尖角突脐孢对稻田稗草的防除效果

在温室内进行了露水期、接种量、喷液量及稗草叶龄对尖角突脐孢菌(Exserohilummonoceras)除稗效果的试验.结果表明,适合条件下,尖角突脐孢对4叶期以下的稗草幼苗具有极好的防效.要达到理想的除稗效果需要至少24h的露水期,接种菌液的孢子浓度在1.25×105孢子/ml以上.接种孢子浓度和喷液量对尖角突脐孢除稗效果的影响也极明显,它们与防效呈S曲线关系.     

中国稗草病原真菌对稗草及水稻的致病性

从稗草病叶上分离到８种病原真菌,它们是：链格孢、棒弯孢、月弯孢、画眉草弯孢、橙黄树座霉、紫附球菌、Ｂｉｐｏｌａｒｉｓｓｃｈｏｅｍａｋｅｒ和尖角突脐孢。前４种病原菌对水稻有致病作用。在对水稻无致病作用的４种病原菌中,橙黄树座霉、紫附球菌和Ｂ．ｓｃｈｏｅｍａｋｅｒ对稗草的致病力弱,而尖角突脐孢对４．５叶期以下的稗草有极强的致病作用。寄主范围测定表明尖角突脐孢除了轻度侵染玉米幼苗,对其它主要作物如水稻、小麦、大豆、棉花、谷子、豌豆、芸豆、向日葵、芝麻、大麻无致病作用。本研究结果表明尖角突脐孢在我国可作为微生物除稗剂的候选菌     

影响链格孢菌生长及产孢的因子

在实验室研究了影响稗草病原真菌链格孢生长及产孢的因子.链格孢菌可在较宽的温度范围内生长、繁殖;连续黑暗、空气充足条件下有利于产孢;该菌在4种不同的植物产品上培养可产生大量的孢子,最多的无芒稗籽上每克干物质产孢量达3.59×108个,这些培养物在首次产孢收获后均可直接培养作二次产孢利用.固体(菌块)和液体(菌悬液)接种培养物均能成功产孢.但培养量大时液体接种优于固体接种,产孢量与接种菌悬液浓度呈正相关.     

禾长蠕孢菌和尖角突脐孢菌防治稗草的研究

 病原真菌禾长蠕孢菌稗草专化型(Helminthosporium gramineum Rabenh f.sp.echinochloae,HGE)和尖角突脐孢菌(Exserohilum monoceras,EM)在稗汁葡萄糖中的发酵滤液对稗草种子的发芽有明显的抑制效果,发芽抑制率分别为30.9%和13.5%.HGE菌在改良Fries、稗汁葡萄糖,EM菌在改良Fries中的发酵滤液对稗草根和芽的生长有明显抑制作用.HGE菌发酵滤液与其孢子混合使用比单独使用对稗草的防效明显提高,稗草感病株率、致死率分别达86.3%和69.5%,病情指数为78.7;发酵滤液与孢子结合(先后喷雾)使用后稗草的感病株率、致死率分别为83.9%和67.9%,病情指数为72.8.HGE与弯孢菌(Curvularia lunata)孢子混合喷雾接种对稗草防效明显高于2种菌孢子单独使用.     

一种筛选稗草生防潜力菌的简易生测方法

将催芽至露白的稗草和水稻种子直接接种在于PDA培养基上培养形成的 4种稗草病原菌 (交链孢菌、弯孢菌、禾长蠕孢菌稗草专化型、尖角突脐孢菌 )菌落上 ,观察稻、稗苗感病情况 ,调查根、芽生长抑制率。结果表明 ,4种菌对稻、稗的致病性和生长抑制率与常规生测法结果基本吻合。说明在培养基中初步测定、筛选稗草生防潜力菌是可行的。该方法与常规生测法比较 ,可节省一半时间左右 ,同时可减少工作量。     

