库尔勒香梨叶片不定芽再生诱导的研究

以库尔勒香梨幼叶为外植体,研究基本培养基种类、外源激素浓度、AgNO3浓度及接种叶片的放置方向对叶片不定芽再生的影响。结果表明:培养基的种类是影响叶片能否获得再生不定梢成功的关键,NN69培养基是香梨叶片再生不定芽的最佳培养基,诱导不定芽的分化以培养基NN69+TDZ 1.0mg/L+IBA 0.3mg/L为最佳;附加0.5mg/L AgNO3有利于叶片再生;以叶片远轴面接触培养基比近轴面接触培养基更利于不定芽的再生;结合21d暗培养香梨叶片再生频率最高可达到64.3%,再生芽数最高为2.59。     

梨叶片离体培养和植株再生

 用梨(Pyrus) 4 个栽培品种的叶片诱导不定芽。暗培养20 d , 取试管苗顶部幼嫩叶片, 远轴面向下接触培养基, 叶片再生效率高。八月红品种的叶片再生效率高于其它3 个品种。在NN69 + TDZ 1. 0 mg/L + IBA 0. 5 mg/L 培养基上, 八月红梨叶片再生频率为100 % , 平均再生芽数为5. 78 。八月红梨和水晶梨叶片再生苗在附加IBA 的1/ 2MS 培养基上生根。     

'砀山酥'梨叶片再生体系的建立

以‘砀山酥’梨(Pyrus bretschneidericv.Dangshansu)叶片为材料,研究基本培养基种类、植物生长调节物质浓度、抗氧化剂、碳源对再生的影响,以及不同浓度生长激素对再生芽生根的影响。结果表明:NN69培养基是叶片再生不定芽的最佳培养基,诱导不定芽的分化以培养基NN69+6-BA 3.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L+琼脂6 g/L为佳;AgNO3比活性炭和PVP更利于叶片的诱导;与蔗糖相比山梨醇更适宜作为叶片再生的碳源,最佳浓度是10 mg/L,叶片再生频率最高为74.03%,平均再生芽数1.01。生根培养基以ASH+IBA 10 mg/L+间苯三酚80 mg/L+蔗糖15 g/L+琼脂6 g/L为佳,生根率高且根粗壮。     

鸭梨叶片不定芽再生体系的建立

为建立鸭梨(Pyrus bretschneideri Rehd.cv.Yali)叶片不定芽再生体系,采用正交试验设计研究了不同培养基、植物激素和植物生长调节剂的种类及其浓度、蔗糖含量对鸭梨叶片不定芽再生的影响。结果表明,基本培养基是影响叶片不定芽的诱导、继代和生根的关键因素,分别以NN69、MS和1/2MS为宜;IBA是影响叶片不定芽增殖的重要因素;最适诱导培养基为NN69+BA3.0mg·L-1+IAA0.5mg·L-1,再生频率和再生芽数分别为80.00%和1.77;最适增殖培养基为MS+BA1.0mg·L-1+IBA0.5mg·L-1,增殖系数可达2.23;最适继代培养基为MS+BA1.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1,平均苗高4.98cm;最适生根培养基为1/2MS+蔗糖30g·L-1+IBA0.5mg·L-1,生根率和平均根数分别为50.00%和2.04。该再生体系可为鸭梨遗传转化提供有效的受体系统。     

‘苹果梨’离体叶片再生体系的建立

【目的】为了给梨转基因研究提供稳定、高效的离体再生体系,【方法】以‘苹果梨’为试材,NN69作为基本培养基,研究了植物生长调节剂种类、暗培养时间及外植体类型等因素对其再生体系建立的影响,筛选出较适合‘苹果梨’不定芽分化的培养条件。【结果】结果表明,较适合‘苹果梨’分化的外植体为继代4次以上(含4次)的组培苗叶片,适宜分化的培养基为NN69+1.5 mg.L-1TDZ+0.4 mg.L-1NAA,结合20 d的暗培养,再生频率达到71.00%,平均再生芽数为2.21。【结论】影响‘苹果梨’离体叶片再生的最关键因素是外植体的继代次数。     

