实时荧光定量RT-PCR检测犬乳腺肿瘤血管内皮生长因子(VEGF)基因方法的建立及初步应用

为了准确地分析血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）在犬乳腺肿瘤形成过程中的作用,试验设计了针对犬VEGF基因的特异性引物,提取乳腺肿瘤组织RNA并扩增出目的片段,将PCR产物克隆到pGEM-T Easy载体,经质粒PCR扩增、酶切和测序鉴定重组质粒,构建标准曲线等,成功建立了乳腺肿瘤VEGF基因实时荧光定量PCR检测方法。运用实时荧光定量PCR检测了40例不同的犬乳腺肿瘤病例、2例正常乳腺组织。结果发现：在犬恶性乳腺肿瘤组织中,VEGF基因表达量明显高于良性乳腺肿瘤和正常乳腺组织（P〈0.001）;在伴有淋巴结转移的犬乳腺癌组织中,VEGF基因表达量明显高于没有发现转移的乳腺癌组织（P〈0.01）,但VEGF基因的表达量与肿瘤的大小和发病动物年龄无关（P〉0.05）。VEGF基因在犬乳腺癌组织中的表达量远高于其在正常乳腺和良性乳腺肿瘤组织中的表达,且与淋巴结是否发生转移相关。因此,VEGF可作为犬乳腺癌转移、复发的预测指标之一。     

COX-2和血管内皮生长因子过表达与犬乳腺肿瘤血管生成的相关性

本研究旨在探讨环氧合酶-2(COX-2)和血管内皮生长因子(VEGF)在犬乳腺肿瘤血管生成中可能的作用。对70例肿瘤病例(28例良性和42例恶性)进行免疫组织化学分析,检测其COX-2和VEGF的表达情况;以CD31免疫标记测定微血管密度(MVD)来评估肿瘤血管生成。结果显示,在恶性病例中COX-2和VEGF的表达,MVD均显著高于良性病例(P<0.001)。在恶性组中,COX-2阳性肿瘤病例的MVD显著高于COX-2阴性肿瘤病例(P=0.026)。同样,VEGF阳性肿瘤病例的MVD也显著高于VEGF阴性肿瘤病例(P<0.001)。本研究结果提示,COX-2和VEGF的过度表达可能有助于恶性肿瘤的血管生成和侵袭。     

犬乳腺纤维肉瘤的病理学观察

正犬乳腺肿瘤是成年雌性犬多发的一种疾病,主要表现为乳腺部有硬块状物,身体消瘦等临床症状。犬乳腺肿瘤包括乳腺原发性癌、肉瘤、癌肉瘤及良性肿瘤。来源于乳腺间叶组织的恶性肿瘤包括恶性叶状肿瘤、血管肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤、基质肉瘤、纤维肉瘤、脂肪肉瘤等,乳腺纤维肉瘤是原发性乳腺肉     

犬乳腺肿瘤ER和C-erbB-2蛋白表达

犬乳腺肿瘤是犬常见的肿瘤之一,仅次于皮肤肿瘤,恶性肿瘤约为50%[1].尽管本病的病因尚未完全清楚,但类固醇、生长因子及其受体为阐明病因提供了重要的依据[2].     

浅析一例犬的乳腺肿瘤诊治

乳腺肿瘤是雌性犬在临床上的常见病,是一种犬乳腺发生癌病变的疾病。犬的乳腺肿瘤分良性和恶性两种,犬乳腺实质性纤维瘤是犬乳房良性肿瘤的一种临床症状,以无痛性乳房肿块为主要特征。对一例雌性哈士奇乳腺肿瘤的病例采用了临床检查、实验室检查确诊该犬患良性的实质性肿瘤,通过手术方法摘除肿瘤,该哈士奇犬术后恢复良好。     

犬乳腺肿瘤治疗的研究进展

乳腺肿瘤是犬常见的肿瘤类型,研究犬乳腺肿瘤的治疗可以对人类乳腺肿瘤的治疗提供参考.归纳了近年来国内外乳腺肿瘤的治疗方法及进展,提出了犬的乳腺肿瘤的治疗建议,为犬的乳腺肿瘤的治疗提供了理论参考和依据.     

