肽聚糖对鲫鱼嗜水气单胞菌灭活疫苗免疫增强效果的研究

为了探讨肽聚糖在鱼类抗嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila，AH）感染中的免疫佐剂作用，用添加A3a肽聚糖的饲料投喂接种F-AH疫苗的彭泽鲫（Carassius auratus var．pengze）；通过测定鲫白细胞吞噬活性、血清和体表黏液溶菌酶活性、抗体效价以及活菌攻毒后的免疫保护率，证明肽聚糖与F-AH疫苗联合使用，鲫体表黏液和血清溶菌酶活性、白细胞吞噬活性、抗体效价以及活菌攻毒后的免疫保护率均显著提高，表明A3a肽聚糖是F-AH疫苗的良好佐剂，能增强鱼类F-AH疫苗免疫应答。     

团头鲂对3种致病菌外膜蛋白(OMP)的免疫应答

利用从柱状黄杆菌(Flavobacterium columnare)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)和温和气单胞菌(Aeromonas sobria)中提取的外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)作为免疫原,注射接种团头鲂(Megalobrama amblycephala)后,通过测定受免鱼的交叉凝集抗体效价、肾脏和血液中吞噬细胞的吞噬活性和采用A.hydrophila活菌攻毒方法,比较了3种致病菌OMP对团头鲂的免疫原性。试验结果表明,从3种致病菌中提取的OMP对团头鲂均具有较强的免疫原性,受免鱼的血清中存在对3种致病菌的交叉凝集抗体,与对照鱼相比,肾脏和血液中吞噬细胞对吞噬原的吞噬活性和对A.hy-drophila活菌攻毒的相对免疫保护率(relative percent survival,RPS)明显上升。说明在3种致病菌的OMP上不同程度地存在共同保护性抗原。     

日粮维生素A对雏鸡免疫应答的影响

本研究测定了日粮中添加0－12.8μg/g维生素A（VA）时，雏鸡20－35d对β－酷蛋白抗原刺激时特异抗体生成水平及T淋巴细胞增殖活性。结果显示，日粮中未添加VA时，T细胞增殖活性和对抗原刺激的特异抗体生成水平都显著低于添加VA组（P＜0.01）。添加VA各组的T细胞增殖活性与抗体水平与日粮中VA含量呈曲线相关（P＜0.01）。且随着VA含量的升高T细胞增殖活性与抗体生成也逐渐升高，当含量为6.4μg/g时，其水平达到最高，而VA高于此水平时，其反应呈下降趋势。日粮中添加6－7μg/g VA，可使雏鸡的体液免疫和细胞免疫活性达到最高，对提高鸡体发育和抗感染能力具有重要意义。     

日粮维生素A对雏鸡免疫应答的影响

本研究测定了日粮中添加０～１２．８ μｇ／ｇ 维生素 Ａ（ Ｖ Ａ）时,雏鸡２０～３５ ｄ 对β酪蛋白抗原刺激时特异抗体生成水平及 Ｔ 淋巴细胞增殖活性。结果显示,日粮中未添加 Ｖ Ａ 时, Ｔ 细胞增殖活性和对抗原刺激的特异抗体生成水平都显著低于添加 Ｖ Ａ 组（ Ｐ＜ ０．０１）。且随着 Ｖ Ａ含量的升高 Ｔ 细胞增殖活性与抗体生成也逐渐升高,当含量为６．４ μｇ／ｇ 时,其水平达到最高,而 Ｖ Ａ 高于此水平时,其反应呈下降趋势。因此日粮中添加６～７ μｇ／ｇ, Ｖ Ａ 可使雏鸡的体液免疫和细胞免疫活性达到最高,对提高鸡体发育和抗感染能力具有重要意义。     

