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扁茎黄芪离体快繁及多倍体诱导 总被引:4,自引:2,他引:4
以扁茎黄芪的干燥成熟种子为外植体,研究其离体快繁技术,并在无菌繁殖条件下探索了秋水仙碱溶液不同浓度和时间处理对扁茎黄芪的诱变效应。快繁研究结果显示,扁茎黄芪的发芽培养基为MS,继代增殖最适培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L,平均增殖系数达到4.5,平均苗高达3.5cm;生根最适培养基为1/2MS+NAA0.05mg/L,生根数为4~6条,生根率达到100%。采用浸泡法将扁茎黄芪的茎尖在0.1%,0.3%和0.5%不同秋水仙碱溶液浓度下分别处理1,2,3和4d,并对诱导处理后获得的再生植株进行染色体鉴定,得出以0.3%秋水仙碱溶液浸泡3d为诱导多倍体的最佳处理组合,诱导率达40%。 相似文献
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<正> 1819年,Pelletier 和Caventon发现秋水仙碱后一百多年,Dixon和Malden(1908年)发现秋水仙碱能搅乱细胞的正常分裂。1937年,Dustin 等以小麦、葱等作材料,用秋水仙碱处理后,发现能抑制纺缍丝的形成。同年,Blakaslee 和 Avery 便开始用秋水仙碱创造多倍体的研究。1948年,关博夫首先将该项技术应用于桑的多倍体诱导。70年代末,我国杨今后等也进行了研究,并培育出一些具有优良性状的多倍体桑。近两年来,笔者对多倍体的诱导也进行了一些试验,现结合本人的实践,谈几点体会和看法。 相似文献
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山丹新麦草多倍体诱导的初步研究 总被引:5,自引:0,他引:5
用0.2%的秋水仙素分不同处理时间对二倍体新麦草萌动种子进行了染色体加倍,并对加倍后的植株在幼苗分蘖期进行了细胞学和形态的研究。结果表明:在室温用0.2%秋水仙素溶液处理3~5h,诱导加倍的成功率最高,加倍植株均为二倍体和四倍体的混倍体;混倍体植株叶片气孔保卫细胞的长度均高于未加倍的二倍体植株。 相似文献
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金沙柚是江西甜柚的一个主栽品种,具有风味独特,丰产性好等优点,但果实种子较多。本研究采用秋水仙素、氨磺乐灵和氟乐灵三种诱导药剂,分别对金沙柚种子进行浸种、幼芽期诱导处理和幼苗期诱导处理,并对不同药剂的处理浓度进行比较优选。结果表明,浸种处理以0.3%氨磺乐灵处理24 hr效果较好;幼芽期诱导以采用0.05%秋水仙素处理8 hr效果较好;而苗期诱导处理,各药剂均可获得较高的诱导率,其中以0.3%的秋水仙素诱导效果最佳,多倍体诱导率可达58.90%。 相似文献
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以芒(Miscanthus sinensis)种子为外植体诱导出愈伤组织,对愈伤进行处理,探讨秋水仙素、诺考达唑、安磺灵3种不同诱变剂在相应条件下对芒多倍体诱导的作用效果。通过流式细胞仪进行DNA含量测定、染色体制片技术进行染色体数目鉴定和比较四倍体与二倍体叶片中气孔保卫细胞大小和密度等手段检测再生植株的倍性。结果表明:在对芒的愈伤进行处理时,最佳组合为安磺灵浓度10 μmol·L-1,温度5℃,1.02 mmol·L-1的Ca2+浓度,处理15 min,其诱导率为35.19%。诱变剂对材料的毒害作用表现为秋水仙素毒害作用最大;诺考达唑和安磺灵对材料的毒害作用次之,且二者无显著差别。 相似文献
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果树多倍体品种一般具有生长旺盛、果实大、产量高和抗逆性强等特点。‘红阳’猕猴桃是内果皮为红色的二倍体品种,味道鲜美,但果实较小、抗性较差,因此本研究通过系统筛选,确定采用0.05%秋水仙素诱导处理无菌的叶柄愈伤组织4h,可获得20%变异率,效果最好;经植株再生,最终得到1株四倍体植株和4株混倍体植株。形态学指标分析显示,四倍体与二倍体植株相比,叶片长度提高了12.07%、叶片宽度提高了24.40%、叶柄粗度提高了120%、叶绿素相对含量提高了41.67%、净光合速率提高了17.71%。 相似文献
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以不同植物生长调节剂组合和不同基本培养基,探讨了马蹄金子叶离体培养的方法和影响因素。结果表明,不同植物生长调节剂组合的培养基对愈伤组织的诱导频率有显著影响,出愈率为16%~100%;以MS或B5培养基作诱导愈伤组织的基本培养基效果较好;将子叶接种到MS+1.0mg/L2,4-D+0.2mg/L6-BA的诱导培养基中诱导愈伤组织,再用MS+0.1mg/L2,4-D+2.0mg/L6-BA+3.0mg/LAgNO3作分化培养基出苗效果最佳,愈伤组织分化频率高达20.7%。 相似文献
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不同外植体对马蹄金愈伤组织诱导及分化的影响 总被引:7,自引:0,他引:7
从不同外植体的生长时间、切取方式和光照条件诸因素探讨了对草坪地被植物马蹄金Dichondra repens愈伤组织诱导及分化的影响作用。结果表明:下胚轴和子叶的生长时间只对愈伤组织诱导的始愈时间和生长势有影响,生长期越短,则始愈时间缩短,愈伤组织生长势强,而对出愈率、愈伤组织状态和愈伤组织分化率无明显作用;光照和黑暗培养只对下胚轴诱导愈伤组织的生长状态有影响而对子叶诱导愈伤组织无作用;外植体的不同切取方式对愈伤组织诱导的始愈时间有影响,经切取后可缩短始愈时间;仅从完整子叶离体培养诱导愈伤组织获得了再生植株,其分化频率为13.9%~18.6%。 相似文献
