两种检测精子活率方法的比较

精子活率是评价精液品质的一项重要指标,其在光学显微镜下的测定,操作简便、直观,仍为临床常规检查所应用。本试验就精子用伊红-苯胺黑染色法和中性红染色法两种精子活率的测定方法进行比较,以便选择一种快速又准确的方法。1材料与方法1.1材料1.1.1试剂:伊红Y、中性红染液均购自上海试剂三厂。伊红Y染液:用蒸馏水配制,浓度为0.15%;中性红染液:pH7.4PBS缓冲液配制,浓度为0.01%。1.1.2精液的采集和处理:精液采自宁夏隆德县某奶牛场。精液采集后放入37℃的恒温水浴箱内。借助光学显微镜将精液高倍稀释(以在光学显微镜下可以清楚看到精子轮廓…     

2种检测精子活率方法的比较

<正>精子活率是评价精液品质的一项重要指标,其在光学显微镜下的测定,操作简便、直观,仍为临床常规检查所应用。本试验就精子用伊红-苯胺黑染色法和中性红染色法2种精子活率的测定方法进行比较,以便选择一种快速又准确的方法。     

检测肉羊精子活率方法的比较

就精子加热法、伊红-苯胺黑染色法、中性红染色法3种精子活率的测定方法进行比较,以便找到一种快速又准确的方法。通过测定肉羊精液,结果表明,用以上3种方法测定精子活率,差异不显著。但在试验过程中发现,伊红染液浓度对精子活率有影响。中性红染色法能在光学显微镜下对精子进行形态描述与识别。     

弱酸对猪精子活率及产仔性别的影响

分别向猪精液中加入醋权、乳酸、草酸、柠檬酸,改变了精液的ＰＨ值,并测定精子的活率,当精液的ＰＨ值达到６．５,精子沃经达到６０％时,将此褒庇人发情母猪人工配种,结果当每ｍｌ精液中加入１％的醋酸０．１５ｍｌ（ｐＨ６．５）时,对母猪的产仔数影响不显著（Ｐ〉０．０５）,但与对照组相比可显著地提高仔母猪的比例（Ｐ〈０．０５）。     

中性红、龙胆紫和尼罗蓝在精子活率测定中的应用研究

采用不同浓度梯度的中性红、龙胆紫及尼罗蓝染液对长白公猪精子染色,根据染色现象及精子活率,探究3种染料较为理想的作用时间和浓度。结果:0.01%中性红染色2 min后活精子着红色,死亡精子不着色;0.05%龙胆紫染色1 min后活精子着淡蓝色,死亡精子深紫色;0.1%尼罗蓝染色2 min后活精子着淡蓝色,死亡精子不着色。3种情况下精子的存活率与空白对照组比较无显著差异(P0.05)。试验表明,以上3种染色条件能清晰地区分存活精子和死亡精子,可用于测定精子活率。     

离心条件对犬精液冷冻保存精子活率的影响

通过手握法,采集的精液汇集,分成3等份,分别用3种离心条件离心。对离心后的精液进行稀释冷冻。解冻后保存在37℃水浴中,0~6h测定精子活率、对精子活力进行评估。结果表明,解冻后放入37℃水浴中,立即检查,3种离心处理组在0h精子活力、活率差异不显著（P〉0.05）。精子活力、精子活率随保存时间的增加明显下降（P〈0.05）,3组之间变化差异不显著（P〉0.05）。     

不同稀释剂对猪冷冻精液精子活率的影响

手握法采集12月龄大约克种公猪精液，在37℃下离心，弃去精清，收集浓缩段富含精子部分，用7种不同的稀释液进行稀释，应用液氮熏蒸法制作颗粒冻精。结果表明，在7种稀释液中，7号稀释液优于其他6种稀释液（P〈0．05）：与其他的冷冻保护剂相比，甘油的冷冻保护性能较好（P〈0．01），其适宜浓度为2～4mL／L：干解冻（40℃～45℃）效果优于湿解冻，解冻后精于活率达0．6～0．49（P〈0．05）；稀释液中添加安钠咖可有效地延长精于的冻后存活时间（P〈0．01）。     

