铜对体外仔猪软骨细胞增殖和自分泌IGF—I、IGFBP的影响

体外分离、培养仔猪关节软骨细胞，然后在细胞培养液中分别添加0、7．8、15．6、31．2、62．5μmol/L铜。结果表明，软骨细胞在4种浓度的铜中可存活并增殖，而且能增加胰岛素样生长因子（IGF－I）、胰岛素样生长因子结合蛋白（IGFBP3）的分泌量。但随铜浓度的增加，其存活率、增殖率、^3H-TdR掺入率及IGF－I、IGFBP3的分泌量有明显的差异。且以培养液中添加31．2μmol/L铜对软骨细胞的增殖作用最强，增殖率、^3H-TdR掺入数、IGF－I、IGFBP3的分泌量显著高于对照组9P＜0．01）。表明31．2μmol/L铜浓度是促进体外软骨细胞增殖和自分泌IGF－I、IGFBP3的最适浓度。     

微量元素铜对软骨细胞胰岛素样生长因子mRNA基因表达的影响

分离培养仔猪关节软骨细胞，从中提取总RNA，采用RT-PCR法扩增出关节软骨细胞中胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF—Ⅰ)的cDNA，与pMD18-T载体相连，转化JM109大肠埃希氏菌，提取质粒，经鉴定，所扩增的片段为目的片段。在此基础上培养仔猪关节软骨细胞，并在培养液中添加不同水平的铜，分别在第0、12、24、48h收集软骨细胞，提取总RNA，采用RT—PCR法扩增出IGF—Ⅰ的cDNA，以β-actin为内参，用凝胶分析系统对扩增出的cDNA进行扫描分析，计算IGF—Ⅰ mRNA基因表达的相对水平。结果，在细胞培养液中添加不同水平的铜能促进软骨细胞中IGF—Ⅰ mRNA基因表达，其中以铜浓度31．2μmol／L的效果最好。表明铜对软骨细胞的增殖作用是通过促进IGF—Ⅰ mRNA的表达来实现的。     

铜对体外仔猪软骨细胞增殖和细胞骨架的影响

体外分离、培养仔猪关节软骨细胞,在细胞培养液中分别添加铜0、7.8、15.6、31.2、62.5μmol/L。结果表明,软骨细胞在4种铜浓度中可存活并增殖,但随铜浓度的增加,其存活率、增殖率、3H-TdR掺入率有明显的差异,且能破坏软骨细胞骨架。培养液中添加铜31.2μmol/L,对软骨细胞的增殖作用最强,增殖率、3H-TdR掺入数显著高于对照组(P<0.01),软骨细胞形态及骨架均正常。表明31.2μmol/L铜浓度是促进体外软骨细胞增殖的最适浓度。     

铜对仔猪关节软骨细胞TGF-βmRNA基因表达的影响

分离、培养仔猪关节软骨细胞，从中提取总RNA，用RT-PCR法扩增出TGF-β的cDNA，与pMD18-T载体相连，转化JM109大肠杆菌，提取质粒，鉴定所扩增片断为目的片断后，培养仔猪关节软骨细胞，并在培养液中添加不同水平的铜，分别在0、12、24、48h培养结束时，收集细胞，提取细胞总RNA。采用RT-PCR法扩增出TGF-β的cDNA，以β-actin为内参，用凝胶分析系统对扩增出的cDNA进行扫描分析，以TGF-β的cDNA的光密度值与β-actin的cDNA的光密度值之比作为TGF-β mRNA基因表达的相对水平。结果表明，细胞培养液中添加不同水平的铜能促进软骨细胞中TGF-β mRNA基因表达，其中以31．2μmol／L效果最佳。     

