克伦特罗在猪尿液中的消除规律研究

[目的 ]研究克伦特罗在猪尿液中的消除规律。[方法 ]用含有克伦特罗1.5 mg/kg的饲料,饲喂一组体重约50 kg的90日龄育肥猪,正常饲喂35天后停药,收集停药后前32天的猪尿液,采用高效液相色谱法(HPLC)进行克伦特罗含量分析。[结果 ]停药后的前4天,猪尿液中的克伦特罗浓度迅速下降,第4天降至13.23μg/kg,之后消除速度放慢,第32天为0.44μg/kg,仍然高于最低检测限0.05μg/kg。[结论 ]克伦特罗在猪体内消除缓慢,容易蓄积。     

克伦特罗在猪尿液和血液中残留消除相关性研究

对克伦特罗在喂药期和休药期猪尿液和血液中的残留规律和相关性进行了研究。选择10只健康猪(60kg±5.7kg)进行试验,在饲料中添加4mg/kg盐酸克伦特罗,连续饲喂15d后休药,参考NY/T468-2006方法监测喂药期和休药期尿样和血样中克伦特罗含量,研究其残留消除规律。试验结果表明,克伦特罗在喂药期间猪尿中平均含量为393～1131μg/L,血液中平均含量为6.8～22.1μg/L;停药后含量迅速下降,其中19d后猪尿平均含量为2.19μg/L,猪血液平均含量为0.49μg/L。同时尿液和血液中克伦特罗含量呈一定的正相关关系,喂药期相关系数为0.9385,休药期相关系数为0.9402。     

液相色谱-串联质谱法研究地克珠利在家兔组织中残留及消除规律

[目的]建立一种检测家兔组织中地克珠利含量的液相色谱-串联质谱法（LC—MS／MS）,研究地克珠利在家兔组织中的残留及消除规律。[方法]选择48只家兔（雌雄各半）,在饲料中加入10g／1000kg地克珠利混饲,连续饲喂30d。分别于休药后的第0、1、2、3、4、5、6天,每个时间点随机处死6只家兔（雌雄各半）,取肌肉、肝脏、肾脏组织,DMF,乙腈沉淀法提取并用LC—MS,MS法检测地克珠利残留量。[结果]地克珠利在肾脏中的残留量最高（休药0d为912．6μg／kg）,肝脏次之（休药0d为156．μg／kg）,肌肉最低（休药0d为43．1μg／kg）,在肾脏中的消除速度最快。[结论]该方法适于检测家免组织中的地克珠利含量。休药0d即可满足欧盟要求     

灰黄霉素在家兔组织中的分布及残留消除规律研究

研究灰黄霉素在家兔组织中的分布及消除规律,为灰黄霉素用于治疗家兔真菌病的安全性评价提供依据。选择42只新西兰白兔,于饲料中添加灰黄霉素（800g／1000kg）混饲,连续饲喂14d,分别于停药后1、3、5、7、9、14、21d,各处死6只,取其肝、肾、肌肉、皮肤及脑组织。以盐酸普萘洛尔为内标,二氯甲烷提取后用高效液相色谱-串联质谱仪（HPLC—MS／MS）进行各种组织中灰黄霉素浓度分析。结果显示,连续用药14d后,灰黄霉素在家兔组织中的分布情况为：肝组织浓度最高（134．61μg／kg）,肾组织次之（54．09μg／kg）,脑组织浓度最低（未检出）;停药后,随着时间的延长,灰黄霉素在肌肉、肝、肾和皮肤组织中的浓度逐渐下降,且在肝脏中的消除速度最快,停药21d后,灰黄霉素在肾组织中浓度为3．39μg／kg,在肝组织中浓度为12．36μg／kg,其他组织低于定量限或未检出。建议家兔生产中慎用灰黄霉素。     

克伦特罗在猪尿液和血液中的残留消除规律研究

在饲料中添加10mg/kg的克伦特罗,使用HPLC法研究了克伦特罗在猪尿液和血液中的残留消除规律。研究结果表明:喂药期前3d尿液和血液中克伦特罗的含量逐步上升,4~15d无明显变化趋势;停药期前3d尿液和血液中克伦特罗的含量急剧下降,4~15d呈平缓下降趋势;喂药期和停药期尿液和血液中克伦特罗的含量变化成正相关,相关系数分别为r=0.64、r=0.9961。因此,使用HPLC法以血液样本代替尿样进行克伦特罗检测是可行的。     

