蓝莓贮藏期病原真菌的分离与鉴定

为明确云南省玉溪市蓝莓采后贮藏期引起果实腐烂的病原真菌种类,以采自澄江地区的蓝莓鲜果贮藏自然发病的果实为试验材料,采用组织分离法分离培养病原菌,经形态学观察和ITS rDNA(Internal transcribed spacer)区序列测定分析,对相关病原真菌进行了分类鉴定。结果表明:从采后贮藏过程中发生病害的蓝莓果实上分离到3株病原真菌,经鉴定3株真菌分别为枝孢菌属(Cladosporium)、链格孢属(Alternaria)和匍柄霉属(Stemphylium);该研究可为澄江地区蓝莓贮藏期腐烂病害的预防和控制及进一步深入研究提供一定的参考理论依据。     

宁夏枸杞果内生真菌多样性及其分布

以枸杞为试材,采用组织匀浆法从不同生长期的枸杞果中分离内生真菌,根据培养性状、菌落、孢子等的形态特征和rDNA-ITS序列分析,对分离菌株进行鉴定;根据枸杞果内生真菌的定殖率、相对频率、物种多样性指数、丰富度指数和相似性系数分析其组成特点。结果表明:从枸杞果中分离得到29株内生真菌,这些菌株分属于链格孢属(Alternaria)、枝顶孢属(Acremonium)、帚枝霉属(Sarocladium)、亚隔孢壳属(Didymella)、派伦霉属(Peyronellaea)、茎点霉属(Phoma)和盘二孢属(Marssonia)7个属;其中链格孢属(Alternaria)、枝顶孢属(Acremonium)和帚枝霉属(Sarocladium)为优势属,分别占总菌株数的31.0%、27.6%和27.6%;成熟期枸杞果内生真菌物种多样性指数最大,幼果期枸杞果内生真菌物种多样性指数最小。枸杞果内含有丰富的内生真菌资源,成熟期枸杞果内生真菌多样性指数和丰富度指数远远高于幼果期和变色期。     

宁夏枸杞内生真菌的分离及多样性分析

以枸杞为试材,采用组织分离法从不同品种、不同部位的枸杞组织中进行内生真菌的分离,根据培养性状、菌落、孢子等的形态特征和rDNA-ITS序列分析对分离菌株进行鉴定;根据枸杞内生真菌的相对频率、物种多样性指数、丰富度指数和相似性系数分析其组成特点。结果表明:21份枸杞样品中共分离得到363株内生真菌,这些菌株分属于链格孢属(Alternaria)、曲霉属(Aspergillus)、双极霉属(Bipolaris)、毛壳菌属(Chaetomium)、枝孢属(Cladosporium)、镰刀菌属(Fusarium)、青霉菌属(Penicillium)、光黑壳属(Preussia)、裂壳菌属(Schizothecium)、粪壳菌属(Sordaria)、戴氏霉属(Taifanglania)、梭孢壳属(Thielavia)、火丝菌属(Tricharina)和炭角菌属(Xylaria)14个属,其中链格孢属(Alternaria)、梭孢壳属(Thielavia)和曲霉属(Aspeirgllus)为优势属,分别占分离菌数的46%、14%和13%。枸杞植株各器官都有内生真菌分布,其中,茎部内生真菌多样性指数最大,为0.86,且果与茎部的相似性系数最大。不同枸杞品种间内生真菌分布存在差异,"宁杞1号""宁杞2号"内生真菌多样性指数和丰富度指数远远高于黄果枸杞和黑果枸杞。内生真菌群落组成的相似性结果表明,部分内生真菌具有一定的宿主和组织偏好性。枸杞体内含有丰富的内生真菌资源,其内生真菌具有很高的宿主特异性,而且其分布受生境影响。     

蓝莓果实潜伏侵染病原真菌的分离与鉴定

以辽宁省蓝莓鲜果为试材,采用组织分离法分离潜伏侵染果实的病原真菌,通过形态学和分子生物学方法,对病原菌进行分类鉴定,研究了真菌的潜伏侵染状况,为指导蓝莓果实病害防治提供参考依据。结果表明:辽宁省蓝莓果实普遍存在真菌潜伏侵染现象,不同品种带菌率存在差异,‘M7’带菌率较高,"布里吉塔""爱国者""奥尼尔"和"南好"带菌率较低。从8个蓝莓品种中共分离鉴定出9种潜伏病原真菌,分别为互隔交链孢霉(Alternaria alternata)、细极链格孢菌(Alternaria tenuissima)、芽枝霉属(Cladosporiumsp.)、灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)、黑曲霉(Aspergillus niger)、嗜松青霉(Penicillium pinophilum)、茎点霉属(Phomasp.)、毛壳属(Chatetomiumsp.)和镰刀菌属(Fusariumsp.)。其中,互隔交链孢霉(Alternaria alternata)可在多个品种中分离,为蓝莓果实主要潜伏侵染病原真菌。另外,从蓝莓果实中分离到一株葡萄有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum),该酵母对互隔交链孢霉具有良好的抑制作用。     

