黄瓜低霜霉威残留性相关基因SDH克隆及表达

通过Solexa技术和比较基因组学方法鉴定霜霉威胁迫下黄瓜果实差异表达基因,筛选黄瓜低霜霉威残留性相关基因SDH。研究利用PCR克隆获得SDH基因全长,命名为Cs SDH。构建亚细胞定位表达载体,利用农杆菌浸润法注射烟草叶片后激光共聚焦显微镜下观察;分别用荧光定量RT-PCR方法和酶联免疫法研究高、低农残品系D9320和D0351中Cs SDH基因在农药霜霉威处理后,不同时间点、不同组织部位时空表达特征和琥珀酸脱氢酶活性。结果表明,Cs SDH基因在烟草叶片细胞中被定位在细胞膜上。黄瓜低农残品种D0351中,Cs SDH基因在果实受霜霉威胁迫后反应迅速,主要在处理前期响应表达强烈,琥珀酸脱氢酶活性显著增加,且该基因表达量显著高于其在高农残品种D9320中表达量。Cs SDH果、叶中表达量较茎中高,且各组织部位表达量高低顺序稳定,为叶果茎。黄瓜高农残品种D9320中,Cs SDH基因表达量在0.5、1、3、12 h呈现上调表达,6、9 h基因表达量差异不显著,48 h出现上调表达高峰。说明克隆得到的Cs SDH基因属农药处理前期响应基因,且该基因可能在降低黄瓜农药残留过程中发挥重要作用。试验通过研究黄瓜琥珀酸脱氢酶基因(SDH)在霜霉威胁迫下表达情况,为挖掘黄瓜低农药残留性功能基因以及探明其作用分子机制奠定基础。     

霜霉威在花椰菜上的消解动态及最终残留研究

【目的】研究霜霉威在花椰菜上的消解动态及最终残留量,评价其在花椰菜上使用的安全性,为霜霉威在花椰菜上的科学合理使用及限量标准研究提供依据。【方法】建立测定花椰菜中霜霉威残留量的色谱-质谱法;按照农药残留试验准则,于2013和2014年在河北保定、陕西西安、四川广元进行霜霉威在花椰菜上残留的田间试验,采集样品并经乙酸乙酯匀浆提取和液-液萃取净化,减压浓缩定容后,采用液相色谱-质谱法进行霜霉威残留量检测。【结果】霜霉威在花椰菜植株及可食用部分中的添加回收率分别为85.9%~104.5%,87.5%~101.5%,其在花椰菜植株及可食用部分中的最低检出含量均为0.05mg/kg,最低检出量均为0.25ng。2013和2014年,霜霉威在花椰菜植株中的原始残留量分别为4.68和1.36mg/kg,半衰期分别为6.0和5.3d,属于易降解农药。2013和2014年最终残留试验结果表明,于最后一次施药后的5,7和10d,霜霉威在花椰菜可食用部分中的最终残留量最大值分别为0.94和0.76,0.62和0.55,0.52和0.36mg/kg。【结论】成功建立了检测农产品中残留的霜霉威的液相色谱-质谱法;霜霉威在花椰菜上的最大残留量均低于欧盟的标准,属于易降解农药,在花椰菜上使用安全。     

温室黄瓜霜霉病药剂防效试验

黄瓜霜霉病由鞭毛菌亚门假霜霉属真菌侵害引起,是黄瓜生产中的主要病害,在黄瓜温（棚）室栽培中发生普遍。该病具有传播迅速、不易控制的特点,严重影响黄瓜产量和品质。霜霉威盐酸盐·氟吡菌胺悬浮剂对卵菌纲真菌引起的植物病害表现出了较好的防治效果,可应用于黄瓜霜霉病的防治。本文主要对霜霉威盐酸盐·氟吡菌胺对黄瓜霜霉的药效和对黄瓜的安全性进行试验,以明确使用剂量,     

气相色谱-串联质谱法同时测定杨桃中的内吸磷、抑霉唑和腈菌唑

建立了杨桃中内吸磷、抑霉唑和腈菌唑同时测定的气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)分析方法。杨桃样品用乙腈匀浆提取、盐析、石墨化碳黑/氨基混合型固相萃取柱净化,乙腈/甲苯(3∶1,V/V)洗脱,浓缩定容,最后通过GC-MS/MS进行分析。农药的添加水平为0.02~0.50 mg/kg时,3种农药的回收率为75.6%~99.0%,相对标准偏差为2.4%~10.4%;内吸磷、抑霉唑和腈菌唑3种农药的定量限分别为0.010、0.020、0.005 mg/kg。该方法能满足杨桃中内吸磷、抑霉唑和腈菌唑3种农药多残留检测的要求。     