佐剂对嗜水气单胞菌灭活疫苗免疫效果的作用

制备嗜水气单胞菌J—1株福尔马林灭活疫苗，用浸浴法免疫银鲫。设疫苗加IMS1312佐剂免疫组、不加佐剂疫苗免疫组及未免疫对照组，每组20尾。18～20℃水温饲养35d，检测银鲫血清嗜水气单胞菌凝集抗体。佐剂组抗体效价达1：64，相对保护率为67％。不加佐剂免疫组抗体效价为1：32，相对保护率达56％。对照组抗体效价为1：4，相对保护率为10％。试验结果表明浸浴免疫对银鲫具有较好的保护力，佐剂IMS1312可增强鱼体的免疫应答。     

PEG对嗜水气单胞菌疫苗制备与免疫效果影响的研究

为评价聚乙二醇(PEG)作为超声介质及疫苗佐剂对嗜水气单胞菌疫苗免疫效果的影响,本研究将该疫苗与常规疫苗分别经腹腔注射免疫接种锦鲤成鱼,检测血细胞吞噬百分率、吞噬指数、抗菌活力、抗体效价及免疫保护力等指标,评价疫苗效果.结果表明PEG6000作为佐剂制备的疫苗,其各指标均高于对照组及其他试验组.PEG6000疫苗免疫保护力达到77.8％,高于常规灭活疫苗22.2％,表明PEG6000作为佐剂制备的疫苗效果最好.     

嗜水气单胞菌疫苗的检验及免疫效力试验

选用嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｈｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃ,Ａｈ）疫苗生产用菌Ｊ－１株,以气升式发酵罐２８℃通气培养２８ｈ,制备嗜水气单胞菌疫苗用菌液。半成品检验表明,该疫苗用菌液内无杂菌生长,细菌数量达２．７×１０１０ｃｆｕ／ｍｌ。以０．４％福尔马林溶液３７℃灭活２４ｈ,制成灭活疫苗。经成品检验,该疫苗为棕黄色液体,涂布平板无活菌生长,以１×１０７ｃｆｕ攻击６尾健康鲫鱼,１周内鲫鱼无异常反应。取该疫苗分别以腹腔注射和浸泡两种方式各免疫１２尾鲫鱼,１月后以同源强毒菌株攻击,疫苗的相对存活率分别为８３．３％和５８．３％。     

嗜水气单胞菌微胶囊疫苗对中华绒螯蟹免疫机能的影响

以0(对照组)、1、3、6g/kg的剂量将嗜水气单胞菌海藻酸钠微胶囊冻干疫苗(菌含量为1.5×1012cfu/g)添加于基础饲料中投喂中华绒螯蟹7d,然后投喂对照组饲料。在停喂含疫苗的饲料后第0、1、2、3周,采样测定中华绒螯蟹血细胞呼吸爆发活性、血清超氧化物歧化酶(SOD)、酚氧化酶(PO)和溶菌酶(LSZ)活性,并在停喂含疫苗的饲料后第1周,以每千克体重1.2×107cfu的剂量,体腔注射致病性嗜水气单胞菌CL99920菌株,记录接种7d后中华绒螯蟹的累计死亡率。结果显示:在停喂含疫苗的饲料后第0周和第3周,6g/kg组的血细胞呼吸爆发活性显著增加(P<0.05);在一些采样时段,3个试验组的血清SOD、PO及LSZ活性分别显著上升(P<0.05)。各试验组的蟹对嗜水气单胞菌的抵抗力明显增强。由此说明,投喂试验剂量的嗜水气单胞菌微胶囊疫苗能增强中华绒螯蟹的免疫机能。综合本试验结果并考虑添加成本,建议在生产中使用3g/kg的添加剂量。     

免疫应激对不同品种仔猪免疫应答能力的影响

通过对莱芜猪、鲁莱猪及大约克夏断奶仔猪注射大肠杆菌脂多糖(LPS),以探讨免疫应激对免疫功能的影响。试验分别选用12头体重为(13.6±0.5)kg的莱芜猪、鲁莱猪和大约克夏猪,2×3因子设计,即免疫应激处理(注射LPS或生理盐水)和品种类型(莱芜猪、鲁莱猪和大约克夏猪)。于试验第1天,每品种中的6头猪注射200μg/kg体重的LPS,6头注射生理盐水作对照,并进行猪瘟疫苗接种。注射LPS后第2、7和14天,采血测定淋巴细胞转化率;测定注射LPS前1 d和注射LPS后第7、14天的猪瘟抗体水平。结果LPS刺激第2天的猪,淋巴细胞转化率显著高于生理盐水组(P0.01),莱芜猪的淋巴细胞转化率(P0.05)显著高于大约克;免疫应激对不同品种仔猪的猪瘟抗体水平的变化无差显著性影响(P0.05)。表明LPS能够有效刺激不同品种猪的细胞免疫机能;在免疫应激作用下,不同品种仔猪免疫应答能力有差异。     

