奶牛和小鼠半胚低温冷冻的研究

本实验对小鼠裸半胚采取了多种不同的处理方式，其中冷冻前不培养、冷冻前经短时间培养和冷冻前经长时间培养的冷冻半胚解冻后培养发育率分别为１４．５５％、２６．６７％和６．１２％；装透明带半胚和装透明带后再用琼脂包埋半胚的解冻后培养发育率分别为５６．６７％和６４．２９％；小鼠半胚快速冷冻解冻的培养发育率为６２．００％。此外．将１０枚奶牛半胚装带、包埋、冷冻解冻后，移植给５头受体．结果有１头妊娠；奶牛整胚冷冻后分割的半胚移植妊娠率为２８．５７％（４／１４）。     

山羊半胚冷冻试验

 试验研究了诱发结晶温度、缓慢降温速度、冷冻速度、解冻温度和冷冻前短暂体外培养对半胚冷冻效果的影响，证明在下述条件下对琼脂包被半胚进行冷冻和解冻可显著提高山羊半胚冷冻效果：①在-7℃诱发结晶；②以约0.05℃/分的速度缓慢降温15分钟；③以0.3℃/分的速度降温至-35℃投入液氮；④在30-50℃的水浴中解冻；⑤在冷冻前对半胚进行2小时短暂体外培养。将按上述条件冷冻一解冻的12枚半胚移植于6只受体，结果有4只妊娠（66.7%），共产半胚羔5只（41.7%），其中包括1对异龄同卵双生羔和1对同龄同卵双生羔（33.3%）。     

小鼠胚胎分割方法及同卵双生试验

选择小鼠晚期桑椹胚和早期囊胚,采用下列方法进行分割:A、显微手术刀直接分割;B、酶消化透明带后分割;C、显微玻璃针去带分割;D 酶——机械去带分割。共分割277枚胚胎,分割成功264枚(95.3%)。将其中480枚半胚作体外培养,A,B,C,D 各组半胚发育到囊胚的发育率分别为65.7%(92/140)、54.2%(65/120)、63(63/100)、64.2%(77/120)。将用 A法分割的48枚半胚移植于12只受体鼠,结果有4只怀孕,共产11只半胚鼠,其中4对有同卵双生仔鼠。     

小鼠半胚冷冻的研究

对半胚冷冻的方法和条件进行了系统研究,证明采用下述程序冷冻小鼠半胚可显著提高解冻半胚的成活率:①在含10％甘油的磷酸缓冲液中平衡35～40min;②在-6.5℃或-7℃诱发结晶,③以0.05℃/min的速度缓慢降温15min;④以0.3℃/min的速度降温至-35℃投入液氮;⑤在30～35℃的水浴中解冻;⑥在含不同浓度(6.6％,3.3％,0％)甘油和0.3mol/L蔗糖的磷酸缓冲液中平衡35～40min,去除甘油。将按上述程序冷冻—解冻的16对半胚移植后,获半胚鼠12只,其中5对为同卵双生。     

小鼠冻胚分割试验

研究了分割所用溶液、冷冻前胚胎发育时期和分割后将半胚是否装入透明带对冻胚分割效果的影响。结果证明:①将解冻囊胚分割后,无论是否将半胚装入透明带对冻胚分割的效果均无显著影响(P>0.05);②在PBS中分割解冻桑椹胚和囊胚的效果无显著差异(P>0.05);③与分割解冻桑椹胚相比,在蔗糖液中分割解冻囊胚可显著提高冻胚分割效果(P<0.05)。将在蔗糖液中分割冻囊胚获得10对半胚移植于5只受体,结果有2只妊娠,共获得半胚仔鼠6只,其中2对为同卵双生。     

波尔山羊胚胎冷冻和移植试验

用含1．5M乙二醇,0．1M蔗糖、20％NCS(V／V)的PBS液,或含1．5M乙二醇,20％NCS的PBS为冷冻保护液,将42枚A级胚胎(致密桑葚胚16枚,早期囊胚26枚)一并移入冷冻保护液,并进行快速冷冻,在降温至-36℃时将胚胎投入液氮保存。解冻时,胚胎细管先在室温(20～22℃)空气中停留15s后进入水浴快速解冻,解冻后一步除去保护剂,移入含20％NCS的PBS液中保存,手术移植入受体子宫角内。结果表明,解冻后形态质量完好的A级冻胚达88,1％(37／42),移植受体妊娠率达42,9％,说明本试验采用的胚胎冷冻-解冻程序,能有效地进行波尔山羊致密桑葚胚和囊胚的冷冻保存。     

小鼠冻胚分割试验

研究了分害虫所用溶液，冷冻前胚胎发育时期和分割后将半胚是否装入透明带对冻胚分割效果的影响，结果表明：①将解冻囊胚分割后，无论是否将半胚装入透明带对冻胚分割的效果均无显著影响（P＞0.05）；②在PBS中分割解冻桑椹胚和囊胚的效果无显著差异（P＞0.05）；③与分割解冻桑椹胚相比，在蔗糖液中分割解闲囊胚可显著提高冻胚分割效果（P＜0.05）。将在蔗糖液中分割冻囊胚获得10对半胚移植于5只受体，结果有2只妊娠，共获得半胚仔鼠6只，其中2对为同卵双生。     

