微透析探针对杨树嫩茎细胞损伤的显微观察

利用微透析技术研究植物汁液成分时,所遇到的首要问题是其透析液来自质外体还是共质体。以冬季水培的吴屯杨和荷兰杨幼苗为材料,采用石蜡切片法,制作微透析探针插入杨树嫩茎后,对嫩茎受损部分横切面组织切片进行显微观察并加以探讨。结果表明,微透析探针的粗度约为杨树细胞直径20倍,探针对周围细胞造成一定程度的破坏,因此,探针插入杨树嫩茎后开始一段时间内收集的透析液将受到破损细胞液的污染,随着微透析时间的推移,逐渐地趋近于质外体汁液。对微透析技术可以获得植物质外体汁液从细胞显微结构变化方面予以解释,为微透析技术在植物质外体研究中的应用奠定细胞学基础。     

植物微透析取样技术研究进展

简要介绍了微透析的原理及其在动物、人体上的应用,结合实验室利用微透析技术对植物体进行取样研究,介绍了微透析技术获取植物质外体的方法,论述了微透析技术在植物活体取样中的可行性并对探针的回收率进行探讨,进而为植物生理研究提供更为简单、实用、精细的新方法。     

不同耐氮肥烤烟品种质外体NH4+浓度差异和有关生理指标分析

 【目的】研究不同耐氮肥烤烟品种叶片质外体NH4+浓度差异与耐氮肥性关系,为筛选对氮素适应范围广的烤烟品种提供理论依据。【方法】以耐氮肥的烟草品种中烟90、中耐氮肥的K326和对氮肥敏感的NC89为试验材料,用盆栽法研究它们之间的质外体NH4+浓度差异。【结果】生育后期3个烤烟品种叶片质外体的NH4+浓度均呈现逐步升高的趋势,中烟90的质外体NH4+浓度最大,NC89最小.谷氨酰胺合成酶 (GS)活性和总氮含量下降明显,质外体pH值急剧减小,谷氨酸脱氢酶(NADH-GDH)活性缓慢上升,质外体pH始终低于叶片pH;质外体NH4+浓度与GS活性和总氮都呈显著负相关,与GDH活性呈显著正相关。【结论】 烤烟品种耐肥性与其生育后期质外体NH4+浓度,GS活性和GDH活性有关,耐肥性强的烤烟品种其质外体NH4+浓度高,GS活性低,GDH活性高,NH4+挥发多。     

膳食锌对饲料引起的大黄鱼铜中毒症的保护作用

试验检测大黄鱼幼鱼对饲料中铜和锌的吸收。4组试验膳食(分别为-Cu-Zn、-Cu+Zn、+Cu-Zn和+Cu+Zn)配制包括两种铜浓度(4和24 mg·kg~(-1))和两种锌浓度(0和120 mg·kg~(-1)),每组3个重复,试验共10周。高铜饲料组(+Cu-Zn和+Cu+Zn)大黄鱼的终体重、体增重较低,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、6-磷酸葡糖酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶和脂肪合成酶的活性均低于低铜饲料组(-Cu-Zn和-Cu+Zn),脂蛋白脂肪酶(LPL)活性也低于低铜饲料组,但高铜饲料组大黄鱼肝铜、肌铜和硫代巴比妥酸反应物(TBARS)含量较高。相比之下,高锌组(+Cu+Zn和-Cu+Zn)大黄鱼GPX活性高于低锌组(+Cu-Zn和-Cu-Zn),但高锌组TBARS含量和LPL活性低于低锌组。试验结果表明,铜摄入量高能减缓大黄鱼生长,抑制抗氧化酶和脂肪合成酶的活性。饲料中高浓度锌可缓解高铜对大黄鱼的毒性。     

