以水稻白叶枯病原菌培养过滤液离体筛选再生植株后代的抗病性研究

用人工接种方法,从水稻感病品种青二矮和桂朝二号体细胞组织培养再生植株后代(R2)中,筛选抗白叶枯病变异株系。测试932个株系,发现12个有抗性变异,其中7个整个株系的植株表现一致抗病,另5个则有抗感分离。在有抗性变异的12个株系中,6个是从含白叶枯病原菌培养过滤液培养基培养得来的327个无性系中筛选出来的;另6个是从来源于不含病原菌培养过滤液培养基培养的605个无性系中产生。变异率分别为1.83%和0.99%。经测定W1和W78两株系R2扰病变异植株,在R3、R4均抗病。它们的抗性与原种及感病对照品种金刚30的抗性达极显著差异,与抗病对照品种IR26属同一水平。     

几种麦田杂草的离体植株再生研究

通过组织培养方法对麦田８种杂草的离体植株再生能力进行了诱导与观察。结果表明，从看麦娘幼穗愈伤组织上可产生较高频率的再生植株；从日本看麦娘、繁缕、硬草、地肤的外植体上仅诱导出非胚性愈伤组织；而从猪殃殃、婆婆纳的各种外植体上均不能诱导出愈伤组织。说明基因型外植体发育状态及培养基中的激素成分对愈伤组织诱导与植株分化有着复杂的影响。其中，选用出愈潜势高的外植体，有助于离体植株再生。     

抗白叶枯病菌水稻体细胞无性变异系离体筛选后代的生理生化特性

 对离体筛选的抗白叶枯病的粳稻105R、粳稻3037R后代植株功能叶的生理生化特性进行测定,结果表明:与未筛选的粳稻105S、粳稻3037S相比,筛选后代植株中可溶性蛋白质含量低,而酚类物质和木质素含量、过氧化物酶(PO)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性均明显高于未经筛选的对照(感病)品种。由此说明离体筛选抗病品系的抗病机制与一般抗性品种类似。     

抗白叶枯病菌水稻体细胞无性变异系离体筛选后代的生理生化特性

 对离体筛选的抗白叶枯病的粳稻105R、粳稻3037R后代植株功能叶的生理生化特性进行测定,结果表明:与未筛选的粳稻105S、粳稻3037S相比,筛选后代植株中可溶性蛋白质含量低,而酚类物质和木质素含量、过氧化物酶(PO)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性均明显高于未经筛选的对照(感病)品种。由此说明离体筛选抗病品系的抗病机制与一般抗性品种类似。     

水稻白叶枯病菌在离体培养条件下生物膜形成的检测

分析了不同培养和测试条件(塑料和玻璃表面、培养时间、培养温度和培养基)对水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae,Xoo)生物膜形成的影响,并测定了不同地区来源的Xoo野生型菌株、基因缺失突变体的生物膜形成。结果表明,在聚苯乙烯表面生长、用M210培养基在23 ℃下静止培养24 h是Xoo生物膜形成比较适宜的条件;不同地区来源的菌株生物膜形成能力不同;鞭毛相关基因fleQxoo、fliExoo和rbfCxoo以及H2O2降解调控基因oxyRxoo的缺失突变均影响生物膜形成。     

应用组织培养技术离体筛选枸杞抗根腐病变异体的研究

 用宁夏枸杞-宁杞1号的髓组织进行离体培养,诱导产生胚性愈伤组织,并用⁶⁰Co-γ射线进行诱变,以枸杞根腐菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum Schlecht)菌株产生的培养滤液为选择剂,筛选抗性变异体,在含毒素60%的条件下,一次性获得抗根腐病毒素的愈伤组织,抗性愈伤组织经稳定性分析,其抗性稳定。抗性愈伤组织在含30%的毒素培养基中可分化成再生植株,共获得25株,其叶片经用根腐菌分生孢子液接种鉴定,有6株抗病;再生植株经过脯氨酸、叶绿素含量分析,二者含量都有所提高;经过过氧化物同工酶酶谱分析,抗性再生植株酶谱带数有增加;说明经筛选得到的抗性再生植株是抗根腐病的变异体。     