EM发酵玉米秸秆饲喂陕北白绒山羊效果研究

为研究EM发酵玉米秸秆饲喂陕北白绒山羊效果,试验选择16只健康状况良好的1周岁空怀期陕北白绒山羊,将其随机分成A、B两组,每组8个重复,每个重复1只。试验基础日粮为苜蓿干草200g＋精料补充料200g。A组饲喂基础日粮＋常规玉米秸秆;B组饲喂基础日粮＋EM发酵玉米秸秆,试验中A、B两组自由采食秸秆。试验共40d,其中预饲期18d10结果显示：（1）B组平均干物质采食量显著高于A组（P〈0.05）,其中玉米秸秆采食量较A组高22.53%（P〈0.05）;（2）B组DMD、GED和CPD分别较A组高3.65%（P〈0.05）、4.18%（P〈0.05）和8.02%（P〈0.01）;（3）B组平均日增重和饲料转化效率分别为45.45g和74.19g/kg,极显著高于A组的22.27g和39.32g/kg（P〈0.01）。综上所述,EM发酵的玉米秸秆可以达到开发秸秆粗饲料、减少资源浪费、减少公害、降低生产成本的目的。     

盐酸克伦特罗在羊主要脏器中残留量消除规律的研究

本试验对盐酸克伦特罗在休药期肉羊眼睛、心脏、肾脏、肺脏、脾脏等组织中的残留规律进行了研究。选择24头体重为(30±5)kg健康肉羊进行试验,在饲料中添加50 μg/kg盐酸克伦特罗,连续饲喂35 d后休药,通过液相色谱—质谱联用/质谱检测休药期肉羊组织中克伦特罗含量,研究其残留量消除规律。试验结果表明,肉羊眼睛中有高浓度的盐酸克伦特罗残留且其在肝脏中消除较慢;停药第14天眼睛中盐酸克伦特罗的浓度仍为42.42～63.48 μg/kg,脾脏中盐酸克伦特罗消除速度是最快的;停药3 d时,检测不到盐酸克伦特罗的残留量(低于检出限0.07 μg/kg),故眼睛可用作检测盐酸克伦特罗在肉羊生产上非法使用的靶标。     

不同营养调控剂对荷斯坦公牛增重效果的影响

选取42头体重相近的荷斯坦公牛，随机分为7组，每组6头。对照组饲喂基础日粮，调控剂A1、A2、A3组在基础日粮中添加营养调控剂A，添加剂量分别为2g／（d·头）、5g／（d·头）和8g／（d·头）。调控剂B1、B2、B3组在基础日粮中添加营养调控剂B，添加剂量分别为2g／（d·头）、5g／（d·头）和8g／（d·头）。试验结果表明，调控剂A2组和调控剂B2组的平均日增重与对照组相比，分别增加了0．19kg和0．20kg，差异显著（P〈0．05）；以上两组的平均日收入与对照组相比，分别增加了3．57元和3．82元。结果表明，营养调控剂A和营养调控#IB在荷斯坦公牛日粮中添加剂量为5g／（d·头）时，可以促进公牛的增重，提高经济效益。     

盐酸克伦特罗在猪尿液中消长动态研究

利用2种不同浓度的盐酸克伦特罗饲喂2组育肥猪,收集不同时期的尿液,采用高效液相色谱法（HPLC）进行分析,研究盐酸克伦特罗在猪尿液中消长动态规律.试验结果表明：饲喂不同浓度的克伦特罗,其在猪尿液中的排出量在第3d达到1个高峰,第20d再次出现1个高峰,此过程呈波浪形,而且随添加剂量的增大而升高.消除速度比吸收速度慢,停药14d,不同浓度克伦特罗在尿液中的残留量仍高出最低检测限许多,并且随浓度的增加,消除时间随之延长.     

复方中草药添加剂对辽宁绒山羊种公羊精液品质的影响

将15只年龄2．60士0．25岁、体重43．48士1．46kg的辽宁绒山羊种公羊随机分为三组,试验一组和试验二组分别饲喂10g／d和15g／d的复方中草药添加剂,对照组不添加,目的是研究中草药添加剂对种公羊精液品质的影响。结果表明,试验45d和75d后,两个试验组的射精量均高于对照组,其中试验一组差异显著（P〈0．05）;精子密度均显著（P〈0．05）高于对照组;顶体完整率高于对照组,其中试验二组在试验75d后与对照组差异极显著（P〈0．01）;美兰褪色时间极显著（P〈O．01）低于对照组;两个试验组的精子活率、畸形率和解冻后活率与对照组均差异不显著（P〉0．05）。对于本复方中草药添加剂而言,辽宁绒山羊种公羊按照10g／d的剂量饲喂即达到了改善精液品质和提高生产效率的目的。     

