香菇多糖Le-Ⅱ-2的分离纯化及其性质研究

采用水提醇沉法从香菇子实体中提取香菇粗多糖,Sevage法脱蛋白后,经DEAE柱层析、Sephdex G-200柱层析后得香菇多糖Le-Ⅱ-2组分.该组分经紫外和红外扫描证明其不含蛋白成分,并具有多糖的性质.     

苯酚硫酸法和高锰酸钾滴定法测定香菇多糖含量的比较

为确定一种比较准确、方便的香菇多糖测定方法,比较了苯酚硫酸法和高锰酸钾滴定法测定香菇多糖含量的差异:两种方法均稳定可行,重现性较好。但苯酚硫酸法测定香菇多糖含量高于高锰酸钾滴定法,苯酚硫酸法不仅灵敏度高,而且回收率也高于高锰酸钾滴定法;高锰酸钾滴定法操作也较繁琐。相对而言,苯酚硫酸法是测定香菇多糖较为理想的方法。     

贺兰山紫蘑菇多糖的分离与纯化

以贺兰山紫蘑菇为材料,采用纤维素酶酶法提取多糖,并经离子交换纤维素柱层析和葡聚糖凝胶柱层析对其组分进行分离和纯化,以明确贺兰山紫蘑菇的多糖组份和纯化方法。结果表明:贺兰山紫蘑菇多糖含有Ⅰ和Ⅱ2个组分,纯化后二组分均不合有核酸和蛋白质,此方法适宜该蘑菇多糖的分离纯化。     

固体发酵灵芝菌丝多糖的提取及组分分析

以苯酚硫酸法作为灵芝多糖的测定方法，研究了从固体发酵灵芝菌丝体中提取水溶性多糖的工艺，对浸提过程中的温度、时间、固液比及提取次数4个因素进行了单因素试验和正交试验，并利用Sephadex G-100凝胶色谱法和薄层层析法对主要组分GLPI进行了分子量测定和单糖分析。结果表明，灵芝多糖的最佳提取条件为浸提温度95℃，浸提时间40min，固液比1：20和提取次数为2次；GLP1分子量约为179900，初步判断为甘露聚糖。     

菌草栽培猴头菌子实体多糖的研究

以菌草栽培和木屑栽培的猴头菌子实体为试材,采用L9(34)正交实验设计方法对2种猴头菌子实体粗多糖进行提取,研究了不同浸提次数、料液比、浸提时间和温度对猴头菌子实体粗多糖得率的影响;用DEAE SepHarose Fast Flow离子柱层析法和SepHadex G-100凝胶柱层析色谱法对提取出的粗多糖进行初步分离和纯化,以期得到几个组分,且每组分为具有单一对称峰的多糖。结果表明:猴头菌子实体粗多糖提取的最佳条件是,浸提2次,料液比1∶25g·mL-1,浸提时间4h,温度90℃。菌草栽培猴头菌子实体多糖得到3个组分,分别记为cHEP1、cHEP2、cHEP3;木屑栽培猴头菌的子实体多糖纯化后只得到2个组分,分别记为sHEP1、sHEP2。对分离出的cHEP2、cHEP3和sHEP2纯度鉴定结果表明,3种组分均显示为单一对称峰。     

白背毛木耳胞内多糖的提取与纯化

通过正交试验确定了白背毛木耳(Auricularia polytricha)43-26液体发酵培养基的最优配方(g/L):土豆20、玉米粉20、蛋白胨10和磷酸二氢钾5;利用超声波辅助水提醇沉法提取胞内粗多糖,多糖含量为75.5%;多糖粗提物经DEAE-52纤维素离子交换层析和Sephadex G-200层析分离纯化,分别得到4个相对均一的纯多糖组分AP1、AP2、AP3和AP4.     

长裙竹荪子实体酸提水溶性多糖DiA的分离,纯化及组成单糖的鉴定

长裙竹荪(Dictyophora indusiata)子实体的3%三氯乙酸提取液经乙醇沉淀,去蛋白后得到多糖粗制品。粗制品再经二次DEAE-纤维素柱层析分离和Sephadex G-200柱纯化得到竹荪水溶性多糖DiA。经Sepharose 4B柱层析、聚丙烯酰胺凝胶电泳和醋酸纤维薄膜电泳鉴定,DiA为—单一物质。纸层析和气相层析表明,DiA的单糖组成为葡萄糖和甘露糖,其摩尔比为:0.29:1.00。多糖的分子量约为168000。     

