PTEN 基因在犬乳腺肿瘤组织中的表达及临床意义

有关酪氨酸磷酸酶基因（Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosometen,PTEN）在乳腺肿瘤中的检测在人医早有报道。为了研究PTEN基因在犬乳腺肿瘤组织中的表达情况,笔者运用实时荧光PCR定量检测了38例不同的犬乳腺肿瘤组织（包括15例良性乳腺肿瘤和23例恶性乳腺肿瘤）、4例正常犬乳腺组织。结果发现：PTEN基因在犬恶性乳腺肿瘤组织中表达量明显低于其在良性乳腺肿瘤和正常乳腺组织中的表达量,两者差异极显著（P〈0.001）;PTEN在良性乳腺肿瘤组织中的表达与正常犬乳腺组织相比,差异不显著（P〉0.05）;发生了淋巴结转移的乳腺癌PTEN基因的表达量与未发生转移的乳腺癌组织的表达量间差异亦不显著（P〉0.05）,且PTEN的表达量与肿瘤组织的大小和发病动物年龄无关。结论：PTEN蛋白表达异常可能与乳腺肿瘤发生、发展相关,可考虑作为判断犬乳腺肿瘤生物学行为和预测的指标。     

NLRP3炎症小体及其下游炎症因子在犬乳腺肿瘤组织中的表达

本研究旨在明确NLRP3炎症小体及下游炎症因子在犬乳腺肿瘤中的表达及临床意义.采用RT-qPCR方法检测45例犬乳腺肿瘤组织(15例良性肿瘤和30例恶性肿瘤)以及16例肿瘤旁正常乳腺组织中的NLRP3、Caspase-1、IL-1β和IL-18 mRNA的表达水平,并分析NLRP3与肿瘤临床病理学特征的关系(肿瘤大小、...     

犬乳腺肿瘤中MUC1的表达及临床意义

为了检测MUC1在乳腺肿瘤的侵袭、转移及病理分级中的作用,本研究通过real-time PCR检测了47例犬乳腺肿瘤组织(20例良性,27例恶性)和3例健康犬乳腺组织中MUC1基因的转录情况,通过IHC检测MUC1在犬乳腺组织中的表达情况,并分析二者与肿瘤恶性程度分级的关系。结果发现:MUC1基因和MUC1在犬乳腺肿瘤组织中高表达,且在不同的恶性分级中差异显著(P0.05)。研究显示MUC1基因和MUC1可作为犬乳腺肿瘤诊断和恶性程度评估的重要指标之一。     

犬p27蛋白在犬乳腺肿瘤中的表达分析

为分析犬p27蛋白在犬乳腺肿瘤组织中的表达情况,本研究构建了原核表达重组质粒pET-p27,进行重组蛋白的表达,并将纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔,制备了抗犬p27蛋白多克隆抗体。将制备的犬p27抗体对临床84例犬乳腺肿瘤组织中的犬p27蛋白表达情况进行了检测。结果显示,制备的抗体效价达1∶12 800以上;western blot检测显示,该多克隆抗体能够与重组蛋白发生特异性反应;免疫组织化学试验表明,犬p27蛋白在犬恶性乳腺肿瘤组织中表达率低于犬良性乳腺肿瘤组织,提示犬p27的表达水平可能与犬乳腺肿瘤的恶性程度相关,本实验为进一步研究犬p27蛋白的生物学功能奠定了基础。     

IGFBP-2 PTEN蛋白在犬乳腺肿瘤中的表达

为了探讨IGFBP-2、PTEN蛋白表达与犬乳腺肿瘤生物学行为关系。采用免疫组织化学PV法对临床收集的71例乳腺肿瘤,4例非典型性增生和6例健康犬乳腺组织中IGFBP-2和PTEN蛋白的表达水平进行检测,并分析它们与临床病理特征之间的关系。结果 IGFBP-2和PTEN蛋白染色主要定位于胞浆,少量可见于胞核和胞膜。IGFBP-2和PTEN蛋白在犬正常、增生乳腺组织中和良性乳腺肿瘤中的表达差异不显著(P0.05),但与恶性乳腺肿瘤相比二者表达差异极显著(P0.01)。IGFBP-2和PTEN蛋白表达与患犬年龄、肿瘤大小和预后无关。表明联合检测IGFBP-2、PTEN表达可作为犬乳腺癌生物学行为判断的重要指标。     