不同类型药剂对黄瓜霜霉病的田间防治效果

为筛选出防治黄瓜霜霉病的最佳药剂,选用13种不同类型的杀菌剂在黄瓜霜霉病发病初期进行喷雾防治。结果表明,供试药剂对黄瓜霜霉病均有一定的防治效果,保护兼治疗剂防治效果较好,复配制剂防效好于单剂;66.5%霜霉威盐酸盐水剂、52.5%噁唑菌酮·霜脲氰水分散粒剂、22.5%啶氧菌酯悬浮剂和35%氰霜唑·烯酰吗啉悬浮剂对黄瓜霜霉病的防治效果较好,防效均达76%以上,其中,35%氰霜唑·烯酰吗啉悬浮剂的防治效果最好,防效可达81.39%。建议在黄瓜霜霉病发病初期选用以上4种药剂进行防治,间隔7～10 d用药一次,连续防治2～3次,生产中应轮换交替使用各药剂。     

霜霉威吡虫啉腐霉利在结球生菜上的消解动态及相关因子的影响

通过开展结球生菜生产中所用主要农药——霜霉威、吡虫啉、腐霉利的消解规律研究,探讨生菜农药消解与农药种类、浓度及外部因子的关系,为结球生菜生产过程中的安全管理提供参考依据。以目前我国生产上主要使用的结球生菜品种——皇帝为材料,2007年春季露地种植,按霜霉威、腐霉利、吡虫啉最大推荐用量(计算浓度分别为1203.3、500.0、40.0mg·kg-1)和最大推荐用量的2倍(计算浓度分别为2406.6、1000.0、80.0mg·kg-1)两个农药剂量处理,分别于6月6日施药后当日、2、6、9d取样测定农药残留含量,并记录环境因子温度、光照的变化。结果表明,不论是按最大推荐用量还是最大推荐用量2倍喷施,吡虫啉、霜霉威、腐霉利在生菜上均表现为起始和最后阶段消解快、中间阶段消解平缓的特点;按日本肯定列表制度对生菜吡虫啉、霜霉威和腐霉利最大残留限量(分别为5.0、10.0和5.0mg·kg-1)要求,对于吡虫啉,即使按最大推荐用量2倍喷施,其喷施8h后的残留量仅为1.5mg·kg-1,说明春季露地生菜上喷施吡虫啉的安全性较高;对于霜霉威,按最大推荐用量喷施,施药6d后的残留量为10.7mg·kg-1,接近肯定列表制度的要...     

土壤和黄瓜中霜霉威盐酸盐残留量的测定

为了建立测定土壤和黄瓜种霜霉威盐酸盐残留量的液相色谱串联质谱分析方法,采用乙腈和水提取土壤和黄瓜样品,盐析后取上清液,液相色谱串联质谱法测定。经过3个水平的添加回收试验,所建方法的平均回收率在91.7%~98.7%,相对标准偏差1.0%~3.3%,n=5,目标物最低检出浓度0.01 mg·kg-1。所建方法的准确度、灵敏度和精密度均满足农药残留分析的要求。     

无公害蔬菜选用的杀菌剂

一、防治卵菌害的杀菌剂 1.霜脲锰锌又称克露、露克星,是由霜脲腈和代森锰锌混配而成。该药属广谱杀菌剂,具有局部内吸作用,有抑制产孢和孢子侵染的能力,对卵菌引起的病害有较好的防治效果,主要用于防治蔬菜的霜霉病和疫病等。 2.霜霉威酸盐又称普力克、扑霉特,属内吸性氨基甲酸酯类杀菌剂,能防治由腐霉菌引起的土壤传播病害以及由霜霉菌引起的叶部病害,适用于土壤处理和叶面喷雾,对蔬菜猝倒病、疫病、霜霉病有较好的防治效果。 二、防治白粉病、锈病的药剂 1.腈菌唑、复配品种仙生等属三唑类杀菌剂,有较强的内吸性,杀菌谱广,药效高…     

氟菌·霜霉威防治马铃薯晚疫病剂量试验

通过不同剂量氟菌·霜霉威防治马铃薯晚疫病试验,结果认为氟菌·霜霉威悬浮剂对马铃薯晚疫病的防效高于相近浓度对照农药58％甲霜灵锰锌可湿性粉剂;其悬浮剂田间最佳稀释浓度为400倍液.     

