花叶金线莲茎段诱导植株再生培养技术研究

以花叶金线莲茎段为外植体,采用正交设计,探讨基本培养基(MS、B_5、改良MS)、植物生长调节剂(TDZ、6-BA、KT、IBA)等对其茎段诱导、增殖及生根等关键环节的影响,以期建立花叶金线莲茎段诱导植株再生培养技术。结果表明:各试验因素对花叶金线莲茎段诱导丛生芽影响的主次关系为基本培养基KT6-BATDZ;筛选出适宜的增殖培养基配方为改良MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+KT 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+白糖30.0g·L~(-1)+琼脂粉3.0g·L~(-1)+卡拉胶3.0g·L~(-1),60d平均增殖系数达4.58;筛选出适宜生根的培养基配方为改良MS+IBA 0.3mg·L~(-1)+活性炭0.5g·L~(-1)+白糖20g·L~(-1)+琼脂粉3.6g·L~(-1)+卡拉胶3.6g·L~(-1),培养60d,生根率为100.0%。     

观赏水草雪花草的离体培养与快速繁殖

为了促进雪花草的工厂化育苗,以雪花草幼嫩的枝条为外植体,建立了快速无性繁殖体系。结果表明:不定芽诱导增殖培养基最佳配方为改良MS培养基+6-BA2.0mg·L~(-1)+IBA0.1mg·L~(-1)+GA1.5mg·L~(-1);生根培养基配方为改良的MS培养基+NAA 1.0mg·L~(-1)+6-BA 0.1mg·L~(-1)。该离体培养方法能提高雪花的繁殖系数,有效缓解当前种苗不足和缩短上市时间,满足市场需求。     

垂枝樱花组培技术研究

为了建立更高效的垂枝樱花的组织快繁体系,以垂枝樱花的当年生带腋芽茎段为外植体,进行了外植体的灭菌、启动、增殖和生根培养,探讨了适宜的外植体灭菌方法与程序,不同培养基配方对启动、增殖、生根培养效果的影响。结果表明:适宜的表面灭菌方法为75%乙醇浸泡30s,0.1%的HgCl2浸泡10min,最后无菌水冲洗5遍,成活率达66.7%;较适宜的启动培养基为1/2 MS+6-BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1),分化达68.3%;适宜的增殖培养基为:MS+6-BA 0.3mg·L~(-1)+NAA 0.05mg·L~(-1)+GA310mg·L~(-1),增殖系数为7.0,平均苗高2.9cm;适宜的生根培养基为:1/2 MS+NAA 1.0mg·L~(-1)+IBA 0.5mg·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),生根率达93%。     

蝴蝶兰“大辣椒”组织培养与快速繁殖

采用蝴蝶兰品种"大辣椒"幼嫩花梗作为试验材料,通过正交试验设计研究基本培养基、植物生长调节剂成分及含量对花梗不定芽的诱导、增殖、分化、生根的影响。结果表明,不定芽诱导的最佳培养基为:花宝一号+NAA 0.3mg·L~(-1)+6-BA 5mg·L~(-1);不定芽增殖和分化的最佳培养基为:花宝一号+NAA 0.2mg·L~(-1)+6-BA6mg·L~(-1),增殖系数最高达到5.53倍;最佳的壮苗和生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg·L~(-1),生根率为96%,椰子汁、苹果汁、土豆汁作为复合添加物对生根较为有利;组培生根苗移栽成活率在91.5%以上。     

樱桃砧木吉塞拉7号茎尖快繁技术

本试验研究不同浓度激素配比对吉塞拉7号茎尖培养的影响。取春季一年生的新梢做外植体,剥取幼嫩茎尖,接种到不同配方的诱导培养基上,生长30 d左右,转移到增殖培养基上。结果表明,茎尖成活率最高的培养基是MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+IBA 0.1 mg·L~(-1),成活率达90.0%;最佳增殖培养基为MS+6-BA1.0 mg·L~(-1)+IBA 0.1 mg·L~(-1)+GA_3 0.1 mg·L~(-1),增殖系数达3.9;生根率最高的培养基为1/2MS+IBA0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.5 mg·L~(-1)+Ac 0.5 mg·L~(-1),培养30 d左右,生根率达89%,平均每株生根4.3条;最佳移栽基质是蛭石,成活率达95.7%。     

