鸭瘟病毒河南株gG基因的克隆、测序

鸭瘟是鸭的一种急性传染和高致死的病毒性疾病.根据GenBank收录中鸭瘟病毒gG基因序列设计并合成1对引物,以鸭瘟病毒河南分离株DNA为模板,PCR扩增出1条约1 600 bp的含gG基因特异性片段,并将其克隆至PMD19-T载体上.经酶切鉴定,得到含gG基因重组质粒,并对重组阳性质粒进行序列测定.结果表明,gG基因长...     

食品安全检测中的酶联免疫技术应用

酶联免疫技术(ELISA)是在免疫学和细胞工程学基础上发展的一种微量检测技术,具有操作简便、灵敏性高等优点,已在食品农药残留、重金属污染、食品添加剂检测等诸多方面表现出了独特的优势,在食品安全检测领域有着广阔的应用前景。分析酶联免疫技术的原理和方法,从生物毒素、药物残留、致病微生物、重金属污染和食品的品质等方面评述其在食品安全检测中的应用。     

解读酶联免疫（ELISA）法测定食品中玉米赤霉烯酮的影响因素

以酶联免疫（ELISA）法测定食品中玉米赤霉烯酮为例，通过对标本采集及其处理、测量前的物品准备、操作过程的影响因素、判读结果的分析等环节中注意事项的描述及分析，减少人为因素对实验的影响，提高检测的准确度。该文中部分内容在酶联免疫（ELISA）法测定食品中真菌毒素时是通用的，在食品卫生检测中会经常用到。     

小麦抗白粉病生化标记--过氧化物酶pⅠ 6.1酶带

采用等电聚焦凝胶电泳比较了抗、感白粉病小麦品种的过氧化物酶同工酶酶谱,发现抗、感品种之间的叶片过氧化物酶同工酶pⅠ6.1酶带(位于过氧化物酶同工酶等电聚焦凝胶电泳酶谱pⅠ6.1)在拔节期至白粉病发生期表现水平有很大差别.抗病品种中编码pⅠ6.1酶带的基因终生正常表达,该酶带在小麦全生育期均有较强的活性,染色后着色深,多属一级酶带.而该基因的表达在感病品种拔节之后受到抑制,酶带变得模糊不清甚至消失踪迹,多为三级、零级酶带.感染白粉病之后酶活性才回升,再度表现为一、二级酶带.为了探索造成这一差异的原因,比较了119株抗病品种与感品种杂交F2代和65株抗病品种/感病品种//感病品种的BC1代植株叶片过氧化物酶同工酶IEF酶谱,证明感病品种成株的pⅠ6.1酶带活性下降是因另一隐性基因所至.     

酶联免疫吸附测定(ELISA)需要注意的问题

由于酶联免疫吸附测定(ELISA)具有样品前处理简便、快速准确、所需仪器廉价等优点,已广泛应用于免疫学检验的各领域中。国家标准GB/T5009.111-2003、GB/T 5009.22-2003规定了ELISA方法作为粮食行业中呕吐毒素、黄曲霉毒素     

酶在果品加工中的应用与其固定化

介绍了果胶酶、柚苷酶、橙皮苷酶、葡萄糖氧化酶在果品加工中的应用,还对酶固定化的意义和方法等进行了简要阐述。     

小麦新、老种子活力与其酶关系的研究

以周麦18、百农AK 58两种小麦的新、老种子为试验材料,进行小麦发芽试验、老化处理和抗冻处理来了解两个品种新、老种子的活力情况;再通过测吸光值法对两品种新老种子的过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性进行测定.结果表明,同一品种小麦的新种子在3种条件下的发芽率明显大于其老种子;同一品种小麦的新种子的过氧化物酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶的活性明显大于其老种子,电泳图谱结果也与之一致.种子活力与种子内过氧化物酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶的活性成正相关.另外,从周麦18,百农K 58的相关数据和酶谱的对比,得知百农AK 58的种子活性及其稳定性明显优于周18.     