稻田稗属杂草致病菌的分离与鉴定

稗草Echinochloa crus-galli作为稻田难以防除的恶性杂草,严重影响水稻产量。为发掘具有防治稻田稗草潜力的生防菌,本研究从江苏、广西、贵州三省采集感病稗草,采用组织分离法获得10株对稗草致病性较强的优势菌株。通过观察优势病原菌的形态特征,结合rDNA-ITS、GAPDH、EF-1α基因片段序列分析确定10株菌分别为新月弯孢Culvularia lunata、尖角突脐蠕孢Exserohilum monoceras、禾长蠕孢菌Setosphaeria rostrata、稻平脐蠕孢Bipolaris oryzae、梭形突脐蠕孢Exserohilum fusiforme、澳大利亚弯孢Curvularia australiensis、双色平脐蠕孢Bipolaris bicolor、高粱附球菌Epicoccum sorghinum、亚隔孢壳属Didymella americana和亚隔孢壳属Didymella pinodella。该研究丰富了稗草病原菌生物资源,为进一步开发稻田生物除草剂提供了新材料。     

尖角突脐孢菌在温室环境下侵染稗草的致病体系研究

稗属（Echinochloa）杂草是全世界水稻等作物生产中的一类恶性杂草。人工除稗安全但费时费力，化学除稗高效但伴随农产品安全和环境相融友好方面的潜在风险。因此，寻求安全高效的除稗活性成分和施药技术成为国际上除稗剂发展的重要方向之一。在研究和开发生物除稗剂的技术体系中，满足高通量筛选安全、高效的除稗生防因子的温室检测体系是极为重要的支持平台，同样，生物除稗剂的田间科学施药技术亦应依据生防因子在稗草上致病和致害所需的最佳条件来制定。基于此，亟需探明生防因子侵染稗草致病的相关条件并建立快速有效的生防因子除稗效果温室检测体系和田间施药技术。本文系统研究了影响尖角突脐孢菌侵染稗草的相关因子，建立了稳定的温室环境下尖角突脐孢菌侵染稗草的致病体系。     

狭卵链格孢菌株AAEC05-3及其毒素对稗草的致病性

为了确定稗草生防菌狭卵链格孢Alternaria augustiovoidea菌株AAEC05-3防除稗草的潜力,研究了其孢子接种浓度和喷液量对该菌株致病力的影响及菌株的寄主专化性。结果表明,接种浓度和喷液量显著影响菌株的致病力,接种浓度达到1×106个孢子/mL时,菌株对稗草生长抑制率达到85.32%。150mL/m2的喷液量对稗草的防除效果达到91.84%。进一步增加喷液量,菌株对稗草的生长抑制率降低。水稻、大豆、向日葵和绿豆对菌株不敏感,而小麦、玉米和谷子等作物对菌株较敏感,表明菌株寄主相对专一。通过柱层析法和高效液相色谱法分离到一除草活性化合物,化合物的最大紫外吸收峰在243nm和281.5nm。试验结果表明,采用C18柱并以甲醇∶水(v/v)=60∶40为流动相能较好地分离纯化该毒素。在100mg/L浓度下,毒素可完全抑制稗草种子的萌发。盆栽试验结果表明,在100mg/L浓度下,该毒素对稗草幼苗生长抑制率达76%。表明菌株AAEC05-3可有效防除稗草,具有微生物除草剂开发潜力。     

突脐蠕孢与弯孢原生质的双亲灭活融合

采用灭活原生质体方法,对致病力强、产孢量低的突脐蠕孢EM菌株和致病力较弱、但产孢量高的弯孢CL菌株两株稗草致病菌进行原生质体融合,通过观察形态、生物学及抑草活性等特性筛选融合子。结果表明,2%溶壁酶+2%蜗牛酶处理获得两亲株的原生质体释放数量最高,CL和EM分别达1.25×106个/ml和1.21×106个/ml;再生培养基○c处理的CL和EM原生质体再生率分别达14.7%和13.2%。EM利用热灭活55℃5min;CL利用紫外灭活30s,距离20cm,照射时间4min;聚乙二醇促融,获得3个融合子。融合子在孢子形态上与亲株存在明显差异,其菌丝生长速度、孢子产量、对稗草根生长的抑制作用等也与双亲菌株有差异。     

