妊娠期激素对Th1和Th2细胞因子的调控

妊娠是一个复杂的生理过程,受到神经、免疫和内分泌的共同调节。作为半自体抗原的胎儿不被母体排斥是子宫局部免疫水平调节的结果。其中激素对辅助性淋巴细胞(Th)发生、分化的调节作用愈来愈受到重视。辅助T淋巴细胞能分化为不同的亚型(Th1和Th2),孕酮可促进Th2型细胞因子(IL-4,IL-5)的产生,有利于妊娠的正常发生;松弛肽促进Th1型细胞因子(IFN-γ)的产生,对妊娠有害。在母胎界面存在激素-细胞因子网络,淋巴细胞产生的细胞因子还能够影响其他细胞因子的产生。由Th2样细胞产生的,对胚泡着床具有非常重要作用的白血病抑制因子(LIF),其表达受Th1细胞诱导因子的下调,如IL-12,IFN-α,IFN-γ,受IL-4和孕酮(诱导T淋巴细胞向Th2细胞分化)的上调。激素通过调控淋巴细胞分泌的细胞因子来调控免疫系统,保持一个动态的平衡,有利于维持妊娠。     

Th17细胞及其与疾病的研究进展

辅助性T细胞17(T help cell 17,Th17)是2005年新发现的能够分泌白细胞介素17的CD4+ T细胞,其与Th1、Th2、Tregs细胞共同构成CD4+ T细胞的4个亚群,该细胞与炎症、各种感染性疾病、肿瘤和自身免疫性疾病的发生密切相关。作者对Th17细胞及其在某些疾病或病理过程中作用的研究进展进行了简要综述。     

猪圆环病毒2型ORF2/猪白介素2嵌合表达质粒在猪体内诱导的保护性免疫反应

为探讨猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2/猪白介素-2(PoIL-2)嵌合重组表达质粒(rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2)在猪体内的免疫效果和免疫保护效果进而研制高效PCV2核酸疫苗,将35只10日龄健康仔猪平均分成7组分别以rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2重组表达质粒或PCV2ORF2基因原核表达的rCap蛋白进行免疫及免疫保护试验。共进行4次肌肉注射免疫,每次间隔2周;于第4次免疫后3周通过口腔和鼻腔途径感染PCV2细胞强毒。分别于第4次免疫后和攻毒后不同时间通过检测免疫猪血清抗体水平和外周血T淋巴细胞增殖活性、辅助性T细胞(Th)和细胞毒性T细胞(Tc)亚群的百分含量、排毒率和病毒血症阳性维持时间等指标以评价其免疫和免疫保护效果。结果表明,各免疫组猪均产生了抗PCV2特异性ELISA免疫抗体,但rCap蛋白免疫组猪抗体水平较低;rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2质粒对猪体的免疫和免疫保护效果显著优于rpcDNA3.1/ORF2质粒;在rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2质粒或rpcDNA3.1/ORF2质粒中添加rCap蛋白对重组质粒免疫及免疫保护效果无明显影响。因此,选取rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2质粒为下一步研制PCV2核酸疫苗的主要成分。     

旋毛虫抗原基因T668重组蛋白对鼠结肠炎的保护效应

旋毛虫感染已被证实对Th1型免疫应答为主的炎症性肠病具有良好的干预作用。寄生虫特异性抗原基因表达的蛋白在发挥免疫调节过程中扮演重要角色。本研究目的是探讨旋毛虫表达T668重组蛋白对肠炎模型鼠的保护作用。BALB/c小鼠腹腔注射50μg T668蛋白1次/10d,共3次,直肠内灌注5mg三硝基甲苯磺酸(TNBS)以诱导肠炎发生,通过检测疾病活动指数、组织病理变化进行评估及Th1、Th2型免疫反应相关细胞因子变化情况。T668重组蛋白明显改善疾病活动指数(DAI)及宏观和微观上病理评分。肠道细胞ELISA检测显示,T668蛋白免疫造模后3、7dIL-10和TGF-βLPMC产生水平高差异显著(P<0.05),而3、7dIFN-γ、IL-17和3d后的IL-12LPMC产生水平低差异显著(P<0.05);免疫细胞检测7d的蛋白免疫组CD4+CD25+Foxp3+Treg表达比未免疫组显著降低(P<0.05)。T668表达的重组蛋白对IBD是一个潜在的保护剂。     

