卡那霉素浓度和喷洒时间对鉴定转Bt基因棉花的影响

目前对转Bt基因抗虫棉的检测有两方面,一是对转Bt基因抗虫棉抗棉铃虫性生物测定,一是对棉株体内Bt毒蛋白的检测。根据转Bt基因抗虫棉本身携带的含嵌合基因卡那霉素特性,国内李燕娥等人均进行了转基因抗虫棉抗虫性检测,取得了一定的进展。卡那霉素的浓度以及喷洒卡那霉素的时间不同,抗虫棉与非抗虫棉对其反应时间不同。为更有效地鉴定转Bt基因抗虫棉不耽误农时特作本试验。1浓度对鉴定转Bt基因棉花的影响2005年4月在安徽农业大学棉花实验基地进行了用喷洒卡那霉素法筛选转Bt基因抗虫棉的实验,品种是抗虫棉新棉33B,非抗虫棉中棉所35。以40…     

转基因棉花室内种质筛选新方法研究

为进一步改进转基因棉花室内筛选系统,使用5000mg·L^-1浓度卡那霉素分别对转Bt基因棉花和非转基因棉花品种新陆早33的种子进行卡那霉素影响侧根生成的实验研究,经过卡那霉素溶液处理的棉花种子在基质中培养5d后进行数据统计,然后分别提取生成和不生成侧根的棉花幼苗子叶DNA,进一步经聚合酶链式反应（PCR）鉴定确认。结果表明：用5000mg·L’的卡那霉素对2个品种进行筛选时,Bt棉89％有侧根形成,而新陆早33仅2％有侧根发生。PCR鉴定结果也显示有侧根生成的棉花幼苗具有卡那霉素抗性基因NPTII和抗虫基因Bt。实验结果-9预期结果一致,所以这种筛选新方法可以作为有效快捷的转基因棉花室内筛选方案。     

大规模转基因彩色棉花后代筛选方法研究

 为了验证田间卡那霉素筛选与PCR分子鉴定相结合作为大规模转基因棉花后代筛选方法的可靠性和实用性,以该方法对转基因棉花不同品种的T1至T3进行筛选研究。结果表明：不同品种对卡那霉素抗性表现有差异,在确定卡那霉素筛选最佳条件后,陇棉2号经过5.0 g·L^-1卡那霉素叶片涂抹, 0～3 d观察期;BC05经过 5.0 g·L^-1卡那霉素叶片涂抹, 0～4 d观察期;陇绿棉3号经过3.0 g·L^-1卡那霉素叶片涂抹,0～5 d观察期,可以明显识别植株是否对卡那霉素有抗性。此法快速筛选的820株阳性植株中,PCR分子鉴定有14株呈假阳性,164 株具备外源目的基因,卡那霉素筛选的准确率为20%。因此,田间卡那霉素筛选是一种快速的棉花转基因后代筛选方法,但可靠性不足,如结合目的基因PCR分子鉴定,则是一种大规模转基因棉花后代群体筛选的有效方法。     

2008年河南安阳转Bt基因棉叶抗棉铃虫性时空动态

近几年来,国内外学者对转Bt基因棉花的抗虫性进行了一系列的室内和田间鉴定,并研究了转Bt基因棉对目标害虫取食、生长发育、行为变化及对非目标害虫种群动态的影响。但外源基因的表达受多种因素的影响,如降雨、光强、温度等,因此,不同年份转基因抗虫棉对棉铃虫的抗性有所不同。     

转基因棉花在生产应用上的风险与安全控制

针对转Bt基因抗虫棉在各棉区广泛种植的现状,分析了转外源基因棉花在生产应用上存在抗除草剂棉花可能成为杂草、基因漂移威胁棉花近缘物种、转基因棉加速害虫的抗性进化、对非靶标有益生物的影响、转基因棉花对土壤生态环境的影响等风险,提出培育种植转多基因棉花、调控外源基因表达、设置棉花害虫＂庇护所＂、轮换种植不同类型的转基因棉品种、建立转基因棉花害虫综合治理技术体系等转Bt基因抗虫棉的安全控制措施。     

新疆地区转Bt基因棉田主要害虫及其天敌消长规律的初步研究

对转Bt基因棉田与常规棉田主要害虫及天敌消长规律的研究结果表明,转Bt基因棉对棉铃虫有良好抗性,棉铃虫在转Bt基因棉田的落卵量与常规棉田落卵量差异不显著;田间幼虫存活虫量差异显著;田间越冬蛹基数差异极显著;田间蚜量转Bt基因棉田略高于常规棉田;田间优势天敌存量相当.     