公牛冻精品质检测方法比较

精液品质检测中，精液的存活率、精子畸形率、顶体完整率是判定精液品质优劣的常用指标。在以往检测过程中，通常采用常规染色法，即每测一个指标时进行一种染色操作，这样操作过程繁琐、耗时、耗力、耗材。本试验旨在对不同染色方法进行比较，从中寻找出一种操作简便、染色效果较佳的染色方法，这样即可省去许多步骤，也可减少多次实验操作造成误差。１材料与方法１．１精液样本：中国荷斯坦牛颗粒冻精（山西省种牛站）。１．２染色原理：利用活精子对特定染料不着色而死精子着色的特点来区分死精子和活精子，从而得出存活率指标。通过油镜…     

解冻温度和保存时间对牛细管冻精精子活率的影响

本试验采用4组解冻温度,每组解冻温度设计了2个不同的解冻时间,观察不同解冻温度、解冻时间及解冻后常温保存时间对牛细管冷冻精液精子活率的影响。结果显示,4组解冻温度以80℃（3s）精子活率最高,为48．77％,20组（2（80s）精子活率最低,为30．02％,两者差异极显著（P〈0．01）。各组精液解冻后保存1h检查精子活率明显高于解冻时镜检活率（P〈0．05）,80℃解冻后间隔5h精子活率仍达到30％。     

一种简单的兔假阴道采精器的制作

作者介绍了2种简单有效的兔假阴道制作方法。 该法使用容易获得的材料和简单工具，结合实验室实际制作采精用假阴道。结果表明，采精效果较好，制作、清洗方便，满足工作需要。     

狐精液精子密度简易检测法的初步研究

为寻求一种在生产中既简便、快捷又相对准确的检测狐精液精子密度的方法,对来自不同个体蓝狐和银黑狐的多份精液,根据不同的稀释倍数,分别测得了其相应的精子密度、吸光度和视野精子数,从而得出了精子密度与吸光度和视野精子数之间的相关关系。结果表明,精子密度与吸光度之间的回归关系为指数回归,回归关系显著,相关系数高;精子密度与视野精子数之间的回归关系为直线回归,回归关系显著,相关性良好     

家蚕精子顶体酶活性分析及冷冻精液的人工授精

采用改良Kennedy s法测定了家蚕精子顶体酶活性,得到了适合家蚕精子顶体酶活性测定的最佳条件,即:孵育温度为25℃,孵育时间为4 h;精液体外4℃存放随时间延长其顶体酶活性呈下降趋势,酶活性的测定应在15 h内进行。虽然冷冻精液随着冷冻时间的延长其酶活性下降,但是不同冷冻方式之间酶活性变化趋势不同,-80℃保存时酶活性直线下降,120 d后酶活性下降了61%。液氮中保存的精液虽然在30 d后的酶活性为冷冻前的58%,但在其后的几个月中酶活性下降不明显。此外,顶体酶活性的高低与精液人工授精产卵数及受精卵率相关,酶活性越低其产卵数越少,受精卵率也越低,提示顶体酶活性的高低可以在一定程度上反映精液的品质。     

精子载体法转基因技术研究进展

精子载体法是以精子作为外源基因的载体,在受精过程中将外源基因导入动物胚胎,从而使外源基因进入子代的基因组中。作者就精子结合外源基因的机制,精子与外源基因结合的方法、影响精子转染外源基因和生产转基因动物的精子因素进行简要介绍,并对发展起来的输精管内注射转染法、曲细精管微注射法和睾丸直接注射法等精子载体转基因新途径进行综述。     

《动物寄生虫》课程考核方式的改革探讨

为了全方面地进行课程改革,使课程改革取得更好的效果,金华职业技术学院主要从理论考核、实践考核以及结合适当的论文写作等三方面入手,针对《动物寄生虫》课程考核方式的改革进行了探讨,以期更好地服务于课程全面改革的实践。     

