寒地草莓几种脱毒技术比较研究

通过对草莓茎尖培养、花药培养、幼叶培养、茎尖愈伤组织的诱导及分化培养以及加热处理等方式进行脱毒技术研究，比较几种脱毒技术手段的优缺点，以便用于指导生产。经过几种脱毒方法的比较，结论为草莓脱毒最好的方法为花药培养。     

植物组织培养脱毒方法综述

植物病毒是制约花卉产业发展的重要因素,通过茎尖处理、茎尖结合热处理、冷处理、化学药剂处理及愈伤组织处理等方法可以去除植物病毒。通过查阅国内外研究文献和资料,综合阐述了茎尖培养脱毒、热处理脱毒、化学药剂培养脱毒、愈伤组织脱毒、冷处理脱毒等方法。     

菊花脱除花叶病毒组培技术研究

以患花叶病菊花0.5~0.8 mm幼嫩茎尖为外植体,愈伤组织的诱导在MS+BA2.0mg/L+NAA0.1 mg/L培养基上效果最好,诱导率达96.0%;愈伤组织分化出芽以MS+BA3.0 mg/L+NAA0.1 mg/L效果最佳,分化率达60.0%,每块愈伤组织平均分化出4个芽;幼苗在1/2MS+NAA0.1 mg/L培养基中生根率达92.0%,株平均生根5.1条。组培苗经症状观察和汁液传染实验试验检测,以后种方法结果为依据,获得菊花脱毒苗19株,脱毒率为63.3%。     

植物生长调节剂对黑果枸杞愈伤组织诱导、增殖及分化的影响

为建立黑果枸杞高频再生体系及进行细胞突变体筛选、遗传转化奠定基础,以黑果枸杞叶片、茎段和腋芽为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度的植物生长调节剂进行愈伤组织的诱导、增殖及不定芽分化研究。结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0mg/L+6-BA 0.5mg/L;在愈伤组织的继代培养过程中,高浓度的2,4-D有利于愈伤组织的诱导,但对愈伤组织的生长有一定的抑制作用,最佳培养基为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 0.5mg/L;在愈伤组织的再分化过程中,6-BA对再生芽的分化效果最好,出芽率高,且多诱导出丛芽,最佳培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.10mg/L。试验表明:黑果枸杞叶片、茎段和腋芽均可诱导愈伤组织,茎段诱导率最高;筛选出了茎段愈伤组织诱导、增殖及再生芽分化的适宜培养基,为其细胞工程育种及规模化生产提供支撑。     

芍药茎段愈伤组织诱导的研究

以芍药品种‘粉玉奴’茎段为实验材料,1/2 MS培养基为基本培养基,探究不同浓度的6-BA以及不同光质对芍药茎段愈伤组织诱导的影响。试验结果表明,6-BA浓度为0.5 mg/L时芍药茎段愈伤组织诱导情况最好;最适宜芍药茎段愈伤诱导的培养基为:1/2MS+Ca~(2+)(WPM)+PVP 1.0 g/L+NAA 1 mg/L+LH 0.5g/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L+6-BA 0.5 mg/L;不同的光质条件下,红光更有利于芍药进行愈伤组织诱导。     

钙果4号愈伤组织的诱导和植株再生

以钙果4号的茎尖和带芽茎段为材料,接种在不同浓度激素配比的培养基中,研究愈伤组织诱导、分化及植株再生。结果表明:钙果4号芽启动培养以MS+BA0.5mg/L;愈伤组织诱导和分化以MS+BA(1.0～2.0)mg/L+NAA0.5mg/L;芽增殖以MS+6-BA(0.3～0.5mg/L)+NAA0.05mg/L最理想。添加一定浓度(0.2mg/L)的IAA生根效果均好于单独使用IBA、NAA或三者配合使用,生根率可达72.3%。     

小叶龙竹高频植株再生系统的建立

以离体保存的小叶龙竹试管丛芽为外植体进行脱分化形成愈伤组织和愈伤组织再分化的研究。结果如下:1丛芽、茎尖、茎节和叶片,都能长出愈伤组织,效果较好的是丛芽、茎尖,其次为茎节,叶片较差。2最适培养基为MS+2,4-D 3 mg·L-1+Kt 0.2 mg·L-1+S 3%。3 1~3代愈伤组织分化芽的频率高,每隔6~8个月新启动一批丛芽诱导产生愈伤组织,可以保证高频稳定的愈伤组织再生系统的建立,以供后续的转基因研究。     

马尾松幼苗茎段愈伤组织诱导的研究

以马尾松优良种子萌发后的幼苗的茎段为实验材料,研究了不同培养基类型、激素种类和激素质量浓度对愈伤组织诱导的影响.结果表明:改良GD培养基为诱导愈伤组织的最佳诱导培养基;改良GD+4 mg·L-12,4-D+2 mg·L-16-BA+500 mg·L-1CH+30 g·L-1蔗糖+8 g·L-1琼脂的组合为愈伤组织最佳增殖配方;暗堵养20 d后平均直径能达到8.5 mm.这为马尾松幼苗茎段愈伤组织分化或进行遗传转化奠定了研究基础.     