脂多糖对鱼类免疫功能影响及其在水产饲料中应用展望

<正>近年来,随着水产养殖业的迅速发展和养殖规模的不断扩大,养殖集约化程度不断提高,营养、环境和代谢等急剧变化的应激条件容易诱导鱼类产生疾病,甚至导致鱼类死亡,给养殖业带来巨大损失。以往使用抗生素防治海水养殖病害,其负面影响突出,国家     

小鼠对温和气单胞菌口服缓释微球疫苗的免疫应答

采用中华鳖温和气单胞菌(Aeromonas sobria,As)Z-1株灭活全菌液,以生物降解性高分子材料为载体,制成微球疫苗,口服免疫ICR小鼠,测定了血清中凝集抗体效价、血液中单核-巨噬细胞的吞噬活性以及对活菌攻击的免疫保护力.结果显示小鼠微球疫苗口服免疫后第4周,血清中凝集抗体效价和血液中单核-巨噬细胞的吞噬指数均可达到与灭活菌液注射组相当的水平(P＞0.05),明显高于灭活菌液口服组(P＜0.01);免疫后第7～12周,微球疫苗口服组血清凝集抗体效价显著高于灭活菌液注射组(P＜0.05);微球疫苗口服组和灭活菌液注射组的免疫保护力均为87.5%,而灭活菌液口服组不能提供有效的保护,与对照组死亡率相同(100%).结论认为,中华鳖气单胞菌口服微球疫苗具有缓释作用;以可生物降解的微球作为中华鳖气单胞菌口服疫苗的载体系统具有潜在的优势.     

饲料脂肪水平对彭泽鲫免疫、抗氧化和肠道消化酶活性的影响

试验研究饲料脂肪水平对彭泽鲫免疫、抗氧化和肠道消化酶活性的影响,以平均体质量为(31.58±0.19)g的彭泽鲫为研究对象,进行为期8周的饲养试验。将180尾试验鱼随机分成3组。以鱼油和豆油为脂肪源,配制脂肪水平分别为5%、8%、11%(实测值为4.7%、7.9%、11.1%)的试验饲料。结果显示:随着饲料脂肪水平的增加,总抗氧化酶(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性显著增强,11%饲料脂肪组活性显著高于其余各组(P0.05);过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量呈现相反的趋势。彭泽鲫肠道脂肪酶活性、胰蛋白酶活性随饲料脂肪水平的增加显著升高(P0.05),11%饲料脂肪组活性达到峰值。随着饲料脂肪水平的增加,淀粉酶活性呈降低的趋势,5%饲料脂肪水平组其活性显著高于11%饲料脂肪水平组(P0.05)。试验结果表明,饲料中适宜的脂肪水平可提高彭泽鲫的消化酶活性,增强抗氧化能力,并有助于改善彭泽鲫的健康状况。     

微生态制剂对鸡免疫应答功能的影响

微生态菌应用于动物生产已有 3 0余年。利用微生态制剂所产生的生物效应和生态效应国内外已有较多报道 ,其主要作用是通过动物消化道生物的竞争性排斥作用 ,帮助动物建立有利于宿主的肠道微生物群系 ,形成屏障 ,提高抗病力。同时动物建立有利于宿主产生抗体和致敏免疫活性细胞 ,对某些致病性微生物有抑制作用。近年来有些试验结果表明 ,微生态制剂能促进实质性免疫器官增重和刺激非特异性免疫系统 ,进而防止疾病感染。本研究旨在验证本项目研制的微生物制剂ＧＡＩＣ对雏鸡的免疫应答功能的影响。1　材料与方法1 .1　试验方法试验选用 3 2 0…     

