不同培养基对大花蕙兰原球茎诱导与增殖影响的研究

[目的]大花蕙兰快速繁殖体系的建立。[方法]以茎尖和带有侧芽的茎段作为外植体,研究不同培养基对大花蕙兰原球茎诱导和增殖的影响。[结果]结果表明,大花蕙兰茎尖的原球茎诱导率高于侧芽,原球茎诱导的培养基为1／2MS＋2．0mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA＋1．0％芦荟汁;原球茎增殖培养基为1／2MS＋2．0mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA＋150g／L香蕉泥＋1．0％芦荟汁;“井”字形切割（底部不分开）是原球茎增殖较为理想的切割方式。[结论]该研究结果可为建立大花蕙兰大规模工厂化育苗体系提供依据。     

大花蕙兰组织培养与快繁技术

[目的]研究大花蕙兰组织培养与快繁技术,寻求最佳培养基。[方法]以大花蕙兰的原球茎为接种材料,以MS为基本培养基,设计不同生长调节物质浓度的组合、不同激素配比,探讨了不同培养基对大花蕙兰原球茎增殖、诱导芽及生根的影响和不同激素配比对形成根的影响。[结果]大花蕙兰组织培养原球茎增殖以MS+0.1 mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA培养基配方最好;适合大花蕙兰组织培养原球茎诱导分化的培养基配方为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,诱导出芽率可达130%;适合大花蕙兰诱导生根的培养基配方为1/2 MS+0.2 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA,试管苗移栽后成活率为78%。[结论]6-BA浓度的增加,可明显提高原球茎的增殖,高浓度6-BA与低浓度NAA的配比较适合大花蕙兰的原球茎增殖;6-BA在1.5 mg/L时最有利于原球茎的诱导分化。     

不同培养条件对铁皮石斛原球茎增殖的影响

[目的]为了找到适合原球茎增殖的培养条件,为工厂化育苗提供技术支撑。[方法]以铁皮石斛茎段诱导出的原球茎为实验材料,研究了不同基本培养基、不同碳源、不同浓度的脱落酸(ABA)和培养方式对其增殖的影响。[结果]在5种培养基中,原球茎增殖倍数均呈上升的趋势,其中改良MS的增殖倍数明显高于其他培养基;在低浓度的条件下,随ABA浓度的增加,原球茎的增殖速度加快,当浓度为0.5 mg/L时,增殖最大;蔗糖为碳源时原球茎增殖的效果比葡萄糖、果糖好;固体培养和液体振荡培养时原球茎增殖倍数最高。[结论]在改良MS中加入30 mg/L蔗糖和0.5 mg/L ABA,进行固体培养或液体振荡培养,铁皮石斛原球茎增殖的效果好。     

大花蕙兰原球茎增殖、分化与离体保存的研究

以大花蕙兰原球茎为材料,从培养时间、基本培养基、糖浓度、培养方式及切割方式5个方面探讨了原球茎增殖、分化及离体保存的问题。结果表明,2个月内随着培养时间的延长,原球茎增殖与分化越显著,但培养2个月后,原球茎增殖不明显,分化却持续增加;1/2MS基本培养基利于原球茎增殖与分化,而3MS基本培养基利于原球茎保存;糖浓度的高低对原球茎增殖与分化影响显著,20 g·L~(-1)蔗糖适于原球茎保存,50 g·L~(-1)蔗糖适于原球茎增殖,而原球茎分化成苗应选用30 g·L~(-1)白糖;在3种培养方式中,固体培养利于原球茎分化,液体振荡培养利于原球茎增殖,液体静置培养利于原球茎离体保存;片状切割法利于原球茎增殖与分化,整体剥离接种法利于原球茎保存。即以2.0 mg·L~(-1) 6-BA+0.1 mg·L~(-1) NAA为激素组合时,以片状切割法接种原球茎于1/2MS+50 g·L~(-1)蔗糖的培养基中并以液体振荡方式培养时利于原球茎增殖;以片状切割法接种原球茎于1/2MS+30 g·L~(-1)白糖的培养基添中并以固体方式培养时利于原球茎分化成试管苗;以整体剥离法接种原球茎于3MS+20 g·L~(-1)蔗糖培养基中并以液体静置方式培养时利于原球茎保存。上述结论为大花蕙兰试管苗快速繁殖与离体保存提供了有效的技术支持。     