超高效液相色谱-串联质谱法检测动物肌肉组织中19种β-受体激动剂残留

建立了猪、牛和羊肌肉组织中吡布特罗、西马特罗、特步他林、齐帕特罗、沙丁胺醇、西布特罗、克伦塞罗、克伦丙罗、羟甲基克伦特罗、氯丙那林、莱克多巴胺、克伦特罗、妥布特罗、福莫特罗、溴布特罗、克伦潘特、班布特罗、马布特罗和马喷特罗等19种β-受体激动剂残留检测的超高效液相色谱-串联质谱方法.猪、牛和羊肌肉组织样品用乙腈和异丙醇（8：2,V/V）提取,加入NaC1、Na2SO4和MgSO4盐析去杂质.待测药物经BEH C18色谱柱分离,以0.1％甲酸乙腈溶液和0.1％甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱.同位素内标法和基质匹配标准溶液外标法定量.19种β-受体激动剂在系列浓度范围内呈现良好线性关系,相关系数r2均大于0.99;19种药物在肌肉组织中的检测限为0.25 μg/kg,定量限为0.5μg/kg.从0.5、1和5μg/kg三个添加浓度检测结果可以看出,19种药物的回收率为73.7％ ～ 114.1％,批内批间相对标准偏差均小于20％.结果表明,该方法简便快捷、灵敏度高、定性准确,适用于该类药物残留的检测.     

超高效液相色谱-串联质谱法检测猪尿中20种β-受体激动剂残留

建立了猪尿中吡布特罗、西马特罗、特步他林等20种β-受体激动剂残留检测的超高效液相色谱一串联质谱方法。猪尿样品经酶解后,调节pH值至碱性,用叔丁醇和叔丁基甲醚（6＋4,V／V）萃取,MCX柱净化,以0．1％甲酸乙腈溶液和0．1％甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱。同位素内标法和外标法定量。20种β-受体激动剂在系列浓度范围内呈现良好线性关系,相关系数1．2均大于0．99;20种药物在猪尿中的检测限为0．25μg/L,定量限为0．5μg／L。从0．5、1和5μg／L三个添加浓度检测结果可以看出,20种药物的回收率为75．7％～110．7％,批内批间相对杯准偏差均小于20％。该方法具有简便快捷、灵敏度高、定性准确等特点。     

The pharmacokinetics and residues of clenbuterol in veal calves.

Seven female Brown Swiss calves were used to study the pharmacokinetics of clenbuterol after an effective anabolic dosage of 5 micrograms/kg of BW was given twice daily for 3 wk. Analyses of clenbuterol concentrations in different tissues was done by enzyme immunoassay (EIA). Tissue samples were taken from three calves on the last day of administration and from two more after 3.5 or 14 d of clenbuterol withdrawal. The rate of clenbuterol elimination was dependent on time and tissue. Clenbuterol concentrations in the lung dropped from a mean of 76 ng/g to a level of less than .08 ng/g after 14 d, whereas in the liver the clenbuterol concentrations decreased from 46 ng/g to .6 ng/g within 14 d of withdrawal. Highest levels were always found in the eye: 118 ng/g, 57.5 ng/g, and 15.1 ng/g after 0, 3.5, and 14 d of withdrawal, respectively. These data reveal that different compartments contribute to the elimination of clenbuterol; therefore, concentrations in urine do not follow first order kinetics. An initial rapid decline in the concentration of clenbuterol in urine with a half-life of 10 h is followed by a slower elimination with a half-life of about 2.5 d. Treatments using the anabolic dose of 5 micrograms/kg of BW require longer withdrawal times than the therapeutic dose (.8 micrograms/kg BW).     

高效液相色谱-串联质谱法研究猪毛发中克仑特罗和莱克多巴胺的残留及代谢规律

建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)同时检测猪毛发中克仑特罗和莱克多巴胺残留的方法。猪毛发经1 mol/L氢氧化钠溶液水解、乙酸乙酯萃取、MCX固相萃取柱净化,流动相溶解后用HPLC-MS/MS进行检测。克仑特罗在1.9～463.2 ng/mL浓度范围内线性关系良好(R2=0.999 0);回收率为83.3%～86.6%,相对标准偏差为6.7%～9.2%;检出限为0.3μg/kg,定量限为0.8μg/kg。莱克多巴胺在2.8～562.9 ng/mL浓度范围内线性关系良好(R2=0.999 2);回收率为83.4%～88.4%,相对标准偏差为7.2%～9.6%;检出限为0.4μg/kg,定量限为1.2μg/kg。应用该方法研究了克仑特罗、莱克多巴胺在猪毛发中的代谢规律并进行了猪毛发样品检测。结果喂药7 d至停药21 d猪毛发中均检出克仑特罗、莱克多巴胺残留;检测猪毛发样品25份,1份样品检出克仑特罗,残留量为58.68μg/kg。     