羊耳蒜内生真菌的分离鉴定与抑菌活性筛选

以兰科野生植物羊耳蒜为试材,采用常规无菌培养技术分离其根部的内生真菌,同时采用平板对峙的方法,研究了所获得的内生真菌菌株对常见植物病原真菌的抑菌活性。结果表明:从羊耳蒜的根中共分离获得43株内生真菌,经形态学鉴定分属于7个属,其中丝核菌属占优势。筛选得到4株具有较强抑菌活性的菌株,占分离菌株总数的9.3%,抑菌活性集中在油菜菌核病菌。结合分子生物学鉴定发现,这4株菌株分别为腐皮镰孢菌Fusarium solani、柱孢霉属菌株Cylindrocarponsp.、轮枝菌属菌株Lecanicilliumsp.和胶膜菌属菌株Tulasnella sp.。     

金福菇真菌性病害种类调查及主要病原菌鉴定

对广西农业科学院微生物研究所食用菌菌种厂金福菇病害的发生情况进行了调查,并采集回病害样品,对病原菌进行了分离、纯化和鉴定。通过传统形态学分类,对金福菇真菌病害病原菌进行了鉴定,共鉴定了5株病原真菌,分别是曲霉3个菌株、木霉和青霉各1个菌株,曲霉菌出现的频率最高。     

蓝莓贮藏期病原细菌的分离与鉴定

为明确云南省玉溪市蓝莓果实腐烂的病原细菌种类,对玉溪市澄江地区蓝莓果实进行致病细菌分离,对分离的病原细菌进行形态学鉴定和分子生物学鉴定。实验结果表明,从发病腐烂的蓝莓果实上分离出3株病原细菌,初步确定属于沙雷氏菌属(Serratia)微杆菌属(Microbacterium)和短小杆菌属(Curtobacterium)。研究结果对玉溪澄江地区蓝莓贮藏期腐烂病害的防治和进一步深入研究将提供一定的参考理论依据。     

海南龙眼红粉病的病原鉴定

【目的】确定海南省近年发生的新病害——龙眼红粉病病原菌种类,为科学防治提供理论依据。【方法】采集海南省龙眼主产区龙眼红粉病病果样本,通过对病原菌形态观察、致病性测定,以及病原菌的rDNA 28S和rDNA ITS序列分析进行病原鉴定。【结果】经分离纯化获得病原菌,培养后回接健康龙眼果实,出现的病害症状与田间发病症状一致,再次分离得到同样病菌,确定其为致病菌;对病原菌进行传统形态学观察,病原菌分生孢子的形态为粉红单端孢菌属真菌,将待测菌株rDNA-ITS和rDNA-28S序列与GenBank中相关菌株的序列进行比较,发现其致病菌与Trichothecium roseum的相似性达到99%。【结论】确定海南省龙眼主产区新病害龙眼红粉病的病原菌为粉红单端孢菌Trichothecium roseum。     

海南龙眼红粉病的病原鉴定北大核心CSCD

【目的】确定海南省近年发生的新病害——龙眼红粉病病原菌种类,为科学防治提供理论依据。【方法】采集海南省龙眼主产区龙眼红粉病病果样本,通过对病原菌形态观察、致病性测定,以及病原菌的rDNA 28S和rDNA ITS序列分析进行病原鉴定。【结果】经分离纯化获得病原菌,培养后回接健康龙眼果实,出现的病害症状与田间发病症状一致,再次分离得到同样病菌,确定其为致病菌;对病原菌进行传统形态学观察,病原菌分生孢子的形态为粉红单端孢菌属真菌,将待测菌株rDNA-ITS和rDNA-28S序列与GenBank中相关菌株的序列进行比较,发现其致病菌与Trichothecium roseum的相似性达到99%。【结论】确定海南省龙眼主产区新病害龙眼红粉病的病原菌为粉红单端孢菌Trichothecium roseum。     

