链格孢属真菌微机鉴定系统的组建和应用

选取在PCA培养基上的36个编码性状,利用系统聚类分析的平均连锁法,建立了以中国的23种链格孢属(Alternaria)、1种单隔孢属(Ulocladium)和1种葡柄霉属(Stemphylium)真菌为基础的电子计算机鉴定系统。用这个系统对多花黑麦草(Lolium multiflorum)上的1个未知菌株(Alternaria sp.1)和苹果(Malus asiatica)上的3个未知菌株(Altermaria sp.2,Alternaria sp.3,Alternaria sp.4)进行鉴定的结果表明,A.sp.2为A.tenuis,A.sp.3为A.tenuissima,A.sp.1和A.sp.4为不同于上述23种链格孢的2个种。证明此鉴定系统具备比较、鉴定性能。     

重庆地区蚕豆叶部链格孢菌的鉴定及其生物学特性研究

[目的]对重庆地区危害蚕豆叶部的链格孢菌进行鉴定,并对其生物学特性进行研究。[方法]从重庆市分离得到蚕豆叶部链格孢属真菌16株,对其中代表性的2株进行形态学观察、分子鉴定和致病性测定,并对该病原菌的生物学特性进行研究。[结果]根据ITS和EF 2个基因序列的比对,明确2株菌分别属于链格孢(Alternaria alternata)和细极链格孢(Alternaria tenuissima)。2株病原菌菌丝在PDA培养基上生长最适温度为28℃,最适p H为7。[结论]该研究为重庆蚕豆链格孢病害研究提供参考。     

一株来自红树内生拮抗真菌的鉴定

红树内生真菌在病害的生物防治方面有重要作用。本研究从秋茄的叶片和茎部共分离获得15株内生真菌,经对峙培养试验,有61.54%的菌株对目标病原菌蓖麻枯萎病菌有拮抗作用,其中从叶片组织中分离的内生真菌菌株MKA-5作用最明显。经形态学研究显示,该菌株菌落浅灰色至深灰黑色。分生孢子暗褐色,倒棒形或椭圆形,多数无喙,有纵横隔膜,分隔处溢缩,壁光滑,大小为7.0-18.5×3.0-8.8 μm,形态特征与链格孢 (Alternaria alternata)一致。进一步对该菌株的分子生物学研究,结果表明该菌株的ITS系列与链格孢模式菌株的同源性为100%。综合分析,拮抗菌株MKA-5鉴定为链格孢(A. alternata)。该菌株的鉴定对蓖麻枯萎病的生物防治有重要作用。     

一株纤维素降解菌的筛选与鉴定

从落叶覆盖的腐殖层土壤中富集、分离得到12株纤维素降解菌,从中筛选出一株高效降解菌(X10),研究其最适宜的培养条件为:配制以葡萄糖+微晶纤维素(1∶1)为碳源、以蛋白胨+牛肉膏(1∶1)为氮源的培养基,pH值7.5,30℃下培养40 h,测得纤维素降解酶酶活可达到67.44 U。通过对其16s rRNA测序鉴定,该菌与氧化微杆菌(Microbacterium oxydans)有99%的同源性。纤维素降解菌的选育可为高效生产纤维素酶提供新的菌种来源。     

烟草木质素降解菌的筛选及在烟草中的应用

 采用木质素含量较高的烟梗为筛选材料,分离筛选到一株具有降烟草木质素功能的真菌,并测定了该菌的产酶活性、代谢物中挥发性成分及粗酶液在烟草快速陈化中的作用。结果表明：（1）该菌在15 d可产生最高酶活 1 920 U/L;（2）发酵液中挥发性成分主要为倍半萜烯醇、萜烯醇类烟草本香成分;（3）经膜过滤后的粗酶液在烟草快速陈化过程中降低烟草木质素含量达8%以上,可降低烟叶呛咳和刺激性,提高抽吸品质。     

金银花中产绿原酸内生真菌的分离与鉴定

以不同产区金银花的不同部位为材料,采用组织块法对金银花内生真菌进行分离鉴定,并结合TLC法和HPLC法对菌株发酵液进行定性分析.结果表明,共分离得到内生真菌80株,分属于5目、5科、10属,筛选出3株产绿原酸的菌株,均属于链格孢属.金银花中存在着丰富的内生真菌,不同产区及不同部位间内生真菌的种类和数量均存在差异,河南新密产绿原酸活性菌株较多.     