单宁酸对嗜水气单胞菌转录组影响的研究

嗜水气单胞菌作为水产养殖业中的主要病原菌,严重危害该产业的发展。为探究单宁酸对嗜水气单胞菌的抑菌作用及其转录组的影响,本实验将单宁酸2倍倍比稀释(8μg/mL～8 192μg/mL)后,测定单宁酸对嗜水气单胞菌ATCC 7966株的最小抑菌浓度(MIC);将嗜水气单胞菌分别与不同浓度的单宁酸共培养,根据所测细菌OD600nm值(共测24 h),绘制细菌的生长曲线。结果显示,单宁酸对嗜水气单胞菌的MIC为2 048μg/mL;浓度低于64μg/mL (临界值)单宁酸处理后不影响嗜水气单胞菌的生长。因此本实验采用64μg/mL的单宁酸与嗜水气单胞菌ATCC 7966株共培养,每组重复4次,12 h后提取各组嗜水气单胞菌总RNA,反转录为cDNA后构建cDNA文库,再利用随机引物,经PCR扩增、定量后,采用Illumina HiSeq测序平台进行转录组测序(RNA-Seq)。通过计算每个样品中r RNA的占比(rRNA%)及碱基的错误率对测序数据质控;采用Bowtie2将获得的各组嗜水气单胞菌测序数据与GenBank中嗜水气单胞菌ATCC 7966株参考基因组比对,分析它们之间的相似性。结果...     

免疫途径对鸡全身性免疫应答水平的影响

本研究观察了蛋白抗原的自由饮水、皮下注射和强饲途径对鸡免疫应答能力的影响。结果显示，注射免疫和饮水免疫处理组所产生的IgG应答明显强于强饲免疫处理组和未免疫的对照组（P〈0．05），这说明抗原接触途径中的自由饮水免疫方式与注射免疫方式同样有效，这为商品家禽接种纯化的蛋白抗原提供了一种崭新的途径。     

霉菌毒素对猪免疫应答的影响

霉菌毒素属于真菌次级代谢产物,在许多农产品中可以检测到,尤其是谷物。在畜牧业生产过程中,谷物的消耗量很高,猪会较容易接触到这些毒素。猪饲料中存在合乎规定的黄曲霉毒素、赭曲霉毒素A、伏马霉素、玉米赤霉烯酮,这些霉菌毒素具有不同的毒性作用,并都是以免疫系统为靶向,免疫系统主要负责抵抗病原体入侵。毒素具有免疫刺激或免疫抑制作用,效果取决于毒素的类型、浓度等因素。在此综述中,主要分析霉菌毒素对猪免疫系统的影响。     

育成猪对猪链球菌的免疫应答

取 7周龄长大杂交猪 12头 ,随机均分为试验组和对照组。试验组按每公斤体重 4.5亿个菌腹部皮下接种猪链球菌 C551 2 6复制猪链球菌病 ,接种后 0、7、14、2 1、2 8d,自前腔静脉采血 ,计数红、白细胞总数和白细胞分类 ,用硝基蓝四氮唑 (NBT)还原试验定量检测嗜中性粒细胞吞噬功能 ,噻唑蓝 (MTT)比色法检测外周血中淋巴细胞转化 ,单向免疫扩散法测定血清 Ig G浓度 ,5 0 %溶血试验测定血清中补体总活性 ,同时 ,用植物血凝素 (PHA)皮肤试验检测迟发型超敏(DTH)反应。结果表明 ,接种后 7d开始 ,试验组白细胞总数升高 ,接种后 14d嗜中性粒细胞百分含量低于对照组 ,淋巴细胞百分含量则升高 ;嗜中性粒细胞还原硝基蓝四氮唑 (NBT)能力均极显著高于对照组 (P<0 .0 1) ,PHA诱导的淋巴细胞转化则极显著降低 (P<0 .0 1) ,DTH只在接种后 2 1d显著低于对照组 (P<0 .0 5 ) ,血清中 Ig G总量接种后 7d降低 (P<0 .0 5 ) ,14d却极显著升高 (P<0 .0 1) ,此后恢复正常 ,血清补体总活性只在接种后 7d降低 (P<0 .0 5 )。可见 ,猪对猪链球菌的免疫应答除了常见的抗原抗体反应外 ,还表现在免疫细胞数及其功能的变化 ,以及补体活性的改变。     

