一种适用于甜菜大规模快速提取DNA的方法

目前甜菜DNA提取通常使用CTAB法,大多数人仍采取研钵研磨的方法,但是在大批量提取DNA的时候,该方法耗时费力,提取效率较低。为了提高提取DNA的效率以适应大规模PCR的需求,我们创新了使用CTAB提取DNA的方法。该方法为先在离心管放入钢珠,然后把样品放入离心管中,放入到液氮中冷冻后直接使用震荡研磨机研磨后,再利用CTAB法进行提取,结果表明,该法点提取的DNA浓度和纯度均表现较好,并且将提取的DNA用于SSR引物的扩增,所得条带清晰,实验结果较好,可提高效率30%。     

样品不同处理方法提取甜菜基因组DNA的比对研究

为了提高甜菜基因组DNA的提取效率以及避免提取过程中DNA的降解,通过利用研磨机和锡箔纸两种不同的方法处理样品。结果表明,利用研磨机可以极大地提高研磨样品的效率,样品可以直接放到离心管中、加入缓冲液和钢珠后,直接利用研磨机进行打磨,一次可以处理24个样品;而利用锡箔纸进行研磨样品,既可以直接加液氮进行研磨也可以冷冻后再加液氮进行研磨,样品损失小,DNA无降解。两种方法提取的DNA含量接近,并且提取的DNA均可用于SSR引物的扩增。     

不同碱裂解法快速提取甜菜大群体DNA的研究

尝试使用一种新的方法提取甜菜干种子DNA,该方法不需要使用CTAB、SDS及其它提取DNA中需要使用的常规药剂,该方法仅需要使用NaOH一种试剂,提取几十份DNA只需要10几分钟的时间,并且提取的DNA完整性很好,完全可以满足甜菜SSR扩增的需要,为将来快速鉴定甜菜品种纯度和真伪性等工作奠定了坚实的基础.     

高粱DNA提取纯化方法的比较及RAPD反应条件的建立与优化

以高粱叶片为试材，采用4种方法提取DNA，并对这4种方法进行比较，选择高粱DNA提取纯化的最佳方法，同时对高粱RAPD反应条件进行研究，从而建立了一个适合高粱RAPD分析的最佳反应系统。     

快速大量提取甜菜DNA的新方法

以甜菜幼嫩叶片为材料,通过冷冻真空干燥将材料变成干粉,利用CTAB法对DNA提取程序进行了研究,建立了一种简单、快速的甜菜DNA提取程序,既节省时间,又可获得高质量的DNA,可以满足SSR及SRAP扩增的需要。     

我国华北区甜菜苗期未知叶斑病害的诊断鉴定

对2014年我国河北省和内蒙古两地甜菜种植区纸筒育苗苗期甜菜叶片上出现的新的叶部枯斑病害,利用马铃薯葡萄糖琼脂培养基分离、培养、保存病原菌。结合分离菌落形态,提取发病叶片或分离的菌株菌丝DNA,利用真菌检测的通用引物ITS1及ITS4检测结果得到长541 bp单一条带,并测序。无论是直接提取病叶DNA的PCR产物测序还是分离的病原菌提取菌落DNA测序得到的序列相同,NCBI比对结果为极细链格孢菌(Alternaria tenuissima)。进一步利用组蛋白3基因引物H3-1a和H3-1b扩增分离物菌丝DNA结果得到600 bp左右单一条带,测序结果同真菌通用引物检测结果一致。采用甜菜叶片涂抹法接种进行致病性试验出现了相同的叶斑症状,并从接种后出现病害症状的叶片上分离检测确认了病菌。因此,从河北和内蒙采集的甜菜苗期叶部病害病原菌为极细链格孢菌,为有效控制此类病害、减轻甜菜损失提供了理论指导。     

