美发网菌子实体和原质团中甾醇类物质含量测定方法研究

建立利用高效液相色谱测定美发网菌子实体和原质团中麦角甾醇和豆甾醇含量的方法。麦角甾醇含量测定色谱条件:岛津Inerlsil ODS-SP C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以甲醇为流动相;检测波长为281 nm;流速为1 mL·min~(-1);柱温为28℃;进样量为10μL。豆甾醇含量测定色谱条件:汉邦ODS C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈-水(96:4)为流动相;检测波长为204 nm;流速为0.8 mL·min~(-1);柱温为35℃;进样量为10μL。麦角甾醇在进样量0.2004μg~0.8016μg范围内与吸收峰面积呈良好线性关系,回归方程y=1E+06x-9625.3,r=0.9999。豆甾醇在进样量0.0408μg~0.3208μg范围内与吸收峰面积呈良好线性关系,回归方程y=4E+06x-37149,r=0.9995。应用高效液相色谱法建立的测定方法可以快速准确地测定美发网菌子实体、原质团中麦角甾醇和豆甾醇的含量,可作为美发网菌质量控制方法。     

虫草核苷类成分的提取方法

该研究筛选出1种提取虫草核苷类成分的方法。采用高效液相色谱法,流动相为10%甲醇溶液,流速为1 mL·min~(-1),检测波长260 nm,进样量10μL,测定不同提取溶剂和提取条件制备供试液中尿嘧啶、尿苷、2’-脱氧尿苷、肌苷、鸟苷、腺嘌呤、胸苷、腺苷、2’-脱氧腺苷和虫草素含量。结果表明,当提取溶剂为20%甲醇溶液,提取方法为超声处理,提取时间为90 min,提取次数为3次,虫草样品中核苷类成分可被充分提取。该方法适用于虫草水溶性核苷类成分供试液的制备,为准确测定虫草类真菌样品水溶性核苷类成分提供了依据。     

黄肉桃果实中类胡萝卜素提取和测定方法研究

【目的】建立适于黄肉桃果实中类胡萝卜素有效提取和高效液相色谱(HPLC)快速测定的方法。【方法】在采用YMC-C30色谱柱,检测波长450 nm和柱温25℃的条件下,重点从提取料液比、提取方式和时间、液相测定的流动相配比、流速和进样量等方面研究了黄肉桃果实中类胡萝卜素提取和测定的方法,并对方法进行了评价。【结果】黄肉桃果实中类胡萝卜素以丙酮为提取剂,果肉与提取剂的料液比(g·m L~(-1))为1∶6,超声波避光辅助提取1 h;HPLC测定进样量20μL,以甲基叔丁基醚和甲醇(V/V=30∶70)为流动相等度洗脱,流速1.0 m L·min~(-1)。本方法操作简单,类胡萝卜素提取效率高,HPLC测定回收率为95~105%,相对标准偏差(RSD)小于2.25%,稳定性良好,精密度高,用时短,成本低。【结论】优化所得方法适于黄肉桃果实中类胡萝卜素的有效提取和快速测定。     

高效液相色谱法测定辣椒素及辣度计算

本文研究了用超声波法提取,再采用高效液相色谱法测定辣椒素的方法。通过正交试验确定最佳提取条件为:提取温度60℃,提取时间50min,提取功率100%。高效液相色谱分析辣椒素的条件为:色谱柱为AgilentZorbaxSB-C18(5μm,250mm×4.6mm),柱温30.0℃。UV检测器的波长:280nm。流动相V(甲醇):V(水)=80:20,流速0.8mL/min,进样量10!L。本方法测定辣椒素分离度好,快速、准确。     

黑果腺肋花楸花色苷的提取分离纯化工艺

以黑果腺肋花楸为试材,采用Box-Behnken响应面法优化及柱层析法分离纯化花色苷,以确定花色苷的最佳提取工艺。结果表明:花色苷最佳提取工艺为浸提温度46℃、料液比1∶23.8g·mL~(-1)、浸提时间4.2h,其提取率为6.12mg·g~(-1);最佳分离纯化工艺为以XAD-7型树脂为填料,30%乙醇洗脱,最佳吸附流速1.0 mL·min~(-1),解析流速1.0mL·min~(-1)。在此基础上,可对黑果腺肋花楸花色苷进行微胶囊化,以便应用到食品加工中。     