一种改进的简单快速的多位点突变方法

为了在 1个基因序列内同时实现多个位点突变 ,本试验以犬 2型腺病毒 E3区为突变目的基因 ,建立了一种以多个引物多聚酶链式反应为基础的简单快速的多位点突变方法。首先根据需要在 E3区不同位置设计了与同一条链互补的 4条突变引物 ,在 4条引物 (PBGL、PNCO、PBST、PNOT)中分别引入了 Bgl 、Nco 、Bst B 和 Not 位点 ,与模板链核苷酸序列相比 ,每条引物内均包含了 2～ 3个突变的碱基 ;然后以含 CAV- 2 E3区基因的质粒为模板 ,利用高保真 DNA聚合酶、d NTPs和 5′末端磷酸化的 4条引物 ,在同一个 PCR反应管内进行突变 PCR反应 ,最后以 Dpn 消化反应管内模板链 ,取少许电激转化 E.coli DH10 B感受态细胞获得转化子。经上述 4种内切酶对转化子 DNA的酶切鉴定 ,证明获得了存在多种突变组合的突变基因 ,为进一步研究 E3区不同缺失对外源基因表达的影响奠定了基础 ,也为其他类似研究提供了一种简单快速的突变方法     

猪性控精子纯度实时荧光定量PCR检测方法的建立

研究旨在利用实时荧光定量PCR法检测杜洛克猪性控精子,以期建立一种快速、准确且经济高效的性控精子纯度检测方法。选取位于猪Y染色体上的Y染色体性别决定区（sex-determining region Y,SRY）基因和位于X染色体上的A-激酶锚定蛋白4（A-kinase anchoring protein 4,AKAP4）基因,以猪耳组织样提取的基因组DNA为模板进行PCR扩增验证引物的特异性,利用胶回收试剂盒进行回收并质粒小提,将获得的两种质粒经检测后稀释至相同浓度（20 ng/μL）,混合构建含有不同比例SRY和AKAP4基因的质粒模板,用于绘制检测精子纯度所用标准曲线的反应模板。分别使用SRY和AKAP4基因特异引物检测3个混合的X精子（P.x_gro1、P.x_gro2、P.x_gro3）和3个混合的Y精子（P.y_gro1、P.y_gro2、P.y_gro3）的纯度。结果显示,用SRY基因特异性引物检测P.x_gro1、P.x_gro2、P.x_gro3精子的纯度分别为91.44%、91.93%、88.99%,P.y_gro1、P.y_gro2、P.y_gro3精子的纯度分别为89.91%、87.31%、88.71%;用AKAP4基因特异性引物检测P.x_gro1、P.x_gro2、P.x_gro3精子的纯度分别为91.44%、91.93%、88.99%,P.y_gro1、P.y_gro2、P.y_gro3精子的纯度分别为89.91%、87.31%、88.71%;卡方适合性检验结果显示,两次检测结果之间差异不显著,表明使用这种方法进行精子纯度检测所得结果准确。本试验通过实时荧光定量PCR法准确检测了经流式细胞仪分选后的精子的纯度,建立了一种利用实时荧光定量PCR法检测猪精液中X精子和Y精子比例的新方法。     

山羊精清中抗氧化酶活性与精子活力的相关性分析

为探讨山羊精清中抗氧化酶活性与精子活力的关系.选择年龄3岁左右、平均体重47.2 kg±3.5 kg的健康种公羊20只,采集精液,对精液品质初步评价后离心分离精清,测定GSH-Px、SOD、CAT抗氧化酶活性及T-AOC,然后与精子活力进行相关性分析.结果表明:GSH-Px、SOD的酶活性与精子活力极显著相关, 其相关系数分别为0.592(P=0.008)和0.873(P=0.001);CAT活性与精子活力的相关性接近显著(P=0.065).说明在山羊精清中抗氧化酶GSH-Px和SOD发挥重要的抗氧化作用.     

鸡新城疫病毒的简易纯化与电镜检测

用人Ｏ型红细胞吸附－释放病毒的方法纯化粪便中的鸡新城疫病毒（ＮＤＶ），然后再用电镜检查。结果表明，此法具有简便、快速、敏感等特点，可作为检测ＮＤＶ及其它具有血凝性病毒的常规方法推广应用。     

一种鉴定树鼩发情周期的简便方法

为了探索出树Qu的发情周期，本实验分2组，通过注射氯前列烯醇（PG）促使发情和自然发情两种渠道，采用观察外阴的周期性变化的方法，来鉴定雌性树Qu的发情周期。结果表明该方法简便可靠，有较好的实用价值。