一种高质量的红毛丹基因组DNA提取方法

为了提取高质量的红毛丹基因组DNA，本研究以红毛丹叶片为试材，比较改良CTAB法、改良SDS法和试剂盒法对红毛丹叶片DNA的提取效果。结果表明：3种方法均可从红毛丹叶片中提取DNA，但由于改良CTAB法通过多次洗涤，并联合使用PVP和β-巯基乙醇处理，可有效去除红毛丹叶片中的多糖、多酚和蛋白质等物质，所获得的DNA纯度高且完整性较好，可用于SRAP-PCR等分子标记分析。此结果为后续分子生物学等相关研究奠定了基础。     

甜菜基因组DNA三种提取方法的对比研究

采用CTAB法、SDS法、蛋白酶K法分别提取甜菜基因组DNA,并对得到的DNA进行含量测定、PCR扩增效果鉴定、限制性内切酶酶切。比较3种方法的提取效果,结果表明:CTAB法提取的DNA产量最高,蛋白质和多糖含量低,PCR结果和酶切结果均比较好;SDS法提取的DNA产量也较高,PCR结果不如CTAB法效果好;蛋白酶K法提取的DNA产量最低,且含有较多的RNA,PCR扩增无结果。所以,CTAB法是适合于甜菜基因组DNA提取的最佳方法。     

不同方法对甜菜叶片基因组DNA提取效果比较与适用性探讨

对比了7种不同原理的提取方法对甜菜叶片基因组DNA的提取效果,从得率、纯度、耗时等多方面分析DNA提取效果,为不同研究目的确定了最适的提取方法。最终确定了SDS法是最适合自甜菜叶片中低成本大量提取DNA的方法,CTAB也基本能满足要求,吸附柱法是最适合高通量提取优质DNA的方法,碱裂解法是最适合样品迅速检测的方法,必要时可改用ROSE法。柠檬酸钠法产物质量不高且操作不够简便,尿素法产物纯度过低且耗时过长,在应用上未见优势。     

SDS法提取石斛基因组DNA的研究

以密花石斛(Dendrobium densiflorum Lindley ex Wallich)为研究试材,对植物SDS方法提取基因组DNA中的若干影响因子诸如药品、试剂配制方法、DNA取材部位、蛋白质去除次数、DNA析出时间、提取样品水浴时间等进行了比较分析。结果表明：不同的SDS缓冲液配制方法提取效果差异较大,Wang's配方产率及纯度都较高;石斛花苞的DNA提取产率较叶片高,但纯度较叶片低;提取过程中,适宜的水浴时间当为30～40 min,过短DNA产率下降,过长会引起DNA的降解,或最后产物中增加     

国外甜菜种子在新疆的表现及应用

本文对90年代中期以来国外甜菜种子在新疆进行的品种比较鉴定、区域试验以及大面积生产示范、种子繁殖及销售活动情况进行了详细分析和评价。外国甜菜品种在多方面表现出很强的优势，在有的方面优势不明显。还对外国甜菜种子在新疆的应用前景进行了分析，基于现实状况及未来发展趋势，外国甜菜品种大量进入中国是不可避免，应积极采取主动措施，合理应用引进的外国甜菜品种。     

氮素形态对甜菜抗氮胁迫能力的效应研究

试验采用土培和液培相结合的方法，对不同基因型甜菜的抗氮胁迫能力进行了研究，结果表明：1）甜菜对氮胁迫具有多样性，不同基因型甜菜的抗氮胁迫能力具有较大差异（为2－6倍）；2）甜菜的抗氮胁迫能力受外界供给氮素的形态影响较大，参试的6个品种（系）中，对NH4－N胁迫抗性强的，对NH4－N加NO3－N混合营养液胁迫的抗性也强；3）氮素的供给形态左右甜菜的吸收氮特性，但不同基因型的甜菜对3种氮源的反应不一；4）甜菜的抗氮胁迫指数与叶面积、叶绿素含量和全氮量呈显著正相关。     

