生防菌株B-3对辣椒枯萎病的防治及其鉴定

为了明确生防菌株B-3对辣椒枯萎病的防效及其分类地位,采用管碟法测定了生防菌株B-3对辣椒枯萎病菌的抑制作用,考察了其对辣椒枯萎病的防效,并采用表型特征培养观察法、生理生化测定法和16SrDNA序列分析法对菌株B-3进行了鉴定。结果表明,生防菌株B-3的发酵液及其滤液对辣椒枯萎病菌均表现出较好的抑制作用,对辣椒枯萎病的盆栽与大田试验的防效都比较好,分别为73.6%和64.8%,显著优于100mg/L多菌灵。菌株B-3的形态与生理生化特性与枯草芽孢杆菌很接近,由16SrDNA序列分析的系统发育树发现,菌株B-3的序列与Bacillussubtilis菌株MO5单独构成一个分支,进化上的距离最近,由此可将其鉴定为枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis。     

番茄枯萎病和青枯病拮抗细菌的筛选、评价与鉴定

从宁夏银川、江苏沭阳和福建厦门的番茄、辣椒、西瓜等作物根际土壤中,分离纯化获得367株细菌菌株。以番茄枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.lycopersici和番茄青枯病菌Ralstonia solanacearum为靶标菌,从367株菌株中筛选出对两种病菌皆具有很强拮抗作用的菌株22株。拮抗细菌抑菌物质的研究结果表明：22株拮抗细菌均能分泌蛋白酶;不能分泌几丁质酶;3株细菌能分泌纤维素酶;3株细菌能分泌嗜铁素。盆栽试验结果表明：拮抗细菌PTS-394对番茄枯萎病和青枯病的防效最高,分别为77.4%和80%;菌株H-70、L-1和SJ-280对番茄枯萎病和青枯病的防效均大于60%。对上述4株拮抗细菌进行16S rRNA种属鉴定,均为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。     

紫茎泽兰对石榴枯萎病菌和枯草芽孢杆菌生长的影响

在室内条件下,利用20%的MS营养液（MS0.2）和灭菌蒸馏水培养的紫茎泽兰根系分泌物对石榴枯萎病和生防细菌枯草芽孢杆菌生长进行测定。结果表明,2种方式培养的紫茎泽兰根系分泌物均不能有效抑制枯萎病菌的生长,但对枯草芽孢杆菌的生长具有极强的促进作用。其中30%MS0.2对枯草芽孢杆菌的促进率达29.85%,而40%蒸馏水的促进率可达87.46%。恢复石榴园紫茎泽兰可能提高利用生防细菌枯草芽孢杆菌防治石榴枯萎病的效果。     

不同作物套栽对枯草芽孢杆菌控制石榴枯萎病效果的影响

本文室内测定了枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis对石榴枯萎病菌Ceratocystis fimbriata的抑菌作用,检测其在石榴Punica granatum、番茄Lycopersicum esculentum、大豆Glycine max、青菜Brassica chinensis、芫荽Coriandrum sativum、大葱Allium fistulosum var. giganteum和大蒜Allium sativum根际的定殖动态及其结合作物套栽对石榴枯萎病的盆栽控制效果。结果表明,芽孢杆菌在不同供试植物根际的定殖能力差异大,在石榴根际的定殖力弱,在番茄、大葱和大蒜根际的定殖力强;作物套栽结合施用芽孢杆菌明显地减轻了石榴枯萎病的发病程度,其中芽孢杆菌结合套栽番茄、大葱和大蒜的平均防效分别达78.14%、80.99%和78.91%。综上所述,套栽番茄、大葱和大蒜有望成为一种提高枯草芽孢杆菌控制石榴枯萎病的有效手段。     

微生物以菌克菌在葡萄上的应用

利用枯草芽孢杆菌(依天得)在室内对葡萄蔓枯病菌和葡萄灰霉病的病原菌进行了防效测定。结果表明,枯草芽孢杆菌对葡萄蔓枯病菌和葡萄灰霉病的病原菌均有较好的防效,分别为:93.37%和93.07%。同时还对枯草芽孢杆菌的抑菌机理进行了初步研究,结果表明该拮抗菌可以溶解致病菌菌丝。     

