菜豆萎蔫病菌的血清检测鉴定技术研究

本研究对我国一类检疫性有害生物菜豆萎蔫病菌（Ｃｕｒｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｆｌａｃｕｍｆａ－ｃｉｅｎｓｐｖ．ｆｌａｃｕｍｆａｃｉｅｎｓ，Ｃｆ）进行血清检测鉴定技术的研究。试验中制备了抗Ｃｆ的血清，应用抗００２０，０２３７，０２３８菌株的抗血清及其ＦＩＴＣ标记的抗体进行间接和直接免疫荧光染色试验（ＩＦ／ＩＦ）。通过对１９个Ｃｆ菌株和其它６个属１４个种的植物病原细菌２０个菌株的测定，结果发现约５０％的Ｃｆ菌株为强阳性反应，且与Ｃｆ种下致病变种也有强阳性交叉反应。由于单个血清检测易产生假阴性反应，故将三种血清１∶１∶１混合后进行ＩＦ试验，结果表明与所有的Ｃｆ菌株反应，且与Ｒｆａ和Ｃｍｔ有弱阳性反应。对含１０４～１０７ｃｆｕ／ｍｌ细菌及３０ｇ种子含１粒人工接种种子的种子抽提液均能检测到典型的阳性细胞，血清检测的灵敏度为４．５×１０４ｃｆｕ／ｍｌ，可用于种子的检测。本研究还进行了初步的免疫荧光菌落染色（ＩＦＣ）试验     

四种药用植物炭疽病的病原鉴定

本文以ＶｏｎＡｒｘ和Ｓｕｔｔｏｎ提出的炭疽菌分类系统的依据，对玉竹，朱砂莲，当归，升麻４种药用植物上的炭疽病病原进行了分类鉴定，鉴定出玉竹炭疽病菌Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｃａｐｓｉｃｉ（Ｓｙｄ）Ｂｕｔｌ＆Ｂｉｂｓｙ，朱砂链炭疽病菌Ｃ．ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｄｅｓ（Ｐｅｎｚ．）Ｓａｃｃ．和当归炭疽病毒Ｃ．ａｃｕｔａｔｕｍＳｉｍｍｏｎｄｏ３个合格的种。     

豆科植物萎蔫病及其检测

豆科植物萎蔫病最初是由Ｆ．Ｈｅｄｇｅｓ（１９２２）报道的。当时发现美国南达科他州食用干白豆上有萎蔫病的发生,属维管束病害,同时伴随失绿、矮化等现象和产量的下降。其病原物最初定名为萎蔫细菌（Ｂａｃ－ｔｅｒｉｕｍｆｌａｃｕｍｆａｃｉｅｎｓ）。到１９４２年...     

枣缩果病病原子实体的诱导和鉴定

１９９２～１９９６年作者对枣缩果病病原研究认为该病由Ｃｏｎｉｏｔｈｙｒｉｕｍｓｐ．（Ｃ．ｓｐ）、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａａｌｔｅｒ－ｎａｔａｆ．ｓｐ．ｔｅｎｕｉｓ和一种半知菌亚门有隔有色丝状菌等多病原引起。经室内外对上述病原菌的子实体诱导，以及越冬后自然病果上子实体的发现，病原菌Ｃ．ｓｐ．经再鉴定为Ｃ．ｏｌｉｖａｃｅｕｍＢｏｎ，另一病原菌半知菌亚门有隔有色丝状菌订名为群生小穴壳菌ＤｏｔｈｉｏｒｅｌａｇｒｅｇａｒｉａＳａｃｃ。至此明确引起枣缩果病的病原为Ｃ．ｏｌｉｖａｃｅｕｍ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａａｌｔｅｒｎａｔａｆ．ｓｐ．ｔｅｎｕｉｓ、Ｄｏｔｈｉｏｒｅｌａｇｒｅｇａｒｉａ和一种细菌（待鉴定）     