44例犬乳腺肿瘤的病理学分析及p53和HER-2的蛋白表达

为了对犬乳腺肿瘤分类,分析表皮生长因子受体-2(HER-2)与p53的过表达在肿瘤类型上的差异及影响,对所收集的犬乳腺肿瘤标本,进行石蜡切片、H.E.染色,划分肿瘤的病理类型,应用免疫组织化学法检测犬乳腺肿瘤中HER-2基因与p53基因的表达情况。结果 44例犬乳腺肿瘤病理组织切片中,共观察到纤维腺瘤、叶状肿瘤、导管乳头状瘤、浸润性导管癌、浸润性小叶癌(腺泡型)、小叶癌、黏液癌、髓样癌伴随淋巴细胞浸润、混合样癌9种类型;42例犬乳腺肿瘤的免疫组化结果中,HER-2在良性肿瘤中无表达,在恶性肿瘤中的表达率为38.9%,p53在犬乳腺肿瘤中的表达可达78.6%,而在恶性肿瘤中的表达率100%。结论 HER-2与p53的过表达有肿瘤类型的差异性。     

circ RNA在犬乳腺肿瘤分子机制中的应用前景

犬乳腺肿瘤是最常见的犬类肿瘤之一,严重危害犬的生命健康。circRNA具有特殊的生物学特性和较强的调控功能。circRNA参与乳腺癌的发生发展机制调控,但目前circRNA在犬乳腺肿瘤中的作用机理尚不清楚。文章综述circRNA在犬乳腺肿瘤分子机制研究的应用前景,为进一步研究circRNA在犬乳腺肿瘤的应用提供参考。     

抗犬VEGF单克隆抗体及夹心ELISA试剂盒的制备及应用

本研究旨在制备犬血管内皮生长因子(VEGF)单克隆抗体和研制犬VEGF双抗夹心的ELISA检测试剂盒。研究利用原核表达的方法制备出具有良好反应原性的重组融合蛋白犬VEGF-His,并在此基础上进行了犬VEGF单克隆抗体的制备及鉴定,结果表明,所获得的犬VEGF单克隆抗体对犬VEGF蛋白具有良好的反应原性和较高的特异性。利用此单克隆抗体,与VEGF的兔多克隆抗体血清分别作为夹心ELISA检测试剂盒的上下层抗体使用,建立了以犬VEGF为抗原的夹心ELISA试剂盒的检测方法,并对正常健康犬及乳腺肿瘤患犬血清进行了检测,得出了此试剂盒的阳性和阴性临界值。实验结果表明,此试剂盒具有良好的敏感性、特异性和重复性,且利用本试剂盒对临床样本进行验证时,阳性符合率为87. 5%,阴性符合率为97. 56%,具有较高的临床应用价值。     

犬右侧乳区3个肿块的病理学观察

<正>随着社会经济的发展,犬作为一种伴侣动物获得了更好的营养条件和免疫预防,平均寿命也得到了延长,因此患老年病(如肿瘤等)的机率也随之提高。犬乳腺肿瘤是兽医临床上最为常见的肿瘤之一,母犬乳腺肿瘤的发病率约占母犬全部肿瘤性疾病的50%,雄性犬也会发生乳腺肿瘤,但发生率较低(低于3%)[1],据报道老龄犬和未绝育犬更容易发生乳腺肿瘤[2]。犬乳腺肿瘤形态多种多样,不同个体的肿瘤之间或同一个体的不同肿瘤标本,其组     

锌指蛋白703(ZNF703) mRNA在犬乳腺肿瘤组织中的表达研究

<正>犬乳腺肿瘤是母犬最常见的肿瘤性疾病,约占犬所有肿瘤性疾病的1/2,而其中又有40%~50%被诊断为恶性肿瘤[1]。犬的乳腺肿瘤与人的乳腺肿瘤在组织学和生物学上有着共同特征[2],除去寿命因素,犬和人在肿瘤发病年龄上也很相似[3],而且在临床和某些分子水平上两者也有一定的相似性[4]。因此,犬的乳腺肿瘤可以作为研究人类散发性乳腺肿瘤的理想模型[5]。随着犬乳腺肿瘤研究的深入,基因学研究已经成为研究犬乳腺肿瘤发病机制和发展机     

犬乳腺肿瘤的诊治

犬乳腺肿瘤是犬常见肿瘤,临床上发病率较高,其中恶性肿瘤严重危害犬的健康,甚至危及生命。笔者根据多年的临床实践,总结以下诊治技术,仅供同行参考。1病因乳腺肿瘤的发生还可能与饮食因素有关。一岁犬的肥胖和红肉类食谱是乳腺肿瘤发生、发展的危险因素。激素也可能影响乳腺肿瘤的发生。早期作卵     

犬乳腺纤维腺瘤的诊治

犬乳腺肿瘤是发生于老龄犬的常见疾病之一。兽医在临床治疗上大多切除肿瘤肿块 ,至于该肿瘤肿块是良性还是恶性 ,很少作进一步的确诊和探讨。作者对 1例患乳腺肿瘤的犬进行手术治疗的同时 ,根据其临床症状并结合组织病理学检查 ,最后确诊该肿瘤为良性犬乳腺纤维腺瘤     

