‘小×胡8号杨’组织培养中的褐化控制研究

以‘小×胡8号杨’叶片为试验材料，探讨叶片预处理、无机盐浓度、不同温度和光强、抗氧化剂与吸附剂等对褐化控制的有效性。结果表明：经过5℃、12h预处理能减轻外植体褐化现象；使用1／2MS培养基较MS培养基褐化程度减轻；低温暗处理和常温暗处理都能一定程度上减轻褐化；抗氧化剂和吸附剂对褐化作用较明显，其中PVP效果较好，VC次之，Na2S2O3最差；6-BA和IBA浓度变化对褐化现象基本没有影响。     

剑叶龙血树芽外植体诱导分化

以健康无病虫害的剑叶龙血树的顶芽和侧芽为外植体,摸索外植体的消毒方法,研究不同植物生长调节剂浓度配比对诱导芽分化的影响,同时比较了不同吸附剂的防褐化效果。结果表明:0.1%HgCl2消毒9 min时,存活的无菌芽比率最高;MS+6-BA 5.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基能较好的诱导剑叶龙血树芽的形成;在培养基中添加1.0 g/L的PVP作为吸附剂时防褐化效果较好。     

雷公藤组织培养中嫩叶外植体褐化的控制

以雷公藤当年生嫩叶为材料进行离体愈伤组织诱导培养,研究了不同处理对减轻外植体褐化率的影响。结果表明:初代愈伤组织诱导时选用液体培养基,能有效降低褐化率并延迟褐化发生时间;接种前后的特殊处理,如接种前在1.0 g/L PVP溶液中切割外植体,接种后在暗培养和冷藏条件下预处理,均能有效延迟褐化发生时间;转接时间缩短到3 d,能很好地保证愈伤组织的诱导效果,又在一定程度上降低褐化率;在培养基中加入低质量浓度(0.02 g/L)的硝酸银,能在保证有愈伤组织产出的前提下,降低雷公藤外植体的褐化。     

朱砂根组织培养防褐化探讨

探讨了朱砂根继代培养中抗氧化剂(维生素C、L-半胱氨酸、硫代硫酸钠)和吸附剂(活性炭、聚乙烯吡咯烷酮)对外植体褐化的影响。结果表明:培养基中添加活性炭3 g.L-1,继代周期控制在30 d之内,平均褐化率可控制在18.89%,效果最理想;培养基中添加维生素C 0.2 g.L-1也能有效控制褐化,但整体效果不如活性炭。     

红叶乌桕组培技术初探

以红叶乌桕半木质化新枝为外植体,探讨不同消毒时间、基本培养基、生长调节剂种类及其浓度对红叶乌桕的新芽诱导、继代增殖、壮苗以及生根等的影响。结果表明:用70%酒精消毒15 s,再用0.1 g·L~(-1)升汞消毒7 min效果最佳,合格苗可达75.0%,并且基本没有褐化现象;丛芽诱导的最佳培养基为MS+6BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.3 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1);继代增殖的最佳培养基为MS+6BA 0.5 mg·L~(-1)+KT 0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.5 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1);根诱导的最佳培养基为1/2 MS+NAA 0.3 mg·L~(-1)+IBA 0.3 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1);通过添加抗氧化剂L-半胱氨酸和抗坏血酸,能有效抑制褐化,但有落叶死苗现象。     

黄花矶松组织培养技术

以黄花矶松的种子为材料,经过消毒后接种在不同激素水平的MS培养基上诱导小苗。结果表明:(1)MS 6BA0.3 NAA0.05培养基诱导率最高;(2)在不同配方的增殖培养基中MS 6-BA0.3 NAA0.6培养基的分化系数最高,苗长势最强;(3)在不同浓度的生根剂中MS/2 IBA0.6 NAA0.2培养基生根率最高,生根时间最短,且生根较一致,根系较发达,苗叶色正常,褐化程度较弱。     