检测p53基因诊断犬乳腺恶性肿瘤的初步研究

研究犬乳腺恶性肿瘤p53基因在体内的表达,探讨其与犬乳腺肿瘤恶性程度的相关性。根据GenBank中犬p53基因序列以及文献报道的高度保守区域,设计1对引物,同时以GAPDH基因序列作为内参,将临床采集的犬乳腺肿瘤组织进行p53基因PCR检测,分析p53基因的表达量变化趋势。结果表明,良性肿瘤组织p53基因的表达量极小;恶性肿瘤组织中的表达量随着其恶化程度明显增高。由此可推断,检测p53基因的表达量可作为诊断犬乳腺肿瘤、判断肿瘤恶化程度及预后的一个重要指标。     

实时荧光定量PCR对犬乳腺肿瘤组织TNFR1基因的定量检测

乳腺肿瘤是母犬中最为常见的肿瘤,运用实时荧光定量PCR检测了37例犬乳腺肿瘤病例和37份正常乳腺组织.结果表明:犬乳腺肿瘤组织中肿瘤坏死因子受体(TNFR1)的表达量显著低于正常对照组织(P<0.05).该试验结果说明,犬乳腺肿瘤的发生很可能与TNFR1表达降低有关,为深人研究肿瘤形成的分子机理提供了重要参考.     

犬乳腺肿瘤组织病理学观察及腱糖蛋白C表达的检测

为了探讨腱糖蛋白C(TNC)表达与犬乳腺肿瘤生物学关系,对23例犬乳腺肿瘤临床病例进行病理学观察及分类,然后采用免疫组化SABC方法检测TNC蛋白在23例犬乳腺肿瘤和2例犬正常乳腺组织中的表达情况。结果显示:23例病例中,良性肿瘤有7例,占30.43%;恶性肿瘤有13例,占56.52%;增生病变有3例,占13.05%。在良性肿瘤中良性混合瘤最多,为3例,其余2例为导管内乳头状腺瘤,1例复杂腺瘤及1例纤维腺瘤。恶性肿瘤中,5例未分化癌,3例癌肉瘤,2例筛状癌,2例固体癌,1例纤维肉瘤,1例混合瘤引起的癌。TNC蛋白主要表达于细胞外基质。犬恶性乳腺肿瘤中,TNC蛋白阳性表达率为46.15%(6/13);良性乳腺肿瘤中,其阳性表达率为42.85%(3/7);乳腺增生病变和正常乳腺组织中,未见其表达。研究结果表明,TNC蛋白可以为犬乳腺肿瘤的鉴别诊断提供参考。     

实时荧光定量RT-PCR检测犬乳腺肿瘤血管内皮生长因子(VEGF)基因方法的建立及初步应用

为了准确地分析血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）在犬乳腺肿瘤形成过程中的作用,试验设计了针对犬VEGF基因的特异性引物,提取乳腺肿瘤组织RNA并扩增出目的片段,将PCR产物克隆到pGEM-T Easy载体,经质粒PCR扩增、酶切和测序鉴定重组质粒,构建标准曲线等,成功建立了乳腺肿瘤VEGF基因实时荧光定量PCR检测方法。运用实时荧光定量PCR检测了40例不同的犬乳腺肿瘤病例、2例正常乳腺组织。结果发现：在犬恶性乳腺肿瘤组织中,VEGF基因表达量明显高于良性乳腺肿瘤和正常乳腺组织（P〈0.001）;在伴有淋巴结转移的犬乳腺癌组织中,VEGF基因表达量明显高于没有发现转移的乳腺癌组织（P〈0.01）,但VEGF基因的表达量与肿瘤的大小和发病动物年龄无关（P〉0.05）。VEGF基因在犬乳腺癌组织中的表达量远高于其在正常乳腺和良性乳腺肿瘤组织中的表达,且与淋巴结是否发生转移相关。因此,VEGF可作为犬乳腺癌转移、复发的预测指标之一。     

Ki-67在犬乳腺肿瘤的表达与分析

本试验通过免疫组化的方法,检测了从中国农业大学教学动物医院收集到的6个正常乳腺组织和135例乳腺肿瘤组织(良性30例,恶性105例)Ki-67的表达率。结果犬乳腺肿瘤组织中的Ki-67蛋白表达率明显高于正常乳腺组织(P0.05);犬恶性肿瘤组织中的Ki-67蛋白表达率明显高于良性肿瘤(P0.05)。表明Ki-67在恶性肿瘤里高表达,可以作为犬乳腺肿瘤疾病诊断的指标。