2种杨树嫩茎质外体内源激素对盐胁迫的响应

以春季盆栽的‘吴屯杨’与‘荷兰杨’为试验材料,采用微透析技术,结合高效液相色谱测定不同浓度NaCl(0、200、300mmol/L)胁迫下2种杨树嫩茎质外体的内源激素变化.结果表明:盐胁迫下2种杨树嫩茎质外体内脱落酸(ABA)含量升高,其他激素含量降低;高浓度盐胁迫下脱落酸(ABA)的积累量大于中浓度盐胁迫;同等盐胁迫条件下,‘荷兰杨’需要积累较‘吴屯杨’更多的脱落酸(ABA)来抵御胁迫环境;‘吴屯杨’的抗盐平衡系数小于‘荷兰杨’;2种杨树的细胞分裂素(CTK)与吲哚乙酸(IAA),细胞分裂素(CTK)与赤霉素(GA),吲哚乙酸(IAA)与赤霉素(GA)显著相关;‘吴屯杨’的耐盐性强于‘荷兰杨’.     

不同烤烟品种烟叶衰老期氨气挥发及其与氮素代谢的相关性

【目的】研究不同氮效率烤烟品种叶片衰老过程中氨气挥发量的差异,揭示烟叶品种间氮素转运规律,以期为耐氮肥品种选育提供依据。【方法】采用氨气收集装置测定烟叶的氨气挥发量,同时测定了叶片NH4+浓度,总氮和可溶性蛋白含量,氮代谢相关酶活性和质外体相关指标。【结果】烟叶氨气挥发量呈先上升后下降的趋势,在叶龄60 d达到最大,中烟90、K326和NC89分别达到（16.39±1.08）、（9.92±1.04）和（4.56±0.63）μg•m-2•h-1,分别是叶龄40 d氨气挥发量的3.87、2.41和2.56倍,品种间差异显著。氨气挥发量与谷氨酰胺合成酶（GS）活性呈极显著负相关,与谷氨酸脱氢酶（GDH）活性、质外体NH4+浓度和pH、氨气补偿点呈极显著正相关,与可溶性蛋白含量和硝酸还原酶（NR）活性显著负相关,与叶片NH4+浓度呈二次曲线关系,且相关性极显著,并受总氮降解的间接调控。【结论】不同氮效率品种的氮素再同化和再转移能力存在差异,与烟叶氮素代谢特性有关。烟叶衰老期氮素利用效率低的品种,氮素吸收和再同化能力弱,转移量和氨气挥发量大。烟叶通过质外体挥发氨气,增加了NH4+的转移,减少了氨害的积累,是植物氮素代谢调节的重要方式,可以作为一个评价品种氮效率的指标。     

盐胁迫下沙冬青和绿豆根冠细胞膜电位的原初响应研究

该文以沙冬青、绿豆为材料,利用微电极技术实时记录了活体沙冬青和绿豆根冠细胞膜电位对不同盐分的原初响应,分析了质膜转运蛋白抑制剂（Vanadate、TEA）对植物根冠细胞膜电位的影响。结果表明:50、100、200 mmol/L NaCl、KCl和LiCl均会引起植物细胞膜电位去极化。对于同一阳离子而言,去极化程度随处理液中离子浓度的增加而加强;对于同一浓度、不同阳离子而言,由于水合离子半径大小不一（K+＜Na+＜Li+）,在根自由空间的迁移速率不同（K+＞Na+＞Li+）,因此引起膜电位的去极化程度也存在差异（K+＞Na+＞Li+）;同一阳离子且同一浓度下对于不同植物来说,绿豆根冠细胞膜电位去极化程度大于沙冬青,即单位时间绿豆根对Na+的通透性大于沙冬青。质膜H+ ATPase和K+通道参与了沙冬青和绿豆在盐胁迫时的原初响应,K+通道可能参与了Na+的跨膜转运。      