番茄枯萎病菌和青枯病菌拮抗细菌的评价

为筛选出对番茄枯萎病和青枯病有较好防效的生防菌,采用平板对峙法,以番茄枯萎病菌Fusarium oxysporum和番茄青枯病菌Ralstonia solanacearum为靶标菌,从江苏沭阳、宿迁、溧水及内蒙古海拉尔分离到的2 062株细菌菌株中筛选拮抗菌株,并采用平板对峙法、拮抗菌液灌根法、分子生物学方法进行拮抗物质检测、盆栽试验及种属鉴定。结果表明:从2 062株细菌中共筛选到21株对番茄枯萎病和青枯病具有很强拮抗作用的菌株,均能分泌蛋白酶,具有解磷作用;不能分泌几丁质酶和纤维素酶,仅4株细菌能分泌嗜铁素。拮抗细菌SY290对番茄枯萎病和番茄青枯病防效最高,分别达到74.2%和75.0%,SQ728和LS536次之,但防效均大于60%。结合各菌株形态特征、16S r DNA与gyr-B序列分析结果,菌株SY177、SY290和SQ728鉴定为解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliquefaciens,菌株LS536为枯草芽胞杆菌B.subtilis。     

生防细菌C-4的特性鉴定及其对香蕉枯萎病的防治效果

采用平板对峙法从香蕉根际土壤中共分离到74株细菌,其中菌株C-4对香蕉枯萎病菌1号小种和4号小种均有强抑制作用,相对抑制率分别为81.25%和83.75%。抑菌谱测定结果表明,菌株C-4具有较广的抑菌范围,对番茄枯萎病菌、玉米弯孢叶斑病菌、胶孢炭疽病菌、棉花枯萎病菌、棉花黄萎病菌、小麦赤霉病菌和西瓜枯萎病菌等均有抑制作用。根据Biolog系统鉴定及16S rDNA序列分析结果,将菌株C-4鉴定为地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis,其在YPGA或PDA培养基、32~35℃、pH 7.8~8.0、40~52h培养条件下生长和拮抗作用最为理想。室内盆栽试验结果显示,菌株C-4对香蕉枯萎病具有良好的防效,接种30天后病情指数明显低于对照。     

几种药剂对温室芹菜根结线虫病的防治效果

通过田间试验,分别调查了10%噻唑磷颗粒剂、0.5%阿维菌素颗粒剂、2亿CFU/g胶冻样类芽孢杆菌微粒剂、10亿CFU/mL蜡质芽孢杆菌悬浮剂4种药剂和对照药剂15%阿维·丁硫微乳剂对温室芹菜根结线虫病的防治效果和产量表现。以上5种药剂处理的防效分别为80.73%、65.04%、13.24%、8.44%、21.68%,产量增幅分别为18.45%、14.24%、3.4%、-0.95%、8.01%。供试药剂中,胶冻样类芽孢杆菌、蜡质芽孢杆菌处理的防效和产量增幅均低于对照药剂阿维·丁硫;而噻唑磷、阿维菌素处理的防效和产量增幅均明显高于对照药剂。     

不同微生物菌剂对福白菊枯萎病防治效果的研究

使用4种微生物菌剂不同剂量处理对福白菊枯萎病进行田间试验,结果显示:4种微生物菌剂对福白菊枯萎病均有一定的防治效果,且防效随用药量增大而提高。根据试验结果,根腐克星50倍液防效最好,极显著高于其他各处理的防效;5亿芽孢/g多粘芽孢杆菌水剂17倍液、天下第一菌50倍液、天下第一菌100倍液、1000亿芽孢/g枯草芽孢杆菌100倍液4个处理防效次之,各处理间防效无显著差异;在试验剂量范围内对福白菊生长安全,且有明显促进生长作用。推荐使用根腐克星50倍液、天下第一菌50-100倍液、5亿芽孢/g多粘芽孢杆菌水剂17倍液、1000亿芽孢/g枯草芽孢杆菌100倍液防治福白菊枯萎病,在发病初期灌根防治,10d左右灌根1次,连续灌根3次。     