短裙竹荪菌丝体多糖 DdM-S 提取及其性质

短裙竹荪菌丝体经热水提取，乙醇沉淀，去蛋白后得到粗多糖，经DEAE-Sephadex A-25柱层析进一步纯化，得到多糖纯品DdM-S。DdM-S.经聚丙烯酰胺凝胶电泳和Sephadex G-200柱层析，表明该多糖为单一物质。纸层析和气相层析分析表明，DdM-S.的单糖组成为D-葡萄糖，D-甘露糖和L-岩藻糖，其摩尔比为1．28：1．00：0．36。多糖的分子量约为199KD，红外光谱呈现出典型多糖的吸收峰。     

冬虫夏草多糖抗氧化活性及其单糖组成的研究

利用超声辅助提取法和分级醇沉得到3种醇沉组分粗多糖CSP40、CSP60和CSP80,并分析这3种组分的抗氧化活性。活性较好的粗多糖CSP40经过DEAE-Sepharose Fast Flow离子柱层析和Sephacryl S-400凝胶柱层析纯化得到单一组分CSP40-2a,进行乙酰化处理后用GC-MS测得其单糖组成。结果表明,超声辅助提取所得的3个醇沉组分均具有较好的抗氧化活性,从强到弱依次为CSP40CSP80CSP60。乙酰化分析表明,CSP40-2a主要由3种单糖组成,分别是D-甘露糖、D-葡萄糖和D-半乳糖,其摩尔比为1.98︰1.0︰0.67。     

桑黄多糖提取工艺研究进展

采用归纳总结的方法,对桑黄多糖提取工艺的研究进行了综述,主要提取方法为溶剂浸提法、超声波提取法、微波提取法、酶解法、低温低压提取法及增压提取法等;分离纯化方法主要有:Sevage法、DEAE-52纤维素、超滤法、大孔树脂吸附纯化、Sephadex G-100凝胶柱层析及各种色谱法等;检测方法主要为化学法分析法和仪器分析法等。     

甜瓜果实蔗糖代谢酶提取液中2种去糖方法的比较

以甜瓜鲁厚甜1号开花当天的果实为试材,分别测定蔗糖代谢相关酶—酸性转化酶(AI)、中性转化酶(NI)、蔗糖合成酶(SS)和蔗糖磷酸合成酶(SPS)的活性。对酶提取液中干扰测定结果的可溶性糖采取2种方法进行去除(1)直接用SephadexG-25柱离心去糖;(2)酶提取液先经过硫酸铵沉淀,去糖,重新溶解后再用SephadexG-25柱脱盐。结果显示,方法2处理后AI和NI、SPS和SS的活性均高于方法1。这表明在研究甜瓜果实蔗糖代谢相关酶活性时,采用方法2处理酶提取液效果更好。     

基于响应面优化的超声波辅助提取香菇多糖工艺研究

探究超声波辅助热水浸提法优化提取香菇多糖。以香菇多糖含量为指标,利用单因素试验、Box-Behnken试验设计及响应面分析方法,对香菇多糖提取工艺进行优化,且结合实际情况,获得了香菇多糖最佳提取工艺参数为料液比1∶30,超声提取功率200 W、超声提取温度70℃、热水浸提温度79℃,超声提取时间20 min,热水浸提时间1 h。在此条件下,香菇多糖含量为0.650 g·100^-1g^-1,该结果与建立模型的预测值0.655 g·100^-1g^-1基本相符。     

菌草栽培灰树花子实体多糖的研究

以五节芒(Miscanthus floridulus)、芒萁(Dicranopteris dichotoma)、类芦(Neyraudia reynaudiana)3种草粉按不同配比栽培的灰树花子实体与木屑栽培的灰树花子实体为试材,采用L_9(3~4)正交实验设计方法对灰树花子实体多糖提取条件进行优化,研究了不同料液比、浸提温度、浸提时间和浸提次数对灰树花子实体粗多糖得率的影响,并对灰树花子实体多糖含量进行测定;采用DEAE-Sephadex A-25离子交换柱分别对菌草栽培灰树花粗多糖与木屑栽培灰树花粗多糖进行纯化分级,利用Sephadex G-200凝胶柱层析色谱法对C-GLP1与S-GLP1进行纯度鉴定,为菌草栽培灰树花的精深加工提供参考。结果表明:水提醇沉法提取灰树花子实体粗多糖时,各因素对粗多糖提取率的影响存在差异,影响大小依次为料液比、浸提温度、浸提次数、浸提时间。菌草栽培灰树花子实体多糖提取的最佳工艺为料液比1∶40g·mL^-1,浸提温度100℃,浸提时间2h,浸提次数2次。对菌草及木屑栽培的灰树花子实体多糖分离纯化均得2个级分,C-GLP1、C-GLP2和S-GLP1、S-GLP2。纯度鉴定结果表明,C-GLP1与S-GLP1均为单一对称峰。     