荧光指示剂检测甜菜胞内钙离子的条件优化

胞内钙离子信号做为第二信使参与植物抗病信号转导途径。以甜菜叶片为试验材料,用孵育方法将Ca2+荧光探针Fluo-3/AM载入甜菜细胞中,并结合激光共聚焦扫描显微技术,研究甜菜叶片胞质游离Ca2+的测定方法。结果表明,采用20μmol·L-1的钙离子荧光指示剂Fluo-3/AM装载顺次进行低温4℃孵育120 min,25℃孵育120 min,可获得较为理想的甜菜叶片胞质游离Ca2+染色结果。该方法可用于检测BNYVV侵染甜菜叶片胞质游离钙离子的变化,为研究甜菜BNYVV入侵甜菜后胞内钙信号作用提供理论研究基础。     

糖肾1号方对糖尿病肾病腹膜透析患者VEGF活性及炎症因子的影响

目的 探讨糖肾1号方对糖尿病肾病腹膜透析患者血管内皮生长因子（VEGF）及炎症因子活性的影响。方法 腹膜透析2个月以上的糖尿病肾病患者50例,随机分成治疗组26例和对照组24例,两组均采用常规腹膜液腹膜透析,治疗组加服糖肾1号方。采用放射免疫分析法检测用药前及用药8周后患者血清BUN、Cr及CRP水平;ELASA方法检测治疗前后血清IL-1、IL-6、TNF-α水平及血清和透析液VEGF活性的变化。结果 治疗组用药后血清BUN、Cr及CRP水平较对照组和用药前均显著降低（P<0.05或P<0.01）,血清IL-1、IL-6及TNF-α水平较对照组和用药前均显著降低（P<0.05或P<0.01）;治疗组用药后血清和透析液VEGF活性较对照组及用药前均显著降低（P<0.01）。结论 糖肾1号方能降低糖尿病肾病腹膜透析患者血清及透析液中VEGF活性及炎症因子浓度,可改善微炎症状态。     

基于叶片质外体相关成分和酶活性响应的龙葵耐Cd机理研究

为探讨龙葵(Solanum nigrum L.)耐镉(Cd)机理,采用基质培养法,研究了50 μmol·L^-1 Cd(CdCl₂·2.5H₂O)处理120 d对其生长和叶片细胞壁果胶、木质素含量、多聚半乳糖醛酸酶(PG)、纤维素酶(Cx)、NADH-过氧化物酶(NADH-POD)、愈创木酚过氧化物酶(GPOD)和松柏醇过氧化物酶(CAPX)活性以及质外体汁液中过氧化氢(H₂O₂)含量和GPOD、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。结果表明,与对照相比,Cd处理显著抑制了龙葵地上和地下部的伸长生长、降低了根的干物质积累(P<0.05),但茎的分枝增多,叶面积、叶绿素含量、净光合速率和胞间CO₂浓度无显著变化(P>0.05);细胞壁结合酶NADH-POD、GPOD和CAPX活性以及果胶含量显著增高(P<0.05),而PG活性显著下降(P<0.05),Cx活性和木质素含量无显著变化(P>0.05);质外体汁液中H₂O₂含量显著增加(P<0.05),GPOD和SOD同工酶谱及活性无显著变化(P>0.05);CAT同工酶谱带增宽,APX同工酶谱带数增加,二者活性均显著升高(P<0.05)。说明50 μmol·L^-1 Cd较长时间处理龙葵植株,其地上部分生长仍处于良好状态,表现出对Cd毒害的耐性,这与Cd处理后叶片细胞壁果胶含量和结合酶GPOD以及质外体汁液中APX、CAT活性升高有关,推测这是龙葵耐Cd的一种机理。     