小鼠胚胎嵌合的研究

选用昆白.CI_(57)及B/L_(615)三个品系小鼠,对其8细胞期(8C),桑椹期(M)和囊胚期(B)的全胚和半胚(半)进行聚合,培养和移植试验。8细胞期及桑椹期胚胎的聚合发育率显著高于囊胚期(P<0.05),全胚聚合的发育率显著高于半胚(P<0.05)。将同品系和不同品系的8细胞期,桑椹期和囊胚期胚胎嵌合移植给27只受体,9只妊娠,妊娠率分别为17％(1/6),40％(6/15)及33％(2/6),平均为33％(9/27),共产仔35只,其中不同品系胚胎的嵌合胚移植,产仔15只,4只为皮毛嵌合体。     

自制简易胚胎冷冻器冷冻奶牛胚胎试验

用FSH+PGF_(2)超排黑白花奶牛,以非手术方法采得7日龄早期胚胎。应用含10％甘油卵细胞培养液作为胚胎冷冻保护液,采用自制简易胚胎冷冻器冷冻,在-196℃液氮中保存。冻胚在35℃水浴中解冻,应用92.1g/L甘油+171.2g/L蔗糖PBSS,46g/L甘油+171.2g/L蔗糖PBSS和171.2g/L蔗糖PBSS三步脱去甘油,用含20％犊牛血清PBS将胚胎清洗2遍后装管移植。共解冻18枝冻胚,16枚可用。可用胚率为84.2％(16/18)。采用非手术方法移植16头受体牛,5头妊娠产犊,移植妊娠率为31.5％(5/16)。     

小鼠半胚冷冻的研究

对半胚冷冻的方法和条件进行了系统研究，证明采用下述程序冷冻小鼠半胚可显著提高解决半胚的成活率：①在含10%甘油的磷酸缓冲液中平衡35-40min；②在-6.5℃7或-7℃诱发结晶；③以0.05℃/min的速度缓慢降温15min；④以0.3℃/min的速度降温至-35℃投入液氮；⑤在30-35℃的水浴中解冻；⑥在含不同浓度（6.6%,3.3%,0%)甘油和0.3mol/L蔗糖的磷酸缓冲液中平衡35-40min，却除甘油。将按上述程序冷冻-解冻的16对半胚移植后，获半胚鼠12只，其中5对为同卵双生。     

大丽轮枝菌Nit突变体产生及其营养亲和性测定

从DNA限制性酶切多态性(RFLPs)的A组和B组中选用了具代表性的7个大丽轮枝菌菌系作营养亲和性测定.病菌分别接种在含氯酸钾15～25g/l的基本培养基(MM)、梅干培养基(PLA)、玉米粉琼脂培养基(CMA)和马铃薯葡萄糖培养基(PDA)上,从中获得了41个不能还原利用硝酸钠作为唯一氮源正常生长的突变体(Nit).Nit突变体以PDA和PLA含氯酸钾20～25g/l的两种培养基上发生频率较高.根据对不同氮源利用生长情况,获得了Nit突变体5种生理表现型.以Nit1居多(50%～100%),其次为NitM(0～50%).表现型互补的Nit1与NitM突变体营养亲和性测定结果表明,测试菌系可划分为VCG01和VCG02两个营养亲和群,分别含RFLPsA组的4个菌系和B组的3个菌系.     

大豆浓缩蛋白、肠膜蛋白粉、血浆蛋白粉对早期断奶仔猪生产性能的影响

选用64头25日龄杜×(大×长)三元杂交断奶仔猪,随机分为4组:A、B、C为处理组,分别用猪肠膜蛋白(DPC)、大豆浓缩蛋白(SPC)、喷雾干燥猪血浆蛋白粉(SDPP)部分取代基础饲粮的鱼粉;D为对照组,饲喂基础饲粮(玉米-豆粕-鱼粉)。试验从仔猪25日龄断奶开始,70日龄结束。结果显示:试验组日增重均显著高于对照组,其中B组比对照组高13.18%(P<0.05);A组、C组比对照组高11.53%(P<0.05)4、.43%(P<0.05);B组和A组日增重差异不显著(P>0.05),但均显著高于C组,分别高8.38%(P<0.05)、6.80%(P<0.05)。B组日采食量比对照组高4.82%(P<0.05),A组、C组与对照组相比,日采食量具有提高的趋势(P>0.05)。A组、B组与对照组相比,料肉比有降低的趋势(P>0.05)。由此可见,本试验条件下,大豆浓缩蛋白、猪肠膜蛋白粉、猪血浆蛋白粉对早期(25日龄)断奶仔猪的饲喂效果均优于鱼粉,且大豆浓缩蛋白、猪肠膜蛋白粉对仔猪日增重的改善幅度大于喷雾干燥猪血浆蛋白粉(P<0.05)。     