大棚甜瓜三种主要真菌病害拮抗细菌的筛选与鉴定

从甜瓜根际土壤、牦牛粪、蚯蚓粪等样品中分离出245株细菌,用平板对峙法筛选出14株对甜瓜枯萎病菌具有良好抑制作用的菌株,分别采用管碟法和凹玻片法测定拮抗细菌发酵液对甜瓜枯萎病的抑制效果和对甜瓜白粉病菌、甜瓜霜霉病菌孢子囊萌发的抑制效果。抑菌试验结果显示,菌株FCJ2发酵液对甜瓜枯萎病菌的抑制率为64.7%,对甜瓜白粉病菌、甜瓜霜霉病菌孢子萌发抑制率为62.3%、49.2%。盆栽试验结果显示,FCJ2对甜瓜枯萎病、甜瓜白粉病和甜瓜霜霉病的防效分别为88.5%、93.6%和82.6%,与农药对照组相比均具有显著差异(P0.05)。经形态特征鉴定、生理生化特征鉴定及16S rDNA序列分析,确定FCJ2为芽孢杆菌属枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。     

枯草芽孢杆菌Bs-916的抑菌活性及其抑菌物质初探

为了揭示从土壤中分离出的拮抗菌—枯草芽孢杆菌Bs-916的抑菌作用和抑菌机理,采用管蝶法、平板涂抹法及孢子盟发法测定了Bs-916及其代谢液对水稻纹枯病菌、蚕豆枯萎病菌等8种病原菌的抑菌活性,结果表明其对供试的大多数病原菌均具有较强的抑菌活性,如Bs-916及其代谢液对水稻纹枯病菌的抑制率分别为95.4％和70.7％,对水稻稻曲病菌的抑制率均为100%。为了探索Bs-916胞外物质的种类及特性,分别采用丙酮沉淀、PEG沉淀、等电点沉淀和超微浓缩等方法从Bs-916代谢液中获得了沉淀物或截留物,它们均具有抑菌活性。沉淀物经蛋白酶K 处理后,活性减弱,说明Bs-916胞外抗菌物质具有蛋白质的性质。     

内生细菌B504的鉴定及对黄瓜枯萎病的生防作用

B504是从黄瓜植株中分离到的内生细菌。平板对峙试验表明,该菌株对黄瓜枯萎病菌等10种植物病原真菌具有拮抗作用,对黄瓜枯萎病菌的生长抑制率达44.1%。该菌株造成黄瓜枯萎病菌的分生孢子畸形,形成泡状物,尔后细胞壁消解,引起细胞内含物外溢,明显影响孢子萌发。用B504对黄瓜种子进行催芽处理,对黄瓜苗期、成株期枯萎病的防治效果分别为54.0%和41.7%。B504的16S rDNA序列与枯草芽胞杆菌具有高度相似性。根据菌体形态、培养性状、生理生化特性及16S rDNA序列分析等指标,确定B504为枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis）。     

非致病性尖孢镰刀菌FJAT-9290的定殖特性及对番茄枯萎病的防治效果

为评价非致病性尖孢镰刀菌FJAT-9290对不同植物的致病性和定殖能力,利用该菌株所含的无毒基因SIX1特异性检测引物P12-R1/P12-F2跟踪其在不同植物中的侵入与定殖情况,并研究其对番茄植株生长特性的影响及对番茄枯萎病的防治效果。结果显示,接种120 d内,菌株FJAT-9290对所供试的11种植物均未造成危害,但在侵入时间与定殖方面存在差异。该菌株最易侵入番茄植株,接种第5天即可在茎基部检测到;其次为甜椒、甜瓜、西瓜和香蕉等植株,接种10 d时可在茎基部检测到;但在韭菜、香葱和马唐草上均未检测到。该菌株在番茄与茄子植株的定殖时间最长,达90 d;其次为甜椒、香蕉和粉蕉,至少60 d;在甜瓜、西瓜和黄瓜上为40~50 d。该菌株能促进番茄植株生长,显著提高其株高和叶片数量,对番茄枯萎病的盆栽与田间防治效果分别达76.70%和69.56%。表明菌株FJAT-9290具有良好的定殖能力且对番茄枯萎病具有较好的防治效果。     

土壤施加氧化钙对西瓜枯萎病的影响及其机理初探

为探明土壤撒施石灰对西瓜枯萎病发生的影响,本试验设计5个浓度剂量的氧化钙对连作西瓜5年的土壤进行消毒处理,通过栽培感病品种并调查植株生长情况、枯萎病发病率等指标,结合土壤中尖孢镰刀菌西瓜专化型1号小种病原菌孢子量和土壤pH的变化动态,以此评估土壤施加石灰防治西瓜枯萎病的效果,并利用不同浓度的钙对尖孢镰刀菌西瓜专化型菌丝生长和产孢量的影响进行防治机理的初步研究。试验结果表明,当土壤施加氧化钙后,西瓜发病率显著降低,各处理的相对防效分别为14%、57.8%、96.3%、94.7%、94.7%。在定植10d后,各处理均有促进植株生长发育的作用,其中1.34g/kg最显著。而随着氧化钙施加量的增加,土壤pH值也不断提高,30d趋于稳定。对土壤病原菌孢子数量检测表明:各处理土壤中病原菌数量均呈现显著降低的趋势。PDA平板生测结果表明,当钙离子浓度高于80mmol/L时,病原菌的生长及产孢量开始受到抑制,随着浓度的增加,抑制作用加强。土壤施加氧化钙不仅能改善土壤的酸化,还能有效防控西瓜枯萎病,其机理可能是土壤pH值的提高改变了土壤微环境,不利于病原菌侵染;施加的钙离子抑制了病原菌菌丝的生长及孢子的萌发。研究结果对揭示氧化钙防控西瓜枯萎病机制,具有一定的参考价值。     

木霉T97菌株对几种植物病原真菌的拮抗作用机制和温室防治试验

从土壤中分离了一木霉Trichoderma sp.菌株T97.竞争及对峙培养结果表明,木霉T97对豌豆根腐病菌Fusarium solani f.sp.pisi、番茄灰霉病菌Botrytis cinerea、茄子黄萎病菌Verticillium dahliae、黄瓜枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp. cucumerinum、小麦全蚀病菌Gaeumannomyces graminis var. tritici、小麦根腐病菌Bipolaris sorokiniana和立枯丝核病菌Rhizoctonia solani等7种病原菌有较强的生长竞争优势.光学显微观察表明,木霉T97通过缠绕、附着和穿透的方式寄生立枯丝核菌、番茄灰霉病菌和小麦全蚀病菌.受T97作用后,茄子菌核病菌的菌丝尖端肿大、变粗,豌豆根腐病菌和黄瓜枯萎病菌的菌丝出现断裂等溶菌现象.用T97培养物(0.6%(w/w))处理土壤,对茄子黄萎病和菌核病、黄瓜枯萎病和菌核病以及豌豆根腐病的苗期病害防治效果达66%～81%.用T97孢子悬浮液108cfu/mL在花期喷雾保护黄瓜、辣椒和番茄叶面,对灰霉病的防治效果相当于50%速克灵WP 3 000倍液.     

Interactions Between Meloidogyne artiellia, the Cereal and Legume Root-Knot Nematode, and Fusarium oxysporum f. sp. ciceris Race 5 in Chickpea

ABSTRACT In the Mediterranean Basin, Fusarium oxysporum f. sp. ciceris and the root-knot nematode Meloidogyne artiellia coinfect chickpea. The influence of root infection (after inoculation with 20 nematode eggs and second-stage juveniles per gram of soil) by two M. artiellia populations, from Italy and Syria, on the reaction of chickpea lines and cultivars with partial resistance to Fusarium wilt (CA 252.10.1.OM, CA 255.2.5.0, CPS 1, and PV 61) and with complete resistance to F. oxysporum f. sp. ciceris race 5 (CA 334.20.4, CA 336.14.3.0, ICC 14216 K, and UC 27) was investigated under controlled conditions. In genotypes with partial resistance, infection by M. artiellia significantly increased the severity of Fusarium wilt, irrespective of the fungal inoculum density (3,000 or 30,000 chlamydospores per gram of soil), except in cultivar CPS 1 at the lower fungal inoculum density. In genotypes with complete resistance to Fusarium wilt, infection by M. artiellia overcame the resistance to F. oxysporum f. sp. ciceris race 5 in CA 334.20.4 and CA 336.14.3.0 but not in ICC 14216 K, irrespective of the fungal inoculum density, and overcame the resistance in UC 27 only at the higher inoculum density. Infection by the nematode significantly increased the number of propagules of F. oxysporum f. sp. ciceris race 5 in root tissues of genotypes with complete resistance to Fusarium wilt, compared with roots that were not inoculated with the nematode, irrespective of the fungal inoculum density, except in ICC 14216 K, in which this effect occurred only at the higher inoculum density. Reproduction of an M. artiellia population from Syria in the absence of F. oxysporum f. sp. ciceris race 5 was significantly higher than that of a population from Italy in all tested chick-pea genotypes except ICC 14216 K. However, there was no significant difference between the reproduction rates of the two nematode populations in plants infected with F. oxysporum f. sp. ciceris race 5, irrespective of the fungal inoculum density and the reaction of the genotypes to the fungus.     