铜对体外仔猪软骨细胞增殖和自分泌IGF-Ⅰ、IGFBP3的影响

体外分离、培养仔猪关节软骨细胞,然后在细胞培养液中分别添加0、7.8、15.6、31.2、62.5μmol/L铜.结果表明,软骨细胞在4种浓度的铜中可存活并增殖,而且能增加胰岛素样生长因子(IGF-Ⅰ)、胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP3)的分泌量.但随铜浓度的增加,其存活率、增殖率、3H-TdR掺入率及IGF-Ⅰ、IGFBP3的分泌量有明显的差异.且以培养液中添加31.2μmol/L铜对软骨细胞的增殖作用最强,增殖率、3H-TdR掺入数、IGF-Ⅰ、IGFBP3的分泌量显著高于对照组(P＜0.01).表明31.2μmol/L铜浓度是促进体外软骨细胞增殖和自分泌IGF-Ⅰ、IGFBP3的最适浓度.     

日粮中的铜和脂肪对断奶仔猪的作用

曾有报道，在幼龄仔猪日粮中添加钢能提高蛋白质的消化率和氮沉积率。也有实验室试验报道，适当的铜离子浓度对胃蛋白酶有激活作用。而有关催化了的胃蛋白酶对血红蛋白的水解作用的一些研究则表明，仔猪如果在大约26日龄断奶。则在断奶后的头14d乃至21d内，它不能有效利用基础日粮中的脂肪，但是添加250×10-5的铜能提高这些日粮的脂肪利用率和脂肪消化率。一些研究表明，幼龄仔猪的消化酶含量会随着年龄、饲粮以及断奶效果而变化；而在日粮中添加铜则能增加肝、肾、脑以及血浆中的铜，而同时使肝、肾、脑、血浆和血红蛋白中的铁含量减少。…     

铜对体外仔猪软骨细胞增殖和自分泌IGF-、IGFBP_3的影响

体外分离、培养仔猪关节软骨细胞 ,然后在细胞培养液中分别添加 0、7.8、15 .6、31.2、6 2 .5 μm ol/ L 铜。结果表明 ,软骨细胞在 4种浓度的铜中可存活并增殖 ,而且能增加胰岛素样生长因子 (IGF- )、胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP3 )的分泌量。但随铜浓度的增加 ,其存活率、增殖率、3 H- Td R掺入率及 IGF- 、IGFBP3 的分泌量有明显的差异。且以培养液中添加 31.2μmol/ L铜对软骨细胞的增殖作用最强 ,增殖率、3 H- Td R掺入数、IGF- 、IGFBP3 的分泌量显著高于对照组 (P <0 .0 1)。表明 31.2 μmol/ L 铜浓度是促进体外软骨细胞增殖和自分泌 IGF- 、IGFBP3 的最适浓度。     

铜对软骨细胞碱性磷酸酶活性影响的实验观察

碱性磷酸酶(AKP)是新骨形成过程中一个非常重要的酶，是骨形成必需的催化剂，是参与骨与软骨等钙化组织代谢和再生的一种功能性标志酶，对骨的矿化，骨的形成均有重要意义。AKP活性是成骨样细胞分化成熟的重要标志之一，其活性高低可反映出相应组织、细胞的钙化能力和向成骨方向转化的趋势。本研究拟通过在软骨细胞培养液中添加不同水平的铜，观测不同水平的铜对软骨细胞碱性磷酸酶活性的影响，为探明铜促进软骨细胞生长提供实验依据。     

高剂量铜对断乳仔猪血液激素和生长因子水平的影响

将60头断乳“军牧1号”白猪分成6组，分别饲以添加0，100，150，200，250和300mg/kg铜的基础日粮，进行80d的饲养试验，以探讨日粮铜水平对仔猪血液激素及生长因子的影响。结果表明，基础日粮中添加100－300mg/kg铜能促进仔猪的生长，能显著促进循环血液中生长激素（GH），胰岛素（INS），游离甲状腺素（FT4），游离三碘甲腺原氨酸（FT3），胰岛素样生长因子（IGF－I）及其结合蛋白（IGFBP3）的分泌量，其中以饲料中添加250mg/kg铜水平，于试验的第20－40d最明显（P＜0．01）。     