宁夏枸杞炭疽病病原菌的分子鉴定

以枸杞为试材,对宁夏枸杞炭疽病果、病叶进行了组织分离、致病性检测和分子鉴定研究。结果表明:分离获得4株菌株,经致病性检测,有3株菌株有致病性;经形态学鉴定3株致病菌株属炭疽菌属(Colletotrichum);利用真菌保守的rDNA-ITS序列进行扩增和同源性分析,3株致病菌株与胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)的序列相似性达99.4%。     

杧果果实潜伏侵染真菌种类研究

为了探明杧果果实真菌的潜伏侵染状况,采用组织分离法对采自华南6省区的杧果果实真菌潜伏侵染进行研究,结果表明,我国杧果果实普遍存在真菌的潜伏侵染现象,但不同省区的带菌率存在显著差异,果柄和果实蒂部的带菌率极显著高于果实中部和端部的带菌率。共鉴定11种潜伏侵染真菌,分别为胶孢炭疽菌(Colletotrichumgloeosporioides Penz.)、可可球二孢菌(Botryodiplodia theobromae Pat.)、尖孢炭疽菌(Colletotrichum acutatum Sim-monds.)、杧果拟茎点霉(Phomopsis mangiferae Ahmad.)、杧果拟盘多毛孢(Pestalotiopsis mangiferae(P.Henn.)Sutton.)、多米尼加小穴壳(Dothiorella dominicana Pet.et Cif.)、杧果大茎点霉(Macrophoma mangiferae Hing.&O.P.Sharma)、链格孢(Alternaria alternata(Fr.)Keissl.)、曲霉(Aspergillus sp.)、弯孢霉(Curvularia sp.)、镰刀菌(Fusarrium spp.)。其中,胶孢炭疽菌(C.gloeosporioides)、可可球二孢菌(B.theobromae)为主要潜伏侵染真菌,杧果大茎点霉(M.mangiferae)为首次报道的杧果潜伏侵染真菌。     

中药渣堆肥中拮抗真菌的筛选、鉴定

以发酵后的中药渣为试材,采用稀释涂布平板法进行初筛,通过平板对峙法进行复筛,研究了具有拮抗特性真菌的形态学特征、生理生化特征、18S rDNA分子生物学特征,并检验了拮抗真菌对立枯丝核菌的抑制能力,以期资源化利用中药渣中有生防作用的菌种资源。结果表明:从中药渣中得到了7株对立枯丝核菌有抑制作用的拮抗真菌,F-1为柠檬青霉,F-2为黄曲霉,F-3为塔拉木霉菌,F-4为棘曲霉,F-5为深褐娭姆斯菌,F-6为烟曲霉,F-7为Albifimbria viridis。其中,F-3可产IAA;F-7可以解有机磷。     

28种药用植物提取液对6种植物病原真菌抑菌活性的测定

以瓜果腐霉（Pythium aphanidermatum）、辣椒疫霉（Phytophthora capsici）、尖镰孢菌（Fusarium oxysporium）、茄镰孢菌（Fusarium solani）、灰葡萄孢（Botrytis cinerea）、禾谷镰孢菌（Fusarium graminearum）等6种植物病原真菌为供试菌株,采用菌丝生长法对28种药用植物提取液的抑菌活性进行了测定。结果表明：丁香（Eugenia caryophyllata）对6种植物病原真菌的抑制率均达100%,乌梅（Armeniaca mume）、百部（Stemona sessilifolia）和木香（Aucklandia lappa）对5种植物病原真菌的抑制率均在70%以上。采用孢子萌发法对抑菌效果较好的5种药用植物进行进一步研究,结果表明：这5种药用植物对灰葡萄孢孢子萌发抑制率均在90%以上。     

Needle disinfection and bioptic wood sampling achieved with a disposable for drill resistance measurement devices

Needle drill resistance measurement devices (NDRMDs) are often used during tree hazard assessment campaigns to detect and measure the extent of wood decay and other defects of wood in trees, despite of the possibility of transmission of potentially pathogenic microbial inoculum from tree to tree through unclean needles. Here, we describe a disposable connectable to NDRMDs through an adapter and we report on its efficacy not only at disinfecting the needle, thus reducing the likelihood of disease transmission, but also at collecting wood samples for bioptic purposes, whose subsequent analysis may be pivotal for, or allow to refine, the prognosis. The complete efficacy of the disposable at disinfecting the needle was determined through three different experiments conducted under controlled conditions in vitro and in vivo using both wood decay fungi and the canker stain pathogen of plane trees, and under field conditions. The disposable combined with NDRMD proved to be as effective as state-of-the-art drilling methods at collecting wood samples for subsequent PCR-based molecular diagnosis of wood decay fungi (Fisher’s exact test for count data; P = 4.846 × 10⁻⁷) as determined through comparative sampling and diagnostic assays on 42 trees. The disposable allows not only for a routinely, complete and fully standardized disinfection of the needle, but also provides the opportunity to automatically and efficiently collect bioptic wood samples for subsequent phytopathological analyses.     

