丹红杨愈伤组织诱导与器官再生的影响因子分析

采用正交设计,首次建立了丹红杨离体培养技术体系.结果表明:丹红杨叶片最佳胚性愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D0.20 mg/L+6-BA1.00 mg/L,诱导率为57.50%;叶柄、无芽茎段最佳胚性愈伤组织培养基诱导为MS+6-BA0.30～0.80 mg/L+ZT0.30～0.80 mg/L+NAA0.02～0.05 mg/L,诱导率为82.26%;根最佳胚性愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA1.00 mg/L+KT0.50～1.00 mg/L+NAA0.50～1.00 mg/L.胚性愈伤组织增殖最佳培养基为MS+BR0.10 mg/L+NAA 0.10 mg/L.胚性愈伤组织分化不定芽最佳培养基为WPM+6-BA0.20 mg/L+TDZ0.001～0.003 mg/L+KT0.50 mg/L+NAA0.05～0.10 mg/L.     

红松成熟合子胚愈伤组织诱导的适宜培养条件

为了探索以红松成熟合子胚为外植体诱导愈伤组织的适宜培养条件,以GD、DCR、LM、MS等为基本培养基,以2,4-D和6-BA组成不同浓度激素组合,进行愈伤组织诱导试验。结果表明,1供试培养基均可诱导红松成熟合子胚产生愈伤组织,但DCR培养基上诱导的愈伤组织出现最早,出愈率显著高于其他培养基,达93.3%;2在DCR培养基中添加2,4-D与6-BA的各种组合均获得了较好的愈伤组织发生,但以2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L和2,4-D6 mg/L+6-BA 1 mg/L的出愈率最高,达96.7%。综上所述,红松成熟合子胚外植体诱导愈伤组织时,适宜基本培养基为DCR,适宜激素组合为2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L。     

构树胚性愈伤组织及体胚诱导研究

以野生构树组织培养无菌苗茎段为外植体,探讨不同种类、质量浓度的植物生长调节剂对胚性愈伤组织诱导及体胚发生的影响,初步建立愈伤组织诱导及体胚发生技术途径。结果表明,TDZ是影响构树茎段胚性愈伤组织诱导的主要因素,NAA和2,4-D是次要因素,构树胚性愈伤组织最佳培养基为MS+0. 05 mg/LTDZ+1. 0 mg/L NAA+0. 1 mg/L 2,4-D。最佳体胚诱导培养基为MS+0. 1 mg/L NAA+1. 0 mg/L 6-BA,体胚诱导率达到41. 33%。     

杉木愈伤组织诱导及植株再生

以杉木成熟合子胚为起始外植体,研究了基本培养基、植物激素、凝固剂种类、有机附加物等因素对杉木愈伤组织的诱导、愈伤组织的继代培养及不定芽分化的影响。结果表明:1/2MS+2,4D2mg/L+6-BA1mg/L+KT1mg/L+糖30g/L是成熟合子胚诱导愈伤组织的最佳培养基;1/2MS+2,4-D1mg/L+6-BA0.5mg/L+KT0.5mg/L+糖30g/L适于杉木愈伤组织继代增殖;改良MS+6-BA0.5mg/L+KT1.5mg/L+蔗糖30g/L是诱导不定芽发生的最佳培养基。     

白鹃梅叶片芽再生体系的构建

对白鹃梅叶片芽再生的适宜培养基和适宜条件进行研究的结果表明,2,4-D、NAA、IBA与6-BA组合均可诱导叶片愈伤,但以MS+1 mg/L 2,4-D +0.5mg/L6-BA为愈伤诱导培养基,MS+0.3 mg/L IBA+2mg/L 6-BA+0.1 mg/L TDZ为芽分化培养基,1/2MS+0.3 mg/L IBA为生根培养基最佳.     