叶面喷施威根龙膨大素对甜菜产质量的影响

威根龙膨大素是根据甜菜营养需求规律而研制出的一种专用型叶面肥。田间试验结果表明,甜菜叶面喷施威根龙膨大素后能促进块根的生长发育,根粗和单根重增加,产量比对照和多效唑处理分别提高23.4%和6.9%,含糖分别提高2.25度和1.74度,品质得到明显改善。     

甜菜种株腋芽的培养

本文对甜菜种株腋芽的培养进行了初步研究。采用3种培养基,均诱导出再生植株,表现出较高的诱导频率。实验结果表明,以MS为基本培养基,加一定量的激动素和吲哚乙酸对芽殖有效,而附加高浓度的α-奈乙酸对生根有效。加50％的草碳混合土可提高移栽苗的成活率。     

不同施钾水平下甜菜干物质积累与分配规律的研究

在不同施钾水平下对甜菜干物质积累及分配动态进行了研究，结果表明，甜菜各器官干物质积累量均随施钾水平提高而增加。干物质分配则随施钾水平的提高呈现生育前期冠／根比减小，生育中期增大，而生育后期又降低的规律。表明甜菜施用钾肥后促进了干物质生产及向各生育时期生长中心进行分配。     

不同甜菜种质耐盐性鉴定和筛选

采用发芽率测定、幼苗培养和水培试验相结合的方法,对不同甜菜种质分别在芽期和幼苗期进行发芽率、发芽势、盐害系数及株高、叶面积、干鲜重等指标进行研究.结果表明.随着盐浓度的增加.甜菜发芽率总体呈下降趋势,1.0%盐浓度为甜菜种子发芽的临界浓度,1.8%盐浓度为极限浓度:随着盐浓度的增加,甜菜幼苗的各项指标均表现为较为一致的下降趋势;筛选出耐盐性较强的材料2个.     

山西省甜菜害虫天敌蜘蛛种类及分布

在调查山西省甜菜害虫天敌昆虫种类及分布的基础上,进一步调查了山西甜菜害虫天敌蜘蛛。初步摸清了其种类有29种之多,分别隶属于9科,分布在大同、忻州、太谷等地区,有的在全省均有分布。     

甜菜单胚雄性不育系与保持系花药及小孢子发生的超微结构观察

为阐明甜菜单胚雄性不育系和保持系花药及小孢子发育的超微结构差异,以自育的甜菜单胚细胞质雄性不育系(CMS系)TB9-CMS和保持系(O型系)TB9-O为试验材料,在甜菜花芽分化、现蕾初期、开花初期分别进行4次花蕾取样,电子显微镜观察花药及小孢子发育过程的超微结构差异。结果表明,甜菜单胚CMS系与O型系花药和小孢子发育过程的超微结构存在明显差异。甜菜单胚CMS系花药壁产生初始期与O型系相似,但小孢子母细胞的数量较少,液泡化明显;绒毡层发育初期也形成乌氏体原始颗粒,但仅维持初始状态而停止发育;绒毡层在四分体期收缩离位,瓦解内移;小孢子母细胞形成四分体后,胼胝质壁较厚,小孢子逐渐变异开始退化。观察还发现,甜菜绒毡层细胞间以及形成四分体的胼胝质壁间有胞间连丝结构。     

航天诱变甜菜种子对其SP1代某些生理特性的影响

通过对航天诱变甜菜SP1代变异株及对照在生殖生长期叶片、未开放花蕾、开放花蕾还原糖含量的测定以及花粉粒萌发孔和叶片保卫细胞叶绿体数的观察,研究卫星搭载对甜菜SP1植株生理特性的影响。结果表明,卫星搭载的4个品系还原糖的含量和对照相比均有所变化,但只有3个品系在4个取样点变化显著,而且变异的方向存在差异。卫星搭载的四倍体甜菜变异株花粉粒萌发孔的数目和大小与对照相比有较大差异;而叶片下表皮保卫细胞中的叶绿体数与对照相比则没有差异。