金太阳杏花粉超低温保存方法研究

为探讨杏花粉种质保存的方法,进而为花粉培养、遗传转化和杂交育种提供材料,以杏品种金太阳的新鲜成熟花粉为试材,采用干燥法和玻璃化法2种超低温保存技术,对花粉干燥时间、解冻方式和贮藏时间等影响保存后花粉萌发率的有关因素进行研究。结果表明,干燥时间对金太阳杏花粉超低温保存后的萌发率有显著影响,其中干燥法宜在4℃下硅胶干燥8h、玻璃化法宜在(20±1)℃下以玻璃化液PVS2(体积分数15%二甲基亚枫+15%乙二醇+30%甘油+0.4mol/L蔗糖)处理60min;干燥法保存后分别以4℃2h、20℃30min和40℃70s等3种方式化冻,花粉萌发率无明显差别,而对玻璃化法则以40℃70s化冻后的花粉萌发率最高;以2种方法分别保存1、10、30、60d后花粉萌发率无显著变化。     

魔芋花粉的低温和超低温保存

利用干燥法和玻璃化法，魔芋花粉能够在4℃下保存1个月，－20℃下保存6个月；魔芋花粉经液氮超低温（－196℃）保存后，有明显的“冷刺激”现象，即保存花粉比新鲜花粉有更高的离体萌发率。     

二球悬铃木花粉萌发及花粉保存研究

以新鲜采集的二球悬铃木花粉为试材,研究了不同浓度的蔗糖及硼酸对花粉萌发的影响,并在此基础上研究了不同贮藏温度对干燥与未干燥的二球悬铃木花粉生活力的影响。结果表明:在15%蔗糖+0.10%硼酸的液体培养基上花粉萌发最好;不同贮藏温度对花粉的生活力影响显著,随着贮藏温度的降低,花粉生活力上升,且贮藏时间延长,常温条件下贮藏10d后花粉生活力为0%,而在-72℃条件下贮藏38d,干燥花粉仍有24.65%生活力;花粉经硅胶干燥4h后耐贮性明显高于新鲜花粉。综合分析,经硅胶干燥后于-72℃条件下贮藏利于二球悬铃木花粉的保存。     

马铃薯花粉的超低温保存研究

 ：对影响马铃薯花粉超低温保存效果的因素进行了研究。结果表明：冷冻前干燥处理18 h的花粉．保存后其生活力优于干燥处理12 h和24 h的花粉;用0~C (12 h)一一10~C (12 h)一一20~C (12 h)的逐步降温预冻处理,可大幅度提高在液氮中冰冻保存花粉的活力;保存后的花粉用一20~C (12 h)一4~C(12 h)一25℃ (12 h)逐步解冻效果最好,35～4J0℃直接解冻效果优于(25±2)℃直接解冻;超低温保存对花粉萌发表现出某些促进作用。     

番木瓜茎尖的玻璃化法超低温保存及其植株再生

 研究了番木瓜( Carica papaya L. ) 茎尖玻璃化法超低温保存的一些影响因素。结果表明: 无菌试管苗在MS + BA 0.5 mg/L + NAA 0.1 mg/L + GA₃ 1.0 mg/L 的培养基上生长较好。番木瓜茎尖超低温保存较佳体系是: 3～5 cm的茎尖在含有5 %二甲基亚砜(DMSO) 培养基上预培养3 d , 解剖镜下剥取含1～2 个叶原基的茎尖(1.5～2.5 mm长) , 先在室温下于60 %的玻璃化溶液(PVS2) 中装载40～50 min , 再用PVS2于0 ℃下处理30 min , 换1 次PVS2 溶液后迅速投入液氮。保存24 h 后, 在40 ℃水浴中化冻, 用1.2 mol/L 的蔗糖培养液洗涤两次, 转入继代培养基上再培养, 成活率和再生率分别达53.7 %和52.6 %。再生植株生根后可移栽成活。     