蝴蝶兰丛生芽快繁体系的建立

以蝴蝶兰花梗腋芽为外植体,对消毒方法、培养基种类、激素浓度、褐化控制等因素进行研究,结果表明:花梗切为2～3 cm带腋芽段,预处理后用0.1%升汞灭菌15 min,灭菌成功率达90%;花梗腋芽最适诱导培养基为MS或1/2MS+6-BA 3.0 mg/L;丛生芽诱导最适培养基为1/2MS+6-BA 7.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L;生根最适培养基为1/2MS+NAA 1.0 mg/L+AC 1.0 g/L+香蕉泥60 mg/L。建立了一套通过诱导丛生芽进行蝴蝶兰快繁的有效途径。     

朱顶红鳞茎组织培养中的抗褐化研究

试验以朱顶红（Hippeastrum rutilum）无菌苗为材料，通过筛选基本培养基、低 pH 水培、添 加不同种类和浓度的凝固剂、不同浓度蔗糖、不同褐化剂来探讨鳞茎组织培养中抑制褐化的有效方法。 结果表明：朱顶兰在 MS 基本培养基中生长状况较好，褐化程度最低；低 pH 水培显著影响朱顶红的生 长与增殖，且不能有效抑制朱顶红鳞茎褐化；以琼脂粉 A 为凝固剂，半固体状态，附加 30 g · L-1 蔗糖的 MS 培养基有利于朱顶红鳞茎的抗褐化和增殖；在继代培养基中添加 1.0 g · L-1 活性炭可有效抗褐化。因 此，朱顶红鳞茎继代过程中适宜的培养条件为：MS+2.0 mg · L-1 6-BA +30 g · L-1 蔗糖 +1.8 g · L-1 琼脂粉 A 或 MS+2.0 mg · L-1 6-BA +30 g · L-1 蔗糖 +6.0 g · L-1 卡拉胶 +1.0 g · L-1 活性炭。     

蝴蝶兰离体快繁技术研究

通过对蝴蝶兰花梗的诱导,形成了再生植株,经成功的增殖和生根培养,建立了蝴蝶兰的快繁技术体系。实验结果表明:低盐培养基附加不同的激素组合有利于蝴蝶兰的离体培养,KT能降低培养基的褐化程度,而1/2 MS BA2.0 mg/L NAA0.2 mg/L 8%香蕉泥最有利于蝴蝶兰丛芽的增生,增殖率达3~3.5倍,且叶片健壮;1/2 MS NAA1.0 mg/L 8%香蕉泥有利于促进生根。     

不同抗氧化剂对银杏愈伤组织褐变影响的研究

以银杏幼叶为外植体,对银杏进行愈伤组织诱导和继代培养.通过正交试验设计,研究了不同浓度的3种激素配合使用对银杏愈伤组织诱导的效果,筛选出诱导银杏愈伤组织的最佳培养基MS+3mg/LNAA+3mg/L6-BA.研究了在银杏愈伤组织继代过程中,不同浓度的4种抗氧化剂对褐变抑制的效果,筛选出最佳抗氧化剂及其浓度10 mg/LVc.4种抗氧化剂对抑制褐变的效果如下Vc>PVP>柠檬酸>Ac,其中,PVP的最佳浓度为1 g/L.继代过程中,光照条件对愈伤组织褐变程度有一定的影响.     