山羊半胚体外培养试验

研究了培养基、血清浓度和培养温度对山羊半胚体外发育的影响。结果表明:与杜氏磷酸缓冲液和TCM—199相比,在改良Whitten氏液中进行体外培养可显著提高半胚体外发育率(P<0.05);用改良Whitten氏液进行体外培养,含10％和15％犊牛血清组的半胚发育率显著高于5％血清组(P<0.05),极显著地高于无犊牛血清组(P<0.01);在38～39℃的条件下培养半胚的效果显著优于36℃(P<0.05),但在37～39℃的范围内,温度对半胚体外发育率无显著影响(P>0.05)。     

水牛胚胎分割技术的研究

为探讨水牛桑椹胚去致密化和不同分割方法对水牛切割胚发育效果的影响,将体外受精获得的水牛桑椹胚（第5d）和囊胚（第6～7d）分割后进行体外培养,观察其发育情况。结果显示：（1）水牛桑椹胚经去致密化处理后,其分割成功率（67．69％vs．51．71％）和囊胚发育率（58．30％vs．41．13％）均显著高于未处理组（P〈0．01）,但囊胚细胞数差异不显著（P〉0．05）;（2）以直接分割法和单臂分割法分别分割桑椹胚和囊胚,其分割成功率、囊胚发育率和囊胚细胞数三者均无显著差异（P〉0．05）。可见,水牛桑椹胚去致密化有利于切割胚的成活和发育,而直接分割法和单臂分割法均可用于水牛桑椹胚和囊胚的分割。     

大豆原生质体愈伤组织的体细胞胚胎发生(英文)

在改良MS培养基上从5个大豆品种成熟种子来源的幼苗未展开叶片上诱导出愈伤组织,利用2个月月龄的这些愈伤组织在摇床上建立了细胞悬浮培养系,细胞悬浮培养系每1至2周转培1次,并用于原生质体分离,转培后3到5天的细胞经酶解后原生质体的产量最高,纯化后的原生质体用3种方法进行培养,即液体培养法、琼脂包埋法和琼脂底层法,在琼脂底层法中,培养皿底层先浇上无甘露醇的琼脂培养基,而原生质体则悬浮在2到4毫升含0.45 mol甘露醇的培养基中,3种方法以琼脂底层法最佳,原生质体在培养后2到3天内能见到第1次细胞分裂,在适当的条件下1周内高达80％的原生质体发生分裂,置板频率一般在40％到60％之间,5个供试品种中4个的原生质体愈伤组织在固体和液体培养中出现体细胞胚胎发生,在液体培养条件下得到了大量子叶和胚根发育良好的体细胞胚,但由于这些胚未进一步萌发,故未能得到完整的再生植株。     

绵羊不同直径卵泡卵母细胞特征及染色体形态分析

[目的]剥离不同直径卵泡卵母细胞,比较卵母细胞成熟前后的特征.[方法]测量绵羊卵巢表面卵泡直径后进行剥离,研究卵泡表面直径与卵泡实际直径之间的关系.按表面直径分组(1.0 mm以下、1.0～2.0mm、2.1～4.0 mm、4.1 mm以上),比较各分组间卵母细胞透明带厚度、卵丘复合体质量、卵母细胞成熟前后的染色体形态变化的差异.[结果]随着卵泡直径的增大,卵泡实际直径差异极显著(P＜0.01);各组间透明带厚度差异不显著(P＞0 05),但有降低的趋势;卵丘复合体质量分为A级、B级和C级,A级有增加的趋势,B级C级有降低的趋势;卵母细胞成熟后GV/GVBD比率有下降的趋势,MAT -I、NII有增加的趋势.[结论]随着卵泡直径增大,未成熟卵母细胞的质量提高,卵母细胞核成熟比例增加.     

牛胚胎分割及半胚移植研究

对来自黑白花及西门塔尔超排母牛的７～８日龄胚胎，采用手持微玻璃针，在普通解剖镜下进行分割。通过非手术法将裸半胚移入发情后７天的受体牛黄体侧子宫角。在太原市郊奶牛场及太行山区农民户养牛中，共移植受体牛４５头，结果妊娠产犊２５头，移植成功率为５５．６％。     

不同剂量生姜粉与中草药复方联合对蛋鸡生产性能及蛋品质的影响

[目的]提高中草药在蛋鸡生产中的应用效果。[方法]将220只25周龄的罗曼粉壳蛋鸡随机分为5组:对照组(K)、中草药组(CK)、生姜粉组(A、B、C)。在中草药配方中加入不同剂量的生姜粉,探讨二者联合作用对蛋鸡生产性能和蛋品质的影响。[结果]A组平均日采食量、产蛋率和平均蛋重较CK组分别增加了1.15%、6.20%和1.44%,料蛋比和破蛋率分别比CK组降低了6.25%和47.69%。B、C组破蛋率比CK组分别增加了95.38%和112.31%;A、B、C组蛋形指数、蛋壳厚度、蛋壳强度、哈夫单位、蛋黄比例、蛋壳比例、蛋黄颜色与CK组相比均无显著差异(P0.05)。[结论]在中草药复方中添加适量的生姜粉,能够降低料蛋比,提高产蛋率,生姜粉的添加量以5 g/kg最佳。