HPLC双波长法测定小柄马勃子实体、液体发酵菌丝中麦角甾醇和麦角甾酮含量

建立HPLC双波长法同时测定小柄马勃(Lycoperdon pedicellatus)子实体与液体发酵菌丝中麦角甾醇和麦角甾酮的含量,并比较2种不同药用部位中麦角甾醇和麦角甾酮的含量差异。采用岛津InertsilODS-SP C18柱(4.6 mm×250 mm, 5μm)色谱柱,流动相为甲醇,流速为0.8 mL·min~(-1),检测波长分别为282 nm、 349 nm,柱温为30℃。结果表明,子实体中麦角甾醇和麦角甾酮的进样量分别在0.02μg~0.20μg (r=1)、 6.54 ng~65.40 ng(r=1)范围内线性关系良好。液体发酵菌丝中麦角甾醇和麦角甾酮的进样量分别在0.305μg~3.05μg (r=1)、6.54 ng~65.40 ng (r=1)范围内线性关系良好。因此所建立的双波长测定法准确可靠、重复性良好,可用于小柄马勃及其液体发酵菌丝中麦角甾醇、麦角甾酮化学成分的含量测定,为控制其质量提供参考依据。     

海棠果实中脱落酸的高效液相色谱测定

以‘草莓果冻’海棠为试材,采用高效液相色谱结合固相萃取法建立了一种用于海棠果实中脱落酸(ABA)含量检测的方法。通过优化前处理及色谱条件,最终确定取样量为3g,用80%预冷甲醇浸提12h,经不溶性PVPP吸附酚类等杂质,石油醚脱色,乙酸乙酯萃取,C18固相萃取小柱进一步纯化,再经甲醇∶1.0%乙酸溶液(45∶55,v/v),流速为1.0mL·min~(-1)进行洗脱,C18色谱柱分离,进样体积20μL,检测波长为254nm,柱温45℃。结果表明:该方法在0.01~0.50μg·mL~(-1)范围内线性关系良好,R~2=0.999 8,3个浓度水平下平均回收率均大于70%。采用该方法对‘草莓果冻’海棠半同胞子代中14个单株落果初期果实进行了测定,发现果实中脱落酸含量最低为0.026 9μg·g~(-1),最高含量为0.357 9μg·g~(-1),差别较大,该浓度与已有报道中的测定结果处于同一数量级水平。该方法的建立对于海棠的选育和生长发育进一步研究具有重要意义。     

UPLC法测定朝鲜蓟叶中绿原酸含量

采用Acquity BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm),乙腈-2％的乙酸水溶液(11∶89)等度洗脱,柱温:30℃,检测波长328 nm,流速:0.4 min/mL,进样量:1μL,研究了测定朝鲜蓟叶中绿原酸含量的超高效液相色谱方法.结果表明:绿原酸在0.013～1.3 mg/mL范围类线性关系良好,平均回收率为99.10％,RSD为1.87％,与常规HPLC方法比较,该方法分析时间短,节约溶剂,适用于朝鲜蓟叶中绿原酸含量的快速测定.     

HPLC法测定香菇中香菇嘌呤含量

建立1种运用高效液相色谱(HPLC)测定香菇(Lentinula edodes)中香菇嘌呤含量的方法。优化后的色谱条件为:Ultimate AQ-C18柱(5μm,4.6 mm×250 mm),流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液(7∶93,pH 4.67)等度洗脱,流速1 mL/min,柱温30℃,检测波长259 nm,进样量10μL。研究结果发现该方法准确、灵敏、重现性好,适用于香菇嘌呤的定量分析。     

利用高速逆流色谱技术制备灵芝酮三醇

以沪农灵芝(Ganoderma lucidum)1号子实体为原料,经过87%乙醇提取、D101大孔树脂富集、乙醇梯度洗脱获得弱极性三萜组分。采用高速逆流色谱技术,以正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶水(V∶V∶V∶V=5∶6∶5∶5)为溶剂体系,对该三萜组分中灵芝酮三醇的制备工艺进行研究,在转速900 r·min~(-1)、流速3 mL·min~(-1)条件下,一次上样400 mg灵芝弱极性三萜组分,可得到纯度为91.6%的灵芝酮三醇26.8 mg。     

高效液相色谱法测定苹果、青椒等水果蔬菜中绿原酸的含量

采用高效液相色谱法测定果蔬中绿原酸含量,色谱柱为HYPERS IL-C18(5μm,250mm×416mm),以乙腈(A)和0.5%磷酸溶液(B)进行洗脱,流速为1.0mL/min;进样量为20μL;检测波长为330nm。结果表明,绿原酸在40~200μg/mL范围内线性关系良好,r=0.9997。平均回收率为99.52%,RSD小于2.0%。采用高效液相色谱法测定果蔬中绿原酸含量,方法简便、准确,可以用于绿原酸的检测。     