杏树花粉保存研究初报

供试品种为12年生梅杏花粉,经五个处理保存后观察,其效果差异很大。①在室温自然条件下,萌发率随保存天数的增加下降很快,保存4天后萌发率下降至原来的22.8%,6天后仅为原来的16.8%,总的寿命不足10天,③室温下干燥保存与自然条件下相似,萌发率下降也很快,6天后萌发率下降至原来的17.10%,10天后完全不能萌发。说明仅靠干燥处理并不能延长杏花粉的寿命。③在7℃下干燥保存的花粉寿命保持时间较长,萌发率下降比室温保存下降的慢,15天后萌发率为原来的30.4%,35天后仍能保持原来花粉萌发率的22.6%。④在7℃下干燥保存1天后置-20℃低温下冷冻保存,3…     

百合花粉超低温保存方法研究

以“索邦”和“西伯利亚”百合为试材,研究了不同干燥时间和不同预处理温度及不同化冻方式对花粉超低温保存后百合花粉萌发率的影响.结果表明:不同干燥时间和不同预处理温度对超低温保存后花粉的萌发率有显著影响.与对照相比,2h干燥预处理(即花粉的含水量分别为7.67％和7.27％)后百合花粉的萌发率显著高于1、3、4h处理的;-20℃低温预冻处理后百合花粉的萌发率显著高于CK(室温)、0℃、-70℃处理的;超低温保存后40℃水浴化冻效果最佳.     

苦瓜辐射花粉短期保存方法的初步研究

对4个苦瓜品种开花前1d的雄花进行了9种不同方式的短期保存,以探讨苦瓜辐射花粉短期保存方法。研究结果表明,高温、潮湿有利于花粉的散粉,低温、干燥不利花粉的散粉;在15℃,相对湿度43％条件下保存1d的花粉萌发率较高;而保存2～3d的花粉则以4℃,相对湿度为28％的条件为宜。苦瓜未经辐射处理及辐射后花粉的短期保存条件相同。     

扁桃小滴玻璃化超低温保存研究

【目的】以扁桃休眠茎尖为试材,探讨小滴玻璃化法对扁桃离体超低温保存的影响,为扁桃种质资源的长期保存提供有效途径。【方法】采用小滴玻璃化法,通过正交设计试验和单因素试验对预培养蔗糖浓度、预培养时间、装载时间和PVS2[30%(ω,后同)甘油+15%二甲基亚砜+15%乙二醇+0.4 mol·L~(-1)蔗糖]脱水处理时间这4个因素影响扁桃休眠茎尖超低温保存后成活率的情况进行分析。【结果】预培养时间对休眠茎尖超低温保存后成活率的影响极显著(P<0.01),而预培养蔗糖浓度、装载时间和PVS2处理时间的影响不显著。建立了以‘莎车14号’为代表的扁桃茎尖小滴玻璃化法超低温保存体系,最佳处理方案是:用0.5 mol·L~(-1)预培养蔗糖液处理2 d,装载液处理20 min,PVS2脱水处理120min,放入含新鲜PVS2小滴的铝箔纸上投入液氮24 h后,浸入用40℃温水预热过的洗涤液(1.2 mol·L~(-1)蔗糖的MS)中30 s,然后再将休眠茎尖转入新鲜的洗涤液中洗涤30 min。恢复后接种在MS+0.3 mg·L~(-1)6-BA+0.5 mg·L~(-1)IAA+0.3 mg·L~(-1)GA3培养基上,扁桃成活率达80.44%。运用优化的方案对‘莎车1号’‘莎车11号’和‘莎车18号’3个扁桃品种进行超低温保存,平均成活率分别为87.41%、85.44%和83.02%。【结论】利用小滴玻璃化法可提高扁桃超低温保存成活率,建立了适合扁桃休眠芽超低温保存技术方法,为扁桃种质资源的长期保存提供理论和实践借鉴。     

不同条件下牡丹花粉的贮藏寿命

以2个牡丹品种“凤丹白”和“鲁荷红”为试材,以花粉萌发率和授粉结实率为依据,研究了室温(25℃)、4、-20、-86℃条件下的牡丹花粉贮藏寿命,以建立花粉贮藏技术.结果表明:牡丹花粉室温下保存7d、4℃下保存90 d、-20℃下保存180 d仍有很高的萌发率,-86℃下贮藏la,花粉萌发率没有明显下降、授粉结实率高.室温干燥24 h花粉贮藏后萌发率显著高于未干燥花粉.温度和含水量是影响牡丹花粉贮藏寿命的重要因素.自来水冲洗解冻效果最好.4℃和-86℃贮藏是解决牡丹育种花期不遏的有效措施.     

广金钱草花粉活力测定及贮藏方法

以广金钱草花粉为试验材料,用染色法和离体培养法研究广金钱草花粉活力最佳测定方法,并探讨花粉贮藏的适应条件。结果表明:醋酸洋红染色法能快速检测广金钱草花粉活力,但活力较离体培养法低19.07%。广金钱草花粉在15%蔗糖+0.01%H3BO3+0.09%Ca(NO3)2·4H2O+0.01%Mg SO4·7H2O的液体培养基上培养2 h萌发率最高(96.16%),花粉管长度达到541.72μm。花粉贮藏72~168 h,4℃干燥处理明显高于其它贮藏条件下的花粉活力。试验表明,离体培养法最适合广金钱草花粉活力测定,4℃干燥贮藏条件下有利于花粉活力保持。     

玻璃化法超低温保存猕猴桃离体茎尖及其植株再生

 以中华猕猴桃矮型种质为离体培养材料, 建立试管无性系, 对其离体茎尖的玻璃化法超低温保存技术进行研究, 探讨猕猴桃种质长期保存的适宜途径。结果表明, 含1～2个叶原基(1.5～2.5 mm) 的茎尖, 在5%二甲基亚砜(DMSO) + 5%蔗糖+MS培养基上预培养4 d后, 于室温下用2 mol/L甘油+ 0.4 mol/L蔗糖预处理30 min, 再在0℃下用玻璃化液(PVS2 ) 脱水处理40 min并迅速投入液氮中, 保存24 h后接种至继代培养基上再培养, 成活率和再生率分别为56.7%和51.6%。再生植株生根后可移栽成活。     

草莓新品种宁玉的花粉特性研究

为探明草莓新品种宁玉的花粉特性,以宁玉、红颜2个品种为试材,研究不同花期的花粉生活力与不同培养基成分、不同温度、不同光质对花粉生活力的影响。结果表明:2个品种在刚开花期的花粉生活力均达到最高,其中宁玉显著高于红颜,花粉萌发率分别为91.11%、72.94%;宁玉每枚花药中花粉数量显著高于红颜,畸形花粉率显著低于红颜;10%¹5%蔗糖+0.10%硼酸为2个品种的最适花粉培养基;温度为25℃时2个品种花粉萌发率均达到最高;在5℃下处理8 h后宁玉花粉萌发率48.53%,而红颜仅28.08%;在45℃下处理8 h后宁玉花粉仍有少量萌发,而红颜未萌发;不同光质对2个品种的花粉生活力影响不显著。由此可见,宁玉花粉生活力高于红颜,具有更好的耐低温、耐高温性,推广价值更高。     

白芨花粉活力测定与花粉保存

测定了白芨花粉及其在不同贮藏温度和湿度条件下的活力。结果表明:0.5%TTC染色法检测白芨花粉活力效果最佳;10%蔗糖+0.01%硼酸组成的液体培养基上培养得到的白芨花粉的萌发率最高;一般情况下,温度越低,花粉贮藏寿命越长,温度高增强了花粉呼吸强度,易导致花粉营养枯竭,在一定范围内,相对湿度与花粉贮藏寿命呈负相关性;温度为-20℃,湿度为60%～70%的贮藏条件下的白芨花粉的萌发率最高。     

地被菊花粉活力和储藏性研究

 以地被菊（groundcover chrysanthemum）品种‘毛白玉’、‘粉芙蓉’的新鲜花粉为材料,采用离体萌发法对花粉活力进行测定,并观察花粉萌发及花粉管生长情况。试验结果表明：外源Ca²⁺显著促进了花粉萌发和花粉管生长,硼酸对花粉萌发没有显著影响;花序中部筒状花的花粉活力显著高于花序外部和内部筒状花的花粉;遮荫降低了花粉活力;‘毛白玉’和‘粉芙蓉’花粉在室温下可分别储藏8和6 d,4 ℃下可分别储藏25 d和20 d,–20 ℃下可储藏25 d,–80 ℃下可分别储藏21和18 d。–80 ℃储藏前干燥处理2 h的花粉,储藏后花粉活力显著高于干燥处理4 h和6 h的花粉。预冻处理显著降低了花粉活力。–80 ℃储藏的花粉采用35 ℃解冻2 min或冰上解冻效果较好。     