转抗病基因棉花的培育研究初报

目前,我国棉花主产区相当一部分为重茬地,棉花黄萎病不断蔓延和增长,对棉花生产造成了很大的威胁,部分重病棉田因病产量损失严重,纤维品质下降,经济损失大,直接制约农村经济的发展和农民的收入。如何解决抗病性,成了棉花基因工程研究的新课题。1材料来源采用基因工程技术获得β-1,3-葡聚糖酶及几丁质酶基因双价植物表达栽体GO、GCE转化棉株。在田间对转化植株进行卡那霉素抗性检测及多代抗病性筛选,获得性状优良的抗病转基因棉花品系材料15个。2结果与分析2.1转抗病基因材料病圃抗病性检测。2003、2004年将田间选育的纯合转抗病基因棉花品…     

转Bt基因棉的抗虫性遗传及其生化基础研究

本文从卡那霉素抗性鉴定、抗虫性鉴定Bt毒蛋白含量测定等三个方面对转Bt基因棉的抗虫性遗传及其生化基础进行了研究。结果表明，转Bt基因棉美棉33B和GK-12对棉铃虫具有显著的抗性。盛蕾期饲喂美棉33B、GK-12棉抹顶端叶片72h后，初孵棉铃虫幼虫死亡率分别为86．8％、75．1％，对照TM-1、泗棉33号、苏棉12号三个常规品种(系)初孵幼虫死亡率分别为10.9％、13．9％、9．2％。美棉33B、GK-12盛蕾期功能叶片Bt毒蛋白含量分别为每克鲜重836.68纳克、682．56纳克。饲喂美棉33B、GK-12与常规品种(系)杂种一代棉抹顶端叶片72h后。初孵棉铃虫幼虫平均死亡率分别为84．1％、77．2％，两个转Bt基因棉品种与常规棉品种(系)杂种一代功能叶片的Bt毒蛋白含量平均值分别为每克鲜重820．58纳克、683．77纳克。转Bt基因棉与常规棉杂种一代的抗虫性表现及其生化基础与转Bt基因棉非常接近，杂种二代群体抗、感虫植抹的分离比例符合3：1，回交世代BC1群体抗、感虫植株的分离比例符合1：1，转Bt基因抗虫性状的遗传是受一对完全显性基因控制的。Bt基因与NPTⅡ基因是紧密连馈或完全连锁的。段毒蛋白表达量按照一对显性基因的表达方式在转Bt基因棉杂交后代中进行传递。不存在基因的剂量效应。三种鉴定方法都能对玫基因进行有效的追踪检测，且三者之间具有高度的一致性。并对国产转Bt基因棉GK-12的抗虫性不及美棉33B的原因进行了探讨。     

转Bt基因棉棉子壳培养基对平菇生长发育的影响

研究了转Bt基因棉花的棉子壳作为培养基对平菇生长发育的影响.结果表明,和常规棉对照相比,平菇在转Bt基因棉棉子壳培养基上菌丝生长缓慢,出菇期推迟3天左右,收菇期推迟2天左右,产菇量没有明显差异,但转Bt基因棉棉子壳生物转化率高于常规棉.     

Bt抗虫双隐性核不育系中抗58A

1 Bt抗虫双隐性核不育系中抗58A的培育 2000年选用中国农业科学院棉花研究所配育的非转Bt双隐性核不育系为母本,利用转Bt基因抗虫棉中棉所45做父本进行转育杂交,当年冬季将其F1代在海南岛加代繁殖.2001年春将F2代种子种植本所试验地,开花期间每天逐株进行观察记载,发现不育性彻底稳定的单株,挂牌编号并及时喷施卡那霉素溶液,进行Bt基因鉴定.     

异色瓢虫对取食转Bt基因棉花的扶桑绵粉蚧的捕食功能反应

以转Bt基因棉和常规棉为材料,通过室内测定,研究了以转Bt基因棉为食的扶桑绵粉蚧（Phenacoccus solenopsis）对异色瓢虫（Harmonia axyridis）成虫功能反应的影响。结果表明,异色瓢虫对用转Bt基因棉处理的扶桑绵粉蚧的捕食量与常规棉无显著差异,捕食量均随着密度的增加而逐渐增大,捕食功能反应符合Holling-Ⅱ模型。异色瓢虫对用转Bt基因棉处理的扶桑绵粉蚧的日最大捕食量明显大于常规棉,所用处置时间短于常规棉,瞬间攻击率无显著差异。     

转基因棉花筛选中抗生素浓度的选择研究

蚜虫是棉花的主要害虫之一,在甘肃等西北内陆棉区普遍发生,严重影响皮棉的产量和质量,造成巨大的经济损失。通过生物技术把抗蚜基因导入棉花培育抗蚜虫棉花新品种,是综合治理棉花蚜虫危害的重要手段之一,其中一项主要的工作就是进行转基因植株的筛选鉴定。李燕娥等人采用组织培养技术,在有卡那霉素的培养基上对转基因棉苗进行培养;祝建波等人直接在田间对己进行基因转化或转育的棉花叶片进行卡那霉素抗性筛选,都取得了较为肯定的效果。胡丽华等人报道大田筛选所使用的卡那霉素的适宜浓度为4000mg.L-1。但是研究地域不同,结果也不尽一致。为…     