微波提取法优选海州常山叶总黄酮的提取工艺

以海州常山干叶粉末为试材,采用微波技术提取总黄酮粗品,并通过紫外-可见分光光度计测定样品液黄酮含量,以总黄酮提取量为考察指标,研究了料液比、乙醇浓度、提取时间和提取温度等工艺条件对提效的影响,设计了4因素3水平正交实验,进一步对提取海州常山叶总黄酮的工艺条件进行优化。结果表明:提取海州常山叶总黄酮较佳的提取条件为预浸泡2h,微波功率200W,提取温度60℃,乙醇溶液浓度70%,料液比1∶35g·mL~(-1),微波提取2次,每次3min,提取总黄酮量达71.15mg·g-1;微波提取技术应用于海州常山叶总黄酮的提取工艺可行,该技术可为海州常山植物资源的开发和利用提供参考依据。     

基于高效液相色谱法的宁夏葡萄酒中十种酚类物质的测定

以宁夏贺兰山东麓10个葡萄酒样品为试材,采用了HPLC法同时测定陈酿葡萄酒中没食子酸、水杨酸等10种单体酚,并通过样品回收率和精密度的测试,确定了最佳色谱条件。结果表明:UltraⅡ-C_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相A为水∶乙酸(98∶2)(V/V),流动相B为乙腈,梯度洗脱,流速为1.0mL·min~(-1),检测波长为280nm,在此条件下各物质在25min内得到了良好的分离,各物质的含量和峰面积均有较好的线性关系(r0.999),同时回收率较高(80%),重复性好,具有定量准确、时间短等特点。10个葡萄酒样品中均能检测到这10种物质,且含量各不相同;其中没食子酸、儿茶素含量均较高。     

UPLC测定不同方式干燥的猴头菌中麦角甾醇的含量

以采摘于黑龙江省海林市的猴头菌为研究对象,分别使用自然干燥、加热干燥、真空加热干燥、真空冷冻干燥和微波干燥等方式将其制备成样品,然后用超高效液相色谱(UPLC)-紫外检测法来测定不同干燥方式的样品中麦角甾醇的含量。采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相:乙腈,流速:0.3 mL/min,检测波长282 nm,进样体积4μL,以猴头菌中麦角甾醇的含量为指标,分别对提取溶剂、水浴时间和料液比进行了最佳条件优化。结果表明:最佳的提取溶剂为无水乙醇,水浴时间为30 min,料液比为1∶20(g∶mL),其回归方程Y=9609.4X+4955.6,R2=0.9998,平均加样回收率为100.70%,RSD为0.66%。猴头菌经70℃真空干燥方式处理的麦角甾醇含量最高,而采用1.34 KW微波干燥处理的麦角甾醇含量最低,表明了不同的干燥方式会对猴头菌中的麦角甾醇含量有所影响,因而应当根据不同的药用和医疗途径去选择合适的干燥加工方式。     

北五加皮不同时间水提物中绿原酸含量的变化研究

利用HPLC法研究了北五加皮不同时间水提物中绿原酸含量的变化规律。采用色谱柱Agilent ZORBAX SB-C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为0.4%磷酸溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱[0～8min 24%B;8～12min 50%B],检测波长278nm,流速为1.0mL/min,柱温为25℃。结果表明:绿原酸的最佳提取时间为2h,该方法简单快速、可行,含量测定准确。     

红树莓花色苷的提取与鉴定

以"秋福"红树莓果实为试材,对其花色苷提取条件进行优化,并采用高效液相色谱质谱联用分析鉴定其花色苷组成成分。结果表明:"秋福"红树莓花色苷最佳提取条件为1.5%的盐酸-甲醇溶液,料液比1∶30 g·mL~(-1),提取时间3 h,提取温度35℃,此时花色苷含量可达4.49 mg·g~(-1)。高效液相色谱-质谱联用分析鉴定出"秋福"红树莓中花色苷共有6种组成成分,其中含量最多为花青素-3-葡萄糖苷,其次为花青素-3-槐糖苷和花青素-3-芸香糖苷,三者含量总和占花色苷总含量的93.03%。     