副溶血弧菌对南美白对虾生理生化指标的影响

在自然条件下从患红体病的养殖南美白对虾肝脏内分离出病原菌——副溶血弧菌，将该菌通过肌肉注射的方式，对南美白对虾做感染实验，以探讨副溶血弧菌对南美白对虾生理生化指标的影响。注射弧菌后南美白对虾死亡率与时间、浓度呈正相关，与半致死剂量呈负相关；虾体肌肉、肝脏组织的超氧化物歧化酶（SOD）、溶菌酶（LSZ）酶活性随弧菌浓度的增加呈下降的趋势，而过氧化物酶（POD）酶活性呈上升趋势，这可能是应激反应；酯酶同工酶（EST）酶带表现出缺失，苹果酸脱氢酶同工酶（MDH）具有明显的组织特异性，并且两种酶在肌肉组织中表达最强。副溶菌弧菌感染后破坏了虾体的免疫系统，导致免疫机能的损坏，防病、抗病能力下降，进一步导致虾体患病，甚至死亡。     

副溶血弧菌对南美白对虾生理生化指标的影响

在自然条件下从患红体病的养殖南美白对虾肝脏内分离出病原菌——副溶血弧菌，将该菌通过肌肉注射的方式，对南美白对虾做感染实验，以探讨副溶血弧菌对南美白对虾生理生化指标的影响。注射弧菌后南美白对虾死亡率与时间、浓度呈正相关，与半致死剂量呈负相关；虾体肌肉、肝脏组织的超氧化物歧化酶（SOD）、溶菌酶（LSZ）酶活性随弧菌浓度的增加呈下降的趋势，而过氧化物酶（POD）酶活性呈上升趋势，这可能是应激反应；酯酶同工酶（EST）酶带表现出缺失，苹果酸脱氢酶同工酶（MDH）具有明显的组织特异性，并且两种酶在肌肉组织中表达最强。副溶菌弧菌感染后破坏了虾体的免疫系统，导致免疫机能的损坏，防病、抗病能力下降，进一步导致虾体患病，甚至死亡。     

双须叶须鱼5种组织乳酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶的 组织特异性分析

为了解双须叶须鱼的生化遗传特性,采用聚丙烯胺凝胶垂直板电泳对双须叶须鱼5种组织(心脏、眼睛、肌肉、肝脏和肾脏)的乳酸脱氢酶(LDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)进行了分析。结果表明,双须叶须鱼LDH同工酶和MDH同工酶具有组织特异性和个体差异性,双须叶须鱼的MDH分为上清液型(s-MDH)和线粒体型(m-MDH)。     

苦丁茶等10味中草药抑菌作用研究

本文研究苦丁茶等10味中草药提取物的抑菌作用。本实验以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为指示菌,测定苦丁茶等10味中草药乙醇提取物的抑菌作用,并通过呼吸代谢抑制实验对其中抑菌效果最好的苦丁茶提取物进行了抑菌机制初探。10味中草药提取物中苦丁茶的抑菌效果最好。苦丁茶提取物对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度（MIC）是6．25mg／mL,对大肠杆菌的MIC是12．5mg／mL。呼吸代谢抑制实验结果显示,当苦丁茶提取物的浓度为6．25mg／mL时,可抑制两种指示菌的苹果酸脱氢酶活性,加药组的金黄色葡萄球菌苹果酸脱氢酶（MDH）比活性与对照组相比降低了39．88％;加药组的大肠杆菌MDH比活性与对照组相比降低了32．02％。说明其抑菌机制是通过抑制细菌的呼吸代谢过程等方式实现的。     

Amyloid-beta dynamics correlate with neurological status in the injured human brain

The amyloid-beta peptide (Abeta) plays a central pathophysiological role in Alzheimer's disease, but little is known about the concentration and dynamics of this secreted peptide in the extracellular space of the human brain. We used intracerebral microdialysis to obtain serial brain interstitial fluid (ISF) samples in 18 patients who were undergoing invasive intracranial monitoring after acute brain injury. We found a strong positive correlation between changes in brain ISF Abeta concentrations and neurological status, with Abeta concentrations increasing as neurological status improved and falling when neurological status declined. Brain ISF Abeta concentrations were also lower when other cerebral physiological and metabolic abnormalities reflected depressed neuronal function. Such dynamics fit well with the hypothesis that neuronal activity regulates extracellular Abeta concentration.     