不同碳源条件下链格孢菌培养特征的差异

利用不同的碳源培养基培养链格孢属真菌的7个种,观察7种链格孢菌的培养特征的差异,对其差异性进行分析研究,找出培养特征差异的规律,为链格孢属真菌的分类鉴定寻找新的途径。     

来自六堡茶的3株散囊菌属真菌对烟草的发酵效果分析

[目的]研究来自六堡茶的3株散囊菌属真菌对烟草梗丝的发酵效果,为散囊菌属真菌在烟草中的应用提供参考依据.[方法]分析从六堡茶中筛选得到的3株散囊菌属真菌Aspergillus chevalieri E2(简写E2)、Aspergillus cheva-lieri E3(简写E3)和Aspergillus cristatus E6(简写E6)在自制烟梗粉液体培养基中的发酵情况,采用DNS法测定果胶酶、纤维素酶和淀粉酶活力及总糖和还原糖含量,茚三酮比色法测定氨基酸含量,普鲁士蓝法测定总抗氧化能力,DPPH·降解法测定自由基清除能力.[结果]3株真菌在烟梗粉液体培养基中均能很好生长,在其表面形成金色有性子囊果结构,产生香气;且在此培养基中3株真菌均能产果胶酶、纤维素酶和淀粉酶,3种酶的最高活力约5.00、1.10和0.50 U/mL,其中E2的产酶速度不及另外两株真菌.与未发酵的对照相比,发酵上清液的还原糖含量均有大幅提升,其中E2提高了289.18%,达31.64 mg/mL;E2、E3和E6总糖含量极显著降低(P<0.01,下同),分别是对照的83.71%、60.03%和70.37%,发酵液的还原糖与总糖比例均接近1:1,而对照的还原糖含量为总糖含量的20.83%;E3和E6发酵液的氨基酸含量显著减少(P<0.05),分别为对照的82.71%和82.12%;总抗氧化能力无明显变化,但E2和E3发酵液的DPPH·清除能力极显著增强,分别提升了14.71%和21.26%.[结论]来自六堡茶的散囊菌属真菌在烟梗粉液体培养基中能大量生长,具有产糖水解酶特性和清除自由基能力,在改善烟制品方面有一定应用潜力.     

应用化学指标表征红大品种烟叶的品质特征

[目的]探讨一种全面、完善地应用烟叶化学指标表征其品质特征的方法.[方法]以红大、K326、云87等5种具有代表性的烤烟品种的C3F烟叶为材料,对烤烟的评吸结果、常规指标、致香成分、有机酸等指标进行比较分析.[结果]红大烟叶清甜韵好,香气量充足;在常规指标中表现为烟碱、总糖、还原糖、pH高于其他品种;在致香成分中表现为直链脂肪酸及酯高于其他品种烟叶;在有机酸中表现为异戊酸、2-甲基丁酸、十六酸、苯甲酸含量高于其他品种烟叶.[结论]研究可为应用化学指标表征红大品种烟叶的品质特征提供理论及试验依据.     

复烤温度对西南清香型烟叶质量的影响

研究了复烤温度(80、85、90℃)对云南和四川烟区中、上部清香型烟叶的常规化学成分、致香成分和感官评吸的影响。结果表明:随着复烤温度升高,中部烟和B2F的总糖和还原糖含量升高,中部烟的糖碱比升高,复烤温度对烟叶总植物碱、总氮和氮碱比的影响较小;复烤温度在80~85℃时,烟叶致香成分中的质体色素降解产物、美拉德反应产物和西柏烷类物质的含量较高,烟叶香气质、香气量、刺激性、杂气、余味及香韵等方面有较好的表现,中上部烟叶的复烤温度控制在80~85℃为宜。     

一株抗多杀性巴氏杆菌的白花泡桐内生真菌的分离和鉴定

采用组织分离法从药用植物白花泡桐叶中分离内生真菌,以动物病源菌多杀性巴氏杆菌C48-3、C51-3和X-73为指示菌种对分离到的7株内生真菌进行了抗菌活性筛选,采用形态特性观察及ITS-rRNA序列分析对具有抗菌活性菌株JSD-8进行鉴定。抑菌试验结果显示,JSD-8菌株对多杀性巴氏杆菌C48-3、C51-3和X-73均具有较强的抗菌活性,其抑菌活性成分值得进一步研究。通过形态特性观察及ITS-rRNA序列分析,将JSD-8鉴定为串珠状赤霉菌。     

一株产纤维素酶真菌的筛选、鉴定及降解效果

从东北地区自然环境中采集不同区域腐殖质样品,筛选分离得到1株产纤维素酶的真菌C5,经形态学、生理生化特征试验,结合18S rDNA基因序列分析及扫描电镜分析鉴定该菌为斜卧青霉（Penicillium decumbens）,对其产酶能力及其对秸秆降解效果的研究结果表明:真菌C5具有较全的纤维素酶系和较高的纤维素酶活力,对...     

烟草叶片多酚氧化酶的提取及其特性研究

影响烟叶颜色和香味的多酚氧化酶，自新鲜烟叶中提取后，经（ＮＨ４）２ＳＯ４沉淀透析酶活性增高到５．６倍，该酶催化且氧化邻位二元酚和三元酚化合物，但不氧化一元酚，在４０℃以下时，酶活性经２０ｍｉｎ才出现较弱的活性高峰，但持续时间较长；５５℃以上时，酶活性被迅速激活，出现强的活性高峰后迅速下降，持续时间很短，ＰＨ为６时，酶的活性最高，在偏碱条件下，酶活性下降快，增加Ｃｕ＾２＋浓度能增强酶活性，ＥＤＴＡ，     