遮光处理对酿酒葡萄和葡萄酒中白藜芦醇含量的影响

白藜芦醇是一种多酚类化合物,具有多种药理活性,如抗癌、抗自由基等多种药效和保健功能。该试验以宁夏回族自治区贺兰山东麓酿酒葡萄和葡萄酒为试材,选取3个葡萄品种("梅鹿辄""赤霞珠""霞多丽")进行4种遮光处理,分别为未遮光(对照组)、40%、50%、60%遮光率。然后采用Agilent 1200高效液相色谱(HPLC)进行白藜芦醇的测定,以Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱为分析柱,乙腈-超纯水溶液(30∶70,V/V)为流动相梯度洗脱,在流速为1.0mL·min~(-1),柱温为21℃,检测的波长306nm的条件下进行分析测定。结果表明:葡萄和葡萄酒2组试验中,白藜芦醇的含量都是一样的变化趋势,它的含量大小依次是对照组40%遮光率50%遮光率60%遮光率;说明白藜芦醇的含量与光照强度有关,光强越强白藜芦醇的含量越高。     

新疆慕萨莱思葡萄酒中原花青素含量测定的HPLC方法建立

以矢车菊素、儿茶素、表儿茶素、表儿茶素没食子酸酯为标准品,采用岛津LC-20A高效液相色谱仪、二极管阵列检测器,建立了慕萨莱思酒中原花青素含量测定的HPLC方法。结果表明:优化后的色谱条件为色谱柱Inertsil DOS-3,5μm 4.6mm×250mm色谱柱;流动相A为甲醇,流动相B为超纯水;流动相比例为流动相A为35%,流动相B为65%;流速1.0mL/min;进样量10μL;柱温38℃。应用所建立的HPLC方法对慕萨莱思酒进行分析,出峰效果良好;标准曲线正常,回收率为82%~93%。该方法操作简单、准确度高、测定时间短,可用于慕萨莱思酒中原花青素的测定。     

超高效液相色谱法分析丝瓜酚类物质组分及其含量

建立超高效液相色谱快速测定丝瓜中酚类物质组分及其含量的方法,为丝瓜酶促褐变的后续研究提供技术支持。液相色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为甲醇(A)/0.3%乙酸水溶液(B),柱温32℃,进样量2μL,流速为0.25 m L·min~(-1)。采用梯度洗脱,洗脱程序0~0.5 min,95%B;0.5~17.5 min,95%~67.5%B;17.5~18 min,67.5%~95%B。检测波长选取283 nm。14种酚类化合物标准品在18 min内完全分离,样品中检测出13种酚酸。线性范围在0.05~4mg·L-1,检出限(S/N=3)为0.004~0.049 mg·L~(-1),决定系数均大于0.999,精密度、重复性、稳定性相对标准偏差均小于5%。平均回收率在95.70%~106.89%,相对标准偏差在0.32%~4.71%。龙胆酸为丝瓜样品中主要酚酸,其次是绿原酸、多巴胺、L–酪氨酸,再次是焦性没食子酸、原儿茶酸、香草酸、儿茶酚、表儿茶酸、对羟基苯甲酸、丁香酸、4–甲基儿茶酚、对香豆酸。     

贵州省刺梨中抗坏血酸含量HPLC测定方法优化

贵州省蕴藏着较丰富的刺梨资源,抗坏血酸是刺梨中主要的活性成分之一。为探究较优高效液相色谱法(HPLC)对贵州省刺梨中抗坏血酸进行含量测定,试验分别对流动相、柱温、流速进行方法优化,确定适用的色谱条件,并进行方法学考察。采用所优化的方法对贵州省刺梨中抗坏血酸进行含量测定,测定结果与食品安全国家标准"食品中抗坏血酸的测定"中第一法HPLC测定所得结果使用配对样本T检验比较两者是否存在差异。结果表明,以流动相为0.05%草酸水溶液与甲醇(98∶2),柱温为25℃,流速为0.7 mL/min,检测波长为245 nm,进样量20μL时,所得测定方法耐用性、专属性、精密度、稳定性、重复性、回收率均较好,刺梨中抗坏血酸含量在0～50μg/mL范围内线性关系良好(R~2=0.999 9)。同时,刺梨中抗坏血酸含量与国标方法所测抗坏血酸含量差异无统计学意义(P0.05)。因此,优化所得HPLC法检测贵州省刺梨中抗坏血酸含量结果准确、可靠,操作简便,适用于贵州省刺梨中抗坏血酸的含量测定。