A3α肽聚糖不同投喂方式下牙鲆血清及组织中相关酶的变化

实验研究了不同投喂方式下,牙鲆口服A3α-PG(A3α肽聚糖)对其血清及组织中超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,SOD)、酸性磷酸酶(Acidphosphatase,ACP)及碱性磷酸酶(Alkalinephos-phatase,AKP)活力的影响。结果表明,不同投喂方式对各组织(肝脏、肾脏、肌肉、粘液)中的SOD、ACP和AKP的诱导能力各异。各实验组与对照组相比,不同投喂方式下对SOD的影响,在肝脏、肾脏、肌肉中未见显著差异(P>0.05);而粘液中的SOD活力在“连续”组“、1+1”组和“4+3”组上升较快,其值约为对照组的两倍,差异显著(P<0.05)。ACP活性在肝脏中以“连续”组和“1+1”组诱导力最强,其与对照组“、4+3”及“7+7”组相比差异显著(P<0.05);而肾脏和肌肉中ACP活力在实验中未表现出差异显著性(P>0.05)。AKP活力在肌肉与粘液中各饲喂频度下未见明显差异;而仅在肝脏与肾脏中表现出对AKP的增强作用,尤以“连续”组和“1+1”组最为明显(P<0.05)。就不同口服方式下,A3α-PG对牙鲆血清中酶活的影响,其诱导能力是有限的,SOD和AKP在血清中的水平均未见明显提高,各实验组与对照组相比基本持平。ACP活性也只在“1+1”方式下有较大提高,并显现出与对照及其它各组之间的差异显著性(P<0.05)。此次实验结果显示,A3α-PG作为一种天然的免疫多糖,能对牙鲆体内氧化酶与水解酶系统产生积极的调理作用,但其作用效果并非以不间断的连续刺激好,而是存在一个较为合适的刺激频度及投喂方式的选择。从实验的总体结果来看,对以上3种酶的调节力以“1+1”和“4+3”方式为好。     

注射β-葡聚糖对黄颡鱼免疫抗氧化指标及抗感染能力的影响

本试验研究注射β-葡聚糖对瓦氏黄颡鱼血清免疫抗氧化相关指标及抗嗜水气单胞菌感染能力的影响.选取初始体重(60.0±5.0)g的健康瓦氏黄颡鱼500尾,随机分为5组,每组4个重复,每个重复25尾,分别腹腔注射生理盐水和5、10、20、40mg/(kg体重)β-葡聚糖悬液100μL/尾.注射后第6d,取样制备血清,检测免疫抗氧化相关指标.注射后第7d,每组随机选取60尾鱼,腹腔注射嗜水气单胞菌进行感染试验,计算48 h内的累计死亡率.结果显示,各组之间黄颡鱼血清白细胞介素-6含量没有显著差异(P＞0.05).注射β-葡聚糖组血清免疫球蛋白M含量均高于对照组,其中10mg/kg组显著高于对照组和其它组.注射β-葡聚糖组血清超氧化物歧化酶活力均显著高于对照组(P＜0.05),其中以10mg/kg组最高.10、20和40 mg/kg注射组血清丙二醛含量与对照组相比显著升高(P＜0.05).与对照组相比,注射β-葡聚糖可以降低黄颡鱼抗嗜水气单胞菌感染48 h时的累计死亡率,其中10mg/kg组显著降低(P＜0.05).综上所述,在本试验条件下,腹腔注射β-葡聚糖可以提高黄颡鱼血清免疫相关指标和抗氧化酶活性,增强抗嗜水气单胞菌感染能力.