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采用0.2%中性蛋白酶Ⅱ和0.25%胰酶:0.02%EDTA(1:1)“两步酶”消化法从羊驼背部皮肤分离得到羊驼毛囊干细胞。用无血清角质细胞培养基(K-SFM)培养进行形态学观察、细胞生长曲线克隆形成率及免疫组化染色检测。结果显示,细胞生长曲线表明,不同代次毛囊干细胞接种前3d生长缓慢,4~6d进入倍增期,有无限增殖的趋势,所分离的羊驼毛囊干细胞具备毛囊干细胞特征(体积小、立体感强),呈现未分化特征;CK19、CK15、81-integrin和CD34免疫组化染色阳性;第3、5、7、9代克隆形成率分别为(32.7±2.27)%、(47.0±3.46)%、(46.3±3.18)%和(43.3±3.76)%。结果表明,用“两步酶”消化法成功分离获得羊驼毛囊干细胞,无血清角质细胞培养基(K—SFM)可使羊驼毛囊干细胞体外维持未分化状态并传代至12代。 相似文献
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Thanh Quang DANG‐NGUYEN Tamas SOMFAI Seiki HARAGUCHI Kazuhiro KIKUCHI Atsushi TAJIMA Yukio KANAI Takashi NAGAI 《Animal Science Journal》2011,82(3):374-382
The pig is considered to be a suitable source of cells and organs for xenotransplants, as well as a transgenic animal to produce specific proteins, given the biological similarities it shares with human beings. However, the in vitro embryo production system in pigs is inefficient compared with those in other mammals, such as cattle or mice. Although numerous modifications have been applied to improve the efficiency of in vitro embryo production systems in pigs, not much progress has been made to overcome the problem of polyspermy, and low developmental ability due to insufficient cytoplasmic abilities of in vitro matured oocytes and improper culture conditions for the in vitro produced embryos. Recent achievements, such as the establishment of chemically defined medium and utilization of ‘zona hardening’ technique, have gained some success. However, further research for the reduction of polyspermy and detrimental effects of the culture systems in pigs is still needed. 相似文献
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鸡原代输卵管上皮细胞体外分离培养与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
为了探讨鸡原代输卵管上皮细胞分离培养方法,本研究分别对消化酶、消化时间、取材部位和表面包被物等条件进行比较和优化,筛选出鸡原代输卵管上皮细胞分离和纯化的最佳方法,并对培养细胞进行鉴定与传代。结果显示,取鸡输卵管漏斗部,0.25%胰酶+0.02%EDTA联合消化15min、低速离心去除单细胞、差速贴壁除去成纤维细胞,在20%FBS包被的细胞培养瓶中可获得满意的输卵管上皮细胞分离效果,细胞贴壁性良好。培养的细胞在24h时成团贴壁,48~60h明显增殖,呈圆形或多角形"铺路石样"的单层细胞生长,72h后细胞增殖速度减慢,可以维持至10d以上,且传代后细胞贴壁生长良好,经姬姆萨染色和透射电镜观察鉴定为鸡输卵管上皮细胞。本研究建立的鸡原代输卵管上皮细胞分离培养方法可获得纯度较高的目的细胞,为研究鸭源鸡杆菌对鸡输卵管细胞的侵袭特性提供了良好的体外研究模型。 相似文献