禾长蠕孢菌稗草专化型固体发酵产孢培养基及其工艺条件的研究

禾长蠕孢菌稗草专化型（Helminthosporium gramineum Rabenh. f. sp. echinochloae,HGE）是一株稗草生防潜力菌,为了获得该生防菌大量孢子用于田间试验,本文研究了其固体发酵产孢最佳培养基配方及其培养条件。通过试验筛选确定了固体发酵培养基所需碳源及其浓度、氮源及其浓度以及底物基质,适合HGE菌孢子生产的培养基最佳组合为：以珍珠岩为底物基质,在其中添加4%米粉、1%豆粕粉、0.2%Na3PO4.12H2O、0.1%MgSO4.7H2O。同时确定了适合HGE菌孢子生产的培养条件：培养基最适含水量为40%,最佳接菌量为8%菌悬液,25℃静置培养11 d,培养期间用黑光灯12 h循环光照。按优化后培养条件放大培养HGE菌,获得最高产孢量可以达到1.5×107孢子·克-1干物质。温室生测结果显示优化条件生产的HGE菌孢子对稗草防效可达80%以上。     

Colonization of rose by Sphaerotheca pannosa (Wallr.) Lév. var. rosae Wor.

Colonization of rose by powdery mildew (Sphaerotheca pannosa) is described in terms of mycelium growth, conidiophore production and sporulation in time. The data used are gathered during different years, put together and treated by means of graphic models. Colonies could be separated into fast and slow growing colonies. Colonies initiated on leaves of increasing age showed a decreasing growth rate. Production of conidiophores and conidia started on the same day, and the relative activity of conidiophore production reached its maximum 6 days after the end of the latency period, followed 1 day later by the maximum activity of conidium production. Both conidiophore and conidium production continued for a long time at a low level. The effect of leaf age on conidiophore production found expression in differences in production rate during the first days of colony development and in final production levels. Observations on naturally infected leaves in an outdoor experiment showed a rapid decrease of sporulation on leaves of 10 days and older. Highest percentages of sporulating leaf area were observed on leaves between 7 and 10 days old.     

无壳葫芦根腐病病原菌的鉴定及生物学特性初步研究

近年来随着内蒙古无壳葫芦种植面积不断扩大,其病害也越来越严重,其中无壳葫芦根腐病是最普遍、最严重的一种病害。通过对无壳葫芦根腐病的病原菌进行分离、鉴定,确定该病原菌为茄镰孢(Fusarium solani)。本试验利用孢子悬滴法测量孢子萌发10 h后菌丝长度来研究病原菌的生物学特性,比较方便、省时、降低试验费用。该病菌在25℃条件下,菌丝生长速度最快,适应的pH范围较广,偏向于酸性;大型分生孢子萌发条件要求比较宽泛,小型分生孢子萌发条件要求较高,在PS培养液中萌发最好,土壤浸液能够促进分生孢子萌发以及菌丝生长;分生孢子的致死温度为60℃。     

胶孢炭疽菌CgSho1基因的克隆与功能分析

HOG-MAPK(high osmolarity glycerol mitogen-activated protein kinase)信号途径是真菌MAPK途径中参与渗透压响应的一条重要通路,在植物病原菌生长发育及致病过程中发挥着重要的作用。Sho1(synthetic high osmolarity-sensitive protein1)是HOG-M APK信号途径上游的一个重要感受器,在不同真菌中常具有不同的功能。本研究从胶孢炭疽菌中克隆了Sho1的同源基因,命名为Cg Sho1,该基因编码一个291个氨基酸的蛋白,含有4个跨膜结构域和一个SH3功能域。利用同源重组的方法获得了该基因的敲除突变体,与野生型相比,敲除突变体表现为营养生长缓慢,菌丝稀疏且疏水性增强,产孢量下降,对氧化压力和渗透压更加敏感,致病力明显减弱。上述结果表明,Cg Sho1参与调控胶胞炭疽菌的营养生长、分生孢子产量、氧化应激反应、渗透压响应及致病性。     