弗吉尼亚栎不定芽增殖及试管苗再生影响因子研究

[目的]探析弗吉尼亚栎组织培养中不定芽增殖和生根的关键影响因子,建立弗吉尼亚栎试管苗再生体系,为弗吉尼亚栎无性系选育提供技术支撑。[方法]以弗吉尼亚栎带芽茎段为外植体,采用不定芽增殖途径,研究弗吉尼亚栎组织培养过程中外植体选择、褐化控制以及培养基选择、激素配比对不定芽增殖和生根的影响。[结果]表明:向培养基中添加抗坏血酸、硫代硫酸钠和活性炭均显著降低外植体的褐化半径(p<0.05),其中,外植体在含有3.00、5.00 g·L^-1活性碳的培养基中褐化半径最小。基本培养基筛选试验表明:以1/4MS或WPM为基本培养基时,平均芽长和芽数明显优于MS培养基。不定芽增殖最佳培养基为1/4MS+1.20 mg·L^-1 6-BA,培养周期40 d,增殖倍数可达6.6。最佳生根培养基为1/4MS+0.50 mg·L^-1 IBA+0.50 mg·L^-1NAA,生根率达53.33%,且根粗壮,木质化程度较高。组培苗移植到灭菌河沙中,平均成活率达57.78%。[结论]培养基成分和激素配比是影响弗吉尼亚栎不定芽增殖和试管苗再生的主要因子,低盐培养基(1/4MS或WPM)不仅可以促进不定芽增殖,且能够减轻外植体褐化;还发现野外取材的外植体极易褐化,而来源于无菌苗的外植体,褐化程度明显低于野外取材的外植体。     

防止欧洲七叶树组织培养中外植体褐变研究

外植体发生褐变现象是欧洲七叶树组织培养过程中的主要障碍。以侧芽为实验材料作不同处理,探讨其控制褐变的有效程度。结果表明:培养基添加琼脂8g/L,选择1/2MS为基本培养基,接种前用4%PVP处理外植体,在培养基中添加2000mg/L的PVP可有效抑制褐变的发生。黑暗培养不能减轻外植体褐变。     

Hort16A猕猴桃叶片直接再生不定芽研究

通过外植体直接再生不定芽方式进行器官再生,不经过愈伤组织,能使无性系后代保持原品种的特性。以Hort16A猕猴桃叶片为外植体,以MS培养基为基本培养基,设计不同类型和浓度的植物生长调节剂组合对诱-导分化效果进行研究。结果表明,经过4~5周暗培养后外植体褐化程度最低;诱导不定芽分化的最适植物生长调节剂组合为1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA,在该浓度下,不定芽分化率为100%,平均出芽个数为6.9。     

蒜头果组培褐化控制技术

采用正交试验探究了影响蒜头果组培期间褐化率的几种因素,并确定了褐化率的最佳控制方案。结果表明;外植体类型对褐化率影响最为明显,其次是抗氧化剂类型和消毒方式,培养基类型的影响最弱。用半木质化的枝条作为外植体,使用0.3%氯化汞+2%次氯酸钠进行消毒处理后,将其放置到添加了聚乙烯吡咯烷酮抗氧化剂的1/2WPM培养基中,能够使蒜头果的褐化率降到最低。     

喜马拉雅红豆杉愈伤组织的诱导

采用喜马拉雅红豆杉的幼叶、幼嫩茎段、幼根为材料,比较不同外植体、基本培养基、植物生长调节剂的配比、抗氧化剂以及培养条件对愈伤组织诱导的影响。结果表明,幼叶做为外植体时,其诱导率高于幼嫩茎段和幼根,愈伤组织量大;MS、1/2MS、B5和WPM基本培养基上均能诱导出愈伤组织,其中MS基本培养基上诱导效果最好,显著高于其他的基本培养基;MS培养基上添加1 mg/L 6-BA和0.5 mg/L 2,4-D配合使用时,诱导率达到93.6%,愈伤组织生长也最旺盛;基本培养基MS中添加1 mg/L Vc时褐变现象得到极大抑制,愈伤组织生长较好;暗培养有利于愈伤组织的诱导,且诱导出的愈伤组织质量好。     