满园香梨叶片不定芽的诱导

采用正交试验设计研究了不同基本培养基、TDZ、生长素种类及其浓度4个因素组合对满园香梨(Pyrusus鄄suriensisMaxim.cv.Manyuanxiang)离体叶片不定芽再生的影响。结果表明,基本培养基的种类是影响叶片不定芽再生最重要的因素,其次是生长素的种类。通过叶片不定芽再生频率和平均每叶再生不定芽数分析表明,NN69+TDZ3.0mg/L+IAA0.2mg/L为满园香梨叶片不定芽发生的最佳培养基组合,在该培养基组合上,满园香梨叶片再生率和平均再生芽数分别达到了74.8%和4.40。同一叶片的基部和顶端比中部更有利于不定芽的再生。     

秋子梨叶片高效再生体系的构建

以秋子梨(Pyrus ussuriensis M.)叶片为外植体,NN69为基本培养基,研究了秋子梨组织培养高效再生体系。结果表明:噻隆(TDZ)对秋子梨叶片不定芽的诱导效果显著高于6-苄基腺嘌呤(6-BA)和激动素(KT),吲哚丁酸(IBA)和吲哚乙酸(IAA)的诱导效果显著高于萘乙酸(NAA)和2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)。其中,适合秋子梨叶片不定芽再生的最佳培养基为NN69+TDZ 3.0mg/L+IBA 0.3mg/L,再生率和再生芽数分别为100.0%和8.47个;适合秋子梨不定根诱导的最佳培养基为1/2MS+IBA 0.5mg/L,生根率为45.5%,生根条数为2.24条。     

‘红地球’葡萄叶片、叶柄不定芽再生体系的建立

 探讨了多种因素对红地球葡萄试管苗叶片、叶柄不定芽再生的影响, 叶片再生与生长调节物质种类和浓度、叶片着生部位等因子有关, 叶片不定芽再生的最佳培养基为NN69+ BA 2. 0 ~ 2. 5 mg/L+ IBA 0. 2 mg/L, 不定芽再生率以顶端第1 片幼叶最高。     

不同基因型梨叶片离体培养和植株再生

 以‘巴梨’、‘身不知’和‘早酥’梨试管苗叶片为外植体, 对不定芽进行了诱导、增殖和生根。重点探讨了基本培养基、植物生长调节剂配比、AgNO₃ 不同浓度和NH4⁺-N与NO3^--N比例对不定芽再生的影响。结果表明, MS + TDZ 0.5 mg/L + IBA 0.1 mg/L为‘巴梨’叶片不定芽发生的最佳培养基。在QL + TDZ 1.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L培养基上, 暗培养3周后转光下培养, ‘身不知’和‘早酥’分别获得89.6%、81.2%的不定芽再生率和3.45、3.73的平均再生芽数; 对‘巴梨’和‘早酥’不定芽再生有效促进的AgNO₃ 浓度范围为0.1～0.5 mg/L, 0.1～4.0 mg/L的AgNO₃、1∶2～7的NH₄⁺-N∶NO ₃^--N和21.50mmol/L的K+对‘身不知’叶片再生均有促进作用, 缺乏NH₄⁺-N不利于不定芽的再生; 转移到MS+BA1.0 mg/L + IBA 0.1 mg/L培养基上能快速增殖; 在MS、1 /4MS + IBA 1.0～2.5 mg/L +蔗糖5～15 g/L +活性炭0.5～1.0 g/L上获得了不同程度的生根苗。     

新疆野生樱桃李(Prunus cerasifera)茎段与叶片培养及其植株再生

以新疆野生樱桃李为材料,研究了基本培养基、植物生长调节剂种类、浓度及配比、蔗糖浓度等多种因素对茎段腋芽萌发与生长、增殖以及叶片不定芽再生的影响,建立了其叶片再生体系。结果表明,1)植物生长调节剂组合IAA0.4mg/L+6-BA0.8mg/L较适合于樱桃李茎段腋芽的萌发与生长培养;2)正交试验筛选出不定芽的最佳增殖培养基为3/4MS+IAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L+蔗糖30g/L;3)ZT诱导不定芽再生的效果好于6-BA,ZT1.5mg/L+IBA0.05mg/L为诱导不定芽再生的最适植物生长调节剂组合;4)暗培养为叶片不定芽再生的必要条件,在最适不定芽再生的培养基上,暗培养14d的不定芽再生效果最好;5)樱桃李不定梢的最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.4mg/L。     

