.25±0.16)%、(67.27±0.12)%。本试验成功构建猪MEF2C基因干扰重组质粒,最终确定干扰质粒(siRNA-3)具有最佳干扰效果,证实MEF2C基因的干扰质粒能有效抑制目的基因mRNA和蛋白的表达,为探讨该基因与肌肉肉质性状的关系提供理论基础。     

罗维素安定C———一种应用于水产饲料中的维生素C

罗维素安定Ｃ———一种应用于水产饲料中的维生素Ｃ维生素Ｃ是鱼类和虾类所必需的日粮成分之一（ＮＲＣ，１９８３；Ｌｉｇｈｔｎｅｒ等，１９７７）。维生素Ｃ是提高抗病力（Ｌｉｇｈｔｎｅｒ等，１９７７），促生长（Ｌａｔｓｃｈａ，１９９２），高存活率（Ｈｅｉｎｅ...     

稳定性碳同位素比值分析法(SCIRA)最新发展与应用展望

多年来，SCIRA分析被视为鉴定某些食品（比如蜂蜜）掺假的较为科学的方法之一。然而光碳同化途径研究的新进展给此方法的可靠性提出了挑战。新近研究发现，C3植物中有C4途径，C4植物中亦有C3途径，且交叉比例不轻。本文综述了这些方面的新进展，探讨了导致此种情况的有关因素，指出了SCIRA分析在未来面临的种种可能挑战。     

鸡与哺乳动物补体活性与C_3含量的比较

本文研究了不同动物血清补体水平及其补体C3含量的差异。采取成年鸡、猪、羊、牛、豚鼠五种动物的新鲜血清,测定其补体总活性;生化合成C3α链N端21肽,免疫家兔,制备抗鸡C3抗体,用来测定不同动物血清中C3含量。结果表明,抗鸡C3抗体能够与各种哺乳动物血清中的补体C3发生特异性反应,可以用来测定各种动物血清中的C3含量,测定结果为:鸡血清中的C3含量为0.34±0.005 mg/mL、猪1.47±0.008 mg/mL、山羊1.70±0.005mg/mL、牛1.78±0.007 mg/mL、豚鼠4.18±0.008 mg/mL,其中鸡血清中补体总活性和C3含量都远远低于哺乳动物,差异极显著(P<0.01).     

我国南方草地能源草固C潜能初探

对草地能源草种植系统的土壤C流转化和固C减排的相关因素进行综述,并对我国南方能源草种植优势进行探讨,而且提出一些建议,旨在为今后我国南方草山草坡种植能源草进行草地C固持和减少CO2排放等方面提供一些依据.     

禽呼肠孤病毒σC基因的克隆和表达

采用RT-PCR技术设计扩增禽呼肠孤病毒(ARV)S1133毒株的σC基因,将扩增基因克隆至pMD-19T载体上,经PCR、酶切及测序鉴定,克隆的基因片段为ARV σC基因.将该基因重组至pET32a(+)原核表达载体上成功构建了表达裁体pET32a-σC.该重组质粒在大肠杆菌BL21中经1.0 mmol/L IPTG诱导5 h得到最佳表达.表达重组蛋白的相对分子质量为54 000,以包涵体形式存在.经Western-blot分析表明,该重组蛋白能于ARV阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的反应原性.     

过敏毒素C5a和C3a在微小隐孢子虫感染中的表达分析

为明确过敏毒素C5a和C3a在小鼠感染和清除隐孢子虫(Cryptosporidium)感染过程中的作用,本研究以微小隐孢子虫(C.parvum)为研究对象,以BALB/c小鼠为感染模型,采用实时荧光定量PCR分析了C.parvum感染小鼠的小肠相关淋巴组织和脾脏中过敏毒素C3a、C5a及其相应受体(C3aR和C5aR)的mRNA水平。结果显示,在脾脏和小肠中,不仅过敏毒素C5a和C3a在感染后出现了显著上调表达,其受体C5aR和C3aR的表达水平在感染后亦显著上调表达(P<0.05),并呈现动态变化。这些研究结果提示C5a/C5aR和C3a/C3aR信号参与了宿主抗微小隐孢子虫感染的过程。     

