3株魔芋茎腐病病原菌的分离鉴定与致病性研究

镰刀菌引起的魔芋茎腐病是魔芋栽培过程中重要病害之一,为明确贵州省兴义市魔芋茎腐病的病原菌种类,2019年从贵州省兴义市采集魔芋茎腐病病样,采用组织分离法对病样进行分离,通过形态学鉴定方法结合基于rDNA-ITS与tef序列分析的分子鉴定方法对分离物进行鉴定,并按照柯赫氏法则进行致病性测定。结果显示,经组织分离法共获得3株镰刀菌纯培养物,经鉴定分属于2个种,分别为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)和茄腐镰刀菌(F.solani);致病性结果表明,尖孢镰刀菌菌株xymy-8没有致病性,茄腐镰刀菌菌株xymy-7、xymy-9有致病性,且致病性有差异,其中菌株xymy-7的致病性强于菌株xymy-9的致病性。试验结果为魔芋茎腐病防控提供了理论依据。     

大蒜干腐病病原菌的分离鉴定

以感病的大蒜品系Z-1001鳞茎为材料,经病原菌分离与单孢纯化,获得F、J、H、G 4种纯化菌株。依据病原菌致病性测定,证实F菌株、J菌株为大蒜干腐病主要致病菌株。采用病原菌形态学观察并结合rDNA ITS序列分析,鉴定F菌株为尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum Schlecht）,J菌株为层生镰刀菌〔Fusarium proliferatum（Matsush.）Nirenberg〕,说明尖孢镰刀菌（F.?oxysporum Schlecht）和层生镰刀菌〔F.?proliferatum（Matsush.）Nirenberg〕是大蒜干腐病的主要致病菌。     

洛阳地区牡丹根腐病病原菌的分离与鉴定

2016—2018年以洛阳地区不同牡丹种植地的根腐病株为试材,采用组织分离法进行根腐病病原菌的分离纯化,根据柯赫氏法则检测分离物的致病性,同时结合形态学特征和基因序列分析对具有致病性的分离物进行鉴定,以明确引起洛阳地区牡丹根腐病发病的主要病原菌种类。结果表明:从30份根腐病株中共分离获得15株病原分离物,离体致病性检测表明9株分离物具有显著致病性;根据形态学特征,初步鉴定9株致病分离物为镰刀菌属(Fusarium)真菌,rDNA-ITS序列和EF-1α基因序列分析表明其中7株致病分离物为茄病镰刀菌(Fusarium solani),2株致病分离物为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。因此,该研究结果初步表明茄病镰刀菌和尖孢镰刀菌是引发洛阳地区牡丹根腐病的主要病原菌种类,2种病原菌复合侵染引起根腐病的发生,其中茄病镰刀菌为优势致病菌。     

胡萝卜镰刀菌根腐病病原菌的鉴定

为明确内蒙古西部地区一种新病害——胡萝卜镰刀菌根腐病病原菌种类,采用组织分离法对病原菌进行分离,用胡萝卜片接种、有伤口和无伤口胡萝卜肉质根接种及盆栽接种进行致病性测定,并通过形态学和分子生物学方法对病原菌进行鉴定。结果表明,分离到的3个菌株F1、F2和F3均表现致病性。经形态学鉴定,F1菌株为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum),F2和F3为茄病镰刀菌(Fusarium solani)。进一步采用真菌通用引物ITS1/ITS4对病原菌r DNA-ITS进行PCR扩增,并将测序结果在Gen Bank中进行同源性比对分析,鉴定结果和形态学鉴定的结果一致。明确了内蒙古西部地区胡萝卜镰刀菌根腐病的病原菌种类为尖孢镰刀菌(F.oxysporum)和茄病镰刀菌(F.solani)。     