黑荆树不同外植体愈伤组织诱导与芽分化的研究

为建立高效的黑荆树快速繁殖体系,以黑荆树叶片、茎段和下胚轴为外植体,在添加不同植物生长调节剂的MS培养基上进行了愈伤组织的诱导和不定芽的分化研究。结果表明:综合最高诱导率结果和愈伤组织的生长状况,外植体的愈伤组织诱导能力顺序为叶片(44.83%)下胚轴(36.35%)茎段(30.05%);愈伤组织诱导最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.005 mg/L TDZ+1.0 mg/L IBA。叶片和下胚轴所诱导的愈伤组织均可分化出不定芽,但芽诱导率差异达极显著水平;不定芽分化最佳培养基为MS+0.01 mg/L TDZ+0.2 mg/L IBA,叶片愈伤组织的芽分化率最高可达32.60%。     

红豆杉愈伤组织诱导试验初探

以1年生红豆杉的茎段、芽尖及种子作为外植体,以MS和B5培养基添加2,4-D、NAA、KT进行愈伤组织诱导试验。结果表明:最适宜红豆杉愈伤组织诱导的条件为以茎段为外植体,消毒时间6 min;B5 NAA1.0 mg/L KT0.2 mg/L GA0.75 mg/L培养基;25℃左右培养;接种后外植体暗处理1～2周效果更佳,诱导率高,且诱导出的愈伤组织质量好。     

广藿香愈伤组织的诱导和增殖

以广藿香的幼叶、茎段为外植体,接种于附加不同浓度的2,4-D、NAA、6-BA、KT、TDZ及其组合的MS固体培养基上进行愈伤组织的诱导,结果表明:单独使用5种激素在一定范围内均能诱导出愈伤组织;最佳组合培养基为MS+6-BA 1.0 mg.L-1+2,4-D 0.1 mg.L-1。进一步研究发现,茎段和叶片诱导的愈伤组织的生长曲线都呈“S”型,且生长周期均为18 d。     

野葛愈伤组织诱导与不定芽分化

采用MS为基本培养基，附加NAA、6-BA和IAA3种激素．诱导野葛不同外植体愈伤组织形成；再将愈伤组织接种在不同浓度6-BA的MS培养基上．分别在光照和黑暗条件下进行不定芽的诱导。结果表明．野葛幼叶、茎段和顶芽在适宜激素的诱导下均能形成愈伤组织，但不同激素组合其愈伤组织诱导率不同。幼叶愈伤组织诱导的最适培养基为MS NAA1．0mg／L 6-BA1．0mg/L．其诱导率为75％．茎段愈伤组织诱导的最适培养基为MS NAA1．0mg／L 6-BA3．0mg／L IAA0．2mg/L，其诱导率为70％。不同外植体形成的愈伤组织其不定芽的分化诱导率不同．茎段愈伤组织在不同浓度6-BA下均能诱导出不定芽；光照有利于芽的分化．在光培养条件下，茎段愈伤组织不定芽平均诱导率为66．7％。     

翅荚木愈伤组织的诱导研究

以次生种源翅荚木为研究对象,针对翅荚木愈伤组织诱导的影响因子进行了翅荚木愈伤组织诱导体系建立的研究。试验结果表明：MS＋1mg／L6-BA＋0．5mg／LIBA＋3％蔗糖为基本培养基,茎段为外植体诱导愈伤组织效果最佳;黑暗培养20d后转到光下培养,能提高愈伤组织诱导率。     

牡丹“虞姬艳妆”的茎尖培养

以牡丹"虞姬艳妆"(Paeonia suffruticosa cv.YuJi YanZhuang)茎尖和单芽茎段为材料,研究不同植物激素配比对其芽的诱导、增殖,愈伤组织诱导、分化及生根的影响。结果表明:适合牡丹"虞姬艳妆"腋芽诱导的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L+活性炭1.00g/L,萌芽率为66.67%;适合芽增殖的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.01mg/L,增殖系数为2.80;适合茎段愈伤组织诱导的培养基为MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.5mg/L+活性炭1.00g/L,诱导率为62.5%;适合愈伤组织分化的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.01mg/L,分化率为80%。     

南方红豆杉组织培养育苗试验

以南方红豆杉(Taxes chinensisvar.mairei Cheng et L.K.Fu)的幼叶、幼嫩茎段、花蕾为外植体进行组织培养育苗试验,结果表明:①外植体诱导愈伤组织的容易程度为幼嫩茎段>幼叶>花蕾;②诱导南方红豆杉产生愈伤组织的最佳培养基配方是:MS+6-BA 0.5 mg.L-1+2,4-D 1.0 mg.L-1;③BA、ZT和KT均能诱导愈伤组织分化不定芽,其中以0.1 mg.L-1ZT效果最佳,诱导率达58%;④生根培养阶段,以附加NAA1.0 mg.L-1+0.1%活性碳的1/2 MS培养基效果最好,生根率达96%;⑤试管苗移栽在河沙+泥炭的基质上,成活率可达95%。     