乐东拟单性木兰茎段愈伤组织诱导与褐变控制的研究

利用乐东拟单性木兰成龄树嫩枝茎段作外植体,研究了控制褐变和组织培养的技术。试验结果表明,抗氧化剂控制褐变的效果比吸附剂好,以抗坏血酸最好,其次是巯乙醇和二硫苏糖醇。在培养基中分别加入抗坏血酸(10mgL-1)、巯茎乙醇(1mL·L-1)和二硫苏糖醇(1 5mg·L-1)使外植体的褐变率分别比对照降低67%、53%和33%。在接种前,将外植体在4℃下冷处理2h,能使外植体的褐变率从对照的35%降低为25%。1 2MS和WPM均是较合适的基本培养基。外植体在BA1 5mg·L-1+NAA0 2mg·L-1+2,4 D1 0mg·L-1的激素组合下,能诱导出较多的愈伤组织;在WPM+BA1 5mg·L-1+KT0 5mg·L-1+NAA0 2mg·L-1+2,4 D0 2mg·L-1的培养基上,能产生较多的不定芽和愈伤组织;WPM+BA1 5mg·L-1+KT0 5mg·L-1+NAA0 2mg·L-1+IAA1mg·L-1的培养基适合于芽增殖;在1 2MS+NAA0 3mg·L-1+IBA0 2mg·L-1的培养基上,添加15g·L-1活性炭有利于生根。     

邓恩桉快繁再生体系建立及褐化现象的消除

为解决邓恩桉组培中芽增殖率低及继代中褐化现象严重的问题,以邓恩桉9年生优良母株新萌发枝条为外植体所建立的无菌苗为对象,研究了腋芽分化产生丛生芽过程所需的最适激素条件及继代过程中褐化现象的消除方法。结果表明:以改良MS培养基为基本培养,附加TDZ0.5~1.0mg/L有助于邓恩桉初代丛生芽的诱导;培养基中含TDZ 0.5mg/L、NAA0.3mg/L时,芽继代增殖倍数可达6.2倍。芽丛继代中褐化现象减轻的最适条件为:材料继代接种后先在黑暗下培养4~6d,然后移入光下培养25d,同时继代培养基添加硫辛酸35mg/L,芽增殖系数可达10.2,褐化率降为3.7%。生根培养基以1/2MS为基本培养基,附加ABT生根粉0.75mg/L+IBA0.25mg/L的组合生根率最高,达91.5%。     

地被菊快速繁殖的培养基研究

用含不同浓度的NAA、6-BA的培养基对15个地被菊品种的叶片进行快速繁殖研究,筛选出地被菊叶片诱导和分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg.L-1+NAA 0.5 mg.L-1;最佳增殖培养基是1/2MS;用含不同浓度的NAA对地被菊品种的试管苗进行生根研究,筛选出1/2MS是地被菊的生根培养基。即增殖培养基和生根培养基都用1/2MS,简化了培养基,且长出的幼苗茎粗状、叶片大、叶色浓绿、生长快,增殖系数较高。     

曼地亚红豆杉愈伤组织诱导试验

以5年生曼地亚红豆杉当年生枝条的茎段、芽苞、叶片和幼嫩根为外植体,以MS添加不同质量浓度的2,4-D,NAA,KT为培养基进行愈伤组织诱导试验。结果表明:曼地亚红豆杉愈伤组织诱导培养基中生长素与细胞分裂素的比例应在10∶1左右;2,4-D与NAA的比例应在2∶1左右。当年生茎段是进行曼地亚红豆杉愈伤组织诱导的较好外植体,诱导率高,愈伤组织生长也较好。暗培养条件更有利于愈伤组织的诱导,诱导率高,且诱导出的愈伤组织质量好。35℃温水浸泡30 min的处理对抑制褐化有理想的效果,外植体褐化现象得到了极大抑制。     

“红火球”紫薇组培快繁与抗褐化研究

以"红火球"紫薇茎段为外植体进行组培快繁试验,探讨抗褐化措施。结果表明:春季(4月)采集3 cm长腋芽茎段进行预处理后,用75%酒精灭菌10 s,再用0.1%升汞灭菌10 min,其褐化率和污染率最低,培养效果好;最佳抗褐化诱导培养基为1/2 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+VC 2.0 g/L+L-半胱氨酸1.5 g/L;最佳抗褐化的"一步法"壮苗生根培养基为1/2 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+VC 2.0 g/L+L-半胱氨酸1.5 g/L。