饲粮铁、铜水平对早期断奶仔猪生长发育及组织铁、铜含量的影响

本试验就饲粮铁、铜水平对早期断奶仔猪(30日龄)生长发育及组织中铁、铜含量的影响进行了研究。结果指出:在含铁70mg/kg及含铜10mg/kg的基础饲料中以硫酸亚铁形式添加35及70mg/kg铁和以硫酸铜形式添加125及200mg/kg铜时,对仔猪生长性能、组织器官的发育以及品骨、肾脏中的铁含量没有影响,但饲粮铁水平的增加可导致肝脏和脾脏铁含量的增加。在饲粮中添加35mg/kg及70mg/kg的铁时,可使肝脏铁含量增加14.6％和55.0％(P<0.01),使脾脏铁含量增加15.1％(P<0.05)及22.9％(P<0.01)。在仔猪饲粮中添加200mg/kg铜,可使仔猪日增重和采食量分别提高9.7％和16.2％,使肾脏和肝脏铜含量分别增加104.6％(P<0.01)和434.0％(P<0.01),使肝脏铁含量降低19.4％(P<0.05)。添加125mg/kg铜,使肾脏和肝脏铜增加27.9％和93.4％(P<0.01),使肝脏铁降低9.4％。     

日粮中添加CuSO4和动物脂肪对早期断奶仔猪的增重效果

仔猪易受早期断奶应激的影响，致使早期离乳猪采食量减少，每日摄取的营养尤其是能量严重不足，导致断奶仔猪生长发育受阻。为克服应激对早期断奶仔猪的影响，近年来各地通过饲喂试验证实，在日粮中添加脂肪，既能提高能量，又能增强饲料的适口性，添加微量元素铜，不仅能提高消化酶的活性和抑菌作用，而且对缓解应激，提高某些消化酶的浓度和脂肪的代谢都有明显效果。目前，在日粮中单独添加微量元素铜或脂肪的资料已有不少这方面的报到道，但对早期断奶仔猪日粮中同时添加微量元素铜和脂肪的资料则至今尚未见到，我们为了进一步研究在早期…     

基于斜率比法评定断奶仔猪对不同铜源的相对生物学利用率

本试验旨在研究不同铜源（硫酸铜、碱式氯化铜和柠檬酸铜）和铜添加水平（20和30 mg/kg）对断奶仔猪生长性能、血清铜含量与含铜酶活性以及组织铜含量的影响,探讨断奶仔猪对不同铜源的相对生物学利用率。试验采用3×2双因子随机区组设计,选取平均体重为（8.98±0.48） kg的杜×长×大三元杂交断奶仔猪112头,随机分为7组,每组4个重复,每个重复4头猪。对照组饲喂玉米-豆粕型基础饲粮（铜含量为7.80 mg/kg）,各试验组分别在基础饲粮中添加20或30 mg/kg硫酸铜、碱式氯化铜或柠檬酸铜（均以铜含量计）。试验预试期3 d,正试期28 d。结果表明：1）试验组与对照组断奶仔猪平均日增重、平均日采食量和料重比均无显著差异（P>0.05）。2）饲粮铜源和铜添加水平对断奶仔猪血清铜含量具有显著影响（P<0.05）,但对血清铜蓝蛋白和铜锌超氧化物歧化酶活性均无显著影响（P>0.05）。3）饲粮铜源和铜添加水平对断奶仔猪肝脏铜含量具有显著影响（P<0.05）,但对心脏、肾脏、胰脏和跖骨铜含量均无显著影响（P>0.05）。4）根据多元线性回归斜率比法计算,以血清铜...     