电化学酶传感器在有机磷农药残留检测中的应用

从识别有机磷农药的酶及识别机理、酶的固定化技术、酶固定化载体等不同角度,综述了有机磷农药电化学酶传感器的研究概况,并展望了其发展前景。     

H5N1亚型禽流感病毒神经氨酸酶基因的表达及纯化

参考GenBank上发表的H5亚型禽流感病毒(AIV)神经氨酸酶(NA)基因序列设计引物,PCR扩增NA基因,再将其克隆到原核表达载体pET-32a中,用E.coli BL21(DE3)原核表达,SDS-PAGE和Western-blot对表达蛋白进行鉴定.Western-blot结果表明,表达产物具有免疫学活性,蛋白的分子量约为61 kDa,位于包涵体中.包涵体经变性、复性处理,表达蛋白能与H5亚型AIV阳性血清发生特异性反应,具有良好的抗原性.ELISA检测结果表明,用此纯化蛋白作为包被抗原检测H5N1亚型AIV神经氨酸酶抗体具有良好的灵敏性.     

铝胁迫对小麦根呼吸作用和一些线粒体结合酶活性影响

比较了耐铝性不同的两品种小麦Altas66和Scout66根呼吸速率、线粒体H+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和焦磷酸酶活性变化.铝处理后,两品种小麦根呼吸速率均下降,随处理铝浓度增加而加剧,但对照和处理条件下,Altas66根呼吸速率均高于Scout66.两品种小麦根线粒体膜上都存在H+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和H+-PP酶,离体和活体铝处理后,这些酶活性受     

沙棘种子萌发期过氧化物酶活性检测

沙棘是一种生命力极强的灌木,一般生长在干燥、寒冷的贫瘠山区.沙棘果实和叶片中含有丰富的生物活性成分,是珍贵的药食两用植物资源.同时沙棘还对防止水土流失、改善生态环境,具有十分重要的作用.对沙棘进行高层次的综合开发利用具有重要意义.过氧化物酶(POD)作为植物细胞内保护酶系统的一种,与植物抵御极端温度、干旱、重金属胁迫、病害等各种不良环境有着密切的关系.本文研究了在不同pH、温度条传下,沙棘种子萌发期过氧化物酶的稳定性.结果表明,沙棘种子萌发期过氧化物酶的pH值稳定性和热稳定性都比较低,其作用最适pH值为6.2,最适温度为35℃.同时,实验还检测了底物浓度对沙棘种子萌发期过氧化物酶活性的影响,其最适底物浓度为0.06 mol/L.     

ELISA在苏云金杆菌杀虫蛋白毒素检测中的应用及新进展

苏云金杆菌是目前应用较广泛的生物杀虫细菌之一，其产生的杀虫蛋白毒素是主要的杀虫成分，目前对苏云金杆菌的毒力和杀虫蛋白毒素的检测主要采用生物测定、SDS-PAGE等方法，但这些方法的灵敏度较差。本文综述了酶联免疫吸附分析法在苏云金杆菌蛋白毒素检测中的应用，以及在检测中采用的ELISA的类型和基本原理，并对其应用前景进行了展望。     

荞麦过氧化物酶同工酶研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对毕节地区栽培荞麦(Fagopyrum Mill)23个收集系的过氧化物酶同工酶进行了研究.结果发现:过氧化物酶同工酶共12条酶带,其中甜荞(F.esculentum)有8条酶带,而苦莽(F.tataricum)有10条.酶谱分析和系统聚类表明:荞麦在种内存在一定的遗传差异,但这种差异明显小于种...     