陕西省猕猴桃黑斑病病原菌鉴定

To confirm the causal pathogen and damage degree of a new disease of kiwifruit-black spot in Shaanxi Province, a field investigation was conducted in Zhouzhi County and Huyi District in 2018. The pathogen was isolated from the diseased fruits and identified based on morphological characteristics, pathogenicity testing, sequence alignment and phylogenic tree analysis. The results showed that the average incidence of black spot was 65%, and the early fruiting rate was 33%. Fruits infected with black spot disease were soft-rotted after being stored for two months under low temperature conditions. The pathogenic fungi were isolated from the under skin of Cuixiang kiwifruits and the strains could produce two types of conidia, including oval α-type conidia and curved β-type conidia. Through sequences alignment of 18S rRNA, ITS, reference gene (EF1-α) and phylogenetic tree clustering analysis, it was identified for the first time that the causal pathogen causing black spot disease of Cuixiang kiwifruit in Shaanxi Province was Diaporthe eres.     

陕西省猕猴桃黑斑病病原菌鉴定

正‘翠香猕猴桃’属美味猕猴桃品系,具有早熟优质、味道香甜等优点,是陕西省周至县、鄠邑区、眉县等猕猴桃主产区特有的主栽品种[1]。2013年起,陕西周至‘翠香猕猴桃’果园连年发生黑斑病,平均病园率达85.8%,病果率达48.5%以上[2]。该病在果实生长后期呈现黑色病斑症状并在低温贮藏期引起果实腐烂,严重制约了猕猴桃产业的发展。‘翠香猕猴桃’黑斑病病原菌种类、形成机理尚不明确。本研究针对该病发生情况进行田间调查和病原菌分离,通过回接试验     

采用西瓜汁蔗糖琼脂培养基有效筛选西瓜枯萎病菌拮抗细菌

 在从摩洛哥引进的脐血橙田间植株的新梢嫩叶上观察到褪绿环斑和污斑,褪绿斑驳,叶背有边缘凹刻的圆形或近圆形环,以及脉明和叶脉环阻等症状。通过向Madam Vinous甜橙、邓肯葡萄柚等柑桔类指示植物的嫁接接种;用钝刀醮取汁液切割指示植物墨西哥来檬和埃特洛香的茎部进行机械传播;以及汁液磨擦接种草本指示植物昆诺藜等方法,鉴定到柑桔环斑病毒(citrus ringspot virus,CRSV)。嫁接接种的柑桔类指示植物上的症状包括新梢休克、新叶脱落,新叶表现褪绿环斑和污斑以及斑驳,脉明和叶脉环阻等;机械接种的柑桔类指示植物表现新叶的褪绿环斑症状;昆诺藜在接种后4~6d于接种叶上产生褪绿至坏死的局部枯斑,但无系统感染的症状出现。取表现症状的柑桔类指示植物和昆诺藜的叶片作接种源,汁液磨擦接种回接至昆诺藜,再现了同样的症状。     

向日葵黄萎病菌突变体库的建立及其阳性转化子的鉴定

为揭示向日葵大丽轮枝菌Verticillium dahliae Kleb.的致病机理,利用农杆菌介导法将带有潮霉素抗性标记和绿色荧光蛋白报告基因的双元载体转入大丽轮枝菌的分生孢子中并获得阳性转化子,以野生型菌株为对照,对随机挑取的阳性转化子的菌落形态、菌丝生长速率、产孢量、粗毒素分泌量和致病力进行了研究。结果表明,共获得800株阳性转化子,随机选取的40株阳性转化子中有2株的菌落只产生白色气生菌丝,不能形成黑色微菌核。与对照相比,40株转化子的生长速率均有不同程度降低,其中转化子A1生长速度降低最显著,菌落直径仅为3.28 cm,比对照下降了38.92%。40株转化子中有3株的产孢量高于对照,其中转化子A9的产孢量最高,为3.50×10~7个/mL,比对照提高1.10倍;转化子A1的产孢量最低,仅为1.35×10~7个/mL,比对照下降了19.16%。40株转化子中有4株的粗毒素分泌量较对照显著升高,占测定菌株的10%,有24株较对照显著降低,占60%,其余12株与对照无显著差异。40株转化子中有3株的致病力较对照显著增强,占测定菌株的7.5%;有7株的致病力较对照显著降低,占17.5%;其余30株与对照无显著差异。