银杏炭疽病菌的鉴定和生物学特性的研究

对桂北地区银杏炭疽病菌进行分离鉴定,结果表明是胶孢炭疽菌「Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ（Ｐｅｎｚ．）Ｓａｃｃ。」。该胶孢炭疽菌在１０～３５℃范围内,菌落能生长、分生孢子亦可萌发,适温范围均为２０～３０℃;分生孢子萌发需要高湿的条件,在ｒｈ＝１００％＋水滴的条件下分生孢子萌发良好,病菌在ｐＨ４．５～９．３的范围内均能生长,中性偏碱条件更有利。结构还表明,该炭疽菌在银杏     

胡卢巴灰斑病及其种子带菌的初步检验

经鉴定胡卢巴灰斑病病原菌为尾孢属真菌ＣｅｒｃｏｓｐｏｒａｔｒａｖｅｒｓｉａｎａＳａｃｃ．，该病及病原真菌在国内尚未见报道。文中简要描述了病害症状及病原菌的形态特征。用吸水纸法对发病田播种用的种子及当年病田所产种子进行样品检验，带菌率分别为１５％和４８％。初步认为种子带菌是病害发生的重要初侵染源     

茶皂素对7种植物病原真菌的生物活性初测

本研究用含毒介质培养法测定了茶皂素对稻纹枯病菌Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｏｌａｎｉ、白绢菌Ｓｃｌｅｒｏｔｉｕｍｒｏｌｆｓｉ、芒果炭疽病菌Ｃｏｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ、柱帚霉菌Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃｌａｄｉｕｍｓｐ．、拟盘多毛孢菌Ｐｅｓｔａｌｏｔｉｏｐｓｉｓｓｐ．、瓜枯萎病菌Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｏｌａｎｉ、尖孢镰刀菌Ｆ．ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ等７种植物病原菌的生物活性。结果表明,茶皂素在１００ｍｇ／Ｌ和２００ｍｇ／Ｌ浓度下对瓜枯萎病菌具有很强的抑制作用,３ｄ抑制率分别达到８９．７１％和９５．８８％。对白绢菌和稻纹枯病菌也有一定抑制作用。     

玉米霜霉病对我国农业生产的潜在威胁及检疫对策

在玉米霜霉菌（Ｐｅｒｏｎｏｓｃｌｅｒｏｓｐｏｒａｓｐｐ．）中，Ｐ．ｓｏｒｇｈｉ可随高粱种子（尤其是带颖壳的），Ｐ．ｐｈｉｌｉｐｐｉｎｅｎｓｉｓ与Ｐ．ｓａｃｃｈａｒｉ可随甘蔗插条远距离传播。初步分析我国各地发病可能性为：黄淮平原零星发生，长江以南湿热地区发生可能性大，热带亚热带地区适于发病。应有针对性实施检疫，防止国内病菌蔓延及国外病菌传入，注意选育抗病品种。     

浙江省芦笋茎枯病病原菌生物学特性的研究

浙江各地发生的芦笋茎枯病，其病原菌为Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓａｓｐａｒａｇｉ（Ｓａｃｃ．）Ｂｕｂｋ，但存在培养性状类型不同的菌株。经测定菌落扩展最适温度，绝大多数菌株为２５℃、少数菌株为３０℃；在ＰＤＡ培养基，菌株间的菌落扩展快慢与早期分生孢子器形成数量呈负相关趋势。菌落扩展慢的ＰＡ一１菌株，在３０℃培养条件下的ｐＨ５、ｐＨ６和ｏＨ８的ＰＤＡ培养基，易发生扇形角变。该病菌在偏酸性ＰＤＡ培养基、ＯＡ培养基和ＰＤＡＡｓｐ（２０％）培养基，有促进该病菌培养早期的分生孢子器形成。     

从日本进境大豆种子中检出大豆疫病菌

从日本进境大豆种子中检出大豆疫病菌高秀兰种焱李文利陈洪俊（北京动植物检疫局１０００２９）１９９７年１月７日，在国际邮件交换局截留的１袋大豆种子中（４个品种，７１０ｇ），检查出了大豆疫病菌Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｍｅｇａｐｅｒｍａ（Ｄｒｅｃｈｓ．）ｆ．...     