法氏囊多肽BSP-Ⅰ和BPP-Ⅰ的免疫调节活性及其B细胞结合蛋白的鉴定

为了研究法氏囊多肽的免疫调节作用,本试验用BSP-Ⅰ和BPP-Ⅰ分别与禽流感灭活疫苗或抗原混匀后免疫鸡。结果显示,BSP-Ⅰ和BPP-Ⅰ均明显提高免疫鸡体内禽流感抗体水平,且两者均促进Th1和Th2型细胞因子产生。采用鸡B淋巴细胞cDNA T7噬菌体文库筛选法氏囊活性肽相互作用的受体蛋白,PCR扩增富集噬菌体克隆的插入片段。序列分析结果表明,BSP-Ⅰ相互作用的蛋白受体有3种,分别为VSTM2、N-钙黏蛋白和v-myc。BPP-Ⅰ相互作用的蛋白分子主要是Ryanodine受体、MGC83917蛋白和BTB/POZ1。这些结果表明,法氏囊活性肽参与机体中多种生物学过程,为深入研究法氏囊活性肽的功能提供了理论基础。     

硒蛋白对动物细胞免疫的调控作用及硒在畜牧生产中应用的研究进展

硒是机体必需微量元素,以硒蛋白的形式发挥其广泛生物学作用。硒蛋白通过保护DNA免受氧化损伤,调控免疫细胞增殖以及细胞因子的分泌来增强机体免疫功能。本文对硒蛋白抗氧化抵御细胞损伤、调控细胞免疫及硒在动物生产中的应用进行综述,旨在为硒蛋白调控动物免疫方面的研究及硒在动物生产中的应用提供理论参考。     

硒及硒蛋白生物学作用的研究进展

硒是动物必需的微量元素，硒以硒半胱氨酸和硒蛋氨酸两种形式存在于硒蛋白中，硒通过硒蛋白影响动物机体的自由基代谢、抗氧化功能、免疫功能、生殖功能、细胞凋亡和内分泌激素等而发挥其生物学作用。     

硒在瘤胃内的代谢及其对瘤胃发酵的影响

早在1818年,硒就作为一种矿物元素被发现,但是之后的几十年里一直被视为一种有毒元素,直到1957年硒的生物学作用首次在小鼠中发现之后,其生物学功能才引起重视。动物体内的硒主要以含硒氨基酸(硒半胱氨酸和硒蛋氨酸)的形式结合在硒蛋白(酶)中,并通过硒蛋白(酶)调节动物机体的自由基代谢、抗氧化、免疫、生殖、细胞凋亡和内分泌等功能。反刍动物日粮中的硒和瘤胃微生物代谢之间存在着相互作用,对硒的生物利用效率和瘤胃发酵产生影响,本文将对此进行综述。1瘤胃内硒的代谢1.1瘤胃微生物对硒的代谢作用1.1.1含硒蛋白的合成瘤胃微生物对硒的代谢…     

猪圆环病毒2型ORF2／猪白介素2嵌合表达质粒在猪体内诱导的保护性免疫反应

为探讨猪圆环病毒2型（PCV2）ORF2／猪白介素-2（PoIL-2）嵌合重组表达质粒（rpcDNA3．1／PCV2-linke PoIL-2）在猪体内的免疫效果和免疫保护效果进而研制高效PCV2核酸疫苗,将35只10日龄健康仔猪平均分成7组分别以rpcDNA3．1／PCV2-linker-PolL2重组表达质粒或PCV2ORF2基因原核表达的rCap蛋白进行免疫及免疫保护试验。共进行4次肌肉注射免疫,每次间隔2周;于第4次免疫后3周通过口腔和鼻腔途径感染PCV2细胞强毒。分别于第4次免疫后和攻毒后不同时间通过检测免疫猪血清抗体水平和外周血T淋巴细胞增殖活性、辅助性T细胞（Th）和细胞毒性T细胞（Tc）亚群的百分含量、排毒率和病毒血症阳性维持时间等指标以评价其免疫和免疫保护效果。结果表明,各免疫组猪均产生了抗PCV2特异性EI。ISA免疫抗体,但rCap蛋白免疫组猪抗体水平较低;rpcDNA3．1／PCV2qinker-PolL-2质粒对猪体的免疫和免疫保护效果显著优于rpcDNA3．1／oRF2质粒;在rpcD—NA3．1／PCV2-linkePolL-2质粒或rpcDNA3．I／ORF2质粒中添加rCap蛋白对重组质粒免疫及免疫保护效果无明显影响。因此,选取rpcDNA3．1／PCV2-linkerPoIL-2质粒为下-步研制PCV2核酸疫苗的主要成分。     