实验性皮肤角化不全症仔猪被毛及各组织中锌、铜含量测定

以钙：锌＝３３０：１与５１６：１的日粮饲喂健康断乳仔猪１２０天，复制了仔猪皮肤角化不全症。患病仔猪被毛中锌、铜含量呈逐渐下降趋势，锌含量极显著低于正常组（Ｐ＜０．０１），而铜含量则与正常组差异不显著（Ｐ＞０．０５）。患病仔猪肝、十二指肠、肠系脱淋巴结中锌含量极显著低于正常组（Ｐ＜０．０１），心、肾、脑中锌含量著低于正常组（Ｐ＜０．０５），脾、肺、左侧最后肋骨、背最长肌、胰中锌含量与正常组差异不显著（Ｐ＞０．０５），肝、背最长肌中铜含量极显著高于正常组（Ｐ＜０．０１），脾中铜含量显著高于正常用（ｐ＜０．０５），脑、心中铜含量极显著低于正常组（Ｐ＜０．０１），肾中铜含量显著低于正常用（Ｐ＜０．０５），其余组织中铜含量与正常组差异不显著（Ｐ＞０．０５）。本试验测定了正常仔猪和用化不全症仔猪各组织中锌、铜的含量，报告了角化不全症仔猪心、肺、肠系膜淋巴结中锌、钢含量及被毛中锌、钢含量的动态变化。     

不同铜源对Caco-2细胞内铜-ATP酶二价金属离子转运体1和金属硫蛋白含量的影响

利用Caco-2细胞模型研究不同浓度硫酸铜,微米氧化铜,纳米氧化铜(铜水平2、4、8、16 mg/L)对细胞铜-ATP酶、二价金属离子转运体1(Divalent Metal Transporter 1,DMT1)、金属硫蛋白(metallothionein,MT)含量的影响。结果显示,培养液中添加铜离子能提高Caco-2细胞铜-ATP酶、MT含量,低浓度铜离子能提高细胞DMT1含量,高浓度铜离子降低细胞DMT1含量。纳米氧化铜对几种铜转运蛋白的作用与硫酸铜类似,但纳米氧化铜对铜-ATP酶、MT、DMT1含量的影响更加明显。     

不同化学形式的铜对仔猪生长、消化和胴体组成的影响

１８０头“杜长大”仔猪（２１．３４±０．４４ｋｇ）,按试验要求分为６组,分别饲喂添加５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、２４０ｍｇ／ｋｇ无机铜（硫酸铜）、５０ｍｇ／ｋｇ酪蛋白铜、５０ｍｇ／ｋｇ奶蛋白铜和５０ｍｇ／ｋｇ大豆蛋白铜的饲粮,试验为期３０天。结果表明：①饲粮中添加不同化学形式的铜均提高了日增重,降低了料重比,其中以５０ｍｇ／ｋｇ酪蛋白铜组最佳,日增重比对照组（５ｍｇ／ｋｇ硫酸铜）提高了１３．６％（Ｐ＜０．０５）,料重比下降了９．５％,其次为２４０ｍｇ／ｋｇ无机铜组,日增重提高了１２．５％（Ｐ＜０．０５）,料重比下降了８．３％（Ｐ＜０．０５）。②添加不同化学形式铜均提高了日粮粗脂肪消化率,其中以２４０ｍｇ／ｋｇ无机铜组最为显著,较对照组提高了３１．０％（Ｐ＜０．０５）,其次为５０ｍｇ／ｋｇ酪蛋白铜组,提高了２９．１％（Ｐ＜０．０５）,但是添加无机铜（硫酸铜）和蛋白铜对干物质和粗蛋白表观消化率均无明显影响。③添加铜对仔猪胴体组成无明显影响,但２４０ｍｇ／ｋｇ无机铜组和酪蛋白铜组肌肉失水率略有升高,色泽呈下降趋势。④２４０ｍｇ／ｋｇ无机铜组和５０ｍｇ／ｋｇ酪蛋白铜组的脑铜含量显著升高,分别较对照组提高了３３．１     