铁皮石斛茎段原球茎的诱导、分化与植株再生

为建立铁皮石斛Dendrobium officinale茎段原球茎途径的快繁技术体系,以带腋芽的无菌茎段为材料,利用正交试验的方法,研究基本培养基、植物生长调节剂、蔗糖质量浓度和添加物对原球茎的诱导、增殖与分化和生根的影响。结果表明,原球茎诱导的最佳培养基为1/2MS+6-BA4mg·L~(-1)+NAA0.1mg·L~(-1);原球茎增殖与分化的最佳培养基分别为MS+蔗糖30g·L~(-1)和1/2MS+蔗糖10g·L~(-1)+马铃薯泥10%;生根的最佳培养基为1/2MS+NAA1mg·L~(-1)+马铃薯泥10%+香蕉泥10%,成功建立了铁皮石斛茎段从原球茎诱导到植株再生的组培技术体系。     

小果型西瓜快速繁殖技术研究

为建立小果型西瓜组织培养快速繁殖方法,对小果型西瓜重要种质材料的保存扩繁提供技术支持。以小果型西瓜为材料、MS培养基为基本培养基,通过不同种类和浓度的植物生长调节剂配比试验,筛选小果型西瓜快速繁殖与生根的最佳培养基组成。结果表明:子叶苗茎尖丛生芽诱导培养基MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)效果较好,试管苗继代增殖最适培养基为MS+6-BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1),诱导试管苗生根的最适培养基为1/2 MS+IBA 0.3mg·L~(-1)。     

海州常山叶片愈伤组织诱导及不定芽再生

为获得海州常山愈伤组织和不定芽,以海州常山叶片作为外植体,研究了不同消毒方法、培养基种类、培养条件和植物生长调节剂配方对海州常山叶片愈伤组织诱导和不定芽再生的影响。研究结果表明:海州常山叶片灭菌最适方法为75%酒精处理30 s,再用0.1%Hg Cl2溶液处理5 min;暗培养有助于愈伤组织的诱导;愈伤组织诱导的最适培养基为MS+6-BA 0.50 mg·L~(-1)+NAA 0.10 mg·L~(-1),诱导率最高达66.67%;愈伤组织最适增殖培养基为MS+6-BA 0.50 mg·L~(-1)+NAA 0.05 mg·L~(-1),愈伤组织平均大小达21.76 mm;最佳分化培养基为MS+6-BA 0.50 mg·L~(-1)+NAA 0.01 mg·L~(-1),分化率为13.33%。     

哈路比葡萄柚茎段的组培快速繁殖

以成年态葡萄柚的茎段为材料,研究不同激素组合、基本培养基对丛生芽增殖的影响,以及再生苗生根、炼苗与移栽技术。结果表明:(1)WPM+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.2mg·L~(-1)+蔗糖40g·L~(-1)为初代培养的最佳培养基,腋芽诱导率达78.33%;(2)继代增殖的最适培养基为WPM+6-BA 0.75mg·L~(-1)+NAA0.2mg·L~(-1)+蔗糖40g·L~(-1),增殖系数达4.93,芽长达2.62cm;(3)培养基1/2WPM+NAA 0.1mg·L~(-1)+IBA 1.0mg·L~(-1)+蔗糖40g·L-1+AC 0.1%的生根效果最好,生根率达63.33%,株高3.03cm,根粗壮;(4)生根苗移栽成活率达78%以上。     

素心建兰无菌播种快繁技术研究

以素心建兰种子为外植体,通过基本培养基(1/2MS、花宝1号、改良MS)、植物激素(6-BA、TDZ、NAA)等关键因子对素心建兰种子萌发、根状茎增殖、分化等各培养阶段影响的试验,探讨了素心建兰无菌播种快繁关键技术。结果表明:种子无菌萌发较适宜的培养基配方为1/2MS+6-BA3.0 mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1)+水解乳蛋白2.0g·L~(-1)+活性碳1.0g·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1);根状茎较适宜的增殖培养基配方为改良1号+TDZ 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1)+活性碳0.5g·L~(-1)+白糖30g·L~(-1),45d增殖系数高达7.3;根状茎接种于改良1号+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+白糖30g·L~(-1)培养基上分化培养45d后,再转入1/2MS+IBA 0.5mg·L~(-1)+活性碳0.5g·L~(-1)+白糖20g·L~(-1)培养基上培养60d,可诱导形成完整植株,芽分化率为86.3%,生根率为100.0%。     

紫苏组织培养与快速繁殖

以栽培紫苏为材料,通过对其离体茎段的组织培养,建立了诱导、分化、增殖、生根等一整套离体快繁体系。研究结果表明,紫苏茎段外植体较好的灭菌方法为:75%酒精30s+0.1%HgCl210min;茎段外植体初代培养的适宜培养基为MS+2mg.L-1 6-BA+0.5mg.L-1 NAA;继代及增殖培养以6-BA 2mg.L-1与NAA0.1mg.L-1配比时效果较好;试管苗生根培养的最适宜培养基是1/2MS基本培养基附加0.2mg.L-1 NAA。     