培养基、激素和添加物对大花蕙兰原球茎诱导增殖的影响

本试验较系统地研究了培养基、激素6-BA和添加物对大花蕙兰“红翡翠”原球茎的诱导、增殖效果的影响。明确了最佳原球茎诱导培养基配方；筛选出较理想的原球茎继代增殖的培养基、6-BA浓度、添加物的配比参数值：1／2MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L＋100/L椰乳＋3％蔗糖、0．3％活性炭、1．0％琼脂。     

几种因素对大花蕙兰组培的影响

采用无机盐、蔗糖和植物激素的不同浓度配比以及不同培养方式等对大花蕙兰原球茎的增殖、分化、生根的影响进行试验。结果表明：①无机盐的增加不利于芽的分化和生根,而原球茎的增殖则随无机盐的增加而增加;②蔗糖浓度的高低对原球茎的增殖影响不明显,生根率随蔗糖浓度的增加而增加,而芽的分化率则随蔗糖用量的增加而减少;③BA和NAA过高过低都不利于原球茎的增殖及分化,以NAA浓度为0.2 mg.L-1,BA浓度为1 mg.L-1时大花蕙兰增殖量最高;NAA浓度为0.4 mg.L-1,BA浓度为0.5 mg.L-1时大花蕙兰原球茎分化率最高;以NAA浓度为0.2 mg.L-1,BA浓度为1 mg.L-1时大花蕙兰生根率最高;④原球茎增殖培养宜采用液体悬浮培养,有利于增殖,而分化和生根培养宜采用固体培养。     

大花蕙兰原球茎诱导培养影响因素及褐化防治的研究

[目的]研究大花蕙兰茎尖外植体原球茎诱导及增殖培养、褐化污染的影响因素。[方法]以大花蕙兰茎尖作为外植体,研究无菌系建立、诱导培养的灭菌方法与褐化防治、原球茎诱导培养初始培养基的筛选、原球茎增殖培养的影响因素。[结果]结果表明:解决茎尖内生菌污染及褐化严重的问题,两段式灭菌(75%酒精30 s+0.1%升汞10 min+剥去幼叶+0.05%升汞5 min)优于单一式的灭菌;原球茎诱导培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;原球茎增殖培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+2.0 g/L活性炭+10%马铃薯。[结论]该研究可为大花蕙兰的茎尖快速繁殖及工厂化生产提供技术依据。     

植物激素对大花蕙兰丛生芽增殖与生长的影响

[目的]研究不同种类、浓度及配比的植物激素对大花蕙兰丛生芽增殖与生长的影响。[方法]以大花蕙兰试管苗为外植体,接种于附加不同种类、浓度及配比植物激素的MS培养基中进行培养。[结果]不同浓度6-BA、KT、ZT与同一浓度NAA(0.2mg·L~(-1))配比时,均可诱导大花蕙兰不定芽分化丛生芽,实现增殖,但增殖倍率和苗的生长情况存在差异,其中以培养基为MS+6-BA 3 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)时,大花蕙兰丛生芽增殖倍率最高,达3.57倍,且丛生芽生长健壮,叶片浓绿;在附加ZT的培养基中,丛生芽增殖倍率低,最高为2.07倍,且丛生芽生长较慢,不够健壮,但试管苗不易褐化。同一浓度BA(3mg·L~(-1))与不同浓度IBA配比时,以IBA 1.0mg·L~(-1)时丛生芽增殖倍率略低,为2.03倍,但苗生长健壮,可直接成苗。[结论]不同植物激素对大花蕙兰丛生芽增殖和生长的影响不同,其最适宜培养基为MS+6-BA 3mg·L~(-1)+NAA 0.2mg·L~(-1)。     

大花蕙兰再生体系建立的研究

[目的]研究并建立大花蕙兰再生体系。[方法]用75%酒精和0.1%升汞进行表面灭菌,以MS为基本培养基,采用L9(33)正交试验设计进行类原球茎增殖的优选,以继代培养40 d后的增殖系数及幼苗分化率为考察指标。[结果]在大花蕙兰离体再生过程中,侧芽是最容易启动的外植体;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+AC 0.1 g/L是类原球茎诱导的最佳培养基;1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L是类原球茎增殖和幼苗分化的最适宜培养基;芽分化后,待长至2~3 cm时,小心切下接入1/2 MS+NAA 1.0 mg/L+GA31.0 mg/L+香蕉泥150 g/L培养基中生根壮苗效果最好。[结论]为规模化生产提供依据。     