进境澳大利亚绿豆中菜豆细菌性萎蔫病菌的检测

利用NA培养基从澳大利亚进境绿豆样品中分离到一株疑似菜豆细菌性萎蔫病菌(Curtobac-terium flaccumfaciens pv.flaccumfaciens,Cff)的细菌分离物2000-1,对该分离物进行革兰染色试验、PCR检测、多位点序列分析和致病性测试.分离物在NA平板上菌落浅黄色,圆形,隆起,黏性,...     

落葵上发现短小杆菌属(Curtobacterium)一个新的致病变种

 1994年在江苏省南京及镇江地区新发现了落葵细菌性叶斑病,从病斑所分离的10个细菌菌株经柯赫氏法则验证,均确系该病的病原菌。采用形态观察、表型特征和生理生化特性测定、数值分析、血清学反应、细胞化学成分分析和DNAG+C mol%测定进行了鉴定,并与植物病原棒形细菌15个标准菌株进行了比较。该病原菌为革兰氏阳性细菌,不规则短杆状,有一根鞭毛,亚极生或侧生,结合其生理生化特性、细胞化学成分和DNAG+C mol%测定结果,认为应属于短小杆菌属(Curtobacterium)的萎蔫短小杆菌(Cur.flaccumfaciens),数值分析也支持这一结论。此外,据血清学反应结果及其对短小杆菌属的其它植物寄主的致病情况,认为该病原菌应是萎蔫短小杆菌种下一个新的致病变种,定名为Curtobacterium flaccumfaciens pv.basellae pv.nov.(萎蔫短小杆菌落葵致病变种)。     

Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens

Specific scope

This standard describes a diagnostic protocol for Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens. ¹ 1 Use of names of chemicals or equipment in these EPPO Standards implies no approval of them to the exclusion of others that may also be suitable.

Specific approval and amendment

Approved in 2011‐09.

     

引起糖甜菜细菌性叶斑病的萎蔫短小杆菌新致病变种

 1995年在内蒙古临河市新发现了糖甜菜细菌性叶斑病,从病斑所分离的10个细菌菌株经柯赫氏法则验证,均确系该病的病原菌。采用形态观察、表型特征和生理生化特性测定、数值分析、血清学反应、细胞化学成分分析、DNA G+C mol%和DNA-DNA同源性测定进行了鉴定,并与植物病原棒形细菌15个标准菌株进行了比较。该病原菌为革兰氏阳性细菌,不规则短杆状,有一根鞭毛、亚极生或侧生,结合其生理生化特性、细胞化学成分和DNA G+C mol%和DNA-DNA同源性测定结果,认为应属于短小杆菌属(Curtobacterium)的萎蔫短小杆菌(Cur. flaccumfaciens),数值分析也支持这一结论。此外,据血清学反应结果及其对短小杆菌属的其它植物寄主的致病情况,认为该病原菌应是萎蔫短小杆菌种下的一个新的致病变种,定名为Curtobacterium flaccumfaciens pv. beticola pv. nov. Chen et al.,2000(萎蔫短小杆菌糖甜菜致病变种)。     