宿根婆婆纳‘达尔文之蓝’的组培脱毒和快繁技术

将供试品种的带茎尖和腋芽的茎段,用70%酒精浸泡30 s,然后用20%的次氯酸钠溶液浸泡30 min,无菌水冲洗4次,消毒处理后剥取0.1~0.3 mm的茎尖,接种于以MS为基本培养基添加6-BA、IAA、NAA等外源激素的培养基中,研究了不同条件对愈伤组织诱导芽形成和芽继代增殖、生根和移栽效果的影响。结果表明,以MS为基本培养基,添加6-BA 1.0 mg·L-1和IAA0.5 mg·L-1为较适宜的外植体诱导愈伤组织和愈伤组织诱导芽的培养基。最佳继代增殖培养基为6-BA2.0 mg·L-1和NAA0.1 mg·L-1。最佳生根培养基为1/2MS添加NAA0.2 mg·L-1和IAA1.0 mg·L-1。25 d后,组培苗移栽成活率达到98%以上。     

玉竹愈伤组织诱导及其细胞悬浮培养体系的建立

以玉竹叶片和根状茎为外植体,研究植物生长调节剂、碳源和pH对玉竹愈伤组织诱导的影响以及植物生长调节剂对愈伤组织增殖的影响,通过正交试验初步建立并优化玉竹愈伤细胞的悬浮培养体系。结果表明,叶片和根状茎愈伤组织诱导的最佳培养基均为MS+1.0mg·L~(-1)?6-BA+0.5mg·L~(-1)?NAA+30%蔗糖,培养基最佳pH5.6,叶片和根状茎愈伤组织增殖的最佳植物生长调节剂组合均为2.0mg·L~(-1)?6-BA+0.8mg·L~(-1)NAA,且根状茎愈伤组织的诱导率和增殖倍数均明显高于叶片。根状茎愈伤细胞悬浮培养的最佳接种量80g·L-1,最佳植物生长调节剂组合1.5mg·L~(-1)6-BA+0.6mg·L~(-1)?NAA,细胞生长曲线与多糖含量变化曲线均呈"S"形,细胞最佳继代周期16d,多糖含量在培养14d时最高,培养基pH呈先下降后上升然后趋于稳定趋势。     

雪花梨的离体培养与快速繁殖

以雪花梨的单芽茎段为外植体,建立了雪花梨离体培养和快速繁殖体系。试验表明,5月中旬为雪花梨取材的最佳时间;基本培养基、6-BA和NAA等3种因素对黄冠芽增殖影响差异较大,按影响大小依次为6-BA、基本培养基、NAA;最佳的雪花梨组培苗增殖培养基为MS+6-BA 1.0mg·L-1+NAA 0.15mg·L-1+GA30.5mg·L-1,增殖系数达3.9;适宜雪花梨组培苗的生根培养基为1/2MS+IBA 1.0mg·L-1,生根率达41.4%。     

白首乌的组织培养条件的优化

以白首乌茎段、叶片、茎尖和带腋芽茎段为外植体,进行离体培养植株再生研究,结果表明：适合初代诱导的培养基为：MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1,诱导率可达100%;最佳外植体是带腋芽茎段;芽苗增殖的最佳培养基为：MS+KT 1.5 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1,增殖系数为5.6;生根培养基为：1/2 MS+NAA 0.5 mg·L-1,生根率为93.3%。     

观果树种轮生冬青离体快繁技术

以轮生冬青幼嫩茎段为外植体,通过筛选启动培养基、比较不同增殖培养基及继代次数对增殖的影响,生根诱导培养基的筛选,建立了轮生冬青的离体快速繁殖技术体系。结果表明:最适腋芽诱导培养基为B5+6-BA1.0 mg·L~(-1)+IBA0.05 mg·L~(-1);适宜增殖培养基为B5+6-BA1.5 mg·L~(-1)+IBA0.3 mg·L~(-1),第4次继代时增殖系数最大为6.3,丛生芽长势好;适宜的继代周期为35 d;最佳生根培养基为1/2B5+IBA0.2 mg·L~(-1)+NAA0.3 mg·L~(-1),生根率可达100%。移栽于V(珍珠岩)∶V(蛭石)∶V(腐殖土)=2∶1∶1的混合基质中,成活率达90%以上。     