伯乐树组织培养快繁技术研究

[目的]筛选伯乐树的最佳芽诱导、增殖生根培养基及炼苗基质。[方法]以伯乐树种子无菌萌发的胚芽为外植体，以MS为基本培养基，添加不同浓度的BA、IBA和NAA进行胚芽诱导培养；以不同浓度的琼脂、蔗糖、NAA、BA为因子作正交设计试验，进行继代增殖培养，并附加不同浓度的IBA和NAA进行生根培养。[结果]伯乐树芽诱导最佳培养基为MS＋BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L，出芽率最高，达71．34％，芽体高度为5．30cm；最佳增殖培养基为MS＋BA2．0mg／L＋NAA0．1mg／L＋琼脂1．0％＋蔗糖2．5％．胚芽增殖系数达3．6，芽体高度为3．1cm；最适宜的生根培养基为MS＋IBA3．0mg／L＋琼脂0．8％＋蔗糖3．0％，生根率达到89％；伯乐树试管苗的最适炼苗基质为蛭石25％＋珍珠25％＋河沙50％，移栽成活率可达65％。[结论]建立了伯乐树组织培养快速繁殖技术体系。     

外源激素对杂交兰组培快繁的效应

[目的]探讨杂交兰（Cymbidium hybridum×faberi）组培快繁技术,为杂交兰的工厂化生产提供技术支撑.[方法]以杂交兰茎尖和腋芽为外植体,调查不同激素与活性炭（AC）组合对原球茎诱导、增殖分化和生根培养的影响.[结果]6-BA是影响原球茎诱导的主要因素,IBA是影响原球茎增殖和分化的主要因素.原球茎诱导和增殖最适培养基为MS＋6-BA 1.0 mg/L＋IBA 0.5 mg/L＋AC 3.0 g/L＋3％蔗糖;MS＋6-BA 0.5 mg/L＋IBA 0.5 mg/L＋AC 3.0 g/L＋3％蔗糖最适于原球茎分化成苗;壮苗生根培养基为1/2MS＋ IBA 0.5 mg/L＋AC 1.0 g/L＋3％蔗糖＋0.5％琼脂.[结论]在MS基本培养基中,低量的6-BA、IBA对杂交兰原球茎诱导、增殖与分化、生根和移栽成活均有明显促进效应,原球茎不同生长阶段对AC的需求量不同.     

大花蕙兰原球茎的诱导、增殖及植株再生研究

从大花蕙兰(Cymbidium hybridum)试管苗取材,诱导原球茎,建立植株再生体系,分析了不同激素及其浓度对原球茎诱导、增殖和植株生根的影响.结果表明,不定芽比叶片更容易诱导出原球茎;生长素NAA对原球茎的诱导效果好于2,4-D,最适合原球茎诱导的激素组合为1.0 mg/L BA+1.0 mg/L NAA;原球茎增殖培养基中添加1.0 mg/L BA+0.5 mg/L NAA增殖效果较好,增殖系数可达7.90;最适生根培养基为1/2 MS+0.5 mg/L NAA+30 g/L蔗糖.     

接种密度、培养基中蔗糖和活性炭浓度对生物反应器内大花蕙兰原球茎增殖的影响

为了探明生物反应器内大花蕙兰原球茎增殖生长的影响因素,为大花蕙兰种苗生产中大量培养繁殖材料提供理论依据,以大花蕙兰茎尖诱导的原球茎为外植体,研究了接种量、蔗糖浓度、活性碳浓度对5 L气升式反应器内原球茎增殖和生长的影响。结果表明,大花蕙兰原球茎在5 L反应器内增殖时,接种量为20 g的处理原球茎鲜重显著优于10 g和30 g接种量处理;添加蔗糖30 g/L处理对大花蕙兰增殖生长有促进作用;活性炭浓度0.25 g/L处理原球茎的生长良好,高于0.25 g/L抑制原球茎的生长,增殖系数为7.5。利用5 L气升式生物反应器培养原球茎,接种量为20 g、蔗糖浓度为30 g/L、活性炭浓度为0.25 g/L时,大花蕙兰原球茎增殖较快,生长较好。     

白芨种子萌发及其原球茎高效增殖体系建立

[目的]筛选白芨原球茎诱导和增殖的最适培养基,建立白芨原球茎高效增殖体系,为白芨种苗工厂化组培生产提供技术支持.[方法]以白芨种子为外植体,筛选适宜其无菌萌发的灭菌方法;以MS或1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的植物生长物质和附加物,通过单因素试验,确定最佳光照和温度条件,筛选最适合其原球茎诱导的培养基;通过正交试验,筛选最适合其增殖的培养基.[结果]采用75%乙醇处理白芨蒴果10 min,无菌萌发率达90.0%,且种子萌发不受影响.在原球茎诱导过程中,30.0 μmol/m2·s光照强度和25 ℃温度环境有利于原球茎诱导;最适合原球茎诱导的培养基为1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA.在原球茎增殖过程中,添加土豆泥、椰子汁、香蕉泥等附加物对原球茎增殖有益,其中添加50.0 g/L土豆泥的增殖效果最佳.正交试验结果表明,原球茎增殖的最佳培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+50.0 g/L土豆泥,增殖倍数达5.270.[结论]建立的白芨原球茎高效增殖体系可在白芨种苗工厂化组培生产中推广应用.     