离体黑果枸杞再生途径的研究

以黑果枸杞的叶片和茎段为外植体,采用MS为基本培养基,研究激素对经历愈伤组织诱导、丛生芽诱导以及叶片直接诱导小植株再生途径的影响。实验结果表明,诱导茎段、叶片形成愈伤组织的适宜培养基分别为MS+2,4-D0.3 mg·L~(-1)、MS+2,4-D0.4 mg·L~(-1),其诱导率均为100%;诱导茎段、愈伤组织分化形成丛生芽的适宜培养基分别为MS+6-BA0.2 mg·L~(-1)+KT0.1 mg·L~(-1)、MS+6-BA0.5 mg·L~(-1),而愈伤组织分化出的丛生芽均发生玻璃化现象,其增殖系数分别为32.3倍、47.1倍;诱导叶片分化形成植株的适宜培养基为MS+NAA0.01 mg·L~(-1),其再生植株诱导率为33.3%。结论:黑果枸杞再生能力强,以上途径均能形成再生植株,其最佳的离体繁殖途径为茎段诱导丛生芽形成再生植株。     

应用稻苗离体叶片法筛选水稻纹枯病新农药活性的研究

采用水稻离体叶片法测定了农药对水稻纹枯病的活性。结果表明,该法与“植株法”比较有很好的相关性,具有占用空间小、温湿度容易控制、快速、准确等优点,适合于大量化合物的筛选试验。     

水稻白叶枯病菌毒素对水稻不育系珍汕97A的专化毒性

采用乙酸乙酯法提取对珍汕９７不育胞质具有专化毒性的白叶枯病菌ＡＨ２８、ＧＸ５０和非专化毒性的ＯＳ１４菌株的毒素。以不同浓度的毒素处理珍汕９７不育系和保持系的种子或幼苗,可引起水稻叶片褪绿和细胞坏死,产生与接种病菌相似的症状,在蚕豆叶片上形成过敏性坏死斑;毒素可导致水稻幼苗萎蔫、胚根胚芽生长受抑和根冠细胞死亡;毒素的毒性与毒素浓度和产毒素菌株的致病力成正比;专化性毒素ＡＴ对珍汕９７不育系的毒害程度显著高于对保持系的毒害。     

应用免疫金探针定位和定量测定稻种中的水稻细菌性条斑病菌

 本文首次报道用免疫金染色和免疫金银染色对水稻细菌性条斑病病种的带菌部位及带菌量的研究。结果表明:病原细菌分布于谷壳、籽实皮、胚和胚乳,主要集中在谷壳上。谷壳外表带菌量多于内表面。籽实皮外表面由于受谷壳污染较之内表面的带菌量多。籽实皮内表面、胚和胚乳的带菌量均较少,差异不显著。谷壳、谷壳内表面、籽实皮、胚乳(或胚)的带菌量之比为36:13:9:1。     

水稻白叶枯病菌毒素对水稻不育系珍汕97A的专化毒性

 采用乙酸乙酯法提取对珍汕97不育胞质具有专化毒性的白叶枯病菌AH28、GX50和非专化毒性的OS14菌株的毒素。以不同浓度的毒素处理珍汕97不育系和保持系的种子或幼苗,可引起水稻叶片褪绿和细胞坏死,产生与接种病菌相似的症状,在蚕豆叶片上形成过敏性坏死斑;毒素可导致水稻幼苗萎蔫、胚根胚芽生长受抑和根冠细胞死亡;毒素的毒性与毒素浓度和产毒素菌株的致病力成正比;专化性毒素AT对珍汕97不育系的毒害程度显著高于对保持系的毒害。