非洲菊根腐病病原菌的分离鉴定及致病性

以非洲菊根腐病发病植株为试材,采用常规组织分离法对引起非洲菊根腐病病原菌进行分离纯化,研究了分离物对非洲菊的致病性,并通过形态学结合rDNA-ITS和TEF-1α序列的分子系统学方法对病原菌进行鉴定,以期明确非洲菊根腐病的病原菌类型.结果 表明:从典型病根上共分离获得8株菌株,分别为FZJf 1-1、FZJf 1-2、FZJf 1-3、FZJf 2-1、FZJf 2-2、FZJf 2-3、FZJf 3-1和FZJf 3-2;8株菌株均能导致非洲菊幼苗出现典型的叶片枯萎和根腐症状,其中菌株FZJf 1-1和FZJf 1-3致病力最强,接种第3周植株开始发病,其次是菌株FZJf 2-1,接种第5周植株开始发病,其余菌株致病性较弱;根据形态学特征和分子系统学特征鉴定出6株为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum),分别是FZJf 1-1、FZJf 1-2、FZJf 1-3、FZJf 2-1、FZJf 2-3和FZJf 3-2,1株为茄类镰刀菌(F.solani)FZJf 2-2,1株为层出镰刀菌(F.proli feratum) FZJf 3-1,尖孢镰刀菌(F.oxysporum)为优势病原菌,茄类镰刀菌(F.solani)和层出镰刀菌(F.proli.eratum)为弱势病原菌.     

新疆加工辣椒根腐病病原鉴定

以制干辣椒根腐病病样为分离对象,采用形态学和分子生物学方法对致病菌进行鉴定。结果表明:共采集根腐病样211个,从中分离获得161个分离物,其中镰刀菌Fusarium spp.121个,占总分离物的75.16%;其它菌40个,占24.84%,说明镰刀菌是新疆加工辣椒的主要致病菌。经致病性测定后,采用形态学观察结合18SrDNA-ITS、EF-1α和β?tubulin 3个序列分析,将80株有致病性的镰刀菌鉴定为尖孢镰刀菌(F.oxysporum)和茄病镰刀菌(F.solani),其中尖孢镰刀菌57株,占镰刀菌分离物的47.11%;茄病镰刀菌23株,占19.01%。     

镰刀菌引起的北京市草莓根腐病病原鉴定

对北京市昌平区采集的35个草莓根腐病病样进行病原鉴定,结果分离获得13个菌株,根据培养特征和形态学鉴定,确定分离到的菌株均为尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）|选取真菌通用引物ITS1/ITS4扩增菌株的rDNA-ITS序列并进行测序,通过与GenBank数据库序列比对,分子鉴定结果与形态学一致。将分离到的菌株回接到健康草莓幼苗上,植株表现出与田间发病相似的症状,重新分离能够得到相同的病原物。基于形态学、分子生物学鉴定及致病性检测,最终确定北京市昌平区草莓根腐病的病原菌为Fusarium oxysporum。     

蔬菜枯萎病镰刀菌种类研究

为了明确蔬菜枯萎病镰刀菌种类,为检疫、病害防治、资源利用提供依据。本研究运用形态学鉴定的方法,对来源于4个主要蔬菜种植区的5种蔬菜上分离纯化得到的13个镰刀菌单孢菌株进行菌落培养性状和形态特征研究。最后,从镰刀菌的致病性、产生及防治、培养基类型与菌株生长的关系、研究方法的改进4个方面进行了讨论和总结。     

宁夏枸杞炭疽病病原菌的分子鉴定

以枸杞为试材,对宁夏枸杞炭疽病果、病叶进行了组织分离、致病性检测和分子鉴定研究。结果表明:分离获得4株菌株,经致病性检测,有3株菌株有致病性;经形态学鉴定3株致病菌株属炭疽菌属(Colletotrichum);利用真菌保守的rDNA-ITS序列进行扩增和同源性分析,3株致病菌株与胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)的序列相似性达99.4%。     

石棉县黄果柑果实病斑致病菌的分离鉴定

为明确近年四川省石棉县黄果柑果实田间普遍发生的果面病斑的致病菌,2016年12月在当地采病果为试验材料进行病菌分离,并对分离菌株进行形态学鉴定、分子鉴定及致病性测定。结果表明,分离共获得12株真菌,5株为胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides,5株为互隔交链格孢菌Alternaria alternata,2株为果生刺盘孢菌C. fructicola。分离获得的胶孢炭疽菌株和互隔交链格孢菌株均能侵染果实和叶片形成病斑且与田间病斑基本一致,两者是生产中石棉县黄果柑果面病斑的致病菌。     