基于原球茎培养的白芨育苗技术研究

[目的]研究白芨原球茎增殖液体培养及原球茎直播育苗技术。[方法]通过正交试验筛选MS培养基浓度、马铃薯汁浓度及KT浓度,对原球茎增殖液体培养进行研究;通过单因素试验筛选原球茎直播育苗的播种基质。[结果]白芨原球茎增殖液体培养各因素的优势组合为MS+KT 1.0 mg/L+马铃薯汁120 g/L;白芨原球茎直播有比较优势的基质为腐殖土50%+碎木屑50%+NAA 0.5 mg/L+香蕉汁100 g/L。[结论]白芨原球茎增殖液体培养及原球茎播种育苗的技术路线在生产上具有可行性,该方法简化了培养程序。     

灰岩金线莲种子萌发与组培快繁技术研究

【目的】利用灰岩金线莲种子无菌播种进行组培苗生产,为其工厂化组培育苗提供参考。【方法】采用灰岩金线莲种子为外植体,以MS或1/2MS为基本培养基,探讨不同激素组合对外植体进行无菌播种、原球茎增殖、丛生芽分化及生根壮苗的影响。【结果】采用0.1%升汞处理灰岩金线莲蒴果20 min,灭菌率可达100%,且种子萌发不受影响。在种子萌发培养基中添加香蕉泥有利于种子萌发,最适合种子萌发的培养基为1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;在原球茎增殖培养中,低浓度的6-BA和NAA有利于灰岩金线莲原球茎增殖,最适合原球茎增殖的培养基为1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;丛生芽分化的最适培养为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭,原球茎分化丛生芽较多,生长势最佳;最适合灰岩金线莲生根壮苗的培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+2.0 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭。【结论】利用灰岩金线莲种子进行无菌播种,通过原球茎增殖和分化,可获得大量优质组培苗,是实现工厂化育苗的理想途径。     

金线莲原球茎的诱导与快速繁殖

[目的]寻求金线莲原球茎诱导、增殖、分化与生根的最佳培养基及影响原球茎增殖与分化的主要因子。[方法]以金线莲茎段为外植体,MS为基本培养基,附加不同浓度的6-BA、NAAT、DZ和S-3307,对原球茎的诱导、继代增殖、苗的分化、生根等进行研究。[结果]原球茎诱导的最佳培养基为MS+TDZ 0.4 mg/L+NAA 0.2 mg/L,诱导率达93.3%;原球茎增殖的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+S-33071.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,增殖系数达9.4;芽分化的最佳培养基为MS+S-33071.5 mg/L+TDZ 0.4 mg/L+NAA 1.5 mg/L+琼脂0.7%,分化率达91.7%;最佳的生根培养基为1/2 MS+NAA 0.2 mg/L+活性炭0.05%+琼脂0.7%,生根系数达4.4;组培苗移栽30 d后,存活率均达93%左右。[结论]S-3307是金线莲原球茎增殖的主要因子,TDZ是原球茎分化的主要因子。     

兰花种子的原球茎诱导及其生长分化研究

[目的]从培养基方面优化兰花快速繁殖的技术体系。[方法]将石斛兰和秋花独蒜兰的干种子培养于MS、B5、KC液体培养基上,诱导原球茎形成,再将原球茎培养于MS、KC及B5固体培养基中,研究原球茎分化苗在不同培养基上的生长发育情况。[结果]石斛兰和秋花独蒜兰种子在B5液体培养基中诱导产生的原球茎最多,萌发率分别为3.1%、7.3%。秋花独蒜兰原球茎在KC固体培养基上的成活率最高,为71.9%,且幼苗生长发育状况最好,原球茎直径为(5.8±0.3)mm;石斛兰原球茎在B5固体培养基上的成活率最高,为65.0%,在KC固体培养基上的生长发育状况最好,原球茎直径为(3.8±0.6)mm。[结论]根据不同的组培快繁目标,可在兰花的不同生长发育阶段选用合适的培养基。