硫酸庆大霉素与甲氧苄氨嘧联合用药对鸡大肠杆菌,葡萄球菌的药？…

不少文献报道，甲氧苄氨嘧啶（ＴＭＰ）对部分抗生素药物有一定的增效作用。为进一步了解它的联合用药药敏效果，特对庆大霉素与ＴＭＰ进行了体外抑菌浓度指数（ＦＩＣ）测定试验，结果表明，对鸡大肠杆菌ＦＩＣ为０．７５；对葡萄球菌ＦＩＣ为１．０。抑菌效果有相加作用。     

补体C5研究进展

C5是在炎症反应中起重要作用的一种补体组分.前体蛋白C5在C5转化酶的作用下裂解为C5a和C5b两个片段,补体系统活化产物C5a是一种过敏毒素,是炎症反应的重要介质和趋化因子；C5b则参与形成膜攻击复合物.论文主要介绍了C5a、C5b的结构与生物学功能,C5基因与可变剪接、SNP的研究进展以及与C5相关的几种免疫疾病.     

基于C2C模式的校园二手商品“双线”交易平台研究

本文通过分析大学C2C二手商品市场的前景、市场特点,设计了基于C2C的校园二手商品"双线"交易平台,该平台以线下"校园二手商品寄卖超市"与线上电子商务交易协同运作的方式,将电子商务的便捷性与高效性,及实体商店的真实性和体验性有效地结合起来,很好地解决了高校校园二手商品交易的交易分散、管理混乱、商业模式缺失等诸多问题。     

肌注PHA对犬血清中补体C3、C4的影响

植物凝集素是植物在长期进化过程中形成抵御病虫害和动物消化主要成分之一,在自然界中广泛存在。试验对各犬只肌注PHA,通过测定不同时期血清中补体C3,C4的浓度,以判定PHA是否对补体有影响作用,是提高还是降低,有显著影响的PHA剂量(mL/kg)为多少。试验中,把PHA分成4个剂量组:低剂量组(0.05 mg/kg)、中剂量组(0.10 mg/kg)、高剂量组(0.20 mg/kg)、对照组(相同剂量的生理盐水)肌肉注射犬。试验犬均按正常管理、饲喂,并在注射前和注射后的7 d、14 d对各组犬只进行采血分析,测定其血清中补体的含量,并进行统计学分析,从而可得到实验结果。结果显示,不同剂量的PHA对犬只的补体系统刺激作用不同,其中中剂量组可以极大地提高机体的补体水平,并保持一定时间的高水平,而低剂量组和高剂量组使机体的补体水平有所提高,但在两周后迅速下降,并且高剂量组使机体的补体低于原来的水平。     

猪MEF2C基因慢病毒表达载体构建及C2C12细胞转染条件的优化

MEF2C基因能够控制肌细胞分化过程中的基因转录,特别在骨骼肌、心肌和平滑肌中介导细胞的分化。本研究将猪 MEF2C 基因化学合成后经 Bam HI 和 Asc I 双酶切后克隆到慢病毒表达载体 pLen-ti6.3_MCS_IRES2-EGFP中,获得的重组质粒用限制性内切酶酶切分析和测序鉴定;利用慢病毒阴性对照侵染靶细胞C2C12来确定最佳MOI值以及靶细胞最适抗生素Blasticidin剂量。结果显示猪MEF2C基因成功克隆到慢病毒表达载体中;该重组质粒侵染靶细胞C2C12的最佳MOI值为300;靶细胞抗生素的筛选剂量为4μg/mL,维持剂量为3μg/mL上述试验为建立MEF2C稳定过表达细胞系提供了前期工作基础。     

维生素C的生理作用及其在饲料中的应用

维生素Ｃ又称抗坏血酸 (ＶｉｔａｍｉｎＣ) ,在自然界中以两种形式存在 ,即还原形式Ｌ -抗坏血酸和氧化形式Ｌ -脱氢抗坏血酸 ,大部分维生素Ｃ以还原形式存在 ,这种还原形式的维生素Ｃ在动物体内具有重要的生理作用。到目前 ,国内外许多科学家和学者就维生素Ｃ对畜、禽、鱼类的生理作用及其在饲料中的应用作了大量的研究。笔者对其作一综述。1　维生素Ｃ的生理作用维生素Ｃ作为强还原剂具有很多反应功能。目前了解最清楚的是它参与胶原蛋白的合成和“修复” ,维生素Ｃ是脯氨酸羟基化酶的辅酶 ,有助于脯氨酸羟基化形成羟脯氨酸。羟脯氨酸是胶…     