丝棉木松散型胚性愈伤组织的诱导与增殖

通过建立丝棉木松散型胚性愈伤组织培养体系,为丝棉木组培快繁、体细胞离体诱变育种及遗传转化等研究奠定基础。本试验以丝棉木幼嫩茎段为外植体,研究植物生长调节剂不同种类和浓度对丝棉木松散型胚性愈伤组织诱导与增殖的影响。结果显示,丝棉木茎段在MS+1.0 mg/L 2,4-D培养基上可诱导出松散型愈伤组织,愈伤组织诱导率达100%;将松散型愈伤组织转接到MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D的培养基上可获得胚性愈伤组织;将胚性愈伤组织转接到MS+0.25 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D的培养基上,每15 d继代培养一次,继代时选择结构松散、质地硬脆的愈伤组织,继代培养2～3次后可获得均质的丝棉木松散型胚性愈伤组织。本研究表明,丝棉木茎段理想的松散型愈伤组织诱导培养基为MS+1.0 mg/L 2,4-D;最适松散型愈伤组织诱导培养基为MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D;最适胚性愈伤组织增殖培养基为MS+0.25 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D。     

山杏体细胞胚胎发生及其组织学观察

为了建立山杏体细胞胚胎发生再生体系,以山杏茎尖为外植体,研究山杏体细胞胚胎发生及其主要影响因子。结果表明:山杏茎尖在MS+6-BA(0.5 mg/L)+NAA(0.2 mg/L)培养基中愈伤组织诱导率达100%,胚性愈伤组织增殖的最佳培养基为MS+6-BA(0.5 mg/L)+2,4-D(0.2 mg/L)+水解酪蛋白(0.5 g/L)。山杏体细胞胚胎发生过程中能明显看出球形胚、心形胚、鱼雷胚、子叶胚等阶段。     

高羊茅组织培养基的选择

用不同种类的基本培养基及不同浓度2,4-D、6-BA,对本地高羊茅的种子进行愈伤诱导.结果表明:基本培养基种类对愈伤诱导无明显的效果;MS培养基下不同浓度2,4-D、6-BA对高羊茅愈伤诱导时间及出愈率差别很大,以9 mg/L效果最佳,愈伤诱导率达70.2%左右;过高浓度2,4-D、6-BA对萌芽和愈伤的形成有负作用;愈伤组织分化以MS-BA2.0 mg/L-NAA0.5 mg/ L为最佳 MS基本培养基,2,4-D浓度以9.0 mg/L为最佳,最适合高羊茅愈伤组织诱导的培养基为MS 9.0 mg/L2,4-D.     

朱顶红愈伤组织诱导及增殖发育体系的建立及优化

以朱顶红带有小鳞茎的试管苗作为外植体,进行愈伤组织的诱导、增殖及不定芽分化研究,结果表明:诱导愈伤组织形成的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0mg/L+6-BA1.0mg/L+KT2.0mg/L。愈伤组织增殖需要的最佳2,4-D 2.0mg/L浓度为1.0mg/L,促进不定芽分化及植株再生的6-BA浓度为0.5mg/L。     

拟南芥悬浮细胞系的构建研究

以拟南芥生态型种子为实验材料,研究其悬浮细胞愈伤组织继代培养效果。结果表明:在MS培养基上加入不同激素对拟南芥愈伤组织的诱导和继代培养产生显著影响,用最佳激素配比的MS培养基构建了良好的悬浮细胞培养体系。其中拟南芥愈伤组织最佳诱导配方为MS+3.0 mg.L-1 2,4-D+0.3 mg.L-1 6-BA;愈伤组织继代配方为MS+1.5 mg.L-1 2,4-D+0.3 mg.L-1 6-BA+1000 mg.L-1 CH;悬浮培养配方为MS+1.5 mg.L-1 2,4-D+0.3 mg.L-1 6-BA+1000 mg.L-1CH。     