微量元素硒及其在家禽生产中的应用

硒是动物必需的微量元素,在动物体内具有抗氧化、保证甲状腺激素调节代谢功能正常和增强机体免疫功能等的作用。旨在介绍硒的营养作用、影响硒吸收利用的因素、家禽微量元素硒缺乏症、补硒方法及硒中毒和硒在家禽生产中的应用。     

重组融合肽Tβ4-BP5基因的克隆、表达及其免疫佐剂特性

胸腺肽Tβ4和法氏囊活性五肽BP5均能够调节机体的免疫反应,为探讨重组融合肽Tβ4-BP5是否也与免疫功能相关,本试验按照大肠杆菌偏嗜密码子设计并合成重组融合肽Tβ4-BP5基因,将其克隆至pET-32α表达载体中,重组表达载体在大肠杆菌BL21中诱导表达。为进一步评价重组融合肽Tβ4-BP5的免疫佐剂特性,以Tβ4-BP5联合灭活H9N2型AIV疫苗免疫鸡,检测免疫后鸡的HI抗体效价、抗原特异性IgG抗体、AIV中和抗体效价及Th1型(IFN-γ)和Th2型细胞因子(IL-4)的分泌水平,并通过动物免疫保护试验来评价其对鸡的免疫保护作用。结果显示,重组融合肽Tβ4-BP5在大肠杆菌中获得表达;Tβ4-BP5能够增强机体免疫后HI抗体、特异性IgG抗体水平、促进AIV中和抗体的产生、提高Th1型(IFN-γ)和Th2型细胞因子(IL-4)的分泌水平,表明Tβ4-BP5既能增强机体体液免疫应答,又能增强细胞免疫应答。动物免疫保护试验结果显示Tβ4-BP5有助于鸡肺脏中H9N2型AIV病毒的清除。以上结果提示,重组融合肽Tβ4-BP5具有良好的免疫佐剂的潜能。本研究为新型疫苗佐剂的研究开发奠定了基础。     

新孢子虫NcSRS2和NcSAG1重组蛋白免疫小鼠诱导的免疫应答

为了研究新孢子虫NcSRS2和NcSAG1重组蛋白对动物的免疫效果,利用重组表达的NcSRS2和NcSAG1蛋白与弗氏佐剂混匀后免疫BALB/c小鼠,检测小鼠抗新孢子虫抗体水平和血清中IL-4和IFN-γ含量。结果表明,免疫后的BALB/c小鼠IgG、IgG2a和IFN-γ抗体表达水平升高,IgG1抗体和IL-4表达水平也升高,表明NcSRS2和NcSAG1重组蛋白可激发机体产生Th1型和Th2型免疫反应,且NcSRS2重组蛋白的免疫增强效果与NcSAG1重组蛋白免疫组的差异具有显著统计学意义(P0.05)。本研究结果为研制高效安全的抗新孢子虫的新型疫苗提供了参考。     

不同动物来源转移因子(TF)对肉仔鸡T细胞免疫功能及免疫器官指数影响的比较研究

本研究用不同动物来源转移因子(TF)进行AA+肉仔鸡T细胞免疫功能及免疫器官指数影响的比较研究。采用T细胞体外转化增殖和T细胞体内转化增殖实验,来探讨不同动物来源TF免疫活性和对T细胞的体内和体外转化增殖效果的一致性;给1 d肉仔鸡饮水投服不同动物来源TF,7 d、14 d、21 d采样检测。实验数据分析证明,各实验组TF均对肉仔鸡T细胞体外和体内转化增殖具有促进作用,其中乌骨鸡来源TF作用最强;TF对肉仔鸡免疫器官指数影响实验,实验数据分析证明,TF对肉仔鸡免疫器官具有促生长作用,并表明实验组中乌骨鸡TF对免疫器官促生长作用最强。     

绵羊妊娠期外周血T细胞及其亚群的观察

应用酸性α-萘酯酶(ANAE)组化反应标记绵羊妊娠期外周血T细胞,与间情期相比,T细胞总数和辅助性T细胞(Th)无明显变化(P>0.05),而抑制性T细胞(Ts)明显增加(P<0.05).间情期和妊娠期Th/Ts分别为4.6和2.6.结果提示,妊娠期羊可能通过增加Ts细胞来压低母体免疫水平.     

