紫草素诱导乳腺癌细胞凋亡的研究

以MTT法测定紫草素对乳腺癌细胞株MCF-7等的生长抑制作用,并通过形态学分析、Hoechst荧光染色、流式细胞术及免疫印迹等观察紫草素诱导乳腺癌细胞凋亡的形态学、生化特征改变及凋亡的可能机制.结果表明:紫草素对乳腺癌细胞株有显著抑制生长作用,效应呈时间和剂量的依赖性,24h半数抑制浓度(IC50)均在10μmol·L-1以下.紫草素诱导MCF-7等乳腺癌细胞发生典型的细胞凋亡,细胞周期阻滞于S期,凋亡过程中产生了85ku大小的PARP裂解片段,此效应可被广谱caspase抑制剂抑制,表明紫草素可能经caspase途径诱导MCF-7细胞发生凋亡.     

姜黄素联合光照对BGC-823细胞膜通透性及线粒体膜电位的影响

为了研究在光照和避光条件下姜黄素（CUR）对人胃腺癌BGC-823细胞膜通透性及线粒体膜电位的影响,探讨CUR抑制BGC-823细胞生长的机制,在体外培养的BC,C-823细胞加CUR后光照或避光处理24h。利用激光共聚焦显微镜（LSCM）检测线粒体膜电位变化,利用流式细胞仪（FCM）检测细胞膜通透性改变．结果表明：BGC-823细胞避光组（O、5、20μmol／L）、光照组（D、5μmol／L）的线粒体膜电位分别为（4．71±1．81）、（4．824±1．86）、（0．47±1．42）、（4．264±1．67）、（O．55±1．36）,光照5μmol／LCUR组、避光20μmol／LCUR组与相应对照组线粒体膜电位均显著降低;各处理组细胞膜通透性亦发生改变,光照5μmol／LCUR组、避光5μmol／LCUR组膜通透性较对照组均显著升高,且光照5μmol／LCUR组较避光5μmol／LCUR组质膜通透性显著升高．     

姜黄素调控Notch1信号通路诱导结肠癌SW480细胞株凋亡

目的 从Notch1信号通路探讨姜黄素诱导结肠癌SW480细胞株凋亡的分子机制。方法 （1）利用流式细胞技术检测不同浓度姜黄素（0,7.5,15,30,60 μmol/L）处理结肠癌SW480株24 h和48 h后的细胞凋亡情况。（2）通过RT-PCR检测不同浓度姜黄素（0,7.5,15,30,60 μmol/L）处理结肠癌SW480细胞株24 h和48 h后,Notch1信号通路中膜受体基因Notch1及下游靶基因Hes-1 mRNA表达情况,观察姜黄素对Notch1信号通路中Notch1及Hes-1基因mRNA表达的影响。结果 （1）姜黄素能诱导结肠癌SW480细胞株凋亡;（2）姜黄素能一定程度上下调Notch1信号通路中Notch1及Hes-1基因mRNA的表达（P＜0.05）。结论 姜黄素能一定程度上诱导结肠癌SW480细胞株凋亡,这种对结肠癌SW480细胞毒性作用可能与调控Notch1信号通路中膜受体基因Notch1及下游靶基因Hes-1转录有关。     

二甲双胍、罗格列酮或联合应用对乳腺癌MCF-7细胞周期和凋亡的影响

目的 观察二甲双胍单药、罗格列酮或联合应用对乳腺癌MCF-7细胞周期和凋亡的影响.方法 用浓度为20 mmol/L二甲双胍(二甲双胍组)、100 μmol/L罗格列酮(罗格列酮)及二甲双胍联合罗格列酮(联合用药组)处理MCF-7细胞48h,分别采用MTT法、流式细胞术、Hoechst33258染色法观察细胞增殖、周期、凋亡情况.结果 二甲双胍组、联合用药组的MCF-7细胞增殖被显著抑制,二甲双胍组、罗格列酮组、联合用药组阻滞MCF-7细胞于G0/G1期比例增加,S、G2/M期比例减少,二甲双胍组、罗格列酮组、联合用药组的细胞早期凋亡率分别为(15.3±1.09)％、(12.4±1.73)％、(17.2±1.63)％,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 单用二甲双胍或联合罗格列酮均能抑制MCF-7细胞的增殖,诱导其细胞周期停滞和凋亡.     

丁香酚诱导癌相关成纤维细胞凋亡的研究

【目的】研究丁香酚诱导癌相关成纤维细胞（CAF）的凋亡表现及其相关机制，为丁香酚的开发利用提供参考。【方法】用0（CK），30，60，90，120 μmol/L丁香酚处理正常成纤维细胞(NF)24 h后，用MTT法检测细胞活力。用0（CK），30，60，90,120,150，180 μmol/L丁香酚处理CAF细胞24 h后，用MTT法检测细胞活力。用0（CK），30，60 μmol/L丁香酚处理CAF细胞24 h，用Annexin V FITC和PI双染色法对细胞染色后进行流式细胞分析。用60 μmol/L丁香酚处理CAF细胞0（CK），15，30，60，120 min，用Western blotting法检测凋亡相关蛋白表达水平的变化。【结果】30~120 μmol/L丁香酚处理对NF细胞活力无显著影响；30~180 μmol/L丁香酚处理对CAF细胞活力有显著或极显著的抑制作用,丁香酚对CAF细胞的半数抑制浓度为84.47 μmol/L。60 μmol/L丁香酚能够显著诱导CAF细胞凋亡。凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、P-P53、Caspase 9、Cleaved Caspase 3、Cytochrome C参与了丁香酚诱导的CAF细胞凋亡调控过程。【结论】丁香酚对CAF细胞有抑制作用，其作用可能是通过P53蛋白途径和内源性凋亡途径实现的。     