白刺花胚性愈伤组织诱导及体细胞胚发生

【目的】探讨不同植物生长调节剂对白刺花胚性愈伤组织诱导的作用,以及培养基中氮源和无机盐浓度对白刺花体细胞胚发生和植株再生的影响,以期建立白刺花体细胞胚发生、发育及调控技术体系,为白刺花种苗快速繁殖体系建立及遗传转化研究提供参考。【方法】以白刺花叶片为外植体,研究生长调节剂2,4-D(1.0、2.0、3.0、4.0 mg ·L -1 )、NAA(0、0.5、0.8、1.0 mg ·L -1 )、6-BA(0.2、0.5、1.0、2.0 mg ·L -1 )和TDZ(0、0.2、0.5、1.0 mg ·L -1 )组合对胚性愈伤组织诱导,及NAA(0、0.2、0.5 mg ·L -1 )、6-BA(0、0.5、1.0 mg ·L -1 )和TDZ(0、0.2、0.5 mg ·L -1 )组合对体细胞胚发生的调控作用,筛选最优生长调节剂组合;并研究培养基中KNO 3和NH 4NO 3比例对体细胞胚发生的作用,及MS培养基中无机盐浓度(1/5MS 、1/4MS、1/3MS、1/2MS)对体细胞胚萌发的影响,筛选最佳的体细胞胚发育及成熟萌发条件。【结果】白刺花叶片外植体胚性愈伤组织诱导适宜培养基为MS + 2,4-D 3.0 mg ·L -1 + NAA 0.5 mg ·L -1 + 6-BA 0.2 mg ·L -1 + TDZ 1.0 mg ·L -1 +蔗糖40 g ·L -1 +琼脂7.0 g ·L -1 ,诱导率为42.0%。采用MS基本培养基时,最佳的体细胞胚发生培养基为MS + NAA 0.5 mg ·L -1 + 6-BA 1.0 mg ·L -1 + TDZ 0.5 mg ·L -1 +蔗糖40 g ·L -1 +谷氨酰胺100 mg ·L -1 +琼脂7.0 g ·L -1 ,体细胞胚发生率为78.46%,总胚数为对照的3.6倍;MS培养基中,KNO 3浓度提高1倍、NH 4NO 3降至1/2时,体细胞胚发生率可提高至91.33%,总胚数为采用MS基本培养基时的1.4倍;1/3MS培养基有利于体细胞胚的萌发,萌发率为82.75%,幼苗长势良好,单株平均鲜质量为76 mg,幼苗驯化移栽1个月后成活率达90%以上。【结论】白刺花叶片接种于添加2,4-D、NAA、6-BA和TDZ不同组合的诱导培养基上,可脱分化形成愈伤组织或胚性愈伤组织,2,4-D浓度对愈伤组织形态和质地有较大影响。TDZ有利于体细胞胚的形成,适宜浓度的生长素与细胞分裂素组合及硝态氮和铵态氮的比例对体细胞胚的形成和发育具有调控作用,降低MS无机盐浓度可提高体细胞胚萌发率,本试验体系的再生植株移栽成活率达90%以上。     

北乌头组培快繁技术体系初步研究

本文对北乌头组培快繁技术体系进行了初步研究,同时比较了不同外源激素组合对北乌头外植体诱导的影响,其结果表明:北乌头愈伤组织诱导最佳外植体为叶片,丛生芽诱导最佳外植体为带芽茎段及茎尖,愈伤组织诱导最佳培养基为MS+1.0mg/L6-BA+1.0mg/L2,4-D,丛生芽诱导最适合培养基为MS+1.0mg/L2,4-D+0.2mg/LNAA,继代培养以WPM+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LIBA效果最为显著,增殖率在4倍以上;北乌头生根最佳培养基为1/2MS+0.1mg/LNAA,生根率可到90%。     

重瓣大花萱草组织培养快速繁殖的研究

试验以重瓣大花萱草带生长点的茎段为试材 ,以MS与 1/ 2MS为基本培养基 ,分别添加不同浓度的 2 ,4 -D ,6 -BA ,NAA。试验结果表明 :MS 6 -BA1mg/l NAA0 1mg/l的固体培养基 ,有很好的诱导外植体产生不定芽苗的效果 ;而MS 2 ,4 -D2mg/l 6 -BA0 1mg/l的培养基能很快诱导外植体产生愈伤组织 ;愈伤组织在MS 6 -BA1mg/l的培养基上培养后 ,形成结构致密的球状体愈伤组织 ,并分化出苗 ,经继代培养后 ,形成丛状苗 ;试管苗的生根是以 1/ 2MS NAA0 5mg/l的固体培养基最为合适。     