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Chemical composition, in vitro digestibility and gas production of straw from four different varieties of Kabuli chickpea (Cicer arietinum) were studied. Kinetics of fermentation of straws from 19 different accessions of chickpea was also evaluated using gas production technique. Significant difference (p < 0.05) was observed in the yield of straw [from 1041 to 1174 kg dry matter (DM)/ha] from different varieties. The proportion of seed/straw from different varieties varied from 0.61 to 0.93. Crude protein, neutral detergent fibre and acid detergent fibre content of straw ranged from 28.1 to 35.8, 598.6 to 645.4 and 459.2 to 473.4 g/kg DM respectively. Organic matter digestibility was different (p < 0.05) among varieties and varied from 471.4 to 535.5 g/kg DM. Potential gas production (A), the rate constants (c and d) and lag times of straws from different chickpea varieties were not different (p > 0.05). However, the rate constants (c and d) and lag times were different (p < 0.05) among accessions. Potential gas production (A) differed (p < 0.05) approximately twofold among different accessions. The results emphasized that in any evaluation of chickpea varieties or accessions, where straw of this legume seed is used as an animal feed, not only seed yield but also yield and quality of straw should be taken into consideration. 相似文献
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采用6种常用抗菌药物对临床分离的38株猪链球菌2型进行敏感性检测,从中选择3株对红霉素和环丙沙星敏感的菌株,采用体外递增药物浓度的方法分别诱导成对红霉素和环丙沙星耐药的菌株,按临床检验标准委员会(CLSI)推荐的方法测定了红霉素和环丙沙星对同一亲本的敏感株和诱导耐药株的体外最小抑菌浓度(MIC),并测定在外排泵抑制剂利血平存在的情况下敏感株和诱导耐药株的MIC变化情况。微量稀释法测定的MIC结果显示:在所选的6种抗生素中,氟苯尼考和氨苄西林对临床分离的38株猪链球菌的作用最好,抑菌率都为100%,红霉素及环丙沙星有一定作用,耐药率分别达39.5%(15/38)和28.9%(11/38),而磺胺间甲氧嘧啶、四环素的抑菌效果最差,耐药率达100%。浓度递增法成功诱导了猪链球菌2型菌株对红霉素和环丙沙星耐药性,其MIC值分别由0.001 8 mg/L上升至128 mg/L。在外排泵抑制剂利血平存在的情况下,抗菌药物对部分猪链球菌2型菌株的MIC值下降。结果提示:逐步增加药物浓度可以诱导猪链球菌2型菌株对红霉素和环丙沙星的耐药性,而且猪链球菌2型菌株耐药性的产生可能与耐药性相关的主动外排机制有关。 相似文献
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牛卵泡卵母细胞体外受精和发育的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
利用屠宰黄牛卵巢作为供试材料 ,对卵巢表面 2~8mm卵泡卵母细胞体外受精(IVF) -受精卵的体外发育 (IVD)进行了系列研究 ,采用上游法、Percoll法和本实验室沿用的直接洗涤法处理牛冻精 ,观察 3种精子处理方法处理牛冷冻精子对卵母细胞体外受精胚胎发育的影响。实验结果 ,就卵裂率指标 ,采用Percoll法处理的精子进行卵母细胞体外受精 ,和上游法及洗涤法分别比较 ,差异均不显著 (P >0 .0 5 ) ;桑囊率指标 ,只有上游法比洗涤法高 ,差异显著 (P <0 .0 5 ) ,其余差异均不显著。以FERT -TALP液作为受精液采用常规培养方法 ,精卵作用 18~ 2 0h后分开 ,与精卵作用 6~ 8h后分开卵母细胞受精后的 8-细胞发育率及桑囊率变化不大 (P >0 .0 5 ) ;卵裂率指标 ,18~ 2 0h处理组高于 6~ 8h处理组 ,但两组之间差异也不显著。表明 ,在生产中采用FERT -TALP液做为受精液 ,应用上游法处理精子 ,不需要另购试剂 ,精卵孵育时间由 18~ 2 4h缩短至 6~ 8h是可行的 ,其现实意义是可以简化胚胎体外生产的程序 ,节省人力 ,降低成本 相似文献
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本文阐述了体外受精技术在牛胚胎工程和育种研究中的意义,介绍了牛体外受精技术的研究历史和目前的研究进展,对牛IVF技术的技术指标现状及经济效益进行了评估,并就牛的体外受精技术当前研究存在的问题作了评述,对其前景做了展望。 相似文献