蓬莪术的离体快繁研究

[目的]探索蓬莪术的离体快繁技术。[方法]以蓬莪术嫩叶、块茎和根为外植体,接种在以MS为基本培养基,外加不同浓度激素组合的培养基上进行愈伤组织诱导、增殖和分化培养;以幼芽为外植体,进行幼芽的增殖、生根培养和移栽等。[结果]诱导蓬莪术叶、块茎和根的愈伤组织形成的最适培养基为MS＋2,4-D1.0 mg/L＋6-BA0.5～1.0 mg/L＋NAA0.3 mg/L,其中蓬莪术叶诱导率最高,达96%;愈伤组织增殖和分化培养还有待进一步研究。幼芽最适增殖培养基为MS＋6-BA3.0 mg/L＋NAA0.1 mg/L＋KT1.0 mg/L,其增殖倍数达3.5以上;而生根培养基以1/2 MS＋NAA1.0 mg/L＋6-BA0.5 mg/L为最佳,生根率达100%,其移栽成活率达85%以上。[结论]该研究结果为蓬莪术的快速繁殖及工厂化生产奠定了基础。     

毛稔叶片离体培养及植株再生研究

以毛稔叶片作为外植体, MS为基本培养基,研究不同种类激素的浓度配比对毛稔叶片离体再生的影响。结果表明,黑暗条件与光照12 h·d-1有利于毛稔愈伤组织形成,毛稔叶片愈伤组织最佳诱导培养基为MS+0.5 mg·L-16-BA+2.0 mg·L-12,4-D+0.1 mg·L-1 NAA,光照12 h·d-1诱导40 d,愈伤诱导率为96%;叶片形成的愈伤组织分化率极低,分化率随6-BA浓度升高而升高,愈伤组织分化最适培养基为MS+0.1 mg·L-1 NAA+2.0 mg·L-16-BA,分化率为10%;最适生根培养基为1/2 MS+0.1 mg·L-1 NAA,生根率为88.89%。     

白玉龙火龙果不同外植体的离体培养

【目的】研究白玉龙火龙果子叶、下胚轴及子叶节的不定芽诱导及茎段增殖技术,为白玉龙火龙果的品种改良及快繁育苗提供技术支持。【方法】以白玉龙火龙果种子培育的无菌苗为材料,采用正交试验设计分析不同培养基、不同植物生长调节剂与浓度及其组合对白玉龙火龙果子叶、下胚轴及子叶节不定芽诱导及茎段增殖与生根的影响。【结果】白玉龙火龙果子叶、下胚轴及子叶节均能直接诱导不定芽发生。其中,16个正交处理均能诱导子叶节不定芽发生,其最优诱导培养基为WPM+0.50 mg/L TDZ+0.50 mg/L CPPU+0.05 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,诱导率为87.1%~100.0%;子叶仅1个处理未能诱导出不定芽,最高诱导率为36.0%,其最优诱导培养基为1/2MS+0.50 mg/L TDZ+0.05mg/L CPPU+2.00 mg/L 6-BA+0 mg/L NAA;下胚轴仅5个处理能诱导出不定芽,最高诱导率仅3.0%,其最优诱导培养基为1/2MS+0.05 mg/L TDZ+2.00 mg/L CPPU+1.00 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA。茎段去顶处理有利于腋芽的诱导萌发,去顶处理的最大增殖系数为4.2,不去顶处理的最大增殖系数为3.1,其最优增殖培养基为WPM+0.50 mg/L 6-BA+0.05 mg/L IBA。NAA处理能促进茎段生根,适宜的生根培养基为1/2MS+0.1~0.5 mg/L NAA,生根率达100.0%。【结论】不同基本培养基、植物生长调节剂与浓度及其组合均能诱导白玉龙火龙果子叶、下胚轴和子叶节不定芽发生及茎段芽增殖和不定根产生。其中,不定芽诱导以子叶节最易诱导发生,其次为子叶,下胚轴较难;茎段芽增殖和不定根诱导均较容易。     

火焰南天竹茎段离体培养再生体系的优化

  目的  进行离体培养关键因子优化，以满足火焰南天竹Nandina domestica ‘Firepower’的规模化生产。  方法  以火焰南天竹茎段为外植体，通过对影响不定芽诱导、增殖生长和生根的基本培养基、6-苄基腺嘌呤（6-BA）和萘乙酸（NAA）不同质量浓度配比、白砂糖质量浓度及pH值等关键因子的研究，优化火焰南天竹茎段离体培养再生体系。  结果  WPM+0.50 mg·L-1 6-BA+0.10 mg·L-1 NAA为火焰南天竹不定芽诱导的理想培养基，不定芽诱导率为93.8%，且生长健壮；WPM+0.75 mg·L-1 6-BA+0.10 mg·L-1 NAA为不定芽增殖培养基，增殖倍数3.3，新芽鲜绿色、生长良好；1/2WPM+0.50 mg·L-1 NAA+白砂糖30.0 g·L-1（pH 6.0）为生根培养基，生根率达95.0%。  结论  本研究建立的火焰南天竹的离体培养再生体系可为其大规模生产提供技术支撑。