荞麦同工酶多态分析

从已收集到的200份样品中,选出具有代表性的甜荞和苦荞各10份,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对其中的4种酶进行了分析。结果表明,在供试的20个样品中,甜荞超氧化物歧化酶（SOD）出现3条强活性谱带,苦荞仅有1条强活性谱带。酯酶（EST）在不同样品中表现出较大差异,存在快电泳变异型、慢电泳变异型和缺失电泳型3种类型。苹果酸脱氧酶（MDH）和谷氨酸脱氧酶（GDH）种内、种间存在较小差异     

设施油桃果实发育过程中糖酸代谢的研究

以设施内超红株油桃果实为试材,测定果实中可溶性糖、有机酸含量及相关代谢酶活性。结果表明,果实发育早期糖分积累以还原糖即葡萄糖和果糖为主;果实发育后期,还原糖含量下降,蔗糖含量迅速升高,蔗糖合成酶（SS）和蔗糖磷酸合成酶（SPS）活性呈上升趋势;有机酸与苹果酸含量均呈先升高后降低趋势,柠檬酸含量呈逐渐上升趋势;果实发育后期苹果酸酶（ME）活性逐渐升高,苹果酸舍量呈下降趋势;苹果酸脱氢酶（MDH）活性呈先升高后降低趋势,与苹果酸含量变化趋势相似。说明SS和SPS与蔗糖积累有关,MDH与苹果酸合成有关,ME与苹果酸降解有关。     

柑桔果实糖酸比及线粒体乌头酸酶活性的变化

测定了尤力克柠檬(高酸Citrus limon Burm．F)、冰糖橙(低酸C．sinensis Osbeck)、锦橙(中酸C．sinensis Osbeck)、奉节脐橙(C.sinensis Osbeck)72—1及其低酸和晚熟芽变在果实发育过程中还原糖含量、糖酸比以及线粒体乌头酸酶(Aconitase,EC4．2．1．3)和苹果酸脱氢酶(Malate debydrogenase,MDH,EC1．1．1．37)活性变化。结果表明：各类型柑橘果实发育过程中糖的含量,随着果实的生长而增加,奉节脐橙的低酸芽变还原糖含量和糖酸比的增长速度最快,与其说它是低酸还不如说是早熟更为合理。各类型柑橘果实线粒体乌头酸酶活性变化一致随果实发育降低,表明果实发育后期有机酸降解与线粒体乌头酸酶活性的降低无关,而较低的细胞质乌头酸酶活性有利于酸的积累;柠檬MDH活性一直较低,但其他柑桔MDH活性变化与果实柠檬酸含量差异没有发现有明显的关系。     

4种鳗鲡同工酶的比较研究

以日本鳗鲡（Anguilla japonica）、澳洲鳗鲡（A．australis）、欧洲鳗鲡（A．anguilla）和美洲鳗鲡（A．rostrata）成体为试验材料,应用垂直聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,对4种鳗鲡的眼球、肌肉、肝脏、心脏和。肾脏5种组织的8种同工酶（酯酶EST、乳酸脱氢酶LDH、苹果酸脱氢酶MDH、葡萄糖脱氢酶GCDH、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶G6PD、醇脱氢酶ADH、超氧化物歧化酶SOD和谷氨酸脱氢酶GDH）进行比较研究。结果表明：GDH在5种组织中均没有表达,7种同工酶（EST、LDH、MDH、GCDH、G6PD、ADH、SOD）在4种鳗鲡均表现出很强的组织特异性。4种鳗鲡的同工酶谱表型非常相似,在同一组织中同工酶的存在位点、表达形态、活性等方面是类似的,但也表现出一定的种间差异性。应用酶谱差异指数D对4种鳗鲡进行聚类分析,结果提示日本鳗鲡和澳洲鳗鲡有较近的亲缘关系、而欧洲鳗鲡和美洲鳗鲡有较近的亲缘关系,这与4种鳗鲡的形态特征和生物学特征相吻合。