海南岛文心兰病叶组织真菌的分离鉴定与优势真菌致病性初探

从位于海南省海口市的文心兰（Oncidium sp.）栽培基地的温室采集‘博大1号’植株发病叶片258份，分离纯化培养真菌，采用分子技术鉴定其种类，并回接验证优势真菌的致病性。共分离到119株真菌，划为39个OTU。其中，子囊菌门（Ascomycota）占90%、毛霉菌门（Mucoromycota）占8%，担子菌门（Basidiomycota）占2%。分离到的真菌中有31种对应60%以上的叶片样品真菌高通量序列。最常见的真菌有巨座壳属Muyocopron alcornii、胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides、间作壳属Diaporthe spp.和弯孢属Curvularia spp.。所分离到的真菌主要为病原真菌和腐生真菌，在24种病原真菌中，有9种为病原—共生型真菌，5种为病原—腐生—共生型；9种为腐生型，1种为腐生—共生型。回接试验表明，分离频度最高的前10种真菌均能快速侵染文心兰幼苗，使其叶片出现坏死与腐烂；致病性较强且快的有Muyocopron alcornii、胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides、Diaporthe miriciae等，接种后1 ~ 2 d即表现出明显的坏死症状。     

浆果类果实采后病害及天然产物对其的抑制作用研究

浆果类水果作为重要的经济作物,在世界范围内均有种植。然而,由病原真菌引起的采后病害,是浆果类水果减产的主要原因,造成了巨大的经济损失。本文系统地阐述了浆果类水果包括草莓、蓝莓、葡萄、猕猴桃、石榴等在内的浆果类水果采后的主要致病菌,以及植物提取物、精油、壳聚糖和拮抗菌等天然产物对果实采后致病真菌的抑菌效果,为采后浆果类水果病害分析及采后保鲜提供参考。     

稻草床栽草菇培养料优质发酵方法研究

简易发酵、一次发酵和二次发酵稻草培养料床栽草菇的试验结果表明,二次发酵法栽培的草菇生物学效率达16.3%,显著高于一次发酵及简易发酵,且能较好地控制病虫害的发生,提高了草菇的产量和质量。     

几种食用真菌和霉菌对一些抗菌药剂的敏感性研究

采用二倍稀释法研究了12株食用真菌和5种霉菌对7种抗菌药剂的敏感性。结果表明,侧耳属、香菇和金针菇对多菌灵和甲基托布津不敏感,而木耳和猴头对这两种药物极其敏感。几乎所有供试食用真菌对甲醛和升汞都较敏感。侧耳属绝大多数菌株对石灰较不敢感。霉菌中黑曲霉、绿色未霉和产黄青霉对多菌灵和甲基托布津极其敏感,而米根霉和总状毛霉对这两种药物极不敏感。5种霉菌对甲醛和升汞都敏感,对高锰酸钾都不敏感。通过敏感性比较。在侧耳类、香菇和金针菇生产中比较理想的抗霉剂是多菌灵并辅以适当浓度的甲醛或石灰。     

茄子种子携带真菌的检测

为了明确茄子商品种子上携带病原真菌的种类及分类地位,采用吸水纸法和PDA平板法对20个茄子品种进行种子带菌检测,通过分离纯化和显微形态学鉴定,发现茄子不同品种携带真菌的数量和种类具有显著的差异,种子表面携带的优势菌群主要为根霉(Rhizopus)、青霉(Penicillium)、曲霉(Aspergillus)类腐生真菌...     

核果类果树根癌病菌寄主范围及抗性研究初报

2000年11月从山东泰安、临朐、诸城等地采集冠瘿瘤标本,经分离纯化及在指示植物向日葵上的致病性测定,共分离到致病性病原菌8株.经对26种供试植株的接菌试验,发现有20种植株得病.基于同一砧木或品种类型对不同菌株的抗性程度往往幅度很大,应采用多种菌株进行侵染试验.对8种樱桃砧木的抗性研究发现,不同砧木对不同致病菌的抗性不同.