超临界流体萃取技术及其在烟草研究中的应用

对超临界流体萃取的原理、过程、特点进行了详细的叙述；综述了超临界流体技术在烟草、香精等分析中的发展及应用，指出该技术仍在不断发展、完善，在烟草领域中有广泛的应用前景。     

万寿菊内生真菌WZ2菌株形态鉴定及生物学特性

万寿菊(Tagetes erecta)植株含有噻吩类、萜类、醇类、酮类等具抗植物病虫活性的化合物。从抗病植物中分离内生真菌,进而获得抗病虫活性化合物已成为生物防治的研究热点之一。试验对分离自万寿菊种子中的1株内生真菌WZ2菌株进行形态鉴定,并测定其生物学特性。经显微形态观察发现分生孢子盘褐色,椭圆形或近圆形,(94.9~299.8)μm×(75.4~217.9)μm;刚毛淡褐色,直立,有隔膜,(158.8~174.9)μm×(8.4~9.7)μm;分生孢子淡褐色,椭圆形或近圆形,(8.8~14.8)μm×(7.4~8.8)μm。将其初步鉴定为炭疽菌属的一种(Colletotrichum sp.)。生物学特性测定结果表明最适合其菌丝生长的培养条件为查氏培养基和胡萝卜琼脂培养基;麦芽糖为碳源、酵母膏为氮源、25~30℃、p H 10、全光照,其中,适合产孢的培养基为查氏培养基的氮源硝酸钠替换为酵母膏。     

一株产纤维素酶真菌Mucor amphibiorum RSC1的分离鉴定及其产酶培养基的初步优化

[目的]对一株产纤维素酶真菌进行分离鉴定,以期为产纤维素酶菌株种类的丰富提供试验依据。[方法]通过刚果红平板染色法初筛和摇瓶发酵产酶复筛从农田稻草堆的土壤中筛选出可产纤维素酶的真菌菌株,并对其发酵产酶培养基进行了单因素试验优化,同时对该菌进行了形态学和18S rRNA分子生物学鉴定。[结果]分离得到的菌株为1株产纤维素酶丝状真菌RSC1,发酵产酶培养基优化结果显示,培养基中含1.3%CMC-Na,0.1%酵母膏和0.1%MgSO4时其产酶活性最高。对该菌进行的形态学和分子生物学鉴定结果表明,丝状真菌RSC1与毛霉属真菌Mucor amphibiorum相似度为97%,故将该丝状真菌命名为Mucor amphibiorum RSC1。[结论]该研究鉴定了所分离纯化的菌株为Mucor amphibiorum RSC1,该结果为产纤维素酶菌株种类的丰富奠定了基础。     

拮抗链霉菌NW136菌株鉴定及其对番茄灰霉病等真菌病害的控制效果

从陕北地区的土壤放线菌样品中分离到一株链霉菌NW136。该菌株的形态特征、培养特征、生理生化特征与已报道的近似种不同,而与微白链霉菌相似。室内和田间试验表明,它所产生的抗生素对番茄灰霉病等具有良好的防治效果。     

烤烟根际土壤产普鲁兰酶菌株的分离鉴定及产酶活性

通过以支链淀粉为碳源的初筛分离培养和以普鲁兰糖为惟一碳源的鉴别复筛,从浓香型烤烟根际土壤中分离到一株具有产普鲁兰酶活性的菌株,编号为CLM2。通过形态特征、生化特性和16S r DNA序列分析及系统发育进化树的构建,确定CLM2隶属于芽孢杆菌属(Bacillus),暂命名为Bacillus sp.CLM2。在以玉米淀粉为碳源、35℃、180 r/min条件下的发酵历程中,发酵54 h时普鲁兰酶活力达到最大值,为4.3 U/m L。     

一种来源于葡萄叶片的真菌(Quambalaria cyanescens)的鉴定及培养特性

【目的】研究一株来源于新疆吐鲁番市葡萄病叶上真菌的种类及分类地位。【方法】观察菌株的培养性状,测量初生分生孢子和次生分生孢子的大小,基于ITS、LSU基因片段采用最大简约法、最大似然法和贝叶斯法构建系统发育树;将该纯化菌株活化培养至不同培养基种类、光照条件、pH值和培养温度等4个因素的不同水平下培养,混合正交试验,分析最适生长条件。【结果】培养基种类、光照条件、pH值和培养温度等4个因素的交互作用对菌株Pt4-1菌落生长具有显著影响,菌株Pt4-1在PDA、SDA培养基上较CMA培养基生长更快,菌株在 SDA培养基、半光照、pH5、温度25 ℃条件下的生长速率最大,平均生长速率为2.29 cm/d;菌株Pt4-1在CMA培养基、半光照、pH 5、温度25 ℃条件下的生长速率最小,平均生长速率为0.55 cm/d。【结论】菌株Pt4-1为蓝色刺孢霉Quambalaria cyanescens;菌株Pt4-1在不同培养条件下菌落形态不同,在PDA、SDA培养基上生长良好,可分泌紫色色素,在CMA培养基上生长但不分泌色素;随着培养温度的升高,色素分泌减少。