不同干燥法与贮藏温度对玉兰花粉萌发的影响

以5～7a生玉兰为试材,研究了日晒干燥法、阴干干燥法、灯照干燥法、恒温干燥法4种干燥方法和室温、4、0、-20、-40、-80℃6个贮藏温度对玉兰花粉萌发的影响。结果表明:玉兰花粉采用阴干干燥法干燥优于日晒、灯照和恒温干燥法。阴干后的花粉分别在室温、4、0、-20、-40、-80℃贮藏10、20、30和40d,玉兰花粉的离体萌发率均降低。室温下,玉兰花粉的萌发率随贮藏时间的增加降低得最快,贮藏前(0d)玉兰花粉的萌发率为73.3%,至40d萌发率已降为0%。4和0℃条件下,花粉萌发率的降低速度相近。-40和-80℃花粉的贮藏效果最好,保存至40d时,花粉萌发率仍然在50%以上。     

杜鹃红山茶花粉活力测定方法的比较研究

以4年生嫁接的杜鹃红山茶花粉为试材,采用MTT法、TTC法和离体萌发法,研究了不同测定方法对杜鹃红山茶花粉活力的影响。结果表明:不同测定方法对杜鹃红山茶花粉活力测定结果影响较大,其中,离体萌发法是杜鹃红山茶花粉活力的最佳检测方法,30℃条件下花粉萌花最适培养基为2.5%琼脂+100g/L蔗糖+10mg/L硼酸,适宜统计的培养时间为4h,花粉萌发率达58.10%,Ca2+对花粉萌发起抑制作用;MTT染色得出92.5%的杜鹃红山茶花粉具有活力,明显高于离体萌发法,而TTC法由于染色不清晰,不适合用于杜鹃红山茶花粉活力检测。     

马铃薯(Solanum tuberosum L.)茎尖超低温保存的研究

以克新8号为试验材料,通过优化超低温保存马铃薯茎尖中影响成活及再生的几个关键因素,成功建立了基于玻璃化法的马铃薯茎尖超低温保存体系。茎尖在MS+0.3M蔗糖的培养基上预培养1天后,经2M甘油+0.4M蔗糖的加载液室温加载30 min,浸入到PVS2溶液中(00C)处理60 min,将处理后的茎尖转至含有0.05 mg/L GA3的MS后培养基上培养,成活率和再生率达到94.8%和78.1%。并将建立的玻璃化法应用到其它4个品种,平均再生率为65.5%,研究结果可为中国马铃薯种质资源的超低温保存提供技术支持。     

马铃薯脱外壁花粉的制备与人工萌发

 将3个马铃薯普通栽培种( Solanum tuberosum L. ) ‘陇薯3号’、‘Favorita’和‘Shapody’的花粉先经低温饥饿处理, 再低温水合、高温热激和渗激, 分离出大量具有活力的脱外壁花粉, 花粉最高脱壁率达34.5%。脱外壁花粉在K₃ 培养基+ 15% PEG + 5%蔗糖+ 0.01% H₃BO₃ + 0.01% LH + 100mg/L PVP的萌发液中萌发率高达38.3%。试验建立了三步冲击法制备马铃薯脱外壁花粉的方法, 并讨论了外壁在花粉萌发与受粉中的生物学意义。     

贮藏温度和湿度对丰水梨花粉生活力的影响

研究贮藏温度和湿度对丰水梨花粉萌发率和花粉管生长的影响。结果表明,在室温下贮藏15天,花粉生活力迅速下降;在4℃贮藏90天,花粉生活力下降缓慢,萌发率降为33·4%;在-20、-73、-196℃贮藏540天,花粉生活力下降极慢,其中-196℃处理,贮藏花粉萌发率为68·37%,-73℃处理,花粉萌发率为62·86%,-20℃处理,花粉萌发率为42·15%。