硒的作用机理及对动物免疫的影响

硒是机体必需的微量元素,对免疫功能有很大影响,在维持动物免疫系统的正常发育和功能方面具有重要作用,缺硒将导致免疫器官萎缩、免疫细胞减少和抗体水平下降。文章就硒的生物学功能、氧化作用及其对动物机体免疫功能的影响进行了综述。     

硒对母牛免疫功能及健康的改善作用研究进展

硒是动物必需的微量元素,其分布与地区有关,一般母牛集中地区硒的含量较少,因而需要在饲料中补充。母牛生产中由于机体免疫机能低下,乳房炎、子宫炎等疾病的发生率较高,严重影响母牛生产的经济效益。日粮中添加适量的硒将会提高母牛免疫功能、改善健康、改善乳品质。目前的研究认为硒对母牛免疫和健康的作用机制主要表现在两方面:一是抗氧化,硒以硒代半胱氨酸参加谷胱甘肽过氧化物酶和硫氧还蛋白还原酶的组成,这2个酶能还原体内产生的过氧化物,从而减少过氧化物对细胞的损伤作用,尤其是对免疫细胞的损伤作用;二是抗炎,硒可通过下调花生四烯酸代谢产生类花生四烯酸的2个限速酶,5-脂氧合酶和白三烯A4水解酶,减少类花生酸类物质如白三烯B4的产生,从而降低其促炎作用。     

金黄色葡萄球菌FnbA配体结合区基因核酸疫苗的构建与免疫试验

扩增了奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌纤粘连结合蛋白A(Fnb A)配体结合区基因,并将其克隆至真核表达载体p VAX1启动子下游,构建成真核表达质粒,通过体外细胞转染试验,运用IFA方法进行抗原性初步确认,所构建的重组DNA疫苗质粒能在真核细胞中表达外源基因并被金黄色葡萄球菌抗体特异性识别。为进一步评价侯选疫苗的免疫原性,进行了BALB/c小鼠免疫试验,分别检测免疫后的ELISA抗体水平、Th1/Th2类细胞因子水平以及T淋巴细胞增殖试验。结果表明,构建的核酸疫苗p VAX1-p Fnb A免疫小鼠后,ELISA抗体水平提高,Th1/Th2类细胞因子含量提升,T细胞增殖能力增强。     

马链球菌兽疫亚种PGK蛋白的免疫保护试验

为了阐明马链球菌兽疫亚种(SEZ)PGK蛋白的免疫保护作用,使该菌引起猪、马、牛等多种动物的链球菌病得到有效控制,本试验构建PGK重组表达载体,纯化重组蛋白,对其免疫效力进行系统评价。结果表明:PGK蛋白可以诱导高滴度的血清Ig G抗体,并且可提供一定的免疫保护效力;Real-time PCR技术分析表明,PGK是一个重要的体内诱导抗原;并且可诱导高水平的Th1和Th2型免疫应答,揭示PGK在SEZ治病过程中起到重要作用,为新型疫苗的研制奠定了基础。     

布鲁氏菌DnaJ蛋白的表达及功能分析

本试验旨在运用分子生物学与生物信息学方法对布鲁氏菌DnaJ蛋白进行分析;将该蛋白进行原核表达,并检验纯化蛋白在体外或体内诱导Th1和Th2型免疫反应的能力。以布鲁氏菌M5-90为模板成功扩增目的基因DnaJ,构建重组表达载体pET-30a-DnaJ;利用SDS-PAGE检测DnaJ重组蛋白在大肠杆菌中的表达,并对其进行纯化;用DnaJ蛋白刺激RAW 264.7细胞和小鼠脾细胞,并用DnaJ蛋白免疫小鼠;利用ELISA试剂盒检测细胞因子IFN-γ、IL-4及小鼠血清中IgG1和IgG2a抗体水平的变化。结果显示,DnaJ蛋白二级结构以无规则卷曲结构为主,该蛋白有11个抗原决定簇;SDS-PAGE结果显示,重组菌在37.7 kDa大小的位置有特异表达条带,获得了DnaJ纯化蛋白;DnaJ蛋白可诱导宿主细胞和小鼠产生高水平IFN-γ、IL-4、IgG1和IgG2a抗体。鉴于DnaJ蛋白可在体外或体内诱导Th1和Th2型免疫反应,有望成为布鲁氏菌病的候选亚单位疫苗。     

缺硒地区雏鸡补硒后组织器官硒含量及分布

众所周知,硒是人和动物不可缺少的营养元素,在动物体内除具有保护细胞及亚细胞免受过氧化物损害的作用外,还对免疫功能有明显的影响。目前,硒的生物学作用研究已取得许多成绩,得到许多人的重视。但在地区性硒水平不同的情况下,组织器官内硒的含量、分布以及它们之间的关系,国内报道尚不多见,为此,将我们在这方面研究的初步结果报告如下: