生物固氮技术在退耕还林还草中的应用

我国西部退耕还林还草工程的实施，需要大面积播种豆科灌木和豆科牧草。接种根瘤菌是解决大面积人工林、草场“氮缺乏”问题的有效措施。在贫瘠的土地上豆科植物接种根瘤菌可增加生长量15%～50%，每年可增收干草750～1200kg/hm2。豆科根瘤菌接种的技术关键包括优良菌种、优质菌剂选择和种子丸衣化接菌技术。目前，国家农业微生物菌种中心保藏着几百株豆科根瘤菌菌种；国内根瘤菌剂生产企业可以生产锦鸡儿、沙打旺、苜蓿、三叶草等十几种根瘤菌剂产品；丸衣接种技术在我国推广应用面积已超过133.33万hm2。根瘤菌接种技术在退耕还林还草中的作用是其他技术无法替代的，有十分重要的地位。     

生物固氮技术在退耕还林还草中的应用

我国西部退耕还林还草工程的实施，需要大面积播种豆科灌木和豆科牧草。接种根瘤菌是解决大面积人工林、草场“氮缺乏”问题的有效措施。在贫瘠的土地上豆科植物接种根瘤菌可增加生长量15％－50％，每年可增收干草750－1200kg/hm^2。豆科根瘤菌接种的技术关键包括优良菌种、优质菌剂选择和种子丸衣化接菌技术。目前，国家农业微生物菌种中心保藏着几百株豆科根瘤菌菌种；国内根瘤菌剂生产企业可以生产锦鸡儿、沙打旺、苜蓿、三叶草等十几种根瘤菌剂产品；刃衣接种技术在我国推广应用面积已超过133.33万hm^2。根瘤菌接种技术在退耕还林还草中的作用是其他技术无法替代的，有十分重要的地位。     

中国豆科牧草根瘤菌大面积应用13年回顾

１９８１年以来，筛选出了几十种豆科牧草根瘤菌菌种，并在我国南方和北方建立了根瘤 菌剂生产基地，在全国飞播牧草区大面积推广种子丸衣化接种根瘤菌技术，１９９３年累计接种面积为７０万公顷。接种根瘤菌提高了飞播牧草的成苗率，促进了共生固氮，提高了牧草产量和质量，为我国豆科牧草人工草地的建植起到了重要作用。     

蒙古岩黄芪丸衣接种根瘤菌试验报告

豆科牧草根瘤菌固氮和促进生长的作用早已被人们认识,如何促使豆科牧草早结、多结根瘤,并把其技术推广应用于大面积生产中,便成为重要的研究课题。这项工作在国外已开展多年,在我国还处于起步阶段。对蒙古岩黄芪(以下简称其俗名——羊柴)根瘤菌的研究,只是在近几年才肯定了它具有根瘤,1985年才开始了菌种的采集。本试验的目的就在于探索在大面积生产过程中,羊柴根瘤菌接种的技术,并观察它对羊柴结瘤、生长情况的影响。     

根瘤接种在牧草生产中的分组应用

根瘤菌是大自然中所包含无数微生物中少量有益微生物之一 ,它通常存在于土壤的各个层次中。在生地上 (未进行过垦殖或未播种过同类豆科牧草的地块上 )播种豆科牧草时进行根瘤接种 ,有利于幼苗早期形成根瘤 ,及早形成固氮能力 ,大大提高牧草产量 ,提高牧草养分含量 ,增强牧草的抗逆性。除开极少数自然天生野合的根瘤菌附生外。一般牧草与根瘤菌是通过人工辅助方式———也就是人们所谓的族间接种方法———直接进行 ,形成牧草与根瘤菌共生的。接种方法 :可用工厂化生产的根瘤菌剂拌种 ;也可采集同类豆科牧草的根瘤 ,按每公顷 1 5 0克的比例 ,…     

科技

中国兽医微生物菌种保藏管理中心引进33株大肠杆菌菌种 8月10日,中国兽医微生物菌种保藏管理中心从丹麦国家血清研究所引进33株大肠杆菌菌种,用于制备大肠杆菌O抗原定型血清。丹麦国家血清研究所是世界卫生组织参考实验室,拥有大肠杆菌。抗原定型血清180种,而中国兽医微生物菌种保藏管理中心库存的用于制备大肠杆菌。抗原定型血清的菌种有140余种。     

科技

中国兽医微生物菌种保藏管理中心引进33株大肠杆菌菌种 8月10日,中国兽医微生物菌种保藏管理中心从丹麦国家血清研究所引进33株大肠杆菌菌种,用于制备大肠杆菌O抗原定型血清。丹麦国家血清研究所是世界卫生组织参考实验室,拥有大肠杆菌。抗原定型血清180种,而中国兽医微生物菌种保藏管理中心库存的用于制备大肠杆菌。抗原定型血清的菌种有140余种。     

苜蓿根际有益菌接种剂对苜蓿生长特性影响的研究

为探讨微生物肥源替代或部分替代化肥的应用潜力,利用前期从苜蓿(Medicago sativa L.)和小麦(Triticum aestivum L.)根际分离的3株溶磷菌(Bacillus sp.,Pseudomonas sp.和Azotobacter sp.)和1株根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)研制苜蓿根际新型专用接种剂,并进行田间随机区组试验,测定其对苜蓿生长特性的影响.结果表明:单一菌种接种剂+半量磷肥对苜蓿的促生效果不及复合菌种接种剂+半量磷肥,与对照(全量磷肥)相比,复合菌种接种剂+半量磷肥处理对苜蓿的各项生长指标均有明显的促生效应,其中以复合接种剂+半量磷肥处理的效果最佳:苜蓿株高、叶绿素含量、叶茎比、干鲜比及产量分别较对照增加9.00％,51.98％,13.79％,19.57％,11.98％(第1茬)和8.26％,48.08％,16.87％,20.07％,20.95％(第2茬)；单一菌种接种剂+半量磷肥处理的效果不及全量磷肥处理,但处理根瘤接种剂+半量磷肥效果较好.因此,推荐根瘤接种剂和Jm170+Jm92+ Lx191溶磷菌+根瘤菌复合接种剂为适用于苜蓿的最佳单一及复合菌株接种剂,研制的各接种剂质量达到农业部微生物肥料行业标准(NY227-94)的要求.     

中国兽医微生物菌种保藏管理中心引进33株大肠杆菌菌种

近日,中国兽医微生物菌种保藏管理中心从丹麦国家血清研究所引进33株大肠杆菌菌种,用于制备大肠杆菌0抗原定型血清。丹麦国家血清研究所是世界卫生组织参考实验室,拥有大肠杆菌0抗原定型血清180种,而中国兽医微生物菌种保藏管理中心库存的用于制备大肠杆菌0抗原定型血清的菌种有140余种。     

微生物菌种资源描述规范、技术规程项目专家评议会在京召开

自然科技资源平台共享建设《微生物菌种资源描述标准和规范研究制定及共享试点建设》和《微生物菌种资源收集、整理、保藏技术规程》项目专家评议会于2004年12月24～25日在北京召开。在这次由中国农科院召开的会议上，对项目组编制的18个微生物菌种描述规范(以下简称《规范》)和11个微生物菌种资源收集、整理、保藏技术规程(以下简称《规程》)进行了评议。     

铝和酸胁迫对苜蓿根瘤菌生长和抗氧化酶系的影响

在铝和酸胁迫下,比较分析了天蓝苜蓿和紫花苜蓿根瘤菌的生长及SOD(超氧化物歧化酶)、CAT(过氧化氢酶)、POD(过氧化物酶)、及GR(谷胱甘肽还原酶) 等抗氧化酶系响应特点。铝胁迫设5个梯度,即0,25,50,75,100 μmol/L;酸胁迫设4个pH水平,即4,5,6,7。结果表明,铝和酸胁迫下,2种苜蓿根瘤菌的OD_A600均显著降低,生长受到抑制,且天蓝苜蓿根瘤菌的OD_A600显著高于紫花苜蓿根瘤菌。在pH水平为4和5时,紫花苜蓿根瘤菌没有生长。在铝毒胁迫下,天蓝苜蓿根瘤菌的SOD酶活性一定程度减小后缓慢上升,而CAT、POD和GR酶活性随铝浓度增大显著下降;紫花苜蓿根瘤菌的SOD,CAT及GR酶活在低Al胁迫下无显著变化,在高铝胁迫下显著下降。随着pH水平的下降,天蓝苜蓿和紫花苜蓿根瘤菌均表现为SOD、CAT、POD、GR酶活性的显著下降。在不同铝及酸胁迫下,天蓝苜蓿根瘤菌各抗氧化酶活性显著高于紫花苜蓿根瘤菌。综合分析认为天蓝苜蓿根瘤菌较之紫花苜蓿根瘤菌有较强的耐酸、耐铝性。     

紫花苜蓿根瘤菌分子分型和生物型划分研究

根据表型和共生效应,对种内根瘤菌划分生物型,为苜蓿与根瘤菌高效共生育种提供理论依据。以分离自甘肃省3个栽培区域5个苜蓿品种植株不同部位的根瘤菌株为材料,进行16SrRNA测序、多位点序列分型(Multilocus Sequence Typing,MLST)、表型数值分类和共生效应测定。结果表明,78株初筛菌经16SrRNA和MLST分析有20株属于Rhizobium radiobacter;表型特征数值分类将其聚为7个群。接种5个苜蓿品种,选择对共生效率贡献率最大的地上干重进行多重比较。当接种处理地上干重显著高于未接种处理CK时标记共生效应为A,与CK差异不显著时标记为B,显著低于CK时标记为C。以苜蓿品种为甘农3号、甘农9号、陇中、清水和WL168HQ的顺序,将各菌株共生效应结合,形成6种共生模式。结合表型和共生模式,20株R.radiobacter被划分为14种生物型,WL168HQ、甘农3号和陇中苜蓿品种内生物型多样性丰富,甘农9号和清水苜蓿品种内生物型单一。综上所述,根据表型特征和共生模型可以进行种内根瘤菌株的生物型划分,苜蓿品种内根瘤菌生物型多样性丰富。     

草食偶蹄动物魏氏梭菌病及预防

为探讨国内野生和家养动物魏氏梭菌病发生的特点与规律,收集了近32 a间的文献资料,设立魏氏梭菌病发生的时间、区域、动物种类、细菌血清型等因素,统计分析流行病特征。结果：①魏氏梭菌病每隔4 a左右就会有高发病出现,各种血清型发病高峰的年际不一样,野生动物和家养动物高发病的年际、血清型有差别。②魏氏梭菌病在一年四季中均可发生,各季节的发生率不同,春季是高发季节,家养动物尤为明显,秋季野生动物的发病较为明显。4个季节中,D型菌引起的发病较多,在春季和夏季中D型菌发病尤为明显,在秋季中仅A型菌和D型菌有发病记录,冬季中都不突出。③魏氏梭菌病在1 a 12个月中均可发生,3、4月是高发病时期,6、11月的发病比率次之。3月西部区域发病较多,4月黄河与长江之间区域发病为多,6月长江以南区域发病高,11月则是黄河以北区域发病较多。野生动物发病多集中在6月和11月,家养动物4月发病较突出。2月C型菌引起的发病较明显,11月A型菌发生的比率明显高于其他血清型,D型菌则全年发生的较多。④黄河以北、黄河与长江之间、西部区域发病主要集中在春季,长江以南则主要在夏季发病。黄河以北区域D型菌最高,A型菌其次,C型菌最低。黄河与长江之间区域A型菌落高于D型菌,C型菌仍是最低。长江以南区域D型菌为主,A型菌其次,没有C型菌发病。西部区域则是D型菌明显高于A型菌和C型菌。结论：魏氏梭菌病的发生有一定的规律,每间隔4 a左右会有高发病出现。不同区域,魏氏梭菌病发生的时间有差别。野生动物和家养动物发病的时间和致病血清型有区别。疫苗接种预防是有效的,综合措施是较好的预防措施。预防时慎用磺胺嘧啶和多黏菌素类抗生素。兽医诊断水平亟待提高。     

贵州尾矿区野生豆科牧草根瘤菌及其抗性测定

为了筛选获得对复合重金属具有耐受能力且能在本地豆科植物根系内定殖共生的抗性根瘤菌,本研究从贵州省内的锰矿区、铅锌矿区采集野生豆科牧草根瘤样品,经分离纯化、菌体形态观察、16S rRNA基因序列比对分析,获得71个根瘤菌保存菌株。系统发育和区系分析结果表明,分离菌株分属7属28种,其中根瘤菌属(Rhizobium)的分布频率高达54.93%,为优势属,木兰根瘤菌(R.indigoferae)的分布频率最高(15.49%),为优势种。选择来自不同尾矿区、不同种类的根瘤菌17株,采用重金属平板法测定各供试菌株对贵州尾矿土分布较多的Pb²⁺,Zn²⁺,Cr⁶⁺,Mn²⁺,Cd²⁺五种重金属的耐受性,结果发现17个菌株对3种或3种以上的重金属都具有不同程度的耐受能力,其中HMZT039-6,HSST042-6,HSST042-1,ZHQT052-1和HXTT050-1对5种重金属离子均有耐受能力,为筛选出的最优抗性根瘤菌株。本研究结果可为本地区土壤重金属污染的修复治理提供共生微生物资源。     

Molecular epidemiology of classical swine fever in the Russian Federation

The ability to discriminate between various classical swine fever virus (CSFV) strains and isolates is a prerequisite for following the spread of the virus after an outbreak. To determine the relatedness between Russian CSFV isolates from different geographical regions, three fragments of the viral genome (5' NTR, the variable region of the E2 gene and a fragment of the NS5B gene) were sequenced and used for genetic typing. Thirty-one field isolates were obtained from CSF outbreaks which occurred between 1994 and 1999. In addition, three attenuated strains were included in the study, namely the LK and CS vaccine strains, and the moderately virulent 238H isolate. The vaccine strains have been used in Russia for more than 30 years. Our results showed that all field isolates are in subgroup 1.1 together with Alfort 187 and with the highly virulent strain Shimen. In contrast, the CS and LK vaccine strains belong to subgroup 1.2. While there is no evidence for the reversion of the two vaccine strains to wild type, it is feasible that the highly virulent Shimen strain, which has been used as a challenge strain for many years, contributed to field strain generation. The Russian field isolates from the 1990s can be distinguished from the CSF virus isolates which occurred in the EU Member States in the same decade, as here all outbreaks were caused by CSF viruses belonging to subgroup 2.     

山东省部分地区禽源致病性大肠杆菌的血清流行病学调查与耐药性检测

为调查山东省禽源致病性大肠杆菌流行的血清型及耐药性,从山东部分地区的45家养禽场分离到致病性大肠杆菌96株,应用微量平板凝集试验进行了血清型鉴定,共鉴定出18种血清型,其中优势血清型6种,分别为O78、O2、O15、O18、O143、O88,占定型致病性菌株的64％。抗菌药物敏感性试验发现,96株大肠杆菌对20种药物有不同程度的耐药性。75％以上的菌株对氨苄青霉素、阿莫西林、土霉素等5种抗菌药耐药,50％以上的菌株对卡那霉素、多西环素、环丙沙星等7种抗菌药表现为耐药;所有分离株存在多重耐药现象,75％的受检菌对9种或9种以上的被测药物耐药。结果表明,O78、O2、O15、O18、O143、O886种血清型是山东省部分地区近年来禽源致病性大肠杆菌的优势血清型,且禽源致病性大肠杆菌的耐药现象严重,有必要加强耐药性检测,以指导兽医临床合理使用抗菌药物。     

新疆乌昌地区与喀什地区规模化牛场嗜冷菌分离鉴定及污染源分析

试验旨在了解南北疆地区规模化牛场嗜冷菌污染情况,为制定有效的防控措施提供科学依据。在气温（TM）和相对湿度（HR）相似情况下,采集新疆乌昌地区与喀什地区的6个牛场8个采集点样品共计396份,采用GB 4789.2-2016《食品国家安全标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》进行嗜冷菌分离与培养,并进行BLAST序列鉴定。鉴定结果显示,从乌昌地区与喀什地区共分离嗜冷菌276株,通过%ID鉴定确定优势嗜冷菌15株,分别为苏云金芽孢杆菌、假单孢菌属、蜡状芽孢杆菌、芽孢杆菌属、不动杆菌属、环状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜冷杆菌属、血链球菌、巨大芽孢杆菌、节杆菌属、荧光假单胞菌、链球菌属、类芽孢杆菌、微小杆菌属。比较两地区间的差异,结果表明,乌昌地区与喀什地区在卧床土、饲料、空气中所分离的菌种类型总量最多;喀什地区除管道口环境外其余7个环境点嗜冷菌数量均低于乌昌地区,其中喀什地区卧床土、奶罐口和饲料中的菌量极显著或显著低于乌昌地区（P<0.01;P<0.05）,而管道口菌量极显著高于喀什地区（P<0.01）。综上所述,在温度、湿度、光照条件相似情况下,管理水平对南北疆地区牛场嗜冷菌污染有很大影响,应对不同地区分别建立有针对性的防控措施。本研究为探究南北疆地区生鲜乳污染溯源提供了理论依据。     

Serologic cross-reactivity of Australian Moraxella bovis to vaccinal bacterin strains as determined by competitive ELISA