Survival of Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens in weeds

Weeds are important alternative hosts of pathogens, responsible for the survival and spread of phytopathogenic bacteria. Our study evaluated the potential of weeds as hosts of Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens (Cff), causal agent of bacterial wilt, one of the main diseases of common beans. Cff survival was evaluated in the phyllosphere and in the rhizosphere of 21 weeds, in four experiments under field conditions, during the years 2018 and 2019. The aerial part of the plant was inoculated by spraying bacterial suspension (10⁷ cfu/ml) of Cff, while the soil of the growing pots was infested with the same suspension. Cff survival was evaluated every 7 days, for 70 days. The identity of the bacterium was confirmed by PCR with the specific primers CffFOR2 and CffREV4, from strains recovered from all samples. Principal component analysis (PCA) showed that high temperatures and rainfall reduced Cff survival in the phyllosphere, while high temperatures reduced the survival of the bacterium in the rhizosphere. Our results demonstrated that Amaranthus viridis (family Amaranthaceae), Conyza bonariensis, Emilia fosbergii, Galinsoga parviflora, Gnaphalium purpureum (Asteraceae), Raphanus sativus, Lepidium virginicum (Brassicaceae), Commelina benghalensis (Commelinaceae), Ipomoea triloba (Convolvulaceae), Cyperus rotundus (Cyperaceae), Senna obtusifolia (Fabaceae), Digitaria insularis (Poaceae), Nicandra physalodes, and Solanum americanum (Solanaceae) are potential hosts for Cff. Their eradication in common bean fields is recommended, especially in fields with a history of bacterial wilt occurrence.     

利用BIOLOG鉴定系统快速鉴定菜豆萎蔫病菌的研究

 本研究利用美国Biolog公司生产的MicroStation^TM V3.5系统对我国一类危险性病害菜豆萎蔫病菌及其相关菌进行了快速鉴定研究。研究结果表明,来自不同国家和寄主的24株菜豆萎蔫病菌及其相关致病变种,23株准确鉴定至种水平,其中13株鉴定至致病变种水平,种水平的鉴定准确率为95.8%,另外1株至属水平。同时2株苜蓿萎蔫病菌和2株番茄溃疡病菌均鉴定至致病变种水平。经聚类分析研究,结果支持了对格兰氏阳性植病细菌在属、种水平的分类。本研究是首次使用该系统对格兰氏阳性植病细菌进行鉴定研究,试验证明Biolog鉴定系统用于快速鉴定菜豆萎蔫病菌是一个很有用的工具,且由于其标准化程度高、快速准确,符合我国口岸植物检疫的要求。     

内蒙古糖甜菜叶斑病菌的多样性分析

采用ERIC-PCR,BOX-PCR和ITS的分析方法,对分离自我国内蒙古自治区5个市的21个糖甜菜叶斑病菌菌株进行多样性分析,并与其他12种病原细菌进行比较。ERIC-PCR揭示,在相似性80%上所有参试菌株分为26簇,而BOX-PCR只得到20个簇,暗示这两种短重复序列在基因组中的分布不同;将两者电泳图谱结合,得到介于上述两者间的结果,分为23个簇;在相似率达87%时,ITS分析将21个糖甜菜叶斑病菌菌株分成7簇。3种分析方法相互验证,均说明内蒙古糖甜菜叶斑病菌基因组存在显著多样性。ERIC和BOX聚类证明了糖甜菜叶斑病菌与短小杆菌属(Curtobacterium)亲缘关系较近,与其他属细菌亲缘关系较远。研究证明,ERIC和BOX扩增基因组DNA指纹比ITS图谱具有更强的多样性。     

Characterisation of Curtobacterium flaccumfaciens Pathovars by AFLP, rep-PCR and Pulsed-Field Gel Electrophoresis

The bacterial species Curtobacterium flaccumfaciens encompasses a group of closely related phytopathogens subdivided into pathovars that exhibit differences in host range. To date, reliable differentiation of pathovars and identification of unknown isolates to the pathovar-level can only be achieved on the basis of host testing. In this study, representative strains from C. flaccumfaciens pathovars and related species were examined using a range of genomic fingerprinting techniques to ascertain their application as additional or potential alternatives to host testing. Amplified fragment length polymorphism (AFLP) and repetitive sequence polymerase chain reaction (rep-PCR) analyses enabled the categorisation of some, but not all strains, in their respective pathovars. In contrast, all strains were correctly assigned to pathovars using HindIII and XbaI macro-restriction digests in conjunction with pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). Fingerprints generated by PFGE not only supported the current pathovar rankings within C. flaccumfaciens, they also identified subgroups within pathovars flaccumfaciens, oortii and poinsettiae.