某鸡场死亡鸡胚中细菌的分离鉴定和药敏试验

细菌是导致鸡胚死亡的重要原因之一。据各种研究表明,正常种蛋的孵化率通常为85%~90%,即在孵化过程中由于各种因素的影响大约会有10%~15%鸡胚出现发育异常的现象。鸡胚死亡率过高会给养殖业造成巨大的经济损失,其中对鸡胚孵化影响比较大且比较常见的是由于细菌感染造成的鸡胚死亡。本试验为了搞清楚在孵化过程中导致鸡胚死亡的细菌种类,分析细菌对鸡胚孵化的影响,为降低鸡胚死亡率提供适当的理论依据,为孵化厂的科学养殖提供合理的建议。方法:本试验对2021年3月11日送检的80份死亡鸡胚样品进行细菌的分离与鉴定。对送检样品进行血平板分离、生化试验、 16S rDNA测序鉴定和药敏试验。结果显示,从送检鸡胚尿囊液中分离细菌于血平板上培养24h后,共分离到7种细菌,将这些细菌进行纯培养后用16S rDNA方法进行鉴定,经鉴定分别为大肠埃希菌、鸭疫里默氏杆菌、腐生葡萄球菌、葡萄球菌、松鼠葡萄球菌、棒状杆菌、气球菌。药敏试验结果显示,本次分离所得的大肠埃希菌、鸭疫里默氏杆菌、腐生葡萄球菌、棒状杆菌和气球菌对氟苯尼考和头孢噻肟等药物均敏感;葡萄球菌对呋喃妥因、多粘菌素B敏感;松鼠葡萄球菌对本次药敏试验所用药物均不敏感。     

雏鸡绿脓杆菌病病原的分离与鉴定

对蚌埠某鸡场一批1日龄雏鸡因MD疫苗接种引发的绿脓杆菌病进行了调查,通过采集病料,对其病原进行分离鉴定,并观察其病变。结果表明,这次雏鸡发病主要是由于MD疫苗接种过程中消毒不严所致,而不是因为使用冻干MD疫苗而造成的雏鸡大批死亡。提出该病的治疗措施,并对鸡场后续处理措施进行了探讨。     

鸡源绿脓杆菌的分离及主要生物学特性研究

从自然发生绿脓杆菌败血症感染的死亡鸡及眼部感染的病鸡分离到几乎纯一的同种细菌经对所做纯培养的１７株分离菌的主要生物学特性鉴定，结果表明为绿脓杆菌，并通过人工感染试验证明了所分离鉴定的绿脓杆菌的病原学意义。     

鸽源绿脓杆菌的分离鉴定及致病性试验

从疑似赛鸽绿脓杆菌感染病料中分离绿脓杆菌并进行相关致病性试验和药敏试验,为今后赛鸽绿脓杆菌防治提供参考。采用常规方法从肝脏、肺脏等组织中无菌钓取细菌于普通琼脂、麦康凯、鲜血琼脂平板培养基中,随后进行染色镜检、生化试验鉴定;对分离菌株进行致病性研究,将10只未经免疫的30～40日龄的雏鸽随机分为对照组和试验组进行感染,10只BALB/c小鼠同样随机分组进行感染,观察并记录感染动物临床症状及死亡率;通过药敏试验检测该菌对庆大霉素、恩诺沙星、复方新诺明等10余种药的敏感性。结果表明,分离得到的菌株根据培养及菌落特征、生化试验确定为绿脓杆菌;人工感染小鼠发病率为100%,死亡率为60%;试验组鸽子发病率为60%,无死亡;该菌对庆大霉素、恩诺沙星、妥布霉素和环丙沙星高度敏感。     

两株禽绿脓杆菌的分离鉴定与致病性研究

[目的]从临汾、平遥等地养殖场采集发病鸡病料,对禽绿脓杆菌进行分离鉴定,及耐药分析和致病性研究。[方法]通过分离培养,形态特征观察,生化试验,16S rDNA基因PCR扩增与测序分析,药敏试验及动物致病性试验,以鉴定禽绿脓杆菌。[结果]经鉴定共分离2株禽绿脓杆菌,分离菌株G1株和G2株接种雏鸡在24 h内死亡率可达到100%,将分离株的16S rDNA基因序列与NCBI中绿脓杆菌序列进行Blast比对,分离菌株与绿脓杆菌不同菌株的同源性高达99%以上,分离菌株对环丙沙星、恩诺沙星、亚胺培南、哌拉西林和替卡西林等抗生素敏感。[结论]本研究通过对山西地区禽绿脓杆菌分离株的鉴定,旨在为进一步研究其致病机制、临床用药和治疗提供理论依据。     