玉米过氧化物酶酶谱编码与品种鉴别

基因蛋白质（酶）的合成、生物体间酶系统的差异在一定程度上反映了生物体之间遗传基础的差异。过氧化物酶广泛存在于植物体内,受不同结构基因的控制构成了过氧化物酶同工酶酶谱的多样性。根据过氧化物酶同工酶酶谱的差异可以判断玉米杂交种或自交系间遗传基础的相对差异。利用同工酶或电泳技术在水稻、小麦、玉米等农作物品种鉴别中的利用国内外已有报道,可是对于酶谱的描述则尽限于利用图谱、泳动率和仪器扫描图的分析,前者简便易行但不能显示出体现酶活性的酶带宽度。后者灵敏度高但存在着难以描述和根据这一指标恢复酶谱原形的问题。本研究的目的是通过过氧化物酶同工酶的酶谱编码达到方便酶谱比较和描述的目的。     

小麦胚和盾片中过氧化物酶同工酶与品种抗感白粉病的关系

对40个小麦、4个黑麦和2个小黑麦品种及品系的胚和盾片进行同工酶电泳分析,发现抗病和感病材料的过氧化物酶酶谱的主要差异在酶谱中部(B区).B区中一级酶带多,且在具有Rf0.50、0.56两条一级酶带的材料中,86%表现为抗白粉病.B区中一级酶带少的或缺少0.50、0.56带的材料中,91%感白粉病.因此认为用胚和盾片的过氧化物酶同工酶鉴定小麦对白粉病的抗性既简便易行,又具有较高的可靠性.     

生物过氧化氢酶研究进展

过氧化氢酶是一类广泛存在于动物、植物和微生物体内的末端氧化酶,其功能是催化细胞内过氧化氢分解,防止膜脂过氧化,在论述过氧化氢酶类型划分,结构特点基础上,对CAT在农业及其相关食品与乳制品业、纸浆和造纸业、以及农业环保上的应用等进行了介绍。     

离子注入对小麦三叶期3种保护酶活性的影响

以鉴54、豫农118及豫麦18号为材料,研究了不同剂量率、剂量离子注入对小麦三叶期过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)及超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响.结果发现:离子注入后小麦三叶期的幼苗叶片中CAT和POD的酶活性一直高于对照,而SOD在低剂量条件下酶活高于对照,在剂量大于5.6×1017 N /cm2时酶活性低于对照.随着剂量的增加,酶活性变化趋势为先升后降,且有一定的波动性.不同剂量率间酶活有一定差异,品种间有辐射敏感性差异.     

磁性固定化漆酶在苹果汁除酚中的应用

以磁性聚苯乙烯微球为载体,戊二醛为交联剂,制备出了磁性固定化漆酶.研究表明,固定化漆酶的Km值较游离漆酶小,最适温度与游离漆酶相同,最适pH较游离漆酶下降0.4个单位,热稳定性、pH稳定性和贮存稳定性均较游离漆酶有所提高.     

超声对酶解反应的影响

超声对酶解反应的影响与超声时间、温度、功率、频率等因素有关,适宜的超声可提高酶解反应速度,提高酶的活性,而施加超声时间过长、功率过大、超声的频率不合适等则会降低酶解反应速度甚至使酶失活。     

菘蓝试管苗玻璃化过程中抗氧化物酶活性的变化

为明确植物体内抗氧化酶活性变化与组培玻璃苗发生的关系,以菘蓝(Isatis indigotica Fort.)正常试管苗和玻璃苗为研究材料,对其抗氧化物酶活性和膜脂质过氧化水平进行了比较分析.结果表明:正常苗和玻璃苗中过氧化物酶(POD)活性随培养时间的延长先降低后升高,过氧化氢酶(CAT)活性先升高后降低,过氧化物歧化酶(SoD)活性和丙二醛(MDA)含量始终呈上升趋势.同一培养时期,玻璃苗中CAT、SOD活性均低于正常苗,而MDA水平远远高于正常苗.表明组培过程中有氧自由基的胁迫,而玻璃苗细胞内保护酶的调节功能紊乱,从而发生了更严重的脂质过氧化.此外,与正常苗相比,玻璃苗中POD同工酶电泳谱带出现增加、缺失等异常现象,表明玻璃苗中酶的表达失常,遗传稳定性改变.