蛋氨酸铜对仔猪的生长性能及血清生化指标的影响

本试验采用体质量20 kg左右的军牧1号断奶仔猪45头,随机分成A、B、C3组,每组15头,A组为对照组,饲喂基础日粮,B、C分别在基础日粮的基础上添加125和250 mg/kg的蛋氨酸铜,试验期为45 d.在试验第15、30、45天的晨饲前空腹采血,分离血清,测定相关酶活性和微量元素含量;试验结束,称重,测定各组的生长性能.结果显示:(1)日粮中添加铜能显著促进猪的生长,其中125 mg/kg蛋氨酸锕的促生长效应最为显著(P<0.05);(2)蛋氨酸铜能使血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性,血浆总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)升高;降低血清尿素氮(BUN)和血糖(Glu)的水平;(3)日粮添加铜可提高血清铜含量(P<0.05),降低血清锌的含量(P<0.05),对血清铁含量影响(P>0.05)较小.本试验结果表明,在营养全面的日粮中,添加中等剂量的蛋氨酸铜即可达到最佳的促生长作用.     

早期断奶仔猪蛋白质及矿物质的营养需要

早期断奶仔猪消化道酶系发育尚未健全，胃内pH值升高，易发腹泻，低蛋白氨基酸平衡日粮可显著降低仔猪断奶后腹泻和提高仔猪的生长速度，第一限制性氨基酸，赖氨酸在日粮中的含量以1．65－1．80％为最佳，日粮中的蛋白质原料以动物性蛋白质为主，添加饲用酸化剂，脂肪，酶制剂和抑菌促生长剂都能提高全猪对蛋白质的消化率和减少腹泻发生，日粮中钙水平控制在0．58％－0．80％之，高铜日粮能提高猪的日增重和饲料效率，高锌和含砷制剂日粮能促进仔猪食欲，减少腹泻发生。     

不同形态铜源对仔猪生长性能、血液生化指标和粪铜排出量的影响

目的：研究不同形态铜源对仔猪生长性能、血液生化指标和粪铜排出量的影响。方法：将96头20kg左右的仔猪随机分为3组，分别在基础日粮中添加150mg／kg源于硫酸铜的铜（对照组）以及105mg／kg源于烟酸铜的铜（试验Ⅰ组）和105mg／kg源于蛋氨酸铜的铜（试验Ⅱ组）饲喂仔猪，每组4个重复，每个重复8头仔猪，试验期30d。结果：试验组与对照组在ADG、ADFI、FCR以及血液生化指标如BUN、TP、T—SOD、CP无等显著差异（P〈0．05），但粪铜的含量比对照组降低了43．7％、45．7％（P〈0．01）。结论：添加低剂量有机铜的吸收利用率比硫酸铜高，且可减少粪铜的排泄。     

早期断乳仔猪饲粮添加甲酸钙效果试验

甲酸钙是一种合甲酸的钙盐，其中含钙31％，含甲酸69％，具有中性的PH值（在10％水溶液中PH值为7.3～7．6），并且水分含量低（最高含量为0.5％）。德国Kirohgessner（198）对体重5．5～7．4千克范围仔猪进行甲酸钙添加试验，发现在口粮中添加1．3％可改善饲料转化率3．8％，添     

炎热条件下助长素对断奶仔猪生产性能及血液指标的影响

在高温和高噪音的不良饲养环境条件下，选择体重１０ｋｇ左右杜浙猪４０头，随机分成四组，即对照组、试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。在同一日粮基础上分别添加０％、０．０５％、０．１０％．０．１５％猪用助长素，以探讨不同浓度的猪用助长素对断奶仔猪的生产性能和部分血液指标的影响。结果表明，添加０．０５％、０．１０％、０．１５％猪用助长素均能明显提高断奶仔猪的日增重，提高饲料利用率。经统计分析，添加０．１５％猪用助长素组猪的日增重与对照组之间存在极显著差异（ｐ＜０．０１）。试验组猪只血液中红细胞总数、血色素和碱性磷酸酶含量也明显高于对照组。添加０．１０％猪用助长素的血液碱性磷酸酶含量与对照组之间存在极显著差异（ｐ＜０．０１）。