Clenbuterol in the horse: urinary concentrations determined by ELISA and GC/MS after clinical doses

Clenbuterol is a beta2 agonist/antagonist bronchodilator marketed as Ventipulmin and is the only member of this group of drugs approved by the US Food and Drug Administration (FDA) for use in horses. Clenbuterol is a class 3 drug in the Association of Racing Commissioners International (ARCI) classification system; therefore, its identification in postrace samples may lead to sanctions. Recently, the sensitivity of postrace testing for clenbuterol has been substantially increased. The objective of this study was to determine the 'detection times' for clenbuterol after administration of an oral clinical dose (0.8 g/kg, b.i.d.) of Ventipulmin syrup. Five horses received oral clenbuterol (0.8 g/kg, b.i.d.) for 10 days, and urine concentrations of clenbuterol were determined by an enhanced enzyme-linked immunoabsorbent assay (ELISA) test and gas chromatography/mass spectrometric (GC/MS) analysis by two different methods for 30 days after administration. Twenty-four hours after the last administration, urine concentrations of apparent clenbuterol, as measured by ELISA, averaged about 500 ng/mL, dropping to about 1 ng/mL by day 5 posttreatment. However, there was a later transient increase in the mean concentrations of apparent clenbuterol in urine, peaking at 7 ng/mL on day 10 postadministration. The urine samples were also analysed using mass spectral quantification of both the trimethylsilyl (TMS) and methane boronic acid (MBA) derivatives of clenbuterol. Analysis using the TMS method showed that, at 24 h after the last administration, the mean concentration of recovered clenbuterol was about 22 ng/mL. Thereafter, clenbuterol concentrations fell below the limit of detection of the TMS-method by day 5 after administration but became transiently detectable again at day 10, with a mean concentration of about 1 ng/mL. Derivatization with MBA offers significant advantages over TMS for the mass spectral detection of clenbuterol, primarily because MBA derivatization yields a high molecular weight base peak of 243 m/z, which is ideal for quantitative purposes. Therefore, mass spectral analyses of selected urine samples, including the transient peak on day 10, were repeated using MBA derivatization, and comparable results were obtained. The results show that clenbuterol was undetectable in horse urine by day 5 after administration. However, an unexpected secondary peak of clenbuterol was observed at day 10 after administration that averaged approximately 1 ng/mL. Because of this secondary peak, the detection time for clenbuterol (0.8 g/kg, b.i.d. x 10 days) is at least 11 days if the threshold for detection is set at 1 ng/mL.     

超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡肉和牛肉中五种常用抗球虫药

建立了鸡肉和牛肉中五种常用抗球虫药物残留检测的超高效液相色谱-串联质谱方法（UPLC—MS／MS）。样品用乙腈提取,吹干后用50％甲醇溶解,正己烷去脂后,供液相色谱-串联质谱法分析。液相色谱条件为：色谱柱为WatersBEHC18柱（50mm×2．1mm,1．7μm）;流动相为乙腈-20mmol／L乙酸铵水溶液,梯度洗脱;柱温30℃;流速0．3mL／min;进样量10μL。质谱条件为：电喷雾离子源（ESI’）,多反应监测（MRM）方式采集。结果表明：在10～500μg／L的系列浓度范围内,五种抗球虫药物的相关系数R2〉0．990;方法检测限为5μg／kg,定量限为10μg/kg;从100、200、500μg／kg三个添加浓度检测结果可以看出,方法的平均回收率为75．4％～109％,批内、批间RSD均〈15％。本方法简便快捷、定性准确,可以满足兽药残留分析的求。     

气相色谱－质谱法测定猪尿中地西泮

建立了猪尿中地西泮的气相色谱-质谱（GC／MS）检测方法。样品经C18固相萃取柱净化后进行气相色谱-质谱测定。结果表明,方法定量限为0．5μg/L,线性范围为10～500μg/L。在三个添加浓度2、4、6μg/L水平上,地西泮的平均回收率为70％～120％,批内相对标准偏差〈20％、批间相对标准偏差〈12％。