OBJECTIVE: To conduct a serologic survey and define pili antigenic variability via the serologic cross-reactivity of Moraxella bovis isolates from naturally occurring infectious bovine keratoconjunctivitis (IBK) outbreaks in Australia. This project applies to the development of an M bovis pili-based vaccine targeting Australian strains originating from intensive cattle producing regions. PROCEDURE: Ocular swabs were collected from cattle affected with clinical signs of IBK from 25 veterinary practices. Standard criteria were used to identify 70 M bovis. Pure, piliated isolates were evaluated with a modified competitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for cell-bound M bovis pili to determine their serologic cross-reactivity with pili of vaccinal bacterin strains EPP63, FLA64, and SAH 38. RESULTS: Sixty-four percent (45/70) of M bovis isolates demonstrated homologous pili antigens to a vaccinal strain. M bovis isolates homologous to one of the three vaccinal strains were obtained in 77% (34/44) of IBK outbreaks sampled. No IBK outbreak had isolates homologous to more than one vaccinal strain; however, 29% (10/34) of outbreaks with a cross-reacting strain had non-cross-reacting strains as well. CONCLUSION: The similar prevalence of pilus antigen homology to strain FLA64 was observed with isolates derived from NSW, Tasmania, and Victoria, compared with results of prior smaller serologic studies, suggests that the common pilus antigens in M bovis within Australia have been relatively stable over the last 20 years. The prevalence of a limited number of pilus antigens in M bovis suggest that the application of a vaccine containing the bacterial strains EPP63, FLA64, and SAH38 may provide a useful management tool for reducing production losses associated with IBK in Australia.     

A novel subgroup among genotypes of equine arteritis virus: genetic comparison of 40 strains

The authors determined partial nucleic sequences of the variable regions of open-reading frame (ORF5) from 151 nucleotide to 668 nucleotide and deduced amino acid sequences of 518 nucleotide respectively of 20 equine arteritis virus (EAV) isolates. About 19 Hungarian and one Austrian EAV strains were subjected to sequence analysis, the further data of 20 EAV strains: six North American and 14 European were obtained from the GenBank. Comparative sequence analysis of the Hungarian EAV strains indicated that among the three variable regions the first has been affected mostly by point mutations. Genetic comparison of the Hungarian strains with other EAV isolates from western Europe and North America (including the Bucyrus reference strain) has been performed on the aforementioned genome region. Besides the already known genetic subgroups of EAV; phylogenetic analysis revealed a novel subgroup comprising mainly Hungarian strains. Compared with the Bucyrus virus, the overall sequence divergencies of the examined Hungarian strains ranged from 81.47 to 90.73% at nucleotide and from 84.88 to 91.86% at amino acid level. Epizootiological studies have shown that the significant part of the EAV strains having been existed in Hungary before and in 2000 belong to this unique cluster (II.D) which was not indicated in former phylogenetic studies. After 2000 new EAV strains emerged in Hungary, one of them causing abortions or neonatal death. The previously dominant 'Hungarian' EAV genotypes were replaced by these new strains belonging to North American and European subgroups (I.A, I.B, II.A, II.B). The anamnesis of these cases revealed connections with persistent virus shedder stallions, those were imported to the country after 2000 or have been infected abroad. One of these Hungarian stallions became the source of abortion storms in Hungarian studs.     

黄芪根际促生菌(PGPR)筛选与特性研究

为获得黄芪根际PGPR菌株并明确其促生特性,可为其在生产中的应用提供依据,本研究以黄芪的根瘤、根系及根际土壤为材料,利用选择性培养基分离筛选根瘤菌与溶磷菌,测定根瘤菌固氮酶活性、溶磷菌株的溶磷能力及分泌3-吲哚乙酸(IAA)的能力,从中筛选出综合性能优良的菌株,并运用生理生化鉴定和16S rDNA分子生物学鉴定相结合的方法鉴定优良菌株的种属。结果发现,溶磷菌数量的分布具有根系表面(RP)>根表土壤(RS)>远根土(NRS)>根内(HP)的规律,有明显的根际效应;经分离纯化获得76 株PGPR菌,其中根瘤菌1株、溶解无机磷菌株42 株和溶解有机磷菌株33 株,其中可分泌IAA能力的溶磷菌株有7株;筛选出综合性能优良,有进一步开发应用潜力的溶磷菌株7株,根瘤菌1株,经鉴定溶磷菌中3株为Pseudomonas sp.,3株为Bacillus sp.和1株为Klebsiella oxytoca,根瘤菌为Rhizobium sp.,这为研制生物菌肥提供优良菌种,同时丰富优良根际促生菌资源库。