康乃馨脱除斑驳病毒组织培养技术研究

作者对康乃馨进行脱除斑驳病毒培育无毒苗的技术研究。试验表明:用0.3mm茎尖接种,在MS+BA0.7mg/L+NAA0.1～0.2mg/L培养基上愈伤组织诱导率为90.0%;在MS+BA0.8mg/L+NAA0.2mg/L培养基上愈伤组织分化出芽率为74.0%,平均每块愈伤组织有芽5.9个。在MS+BA2.0mg/L+NAA0.3mg/L和MS+BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L培养基上增殖倍数6.5～7.4;在1/2MS+NAA0.01mg/L+IBA0.05mg/L上诱导生根率为90.0%;降低培养温度、增加光照强度及培养基中加入20万单位青霉素可减轻玻璃苗现象。经汁液传染试验检测,组培苗脱毒率为65.0%。     

猕猴桃试管苗愈伤组织诱导及叶片和茎段的再生

在猕猴桃的组织培养中,为提高繁殖系数,以茎段作外植体,在添加 １０ｕＭＢＡＰ的改 良ＧＤ培养基上进行愈伤组织诱导,诱导率最高为 １００％,用 ＭＳ＋ＢＡＰ１０ ＵＭ＋ＩＢＡ ５ ｕＭ愈伤组织的继代培养,一次可提高愈伤组织的量的１０％左右。在添加１５ ＵＭＢＡＰ的改良ＧＤ培养基上进行分化培养,愈伤组织分化率可达 １００％,平均 １０ ｍｇ大小的愈伤组织可产生 ４个小 苗,以猕猴的叶片,茎段作外植体,在添加１０ｕＭＢＡＰ＋ＩＢＡ ５ｕＭ的 ＭＳ培养基上进行不定 芽的分化诱导,平均１ｃｍ长的茎段可诱导 ５～６个不定芽,１． ５ ｃｍ×１． ５ ｃｍ的叶片可诱导 １０～１５个不定芽。然后把愈伤组织产生的小苗和叶片,茎段诱导产生的不定芽接种在芽分化及 生根培养基上［１］即可成苗。     

山杏茎尖和茎段组织培养体系的建立

为了给山杏快速繁殖提供理论依据,以山杏茎尖和茎段为外植体,以MS为基本培养基,对消毒方式、初代培养基激素配比、分化培养基激素配比和生根培养基激素配比进行筛选。结果表明,茎尖和当年生茎段经75%酒精处理30 s,0.2%升汞消毒6 min,再用2%Na Cl O处理4 min,其诱导效果最佳。茎尖初代培养最佳激素配比为6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;茎尖愈伤组织分化培养最佳激素配比为6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.1 mg/L;茎段初代培养最佳培养基激素配比为6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L;1/2MS+IBA 0.2 mg/L为最佳生根培养基。     

曼地亚红豆杉愈伤组织诱导试验

以5年生曼地亚红豆杉当年生枝条的茎段、芽苞、叶片和幼嫩根为外植体,以MS添加不同质量浓度的2,4-D,NAA,KT为培养基进行愈伤组织诱导试验。结果表明:曼地亚红豆杉愈伤组织诱导培养基中生长素与细胞分裂素的比例应在10∶1左右;2,4-D与NAA的比例应在2∶1左右。当年生茎段是进行曼地亚红豆杉愈伤组织诱导的较好外植体,诱导率高,愈伤组织生长也较好。暗培养条件更有利于愈伤组织的诱导,诱导率高,且诱导出的愈伤组织质量好。35℃温水浸泡30 min的处理对抑制褐化有理想的效果,外植体褐化现象得到了极大抑制。     

盾叶薯蓣愈伤组织培养及其高产系的筛选

以盾叶薯蓣的块茎、茎、叶和茎尖为材料,对其进行了愈伤组织培养,并根据愈伤组织个体间生长速度和皂甙含量差异,进行了高产系的筛选．结果表明：盾叶薯蓣不同外植体（块茎、茎、叶、茎尖）均能诱导出愈伤组织,其中以茎尖形成愈伤组织最快,皂甙元含量最高;不同培养基、ｐＨ 值、接种量、温度、激素等因子对愈伤组织的形成、生长及皂甙元含量有很大的影响;改良 Ｍ Ｓ培养基、２,４－Ｄ 浓度为２．０～４．０ ｍ ｇ／Ｌ、ＢＡ 为 ０．５ ｍ ｇ／Ｌ 的激素配比使愈伤组织的生长量、产物含量最高;对无性系进行筛选和 ＨＰＬＣ 检测,以 １２号无性系生长速率和皂甙元含量最高,其皂甙含量达 ３．７％ ,生长量比普通系高２１．５％ ．