枸杞新病害叶枯病症状表现及病原菌鉴定

为了明确枸杞新病害叶枯病的症状表现及病原菌种类,2015—2017年在甘肃省武威市凉州区长城乡具有代表性的枸杞种植园,对枸杞叶枯病的症状进行了系统调查,采用组织分离法和回接试验分离病原菌并测定其致病性,对病原菌显微形态及ITS序列进行了鉴定及分析。结果表明:枸杞叶和果实均可感染叶枯病菌,室内接种与田间回接和田间发病症状相同,叶子和果实的病原菌可以相互侵染,并在枸杞叶上和果上均表现出叶枯病典型症状;不同发病组织中分离纯化得到158株菌株,形态观察表明,侵染叶和果实的菌株均为链格孢属链格孢菌(Alternaria alternata(Fr.)Keissler)。通过ITS序列,并结合形态特征进一步确定引起枸杞不同组织叶枯病的病原菌为链格孢菌(A.alternate)。     

湖南邵阳柑桔炭疽病菌分离鉴定和药剂筛选初报

为明确邵阳地区柑桔炭疽病病原菌的种类及其致病性，以及针对性开展防治药剂筛选，对2021年9月采自湖南邵阳的柑桔炭疽病样品进行病原菌分离纯化后，进行形态学和分子生物学鉴定，采用室内离体接种方法对分离病原菌的致病性进行测定，通过切片方法观察其侵染特性，采用菌丝生长速率法测定7种不同药剂对病原菌的抑菌效果。结果表明，共分离到了11株具有相同形态特征的菌株，结合rDNA-ITS和rDNA-GAPDH序列构建系统进化树分析，鉴定病原菌为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides),该菌表现出较强的致病性，多在叶片气孔处侵染为害。在7种供试药剂中，250 g/L吡唑醚菌酯抑菌乳油的抑菌效果最明显，EC₅₀值为0.756 mg/L,有柑桔炭疽病防治应用潜力。     

东北油豆角枯萎病病原菌的分离、纯化与鉴定

为明确引起东北油豆角枯萎病病原菌的分类地位,采用形态学和分子生物学方法(r DNA-ITS区序列测定)对其进行分离、纯化和致病性测定。结果显示:病原菌菌落呈淡紫色,大型分生孢子镰刀形,有3~5个隔;小型分生孢子椭圆形,有0~1个隔。试验共分离到镰刀菌菌株6株,其中对油豆角(将军一点红)有致病性的1株,经分子生物学方法测定,被鉴定为尖孢镰刀菌菜豆专化型(Fusarium oxysporum f.sp.phaseoli)。     

镰刀菌引起的西瓜猝倒病病原鉴定

为明确齐齐哈尔市郊区西瓜繁育基地西瓜幼苗猝倒的发病原因及为西瓜苗期病害防治提供依据,从发病区采集病样进行病原鉴定。结果分离获得12个菌株,根据培养特征和形态学特征,确定分离到的菌株为尖孢镰刀菌(Fusaruim oxysporum);利用真菌通用引物ITS1/ITS4扩增菌株rDNA-ITS序列,GenBank数据库BLAST同源比对与F. oxysporum一致性达99%。将分离到的菌株回接到健康西瓜幼苗上,植株表现出与田间相似发病症状。基于形态学、分子生物学及致病性检测,最终确定齐齐哈尔市郊区育苗基地西瓜猝倒病的病原菌为Fusaruim oxysporum。     

百香果果腐病病原菌的分离鉴定及防治药剂毒力测定

为明确引起百香果果腐病的病原菌种类并筛选出有效防治药剂，采用组织分离法对病原菌进行分离、纯化，结合病原菌的致病性检测、形态学特征及分子生物学分析对该病原菌进行鉴定，明确分离获得的菌株为藤仓镰刀菌（Fusarium fujikuroi）。室内毒力测定结果表明：10%苯醚甲环唑水分散粒剂、50%肟菌酯水分散粒剂和80%多菌灵可湿性粉剂等药剂对藤仓镰刀菌均有一定的抑制作用，其中10%苯醚甲环唑水分散粒剂对藤仓镰刀菌的毒力最强，EC50值为0.000 20 mg/L;50%肟菌酯水分散粒剂和80%多菌灵可湿性粉剂对藤仓镰刀菌的抑菌效果次之，EC50值分别为0.003 60、1.751 97 mg/L。综上，引起百香果果腐病的病原菌为藤仓镰刀菌（F.fujikuroi），且病原菌对10%苯醚甲环唑水分散粒剂、50%肟菌酯水分散粒剂和80%多菌灵可湿性粉剂等药剂敏感。本研究结果为百香果果腐病的化学防治提供了理论基础。     