江苏沿海棉区烟粉虱发生规律与防治技术

江苏沿海地区是我国重要产棉基地,常年种植棉花170khm^2以上,近几年来随着转Bt基因抗虫棉（简称Bt棉下同）面积不断扩大（现已占90％以上）,使得曾经是棉花主要害虫的棉铃虫已得到控制,而使一些次要害虫现已成为棉田主要害虫及防治对象。烟粉虱就是江苏沿海棉区转Bt基因抗虫棉棉田近年来新发生的一种多食性害虫,对棉花的为害逐年加重,甚至达到暴发。     

子叶期应用卡那霉素进行转基因抗虫棉快速检测

应用卡那霉素进行转基因抗虫棉田间快速检测,以棉花顶部第2叶为涂抹的最适宜叶片.但在大田生产上,要等到2叶进行鉴定,会延误间苗、定苗时间.2004年在大田生产上对抗虫棉和非抗虫棉分别于子叶期、2叶期、成熟期进行不同浓度的卡那霉素涂抹试验,以明确在子叶期进行卡那霉素快速检测的技术.     

转基因抗虫棉对甜菜夜蛾的抗性研究

近年甜菜夜蛾在转基因抗虫棉田发生为害呈上升趋势,本研究室内测定了转单价基因(Bt)棉和转双价基因(Bt+CpTI)棉对该种害虫的抗性。结果表明,转Bt基因棉对甜菜夜蛾低龄幼虫的抗性优于转双价基因棉,而转双价基因棉对高龄幼虫的抗性优于转Bt基因棉,但两种转基因棉对高龄幼虫的控制作用均不太理想。大面积推广种植转基因抗虫棉可能使棉田农业生态系统及及其生物群落的结构与功能发生了某些变化,从而有利于甜菜夜蛾的发生为害。     

转Bt基因棉与常规棉主要害虫及天敌群落特征的区别研究

系统调查了转Bt基因棉新棉33B与常规棉中棉所12不同时期植株上、中、下部棉蚜、棉叶螨、棉铃虫及其主要天敌的数量。求得各时期的群落多样性指数、均匀度和相似性指数并分析抗虫棉与常规棉的群落特征区别。     

转Bt基因抗虫棉毒蛋白检测方法及其表达规律研究进展

研究转Bt基因抗虫棉毒蛋白的表达规律及其对标靶害虫毒杀性,对评价Bt基因成功转化、转Bt基因抗虫棉选育和推广、目标害虫抗性预测以及生物安全评价管理都具有重要意义。概述了国内外转Bt基因棉毒蛋白检测方法及其表达变化规律,并提出引起Bt毒蛋白表达变化的原因及改进对策。     

巴基斯坦开始种植转Bt基因棉

巴基斯坦生物遗传工程中心所 ( NIBGE)对转Bt基因棉的研究始于 2 0世纪 90年代中期。在本国按照国际标准对转 Bt基因棉已实施了 3年生物安全性评估 ,结果表明是安全的。棉花是该国主要的创汇作物 ,约占 1 0 0亿美元外汇中的 6 0 % ,2 0 0 0多万人以棉为生。巴基斯坦科学家声称 NIBGE的棉花品种抗病且能稳定出口创汇 ,这种 Bt棉对许多害虫具有抗性 ,如烟芽夜蛾、棉铃虫和红铃虫。反对者说一旦政府允许种植本国的 Bt棉 ,那就意味着必须允许外国公司品种的进入 ,大规模种植这种品种可能更易受病虫害的为害。美国孟山都公司已要求巴基斯坦…     

三种刺吸式口器害虫在山东聊城麦套棉田的消长动态

聊城市是山东省传统棉区,以麦套棉种植模式为主。20世纪90年代棉铃虫暴发期间,棉田种植面积急剧减少。近年来,随着转Bt基因棉花的推广,棉田面积有所回升。转Bt基因抗虫棉的种植有效地减轻了以棉铃虫为代表的鳞翅目昆虫对棉花的危害,但是对刺吸式口器害虫无控制作用,     

金标Bt-CryIAb/Ac试纸条定性检测转Bt基因棉花的方法研究

 鉴于转Bt基因抗虫棉的抗虫性存在时空表达差异的现象,因此,采用免疫检测法中的金标Bt-CryIAb/Ac抗虫检测试纸条进行Bt毒蛋白定性检测,并对其使用方法中的样品取样部位、时期与样品稀释参数进一步调整。结果表明,检测苗期的子叶、顶部第二叶及蕾期的顶部第二叶等组织器官时,样品稀释倍数应控制在10～15;检测花蕾时,应控制在15～20倍;检测开花期的顶部第二叶时,应控制在5～10倍;检测铃期的顶部第二叶及苞叶时,应控制在5～10倍;检测成熟的种子应为15～20倍。金标Bt-CryIAb/Ac试纸条定性检测转Bt基因棉花时,不同时期、不同器官应采用相应适宜的浓度才能获得可靠的鉴定结果。