甜樱桃砧木离体叶片愈伤组织诱导及不定芽再生

叶片再生效率的高低直接影响目的基因转化的成功率,为建立稳定、高效的樱桃不定芽离体再生体系,以30～40d苗龄的甜樱桃砧木ZY-1的组培继代苗为试材,取上部幼嫩叶片或不含腋芽的茎段,分别从培养基生长调节剂配比、接种材料类型、叶片接种部位、接种方式以及培养条件等方面进行了不定芽再生技术研究。结果表明,培养基中添加7.0mg/L的6-BA与0.5～1.0mg/L的IBA配比时不定芽再生率和出芽数均较高,TDZ和NAA不适于诱导ZY-1叶片再生不定芽;接种继代苗茎段比叶片再生率高;接种叶片以选择嫩叶横切2刀、远轴面向下接触培养基的方式为好;叶片不同部位处理以带叶柄的基部叶块最易再生;叶片接种后在25℃室温条件下,先暗培养3周再照光,利于不定芽的再生。     

金花梨叶片不定梢诱导研究

以金花梨（Ｐｙｒｕｓ ｐｙｒｉｆｏｌｉａ Ｎａｋ．ｃｖ．Ｊｉｎｇｕａ）试管苗叶片为试材获得了再生不定梢。在培养基ＮＮ６９＋ＢＡ３ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．３ｍｇ／Ｌ＋蔗糖３％上，先暗培养３周后转光下培养，不定梢再生率最高，达１００％。     

寒富苹果叶片离体再生及四倍体诱导

为建立寒富苹果高效的离体再生体系和多倍体诱导体系,以试管苗叶片为外植体,研究了培养基中激素对寒富叶片再生芽的影响及适宜的四倍体诱导方法。结果表明,当培养基中BA质量浓度为0.5mg/L时,再生频率最高达35.7%;当培养基中BA质量浓度为2.5mg/L时,再生频率超过90%,平均再生芽数在4以上。在培养基中附加1.0mg/LTDZ,再生频率达100%,平均再生芽数达19.47。以附加15、30、60、120mg/L秋水仙素的液体再生培养基处理叶片5d,各个质量浓度处理均诱导出四倍体植株,诱变率在5.3%～22.2%之间;寒富苹果叶片在附加50mg/L秋水仙素固体再生培养基上处理5d亦获得了四倍体植株。研究结果表明寒富苹果叶片具有极强的不定芽再生能力,叶片再生过程中进行秋水仙素处理是获得其四倍体的一个有效途径。     

西洋梨叶片直接再生体细胞胚

 西洋梨‘红安久’和‘绿安久’两个品种的无菌苗幼叶为试材, 研究了不同培养基对叶片分化不定梢及体细胞胚的影响。结果表明: 基本培养基的组成是影响叶片分化为不定梢还是体细胞胚的关键因素, 植物生长物质的种类和水平是影响体细胞胚再生率高低的重要因素。诱导培养基NN69 附加TDZ 2 mg/L 及NAA 0. 1 mg/L , 体细胞胚再生率最高, 绿安久达55. 5 % , 红安久为47. 3 %。NN69 附加BA5 mg/L 及NAA 0. 1 mg/L , 不定梢再生率最高, 绿安久达100 % , 红安久为85. 7 %。     

勋章菊组培快繁技术研究

以勋章菊无菌苗叶片为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度TDZ、2,4-D、IAA、IBA,研究不同浓度激素及组合对丛生芽诱导、试管苗生根的影响,并进行试管苗练苗和移栽.结果表明:最佳丛生芽诱导培养基为MS+TDZ 0.8mg/L+IBA(0.1～0.5)mg/L,诱导率达到90.0％以上.最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg/L+IBA 0.5 mg/L,生根率达到100.0％.勋章菊的叶片是外植体的较好选择,在短期内能获得大量组培苗,移栽成活率也达到95％以上.     

‘艾西丝’南瓜子叶的离体培养

用‘艾西丝’南瓜子叶作外植体离体培养，成功地建立了一套子叶高频率诱导再生芽的程序。在ＭＳ＋ＢＡ ４．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．４ｍｇ／Ｌ的培养基上，以４ｄ苗龄子叶基部切块为外植体，其不定芽的诱导率最高，达５０％，在ＭＳ＋ＢＡ０．２５－０．５ｍｇ／Ｌ的培养基上继代，增殖培养效果较好，在无激素的１／２ＭＳ培养基上最易生根。