遮荫对转BADH基因的美丽胡枝子叶片形态和光合特性的影响

为探索外源甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因的导入对美丽胡枝子耐荫性的影响,选用2个转入BADH基因的美丽胡枝子株系和对照用非转基因植株进行遮荫处理,测定不同遮荫处理下(透光率分别为100％,75％,34％,11％)的转基因株系与非转基因植株的甜菜碱含量、甜菜碱醛脱氢酶活性、叶绿素含量、叶形态指标、净光合速率、蒸腾速率、光补偿点和光饱和点等.结果表明:1)在弱光环境下,转BADH基因的美丽胡枝子T1代植株呈现绿色与黄色性状分化,表现出3∶1的分离规律；2)弱光能诱导BADH基因的表达,增加BADH活性和积累更多甜菜碱；3)在透光率34％,11％的弱光条件下,转BADH基因美丽胡枝子的叶绿素a、b含量、叶长、叶宽、比叶干质量、单位叶面积鲜质量、日净光合速率、日蒸腾速率、表观量子效率显著高于非转基因植株,而叶绿素a/b值、比叶面积、光饱和点、光补偿点显著低于非转基因植株；4)在自然光照和透光率75％环境下,转基因株系的多项指标与非转基因植株间差异不显著；5)转基因美丽胡枝子比非转基因植株更能适应弱光环境.     

干旱胁迫对转SacB基因、转BADH基因的美丽胡枝子的影响

以同时培育的转SacB基因、转BADH基因及未转基因的美丽胡枝子盆栽苗为材料,研究干旱条件下3种试材的脯氨酸、甜菜碱、可溶性糖、过氧化物歧化酶、丙二醛、叶绿素含量的变化.结果表明:在正常土壤水分状态下,3种试材的这几项指标含量没有明显差异,但随着干旱胁迫强度的增加,2类转基因的美丽胡枝子所积累的脯氨酸、可溶性总糖量明显高于非转基因植株,在甜菜碱积累方面.转入BADH基因的美丽胡枝子要强于非转基因植株及转入SacB基因的植株.尽管在干旱状态下,3种试材的SOD活性增强,但2种转基因植株的SOD活性并没有明显大于非转基因植株.不论是转入SacB基因,还是转入BADH基因,转基因植株明显可抑制丙二醛在植物体内的快速积累和叶绿素的降解.田间观测的结果也进一步表明:转基因植株的耐旱性明显强于非转基因植株.     

木糖选择系统下xylA&BADH双价基因对二色胡枝子的遗传转化

【目的】建立安全、无抗生素的二色胡枝子遗传转化体系,通过基因工程技术进一步提高二色胡枝子的抗逆性。【方法】采用PCR法从大肠杆菌DH5α菌株中克隆木糖异构酶基因(xyl A);构建含有xyl A和甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)的植物表达载体p BI121-xyl A-BADH;培养基中用木糖取代一定量的蔗糖建立二色胡枝子的木糖选择系统;以农杆菌介导法对二色胡枝子的子叶节进行遗传转化,通过PCR和Southern检测确定转基因植株;对转化植株及非转化植株进行0.5～2 g·L~(-1)Na Cl胁迫,观测植株生长表现,测定1 g·L~(-1)Na Cl胁迫下转化植株和非转化植株的甜菜碱醛脱氢酶活性、叶绿素、电导率。提取转化植株及非转化植株组培苗叶片中的可溶性总糖,用高效液相色谱仪分析糖成分。【结果】测序结果表明,克隆的木糖异构酶基因与Gen Bank公布的大肠杆菌xyl A核苷酸序列的同源性达到100%,PCR及酶切检测表明正确构建了p BI121-xyl A-BADH植物表达载体。在二色胡枝子遗传转化过程中,应在纯木糖培养基上筛选抗性芽,在抗性芽增殖和生根过程中,可以采用蔗糖5 g·L~(-1)、木糖25 g·L~(-1)的糖类混合剂进行进一步筛选。在农杆菌介导的遗传转化中,外植体预培养1天后,采用LBA4404菌株侵染20～30 min,共培养3天,可以获得相对较多的木糖抗性芽。对获得的部分抗性芽进行PCR及Southern检测,得到2个转基因株系,二色胡枝子遗传转化率低于4.7%。耐盐性观测表明,转基因植株能够在含有2 g·L~(-1)Na Cl的培养基上生长并生根,而非转基因植株在相同培养基上则叶子变黄、脱落,且不能生根。无盐胁迫时,转基因和非转基因植株在甜菜碱醛脱氢酶活性、叶绿素含量和电导率方面无显著性差异;盐胁迫后,非转基因植株的甜菜碱醛脱氢酶活性无明显变化,而转基因植株的甜菜碱醛脱氢酶活性大幅度提升,且达到非转基因植株的8～10倍;盐胁迫后,转基因植株的叶绿素含量显著高于非转基因植株,而电导率则显著低于非转基因植株。高效液相色谱的分析结果显示,转基因植株叶片中测出了果糖和葡萄糖,而非转基因植株叶片中测出了葡萄糖和一种未标示的糖类。【结论】建立了二色胡枝子在木糖选择系统下的遗传转化体系,并获得稳定表达的转基因植株。外源甜菜碱醛脱氢酶基因可提高二色胡枝子的耐盐性;来源于大肠杆菌的木糖异构酶基因的导入会影响二色胡枝子的糖代谢。     