鸡胚破骨细胞的分离培养与鉴定

从18日龄鸡胚长骨（股骨和胫骨）中机械分离破骨细胞于盖玻片和骨片上培养,以建立鸡胚破骨细胞体外培养方法。结合倒置相差显微镜、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色、甲苯胺蓝染色及透射电镜（TEM）和扫描电镜（SEM）对其形态和功能进行观察鉴定。结果表明,直接分离的细胞具有典型的破骨细胞的形态特点：属多核大细胞,TRAP染色阳性,能在骨片表面形成吸收陷窝。结论：鸡胚长骨机械分离法可获得一定数量并具有骨吸收活性的破骨细胞。     

鸡胚破骨细胞的分离培养与鉴定

从18日龄鸡胚长骨(股骨和胫骨)中机械分离破骨细胞于盖玻片和骨片上培养,以建立鸡胚破骨细胞体外培养方法.结合倒置相差显微镜、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、甲苯胺蓝染色及透射电镜(TEM)和扫描电镜(sEM)对其形态和功能进行观察鉴定.结果表明,直接分离的细胞具有典型的破骨细胞的形态特点:属多核大细胞,TRAP染色阳性,能在骨片表面形成吸收陷窝.结论:鸡胚长骨机械分离法可获得一定数量并具有骨吸收活性的破骨细胞.     

鸡胚原代肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离培养与鉴定

[目的]本试验旨在建立一套稳定的鸡肺泡Ⅱ型上皮细胞分离、纯化和培养技术,为深入研究鸡舍空气污染物对鸡肺泡功能影响提供体外研究模型.[方法]采用Ⅰ型胶原酶对16日龄鸡胚的肺组织进行消化,经过差速离心和差速贴壁法分离细胞,采用鸡免疫球蛋白G(IgG)免疫吸附法纯化细胞,再利用免疫荧光检测和碱性磷酸酶进行细胞鉴定.[结果]培...     

副鸡嗜血杆菌的分离鉴定

副鸡嗜血杆菌(Haemophilus paragallinarum,HPG)是鸡传染性鼻炎的病原菌.近年来,北京、陕西、四川等地证明了该病的发生.为了了解该病在山东省的流行状况,从山东德州地区5个鸡场的20只疑似鸡传染性鼻炎鸡体内共分离到6株细菌,经细菌分离培养、生化试验、鸡胚接种试验和16s rDNA 基因序列分析等方法鉴定为副鸡嗜血杆菌.并经玻片凝集试验、Dot-ELISA、血凝试验分型研究,证实6株分离菌株均为副猪嗜血杆菌A型.从而为以后鸡传染性鼻炎的免疫治疗提供理论依据.     

藏鸡和彭县黄鸡鸡胚、弱雏中沙门氏菌的分离鉴定与耐药性分析

【目的】为了解藏鸡及彭县黄鸡中沙门氏菌的耐药性情况和差异,对样品中的沙门氏菌进行分离鉴定与药敏试验。【方法】运用CHR Magar显色培养基与微量生化管进行分离鉴定,采用Kirby-Bauer纸片扩散法测定其耐药性。【结果】沙门氏菌分离率为16.7%:藏鸡鸡胚(20%),彭县黄鸡弱雏(13.3%)。耐药率:对青霉素、吉他霉素和林可霉素的耐药性最高(100%);对新霉素和链霉素耐药性严重(70%以上);对诺氟沙星的耐药率为0。【结论】沙门氏菌耐药及多重耐药现象普遍,总体呈现藏鸡的耐药率高于彭县黄鸡或与其持平的趋势;藏鸡分离株的敏感率也高于彭县黄鸡分离株。     

Isolation,Identification, and Herbicidal Activity of Metabolites Produced by Pseudomonas aeruginosa CB-4

CB-4, a bacterial strain with highly effective herbicidal activity, was isolated from infected corn leaves. Through morphology, physiological and biochemical tests, and 16 S ribosomal DNA gene sequencing methods, CB-4 was identified as Pseudomonas aeruginosa. We conducted activity-evaluation experiments in the laboratory to assess the herbicidal potential of metabolites produced by strain CB-4. Crude extracts of strain CB-4 have high inhibition activity on Digitaria sanguinalis. In general, the root and shoot growth parameters of D. sanguinalis were significantly reduced by metabolites of strain CB-4. The IC50 of the culture filtrate extracts for the radicula and coleoptile of D. sanguinalis were 0.299 and 0.210 mg mL-1, respectively. Component 2 of the herbicidal activity of the crude toxin from strain CB-4 was successfully purified for the first time by using high-speed counter current chromatography with a two-phase solvent system composed of petroleum ether-ethyl acetate-methanol-water（4：5：4：5, v/v） and high-performance liquid chromatography. We concluded that the metabolites of strain CB-4 have the potential to be developed as a microbe-based herbicide.     