肌注PHA对犬血清中补体C3、C4的影响

为研究植物凝集素(PHA)对各犬血清中补体C3、C4浓度的影响,试验分成4个组:低剂量组(0.05 mg/kg)、中剂量组(0.10 mg/kg)、高剂量组(0.20 mg/kg)、对照组,对犬进行肌肉注射。在注射前和注射后的7 d、14 d对各组犬进行采血测定其血清中补体的含量,并进行统计分析。结果:中剂量组可显著提高机体的补体水平(P<0.05),并在高水平维持较长时间;低剂量组和高剂量组作用不显著(P>0.05)。     

肌注PHA对猪血清中补体C3、C4的影响

本试验对各猪只肌注PHA,通过测定不同时期血清中补体C3、C4的浓度,来判定PHA是否对补体有影响作用,并测定有显著影响的PHA剂量。试验中,把PHA分成5个剂量组：低剂量组（0.4mg/kg）、中剂量组（0.8mg/kg）、高剂量组（1.2mg/kg）、超高剂量组（1.6 mg/kg）、对照组（0.8mg/kg生理盐水）进行肌肉注射。各试验猪均按正常管理、饲喂,并在注射后的第1、7、14d对各组猪只采血,测定其血清中补体的含量。结果显示,不同剂量的PHA对猪只的补体系统刺激作用不同,其中中剂量组可以提高机体的补体水平,并保持一定时间的高水平,低剂量组的猪只补体水平稍有升高,而高剂量组和超高剂量组则使机体的补体水平有所降低。     

不同剂量的双歧杆菌对断奶仔猪补体C_3、C_4的影响

在30~75日龄的仔猪日粮中添加不同剂量的双歧杆菌后,整个试验期C3水平监测结果显示,C3水平不断提高,且试验Ⅰ组为579.70 mg/L、Ⅱ组为464.70 mg/L、Ⅲ组为453.97 mg/L分别比对照组提高60.48%、28.64%、25.67%,差异显著(P<0.05),其中以试验Ⅰ组最高。而且添加双歧杆菌后,对C4补体水平的维持有一定的作用,且较高剂量的双歧杆菌(试验Ⅲ组)能更高效的提高C4补体的水平。     

关于包膜维生素C中维生素C检测方法的探讨

在当今激烈的市场竞争中,高含量、高稳定的包膜维生素C产品因其具有包膜完整、加工保留率和生物利用率高、使用更经济等优点独树一帜,成为很多大型专业水产、畜禽公司必然的选择。但不容忽视的是,检测方法的相对滞后在一定程度上影响该产品的应用和推广。国标GB7303—87饲料添加剂维生素C(抗坏血酸)中维生素C含量的测定方法,只适用于合成法或发酵法制得的普通晶体维生素C。采用国标法测定高含量、高稳定的包膜维生素C中维生素C含量,一般都会出现低于实际含量的结果,明显不适用。《美国全国饲料协会(NFIA)分析方法概要》中推荐的采用2,6…     

日粮中C3、C4植物含量对牛肉品质和主要化学成分的影响

为探讨C₃和C₄植物在日粮中的含量对牛肉品质和主要化学成分的影响,本试验选用大豆粕、小麦麸、小麦、棉籽饼、苜蓿干草作为C₃植物试验材料,选用黄贮玉米秸、玉米酒精糟、玉米作为C₄植物试验材料,选用36头西门塔尔杂种公牛作为试验动物开展了肥育和屠宰试验。结果表明,日粮中C₄植物含量对肥育牛增重、牛肉的脂肪酸、氨基酸(其中甘氨酸不确定除外)、水分含量以及牛肉的剪切力、蒸煮损失率、滴水损失率、大理石花纹评分和眼肌面积均没有显著的影响。日粮中C₃植物含量对肥育牛增重、牛肉的脂肪酸(其中十七烷酸不确定除外)、氨基酸(其中丝氨酸和苏氨酸不确定除外)、水分含量以及牛肉的剪切力、蒸煮损失率、大理石花纹评分和眼肌面积也均没有显著的影响。