胡枝子的生物学特性及利用

美丽胡枝子又称胡枝条，豆科蝶形花亚科胡枝子属的落叶灌木，在甘肃省小陇山林区普遍分布，主要在山坡、林下或林缘成群生长。近年来，由于城市园林绿化发展迅速，美丽胡枝子吸引了众多绿化单位和绿化者的眼球，观赏、药用及其他价值得到人们的重视。该植株具有适应性强、栽植成本低、修剪方法简单、耐粗放管理等特点，必将成为城市园林绿化产业开发中首选树种之一。     

鸡眼草和美丽胡枝子对贫瘠土壤的生态适应性比较

采用来自浙江省金衢盆地红壤坡耕地和严重侵蚀退化瘠薄地带的2种土壤,对鸡眼草和美丽胡枝子2种豆科植物进行盆栽实验,比较研究2种豆科植物对贫瘠土壤的适应性.结果表明,在贫瘠土壤条件下,鸡眼草的地上干重,叶绿素含量、浓度氮、浓度磷均极显著高于美丽胡枝子;在正常土壤条件下除浓度磷外,其它理化性状鸡眼草也显著高于美丽胡枝子;在2种土壤条件下,鸡眼草叶绿素含量差异不显著,而美丽胡枝子差异极显著.说明,在贫瘠土壤中鸡眼草较美丽胡枝子具有更强的营养吸收能力,更耐贫瘠.     

高羊茅等3种植物对美丽胡枝子的化感作用

通过培养皿水培法和盆栽沙培法,研究白三叶、高羊茅和紫花苜蓿3种草本植物对美丽胡枝子的化感作用.结果表明,白三叶和高羊茅的全草化感液无论是对美丽胡枝子种子的最终萌发率还是动态萌发过程都表现出明显抑制作用,且随浓度的升高,作用增强;而紫花苜蓿的水提液对美丽胡枝子的种子萌发表现出促进作用,且浓度增大,作用增强,但紫花苜蓿的水提液对美丽胡枝子幼苗根的生长产生明显的抑制作用;共培试验表明3种植物对美丽胡枝子种子的萌发没有起到抑制作用,反而有轻微的促进作用.     

美丽胡枝子基质型容器育苗和造林技术研究

对美丽胡枝子基质型容器育苗和造林技术进行了研究，结果表明：美丽胡枝子采用无纺布基质型容器育苗的成苗率达97．9％、基质生产成本为0．50元／株左右，具有成苗率高、生产成本低，而且移植较方便、一年四季均可进行等特点，是一种较好的美丽胡枝子容器苗生产方式。美丽胡枝子基质型容器苗适应于岩质边坡、泥质边坡、马道边坡、水平带边缘、粗骨土裸露地等困难立地的种植绿化。立地条件相对较好的地段，美丽胡枝子的生长也相对较好．说明美丽胡枝子虽然比较耐干旱瘠薄，并且在困难立地上的生长量远远高于小蜡和伞房决明，但仍然需要一定的土壤肥力。美丽胡枝子虽然适宜于截干造林，但当年苗不适宜于夏季截干造林，可适宜于秋冬季截干造林。     

胡枝子属种子萌发特性试验

以8个种子样品(种、种源)的胡枝子种子进行热水处理、浓硫酸酸蚀处理,探索破除种子硬实促进萌发的适合方法。结果表明:胡枝子种子千粒质量越小则硬实率越高,浓硫酸酸蚀处理较热水浸泡处理能显著提高胡枝子种子发芽率与发芽整齐度。应根据种子大小确定种子酸蚀处理时间,分别为小粒种子(截叶胡枝子)适合处理时间为10 min以下、中粒种子(中华胡枝子、达乌里胡枝子、多花胡枝子)为10～15 min、大粒种子(二色胡枝子、美丽胡枝子)15～20 min。     

四倍体刺槐转甜菜碱醛脱氢酶基因的研究

试验以所建立的四倍体刺槐高频再生体系为基础,通过农杆菌介导法转化甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因,以GUS染色组织分析法为依据探讨了影响转化效率的各种因素,建立了优化转化体系,结果如下:20mg·L~(-1)乙酞丁香酮可显著提高转化效率;菌液浓度OD_(600)值0.3～0.7、预培养2d为宜;转化后暗培养对转化效率没有影响。并在以上研究基础上,成功地建立了高效、可重复的遗传转化体系,选择培养基上头孢霉素400mg·L~(-1)可有效地抑制农杆菌;卡那霉素50mg·L~(-1)时愈伤组织的白化死亡率达96.4％。经PCR检测,外源基因已成功的整合到植株的基因组DNA中,获得了15个转基因株系。     

胡枝子栽培技术及造林成效研究

一、前言胡枝子,又名胡枝条、杨条、杏条,武夷山市农民叫“马扫”。胡枝子全国约有20种,我省有9种,多为野生,人工栽培极少。本市目前发现的多数为胡枝子(Lespcdozabieorturcz)和“美丽的胡枝子(LespedezaFormosa(Voy)Koehne)”,少数为“白花胡枝子(Lespedezadaridii Franch)”3个种类,我市公路沿线等少数农民有用胡枝子作绿肥、保持水土、