3%噻霉酮微乳剂防治黄瓜靶斑病田间药效试验

本试验测定了3%噻霉酮微乳剂对黄瓜靶斑病的田间防效。结果表明,3%噻霉酮微乳剂对黄瓜安全,对黄瓜生长发育无不良影响;对黄瓜靶斑病的防治效果可达94.03%,显著高于687.5 g/L氟菌·霜霉威悬浮剂的防效,建议使用浓度为500~1 000倍液。     

乌龙茶资源农药抗性与叶片形态和解剖特征关系的初步研究

在已筛选出低农药残留量的乌龙茶种质资源的基础上,本试验研究了茶树叶片表面特征、解剖结构与不同品种抗农药残留的关系,初步明确了茶树对农药残留的抗性机制：茶树品种对农药残留的抗性与叶尖形状、角质层同栅栏组织的比值、角质层同海绵组织的比值、上表皮同角质层厚度的比值有较密切关系。低农残的茶树资源具有如下特征：叶尖急尖、角质层同栅栏组织厚度之比低、角质层同海绵组织厚度之比低、上表皮同角质层厚度之比较高;反之为高农残的茶树资源。     

乌龙茶资源农药抗性与叶片特征和解剖结构关系的初步研究

[研究目的]为探索茶树对农药残留的抗性机制,[方法]在已筛选出低农药残留量的乌龙茶种质资源的基础上,该文研究了茶树叶片表面特征、解剖结构与不同品种抗农药残留的关系.[结果]结果表明:茶树品种对农药残留的抗性与叶尖形状、角质层同栅栏组织厚度的比值、角质层同海绵组织厚度的比值、上表皮同角质层厚度的比值有较密切关系.[结论]低农残的茶树资源具有如下特征:叶尖急尖、角质层同栅栏组织厚度之比低、角质层同海绵组织厚度之比低、上表皮同角质层厚度之比较高;反之为高农残的茶树资源.     

Study on Relationship Between Cucumber Germplasm and Propamocarb Residue Using Subjective Rating Technique

Propamocarb(PM)residue in cucumber(Cucumis sativus L.)receives little attention.As is well known to all,high PM residue of cucumber could lead to increase in the violation rates of maximum residue limits and ultimately cause harm to human health.Knowledge of PM residue could help cucumber breeders in developing cultivars with low PM residue and improving cucumber quality.In this study,32 representative cucumber accessions(26 breeding lines and six cultivars)from different regions of China were evaluated for their PM residue in fruit and leaf to provide meaning to the subjective rating,which was highly correlated with PM residual content of fruit(r=0.97)and leaf(r=0.94).In addition,PM residual content of North China ecotype was the highest and Pickling ecotype was the lowest in fruit and leaf of cucumber.The leaf had significantly higher(P<0.01)PM residual content than the fruit,and poor correlation between leaf and fruit was represented.This study verified PM residual relationship between fruit and leaf,and laid the foundation for further identification of germplasm resources and breeding of new varieties for low PM residue of cucumber.     

霜霉威胁迫下黄瓜CsWRKY30表达及功能分析

【目的】从前期转录组测序结果中筛选获得一个在霜霉威(propamocarb)胁迫条件下差异上调表达的基因CsWRKY30,对其进行克隆并分析其在霜霉威胁迫下的功能,了解黄瓜低霜霉威残留的分子机制。【方法】通过PCR技术扩增CsWRKY30全长,利用NCBI和PlantCARE在线工具分别进行该基因编码蛋白的保守结构域分析和启动子序列分析;利用实时荧光定量PCR分析CsWRKY30在霜霉威胁迫及其他胁迫条件下的相关表达模式;通过与GFP蛋白融合对CsWRKY30蛋白进行亚细胞定位;通过花序侵染法将CsWRKY30构建的植物过表达载体转化到哥伦比亚野生型拟南芥中,对获得的纯合转基因株系在霜霉威胁迫条件下的功能进行鉴定。【结果】CsWRKY30的CDS序列全长为1 014 bp,其编码的337个氨基酸中包含1个由60个氨基酸组成的WRKY结构域。CsWRKY30表达模式分析结果显示,黄瓜遭受霜霉威胁迫时,CsWRKY30在低霜霉威残留品系D0351中表达量显著上调,而在高霜霉威残留品系D9320中表达量并没有发生改变;在霜霉威胁迫的0.5-9 h间,该基因在D0351中的表达量一直明显高于对照,然而在24 h以后,该基因的表达不再显著上调。组织特异性表达分析表明,CsWRKY30主要在黄瓜果实中表达。蛋白亚细胞定位结果表明,CsWRKY30定位于细胞核。对CsWRKY30转基因拟南芥进行霜霉威胁迫发现,在未处理条件下,CsWRKY30 转基因拟南芥与野生型拟南芥表型上无明显差异;在2 mmol?L^-1霜霉威处理条件下,CsWRKY30转基因拟南芥萌发率及主根长均明显高于野生型拟南芥。在其他逆境作用下,CsWRKY30对霜霉威和多主棒孢霉菌条件积极响应,对干旱和高盐没有作用,同时受到脱落酸（ABA）信号诱导。【结论】黄瓜CsWRKY30在霜霉威胁迫条件下发挥重要作用,过量表达CsWRKY30可显著提高转基因拟南芥对霜霉威胁迫的抵抗能力。     