洛伐他汀对Hela和HCT116细胞凋亡的诱导效果

采用洛伐他汀诱导Hela细胞和HCT116细胞,以探讨洛伐他汀对两种细胞体外死亡和凋亡机制。结果表明:经过浓度为20μmol/L和50μmol/L的洛伐他汀处理24 h、48 h和72 h后,两种细胞的死亡和凋亡率与处理浓度及时间成正相关,在不含胎牛血清(SVF)条件下效果更明显;经25μmol/L洛伐他汀处理48 h后,caspase-2表达在两个细胞系中均有提高,尤以Hela更明显。故初步认为,Lovastatin能引起Hela、HCT116细胞的死亡和凋亡,凋亡机制与caspase-2表达有关。     

ROS对氯化镉诱导的人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响

为研究活性氧(ROS)对氯化镉(CdCl2)诱导的人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响,本文采用荧光探针DHR检测CdCl2诱导的MCF-7细胞内ROS的变化水平;分别采用MTT法和DNA Ladder法检测CdCl2对细胞的毒性作用和细胞DNA的凋亡情况;通过加入自由基清除剂LNAC抑制细胞内的ROS水平,从而研究ROS对细胞凋亡的影响。结果显示,1.00×10-3 mol/L的CdCl2处理MCF-7细胞6h,细胞内ROS水平为对照组的2.04倍,细胞存活率为26.54%,DNA出现片段化分解。用CdCl2+LNAC复合处理MCF-7细胞6h,细胞内ROS水平为对照组的1.25倍,细胞存活率为61.17%,DNA不出现凋亡条带。因此,由CdCl2所导致的MCF-7细胞凋亡和DNA片段化分解,与细胞内ROS水平的升高有关。     

姜黄素对小鼠睾丸细胞株TM4细胞的影响

主要探讨姜黄素(Curcumin,CCM)对支持细胞株TM4体外生长的影响.通过采用形态学观察、MTT法和TUNNEL法检测了5种不同浓度的姜黄素对小鼠支持细胞株TM4细胞生长和增殖的影响.结果表明,姜黄素抑制TM4细胞的增殖并诱导其细胞凋亡,这种作用呈剂量依赖效应,当用40 μmol/mL的姜黄素处理培养的TM4细胞时,MTT法测得的细胞生长抑制率和TUNNEL法获得的细胞凋亡指数与对照组相比均有显著差异.说明姜黄素在预防和治疗睾丸癌方面有一定的应用价值.     

6种生物碱对斜纹夜蛾离体培养细胞的作用方式

通过倒置显微镜观察斜纹夜蛾细胞凋亡小体,采用MTT法测定细胞增殖抑制作用,并使用流式细胞仪检测细胞周期时相,研究了骆驼蓬碱、喜树碱、蓖麻碱、苦参碱、博落回碱和烟碱对斜纹夜蛾离体培养细胞系SL-1的作用方式和细胞毒理。结果表明:骆驼蓬碱5.0μg/mL、20.0μg/mL和喜树碱0.5μmol/L、1.0μmol/L处理后48～60 h,斜纹夜蛾离体培养细胞系SL-1表现出明显的细胞凋亡诱导作用,处理后12～48 h,明显抑制SL-1细胞增殖,流式细胞仪检测显示细胞阻滞于G2/M期;博落回碱和蓖麻碱5.0μg/mL、20.0μg/mL对SL-1具有细胞增殖抑制作用,以20.0μg/mL处理具有细胞周期时相阻滞作用,同样使细胞阻滞于G2/M期,但无明显的细胞凋亡诱导作用;烟碱和苦参碱在5.0μg/mL、20.0μg/mL对SL-1具有细胞增殖抑制作用。     

独角莲抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖和诱导凋亡的作用研究

为探讨独角莲对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的作用,将不同浓度的独角莲根茎水提物(The aqueous extract from dried powdered rhizomes of Typhonium giganteum Engl.,AEoTGE)处理MCF-7细胞24,48,72h后,应用四甲基偶唑蓝(Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色试验、倒置光学显微镜观察、流式细胞术(Flow cytometry,FCM)及琼脂糖凝胶电泳法检测细胞增殖和凋亡情况.结果表明:AEoTGE能够显著抑制MCF-7细胞增殖,且在一定的浓度范围内呈时间和浓度依赖性,井可诱导其细胞凋亡.30g·L-1AEoTGE处理24,48,72h后,MCF-7细胞凋亡率分别为8.34%、12.1%和12.6%,其凋亡程度与时间呈正相关,S期(DNA合成期)的细 胞在处理72h后分布显著增加.可见,独角莲对MCF-7细胞有抑制增殖和诱导凋亡作用,其抗肿瘤机制与诱导凋亡有关.