海南龙眼红粉病的病原鉴定

【目的】确定海南省近年发生的新病害——龙眼红粉病病原菌种类,为科学防治提供理论依据。【方法】采集海南省龙眼主产区龙眼红粉病病果样本,通过对病原菌形态观察、致病性测定,以及病原菌的rDNA 28S和rDNA ITS序列分析进行病原鉴定。【结果】经分离纯化获得病原菌,培养后回接健康龙眼果实,出现的病害症状与田间发病症状一致,再次分离得到同样病菌,确定其为致病菌;对病原菌进行传统形态学观察,病原菌分生孢子的形态为粉红单端孢菌属真菌,将待测菌株rDNA-ITS和rDNA-28S序列与GenBank中相关菌株的序列进行比较,发现其致病菌与Trichothecium roseum的相似性达到99%。【结论】确定海南省龙眼主产区新病害龙眼红粉病的病原菌为粉红单端孢菌Trichothecium roseum。     

海南龙眼红粉病的病原鉴定北大核心CSCD

【目的】确定海南省近年发生的新病害——龙眼红粉病病原菌种类,为科学防治提供理论依据。【方法】采集海南省龙眼主产区龙眼红粉病病果样本,通过对病原菌形态观察、致病性测定,以及病原菌的rDNA 28S和rDNA ITS序列分析进行病原鉴定。【结果】经分离纯化获得病原菌,培养后回接健康龙眼果实,出现的病害症状与田间发病症状一致,再次分离得到同样病菌,确定其为致病菌;对病原菌进行传统形态学观察,病原菌分生孢子的形态为粉红单端孢菌属真菌,将待测菌株rDNA-ITS和rDNA-28S序列与GenBank中相关菌株的序列进行比较,发现其致病菌与Trichothecium roseum的相似性达到99%。【结论】确定海南省龙眼主产区新病害龙眼红粉病的病原菌为粉红单端孢菌Trichothecium roseum。     

草莓根腐病病原菌分离与鉴定

为了有效防控草莓根腐病,采用组织分离法,对徐州地区草莓根腐病病原菌进行分离与鉴定,分离、纯化后获取了5个真菌菌株,经形态学与分子生物学碱基序列测定结果比对发现：CMGF-1是胶孢炭疽菌或其亚种,CMGF-2和CMGF-3是棒孢拟盘多毛孢或其亚种,CMGF-4和CMGF-5是串珠镰刀菌或其亚种。黑根根腐的致病菌主要是镰刀菌和拟盘多毛孢菌,而红中柱根腐的致病菌是胶孢炭疽菌。     

设施韭菜根腐病致病镰孢菌鉴定及生物学特性研究

韭菜根腐病是设施连作多年生韭菜的重要病害之一.为明确辽宁省设施韭菜根腐病的病原菌种类,从韭菜感病根系分离纯化获得45株镰孢菌,结合形态学特征及EF-1a、Histone3、IGS基因片段序列分析结果,鉴定为尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)、层出镰孢菌(F.proliferatum)和腐皮镰孢菌(F.s...     

甜樱桃细菌性果斑病病原菌的分离与鉴定研究

甜樱桃细菌性果斑病为近年来发生在辽宁省大连地区樱桃上的一种新病害。经病原菌分离及柯赫法则验证,证明引起该病的病原菌为一种细菌,根据分离株培养特性、生理生化反应、致病性及16S rDNA序列分析,将该病原细菌初步鉴定为成团泛菌Pantoea agglomerans。成团泛菌侵染引起的樱桃果斑病在国内外尚属首次报道。