黑曲霉3928植酸酶phy基因的克隆及全序列分析

根据GenBank中已注册的黑曲霉基因序列设计了1对引物,通过PCR方法将黑曲霉phy A全基因进行扩增,获得了1条长约1.5 kb的特异性PCR产物,在PMD18 T载体中克隆了黑曲霉3928植酸酶phy A全基因,筛选到2个重组菌落(1#和2#),并进行了全序列测定。序列分析结果表明:2个重组质粒的测序结果完全一致;克隆的片段中含有完整的phy A基因序列,全长1 506 bp,其中含有一段长102 bp的内含子;phyA基因全序列编码467个氨基酸,信号肽位于基因的5′端,长度为19个氨基酸;碱基序列与GenBank中报道的AY513749的同源性为98.87%,编码的氨基酸序列的同源性为97.21%。     

黑曲霉液态发酵产植酸酶的条件优化研究

文章以黑曲霉为出发菌株,通过初筛、复筛,得到一株产植酸酶的菌株,对发酵时间、温度及pH进行单因素试验,并利用正交设计进行工艺优化。结果表明,当培养基pH为5.5、温度为30℃、发酵时间为5d时,黑曲霉发酵产植酸酶活力最大,为14.35U/mL。     

产植酸酶黑曲霉菌株S8的基因扩增与鉴定

本文主要报道了用 3种不同方法从S8黑曲霉菌丝体中提取基因组DNA ,最适方法是经改进的Vitagene试剂盒法。PCR扩增效果最好的是设计时没有去掉phyA基因内含子的引物 ,获得的特异性PCR产物长约 1.5kb。同时对PCR反应体系进行了优化。对扩增出的目的片段用 3种不同方法进行纯化回收 ,结果是PCRFragmentRe coveryKit法回收效果最好 ,其产量可达到约 10ng/ μL。根据已报道的植酸酶phyA基因序列酶切位点 ,对回收的目的片段进行酶切鉴定 ,该基因能被BamHⅠ、SalⅠ酶切 ,不能被HindⅢ、XbalⅠ、KPnⅠ酶切 ,与已知的phyA基因酶切图谱基本一致 ,进一步判定PCR扩增产物中含有植酸酶phyA基因目的片段     

响应面法优化产植酸酶黑曲霉L2-2的培养基和培养条件

采用中心组合设计和Box-Behnken设计,分别对影响植酸酶产生菌L2-2培养基主要成分和培养条件进行优化,经响应面分析,得到培养基中的3个因素葡萄糖、硫酸铵、植酸钠的最佳组合为:葡萄糖2.57%,植酸钠0.24%,硫酸铵0.30%;培养条件中的3个因素pH、温度、发酵周期的最佳组合为:pH 5.6,温度31.1℃,发酵周期112.8 h。经优化后,黑曲霉L2-2的植酸酶酶活可达15.73 U/mL。     

不同日粮条件下添加植酸酶对生长猪生产性能、养分利用和骨骼发育的影响研究

本文旨在研究不同日粮条件下添加植酸酶时生长猪生产性能、磷利用率和骨骼发育的影响.试验选用体重40 kg左右的杜×长×大三元杂交猪36头,随机分为4组,每组3个重复,每个重复3头猪.4组试验猪的处理为2×2因子设计,即两种类型(小麦型和糙米型)日粮和添加或不添加植酸酶(每千克加植酸酶日粮共舍植酸酶947FTU,替代0.7 g无机磷).试验结果表明:各处理组猪的平均日增重(ADG)差异不显著(P＞0.05).小麦型不加酶日粮组采食量(ADFI)显著高于其他各处理组(P<0.05),小麦型不加酶日粮组料肉比(F/G)显著低于小麦型加酶和糙米型不加酶日粮组(P＜0.05).不同日粮条件、加酶或不加酶处理组生长猪骨骼折断强度、骨灰分及灰分磷含量的差异均不显著(P＞0.05).不同日粮磷表观消化率差异不显著,同种日粮条件下,加酶能显著提高饲料磷的表观消化率(P＜0.05).