皂荚提取物对植物病原菌的抑制作用

 豆科植物皂荚是一种传统药用植物,为我国特有种。本文在室内测定了皂荚叶和棘刺乙醇提取物对枯草芽孢杆菌、胡萝卜软腐欧文氏杆菌、番茄疮痂病菌、番茄灰霉病菌、番茄叶霉病菌、棉花枯萎病菌、瓜果腐霉的抑制作用。叶提取物未检测出抗菌活性。棘刺提取物对枯草芽孢杆菌和番茄疮痂病菌都表现出一定的抗菌活性,最低抑菌浓度(MIC)分别为2.5 mg/mL和10 mg/mL。棘刺乙醇提取物在浓度为1 mg/mL时,对4种植物病原真菌的生长都表现出抑制活性,其中对瓜果腐霉生长的抑制率为28.4%。将棘刺乙醇提取物分为石油醚等5个极性不同的萃取部分,其中乙酸乙酯部分对枯草芽孢杆菌、番茄疮痂病菌、欧文氏杆菌都具有明显的抑制作用,且活性强于其它的极性段,对枯草芽孢杆菌和番茄疮痂病菌的MIC分别为1.25 mg/mL和5 mg/mL。乙酸乙酯部分对瓜果腐霉和棉花枯萎病菌的生长也有较强的抑制作用,在1mg/mL时抑制率分别为45.8%和23.9%。研究结果表明,皂英抗菌活性成分主要存在于棘刺中的乙酸乙酯极性段和正丁醇极性段中。     

Interactions of Pratylenchus thornei and Fusarium oxysporum f. sp. ciceris on Chickpea

ABSTRACT Fusarium oxysporum f. sp. ciceris and the root-lesion nematode Pratylenchus thornei coinfect chickpeas in southern Spain. The influence of root infection by P. thornei on the reaction of Fusarium wilt-susceptible (CPS 1 and PV 61) and wilt-resistant (UC 27) chickpea cultivars to F. oxysporum f. sp. ciceris race 5 was investigated under controlled and field conditions. Severity of Fusarium wilt was not modified by coinfection of chickpeas by P. thornei and F. oxysporum f. sp. ciceris, in simultaneous or sequential inoculations with the pathogens. Root infection with five nematodes per cm(3) of soil and 5,000 chlamydospores per g of soil of the fungus resulted in significantly higher numbers of propagules of F. oxysporum f. sp. ciceris with the wilt-susceptible cultivar CPS 1, but not with the wilt-resistant one. However, infection with 10 nematodes per cm(3) of soil significantly increased root infection by F. oxysporum f. sp. ciceris in both cultivars, irrespective of fungal inoculum densities (250 to 2,000 chlamydospores per g of soil). Plant growth was significantly reduced by P. thornei infection on wilt-susceptible and wilt-resistant chickpeas in controlled and field conditions, except when shorter periods of incubation (45 days after inoculation) were used under controlled conditions. Severity of root necrosis was greater in wilt-susceptible and wilt-resistant cultivars when nematodes were present in the root, irrespective of length of incubation time (45 to 90 days), densities of nematodes (5 and 10 nematodes per cm(3) of soil), fungal inocula, and experimental conditions. Nematode reproduction on the wilt-susceptible cultivars, but not on the wilt-resistant one, was significantly increased by F. oxysporum f. sp. ciceris infections under controlled and field conditions.