雏鸡沙门氏菌病的病原分离与鉴定

邯郸地区某县养殖场于2008年2月引进一批海兰白雏鸡共6500只,4日龄时部分雏鸡开始发病,6日龄时开始死亡,7d内共死亡1248只,死亡率达19.2%。剖检不同日龄死雏21只,活病雏13只,死雏呈现严重败血症病变,活雏心肌、肝、肺、肌胃等脏器出现黄白色或大小不等的灰白色坏死灶。取其卵黄、肝、脾、心血等病料进行病原分离培养,从获得的153个菌落中挑选可疑菌落27个,经细菌学鉴定,确认17株为鸡白痢沙门氏菌,抗原式为1,9,12∶-∶-,10株为德尔卑沙门氏菌(S.derby),抗原式为1,4,12∶f,g∶-。     

鸡传染性喉气管炎病毒的分离鉴定

[目的]证实江都市存在鸡传染性喉气管炎。[方法]以江都市5只发病鸡的喉、气管粘膜及其分泌物为病料,采用鸡胚传代的方法从中分离出1株病毒（ILTV—JD07）,对分离毒株进行了理化特性检验、毒价测定、中和试验、琼脂免疫扩散试验、PCR扩增及电泳检测等。[结果]鸡胚接种病料后48h胚体活性减弱,3—8d内死亡6枚,解剖死胚可见其绒毛尿囊膜（CAM）增厚,取病变CAM传至第4代接种鸡胚,鸡胚集中于接种后3—5d内死亡;第4代分离毒的毒价基本稳定在10^5.77EID50／0．2ml,分离毒毒株可被鸡传染性喉气管炎（ILT）标准阳性血清中和,中和价为1：54;参考株ILT／13与分离株ILTV-JD07均可扩增出1条183bp的DNA条带。[结论]江都市存在鸡传染性喉气管炎。     

波杂山羊绿脓杆菌和肠球菌的分离与鉴定

江苏省溧阳某羊场2007年6～7月间发生了一起疫情,部分波杂山羊尤其羔羊出现连续发病和死亡.采取病死羊病料做病原分离、纯化,对纯化的分离菌开展培养特性、菌体形态特性、生化特性鉴定及对ICR小鼠致病性实验、药物敏感性试验等工作.根据以上试验结果,分离菌鉴定为波杂山羊的绿脓杆菌和肠球菌.     

第28期鸡胚原始生殖细胞的分离培养

[目的]进一步优化生殖细胞（PGCs）细胞体外培养条件。[方法]从第28期（5．5d）鸡胚生殖嵴分离PGCs,将PGCs与性腺基质细胞共培养进行原代培养,比较2种培养温度和3种培养浓度对PGCs原代培养的影响,以及2种饲养层细胞对PGCs传代培养的影响,并通过倒置显微镜下形态学观察、碱性磷酸酶（AKP）和过碘酸希夫反应（PAS）染色方法鉴定PGCs。[结果]培养浓度为2．5×10^5个／ml和培养温度为37℃时PGCs增殖较多,不易分化,存活能力较强,以第2代鸡胚成纤维细胞作饲养层时传代培养效果较好,获得了PGCs增殖的未分化集落,为后期的细胞标记及移植研究提供了较多数量和较高活力的PGCs。[结论]获得了PGCs原代与传代培养较好的培芥体系,为禽类EG细胞系的建立和转基因研究奠定了基础。     

一株AA肉仔鸡大肠杆菌的分离和鉴定

从发病AA肉仔鸡体内分离到一株病原细菌，经微生物学鉴定表明为078血清型的鸡大肠杆菌。     

鸡源性链球菌的分离鉴定与药敏试验

对从病、死鸡中分离纯化出的致病细菌（编号为JLF2）进行了形态观察、生化鉴定和药敏试验。初步鉴定认为该细菌为鸡链球菌,该病菌对先锋霉素、青霉素、庆大霉素、四环素高度敏感,对环丙沙星、菌必治、罗红霉素、壮观霉素、氧氟沙星、氨苄青霉素中度敏感。     

鸡沙门氏菌和组织滴虫混合感染的分离鉴定

大庆市林甸县某蛋鸡场成鸡发生疫情,养殖业户将发病鸡送检,综合流行病学、临床症状、剖检变化、病原分离鉴定及动物试验等诊断为以前未见报道的鸡白痢沙门氏菌和组织滴虫混合感染。药敏实验结果显示阿米卡星具有较好的敏感性。     

鸡传染性法氏囊病病毒的分离与鉴定

从安徽省合肥郊县疑似传染性法氏囊病的雏鸡体内,分离到4株病毒。经血清学、人工感染、鸡胚接种、分子生物学试验鉴定,结果表明,分离物为传染性法氏囊病病毒(IBDV)。人工感染易感鸡试验表明,4株中有2株具有超强毒株的致病特点。将其接种36日龄鸡后第2天精神沉郁,拉白色或绿色稀粪,发病率为100%。第3~4天出现死亡高峰,死亡率达80%。剖检可见全身性出血素质,法氏囊呈“紫葡萄”样外观。接种鸡胚后72~96 h引起鸡胚全部死亡。另外2株接种易感鸡后,发病率和死亡率都较低,临床症状不典型,出现亚临床传染性法氏囊病,剖检病理变化不明显,表明此2株毒力较弱。