1例犬乳腺淋巴肉瘤的诊治体会

<正>近年来犬乳腺肿瘤发病率有日趋严重之势,有数据显示犬乳腺肿瘤已占犬总肿瘤的42%,占母犬生殖系统疾病的83%。最近接诊的1例犬乳腺肿瘤经病理切片分析,认为是犬原发性乳腺淋巴肉瘤。原发性乳腺淋巴肉瘤在临床上较为少见,报道显示仅占乳腺所有恶性肿瘤的0.04%～0.74%,现将该病例报     

血管内皮生长因子在犬乳腺癌裸鼠模型中的表达及其意义

乳腺是犬肿瘤常发的部位，母犬乳腺瘤发病率约占全部肿瘤性疾病的25％～42％，这种疾病在公犬很少发病（低于3％）。乳腺肿瘤疾病在犬5岁之前很少发生，但随着年龄的增长，发病率逐渐上升。大多数的试验证明犬的乳腺肿瘤疾病发病年龄集中在10～12岁。乳腺肿瘤中约有一半是恶性的，并且发生转移的比率很高。据报道，母犬患乳腺肿瘤的机率是人类女性患乳腺肿瘤的3倍，犬乳腺肿瘤在组织形态学与生理学上与人类乳腺肿瘤基本一致。因此犬的原发性乳腺肿瘤是研究人类乳腺肿瘤极好的模型。     

二例犬乳腺肿瘤的诊治与体会

犬乳腺肿瘤是宠物临床中一种常见的肿瘤性疾病,两例犬乳腺肿瘤的诊治中以外科手术为主,结合LEEP,配合使用抗癌药。结果表明,犬乳腺肿瘤摘除术中LEEP法出血少,术野清晰,手术时间短。外科手术法应用广泛,操作简单,病犬术后恢复快。LEEP法和外科手术结合治疗犬乳腺肿瘤效果显著。     

孕激素诱导的生长激素与犬的乳腺肿瘤

乳腺肿瘤是犬的最常见的肿瘤，约占母犬肿瘤总数的一半；乳腺肿瘤约有一半是恶性肿瘤，发生转移的比率很高。犬乳腺肿瘤的发病原因还不很明确，它的形成都受哪些因子调节还未完全确定。孕激素能够诱导乳腺组织生成并蓄积生长激素，使乳腺增生，最终导致犬乳腺肿瘤的形成。在此过程中，雌激素受体、孕激素受体、生长激素结合蛋白和生长激素受体在乳腺癌的形成、发展中起关键作用。从内分泌的角度对犬乳腺肿瘤发病机理作了简单综述，以期为激素治疗乳腺肿瘤提供一些理论依据。     

一例老龄中华田园犬的乳腺肿瘤术后复发的反思

老龄未绝育母犬乳腺肿瘤发病率较高。目前公认的有效治疗方法主要是手术治疗。手术切除可以快速有效地清除肿瘤病变部位,适用于良性肿瘤,但对于老年和体弱的患犬手术风险性大,且有些乳腺肿瘤术后复发率高。笔者对临床接诊的一例老龄犬乳腺肿瘤术后复发病例进行报道以及回顾反思,为犬乳腺肿瘤的治疗提供参考。     

犬猫乳腺肿瘤的组织病理学诊断

<正>犬猫乳腺肿瘤是兽医临床上常见的一种肿瘤疾病,约占母犬母猫肿瘤疾病总发病率的50%,公犬公猫则比较少见。据国外文献记载,犬的乳腺肿瘤是仅次于皮肤肿瘤的最常见肿瘤,约50%为恶性;猫的乳腺是仅次于肝脏和皮肤的最易发生肿瘤的组织,     

常规外科手术与使用高频电刀摘除犬乳腺肿瘤的比较

高频电刀(loop eletro-surgical excision proce-dure,LEEP)目前主要用于人医宫颈病变、扁桃体挤切术、消化道息肉、胆囊摘除术、顽固性鼻出血等疾病治疗,兽医临床应用报道很少,曾见犬阴道肿瘤及犬阴道前庭肿瘤治疗病例[1-2]。犬乳腺肿瘤是兽医临床常见病例之一[3],目前多采用外科手术摘除。但乳腺组织血液供应丰富,手术过程出血较多,LEEP可利用高频电流通过机体组织时产生热效应,进行组织切割并凝固血管止血[4]。因此,本文采用LEEP和外科手术法比较对犬乳腺肿瘤组织的摘除效果,以期获得临床应用启示。