邓恩桉种子组织培养的研究

以邓恩桉种子为外植体,探讨用最少种子快速繁殖最多幼苗的方法,结果表明:MS培养基是较适合邓恩桉种子萌芽和生长的基本培养基;诱导种子直接脱分化成愈伤组织的较佳培养基配方为MS KT1.0 mg/L 2,4-D2.0 mg/L 半胱氨酸30 mg/L;以邓恩桉实生苗的芽来繁芽的较理想培养基配方为H BA2.0 mg/L IAA0.2 mg/L;邓恩桉实生苗的根诱导愈伤组织的较佳培养基配方为MS 6-BA2.0 mg/L NAA0.2 mg/L;诱导邓恩桉下胚轴分化芽较佳培养基配方为B5 6-BA2.0 mg/L 2,4-D0.2 mg/L;诱导邓恩桉下胚轴脱分化为胚性愈伤组织的较佳培养基配方为B5 Ad2.0 mg/L IAA0.2 mg/L.     

刺五加体细胞胚状体发生及成苗的研究

以刺五加试管苗叶片为试材,将叶片接种于含有不同种类和浓度激素的培养基上进行培养,研究不同激素对刺五加胚性愈伤组织诱导、胚状体发生及生根的影响。结果表明：诱导叶片胚性愈伤组织发生的最适培养基为MS＋6-BA 1.5 mg.L-1＋2,4-D 1.0 mg.L-1,胚状体生长发育的最适培养基为MS＋6-BA1.0 mg.L-1＋IBA0.5 mg.L-1,生根的最适培养基为1/2MS＋NAA0.4 mg.L-1。     

葡萄柚品种哈路比叶片离体再生体系的优化

为给葡萄柚的大规模育苗提供方法,以葡萄柚品种哈路比的叶片为外植体,在MS培养基中添加不同浓度配比的激素,探索其离体再生的优化体系。试验结果如下:培养基为MS+0.6 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D愈伤组织诱导率最高为78.57%,愈伤组织呈黄绿色,结构疏松,长势良好;MS+3.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L NAA是诱导愈伤组织分化不定芽的最佳培养基激素浓度配比,分化率最高为48%,不定芽分化快,长势良好;培养基MS+2.0 mg/L IBA有利于诱导生根,生根率达60.74%。初步建立了葡萄柚哈路比的离体再生体系。     

欧洲水仙鳞片组织培养与快速繁殖

以欧洲水仙‘Dutch Master’为研究材料,通过对鳞片取材部位、培养光照、激素配比以及组培苗移栽基质的研究发现,欧洲水仙初代培养的较适外植体为内层鳞片下部,合适光照度为1 000 lx。愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 0.3 mg/L+蔗糖30 g/L,小鳞茎的诱导分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2mg/L+蔗糖30 g/L,小鳞茎继代增殖培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖30 g/L,生根培养基为1/2MS+6-BA 0.3 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖20 g/L。炼苗移栽基质配比为V(蛭石)∶V(泥炭土)∶V(园土)=1∶1∶2。     

尾叶桉的组织培养及植株再生

研究了以尾叶桉(Eucalyptusurophylla)优树(U6无性系)无菌苗的叶子和茎段作为外植体诱导愈伤组织、丛生芽发生以及植株再生的过程。通过多种生长调节剂不同浓度组合的对比试验,确定了U6快繁体系的最适宜培养条件:(1)愈伤组织诱导培养基:MS 1-2mg/L2,4-D;(2)芽增殖培养基:MS 0.5mg/L6-BA;(3)生根培养基:1/2MS 2.0mg/LNAA。     

香蕉薄切片愈伤组织再生体系的建立研究

以巴西香蕉品种的薄切片为外植体高频地诱导出愈伤组织,并诱导出了不定芽,获得了再生植株。在实验过程中,利用正交实验中筛选出愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 4.0 mg.L-1+KT 1.0 mg.L-1+NAA 1.0 mg.L-1+活性炭200 mg.L-1,诱导率可达100%,愈伤组织增殖的最佳培养基是MS+2,4-D 2.0 mg.L-1+6-BA 0.5 mg.L-1+NAA 0.5 mg.L-1+活性炭100 mg.L-1,继代3-4次的愈伤组织在6-BA浓度为5.0 mg.L-1的分化培养基上能分化出不定芽,继代10次之后愈伤组织在继代培养基上开始出现褐化现象,愈伤组织增殖明显受到抑制,褐化的愈伤组织逐渐死亡。