惠州市瓜豆类蔬菜有机磷农药残留状况调查

2008年2～6月,采用速测法和气相色谱法对惠州市主要农贸市场上销售的瓜豆类蔬菜进行了有机磷农药残留检测。结果表明,惠州市区主要农贸市场上销售的11种瓜豆类蔬菜农药残留品种间差异较大,其中豇豆、四季豆、白萝卜的农药残留较严重,残留率分别为25．00％、30．00％、33．33％;黄瓜和茄子的农药残留较轻,残留率分别为13．33％、14．29％;但残留超标率较低,其中豇豆、四季豆残留超标率最高,均为3．70％,其次为白萝卜、黄瓜、茄子,残留超标率分别为2．47％、2．47％和1．23％;丝瓜、蒲瓜、小南瓜、苦瓜、番茄、马铃薯等未检出农药残留;主要残留农药有水胺硫磷、氧乐果、三唑磷,其次为甲胺磷、毒死蜱和磷胺。     

一种基于AHP-E模型的多因子农药残留污染综合评价方法

为了能对某地区不同农产品受农药残留污染程度以及不同时间段受农药残留污染程度进行综合定量评价,提出一种基于层次分析法和熵值法AHP-E模型的多因子农药残留污染综合评价方法。该方法首先根据农药残留侦测结果,综合考虑农药毒性、检出频次、检出含量、超标情况多方面因素,选择评价因子;然后应用层次分析法对不同农产品受农药残留污染的程度进行评价,用熵值法对不同时间段受农残污染的程度进行评价。以2013年3月至6月A市6种农产品中农药残留侦测结果为例进行案例研究,对6种农产品受农残污染程度从高到低排序发现,按农残检出率和超标率两个单因子评价指标进行排序的结果分别为黄瓜、苹果、番茄、青椒、芹菜、韭菜和芹菜、韭菜、黄瓜、苹果、番茄、青椒;而用本文综合评价方法计算得出的排序结果为韭菜、芹菜、黄瓜、青椒、番茄、苹果。对不同时间段受农残污染程度进行排序发现,按农残检出率和超标率单指标进行排序的结果均为5月、4月、3月、6月,与本文方法的排序结果一致。对比单因子和多因子评价排序结果发现他们既有联系又有差异,造成差异的原因是单属性评价方法考虑因素单一,而本文提出的综合评价模型能较全面反映农药残留的污染情况,并有效突出不同农产品之间农药残留污染程度的差距。     

湘中地区烟草中拟除虫菊酯类农药残留现状与评价

按照烟草行业标准方法,湖南省湘中地区6个县市的12个X2F等级的烟叶样品的氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯等4种拟除虫菊酯类农残进行检测,并利用CORESTA农残限量对检测结果进行评价。结果表明,烟叶中主要是检测出氯氰菊酯（0．147～0．758mg／kg）和氰戊菊酯（0．264～0．930mg／kg）的残留,氟氯氰菊酯和溴氰菊酯均未检出,符合CORESTA农残限量标准。     

广西海参养殖现状及产业发展建议

为了更好地推动广西海参产业发展,综述了广西海参资源和养殖现状,分析了广西海参产业面临的主要问题,并对广西海参产业的可持续健康发展提出建议。广西海参养殖业存在养殖规模小、养殖技术水平低、设施化水平低、养殖品种单一、种质资源良莠不齐等问题。建议通过挖掘本地优势种质资源,建立育苗基地;合理规划布局,改善基础设施;开展海参繁养技术研究,提高海参育苗和养殖技术等措施推动广西海参产业健康发展,为广西海洋渔业经济做贡献。