双孢蘑菇多酚氧化酶的分离、纯化及特性分析

 通过分步盐析,DEAE-Cellulose-52阴离子交换层析和Sephadex G-100凝胶柱层析,对双孢蘑菇中的多酚氧化酶（PPO）进行了分离纯化,并对在分离纯化过程中蛋白得率及酶活性进行了测定。最终得到纯化倍数为103.2,比活为566.57 U · mg^-1,蛋白得率为0.47%的酶液。经SDS-PAGE电泳检验,所得到的PPO呈单一蛋白带,分子质量为25.5 kD。利用扫描探针显微镜对该酶的分子形态进行了观察,发现双孢蘑菇中的PPO分子呈椭球状,分子高度在8 ~ 12 nm之间。     

竹荪多糖的分离纯化和鉴定

中国福建古田人工栽培的竹荪（Ｄｉｃｔｙｏｐｈｏｒａｉｎｄｕｓｉａｔａ）子实休干品经热水提取，乙醇沉淀，蛋白法和Ｓｅｖａｇ法相结合去蛋白，ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－２５和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱纯化，得到竹荪多糖，命名为ＤＩ，用聚丙烯酰胺凝胶电泳和葡聚糖凝胶柱层析分析表明：该多糖为均一物质。竹荪多糖的分子量为１４４，０００，经紫外扫描，元核酸和蛋白质的特征吸收峰，红外扫描表明有典型的多糖吸收峰。该多糖经纸层析和气相色谱分析表明：其单糖组成为Ｌ—岩藻糖、Ｄ—木糖、Ｄ—甘露糖、Ｄ—葡萄糖，摩尔比为０．１６：０．２４：１．００：１．０８。     

竹荪多糖的分离纯化和鉴定

人工栽培的竹荪子实体干品经热水提取，乙醇沉淀，蛋白酶法和Ｓｅｖａｇ法相结合去蛋白，ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ－２５和Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－２００柱纯化，得到竹荪多糖，命名为ＤＩ。用聚丙烯酰胺凝胶电泳和葡聚糖凝胶柱层析，分析表明，该多糖为均一物质，竹荪多糖的分子量为１４４０００。经紫外扫描，无核酸和蛋白质的特征吸收峰，红外扫描表明有典型的多糖吸收峰。该多糖经纸层析和气相色谱分析表明：其单糖组成为     

硒在大蒜体内的生物富集及其抗氧化作用

大蒜对硒具有强的生物富集作用，并能将吸收的无机硒的７８．２４％转化为有机硒。经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０柱层析，聚丙烯酰胺凝胶电泳，ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳，首次从富硒大蒜中分离到一种分子量为３００００Ｄ的含硒蛋白，进一步研究其抗氧化作用，发现该蛋白能提高谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性，降低过氧化物酶活性。ＥＰＲ表明，Ｎａ２ＳｅＯ３处理组大蒜体内活性氧相对含量比对照低３１．９１％。     

3种植物免疫诱抗剂对番茄灰霉病菌的抑制作用

为明确植物免疫诱抗剂对番茄灰霉菌的抑菌效果,选用3%氨基寡糖素水剂、0.5%几丁聚糖水剂和1%香菇多糖水剂3种常规植物免疫诱抗剂,分别配制高、中、低3个浓度,采用含药培养基的方法开展室内抑菌试验,明确3种植物免疫诱抗剂相应最佳抑菌浓度后,在番茄生育期开展田间诱导抗灰霉病试验。室内抑菌试验结果表明：3种植物免疫诱抗剂均可抑制番茄灰霉菌的生长,其中,1%香菇多糖水剂对番茄灰霉病菌具有较好的速效性和持效性,1%香菇多糖水剂20倍液接菌1d后的抑菌率为36.1%,4d后抑菌率为67.43%;3%氨基寡糖素水剂抑菌效果次之,3%氨基寡糖素水剂100倍液接菌1d后抑菌率为22.1%;0.5%几丁聚糖水剂抑菌效果相对较低,抑菌率维持在0.0%～14.3%。田间诱导抗病试验结果表明：0.5%几丁聚糖水剂200倍液对番茄灰霉病具有较好的诱抗效果,连续施用4次后,番茄灰霉病防效达61.83%。     

灵芝硒多糖的制备及其分离纯化

灵芝（Ganoderma lucidum）菌丝体通过生物转化作用富集无机硒，分别经水、碱水浸提，醇析，去蛋白，脱色后，得到灵芝硒多糖粗提物。再经DEAE—Cellulose柱层析分离纯化后，收集得到的各组分在高效液相色谱上进行进一步纯化，从而得到了10个不同的硒多糖组分。以K562细胞进行的抗癌试验结果显示，SeGLP-2B-1，SeGLP-2B-2和SeGLP-2B-3三种纯化硒多糖均有抗癌活性，其中SeGLP-2B-1对K562细胞的抑制率最高，达61．58％。