猪伪狂犬病病毒LA株的分离鉴定

从辽宁省某猪场大批死亡的新生仔猪脑及内脏中分离到多株病毒，通过初步验证后选择其中一代表毒株进行了鉴定。该病毒株在PK-15细胞上连续传12代均出现典型的细胞病变，用适应PK-15细胞的病毒接种Veto细胞、猪肾传代细胞IBRS-2及SPF鸡胚成纤维细胞均出现典型的细胞病变。在电镜下可见到典型的伪狂犬病病毒粒子。该病毒对氯仿、乙醚敏感，在pH5．0-9．0下稳定，56℃30分钟即可灭活该病毒。该病毒能被伪狂犬病病毒标准阳性．血清中和。取处理后的病料上清液和传代病毒接种家兔均出现典型的伪狂犬病症状。用所分离病毒提取的DNA及培养病毒液经简单的预处理后作为模板，应用特异性引物进行PCR能扩增出伪狂犬病病毒1240bp的gD基因的特异性片段。结果表明，所分离病毒为伪狂犬病病毒，并将该毒株命名为猪伪狂犬病病毒IA株。     

猪伪狂犬病病毒鄂A株的分离鉴定

从湖北省某些猪场大批死亡的新生仔猪的脑及内脏中分离到的多株病毒,并用其中一代表毒株进行了全面鉴定。该病毒株在仓鼠肾传代细胞上连传１５代均出现典型细胞病变,用适应ＢＨＫ－２１细胞的病毒接种鸡胚成纤维细胞,Ｈｅｌａ细胞,Ｖｅｒｏ细胞,犊牛睾丸原代细胞,猪肾传代细胞ＩＢＲＳ－２均出现典型细胞病变,在电镜下可见到典型的伪狂犬病毒病粒子,病毒对５－碘脱氧尿核苷,氯仿,胰蛋白酶,乙醚敏感,在ｐＨ５．０～９．０     

猪伪狂犬病病毒JL株的分离与鉴定

猪伪狂犬病病毒ＪＬ株的分离与鉴定娄高明韩文瑜张玉静赵建军邹啸环（中国人民解放军农牧大学长春１３００６２）伪狂犬病（ＰＲ）是由疱疹病毒科α疱诊病毒亚科猪疱疹病毒Ｉ型引起的一种以发热、脑脊髓炎为主要症状的急性传染病［１］。猪是本病的主要宿主和带毒者。本病...     

猪伪狂犬病病毒NP株的分离鉴定

2013年下半年,福建某免疫接种过猪伪狂犬病疫苗(Bartha)的规模化猪场大批妊娠母猪发生流产、新生仔猪发生共济失调的神经症状,疑似为猪伪狂犬病病毒感染发病症状,为确定发病原因,从该猪场疑似伪狂犬病病毒感染的仔猪脑、肝脏和肺脏中分离到一株未知病毒,PCR检测及测序比对鉴定为猪伪狂犬病病毒,并将分离的病毒命名为NP株。用Reed-Muench法测定分离株病毒的组织细胞半数感染量(TCID50)为10-9.13/0.1mL,动物攻毒试验出现猪伪狂犬病病毒感染的典型症状。试验结果表明,成功分离到一株猪伪狂犬病病毒毒株,为研究福建省猪群伪狂犬病病毒分子流行病学奠定基础。     

猪伪狂犬病病毒LA株的分离鉴定

从辽宁省某猪场大批死亡的新生仔猪脑及内脏中分离到多株病毒 ,通过初步验证后选择其中一代表毒株进行了鉴定。该病毒株在PK -1 5细胞上连续传 1 2代均出现典型的细胞病变 ,用适应PK -1 5细胞的病毒接种Vero细胞、猪肾传代细胞IBRS -2及SPF鸡胚成纤维细胞均出现典型的细胞病变。在电镜下可见到典型的伪狂犬病病毒粒子。该病毒对氯仿、乙醚敏感 ,在pH5 0～ 9 0下稳定 ,5 6℃ 3 0分钟即可灭活该病毒。该病毒能被伪狂犬病病毒标准阳性血清中和。取处理后的病料上清液和传代病毒接种家兔均出现典型的伪狂犬病症状。用所分离病毒提取的DNA及培养病毒液经简单的预处理后作为模板 ,应用特异性引物进行PCR能扩增出伪狂犬病病毒 1 2 40bp的gD基因的特异性片段。结果表明 ,所分离病毒为伪狂犬病病毒 ,并将该毒株命名为猪伪狂犬病病毒LA株。     

猪伪狂犬病病毒HDDJ株的分离鉴定

广东省某猪场常规免疫猪伪狂犬病疫苗(Bartha-K61株)的母猪流产,疑似为猪伪狂犬病病毒感染。为确定发病原因,将流产胎儿的脑、淋巴结、肺脏研磨混合液接种Vero细胞,形成稳定细胞病变(CPE),并测定其细胞半数感染量(TCID50),通过PCR鉴定、测序比对、进化树分析,确定感染病毒及基因型,动物回归实验判定病毒致病性。结果表明,分离毒株为PRV中国变异株,命名为HDDJ株,与猪伪狂犬病疫苗Bartha-K61株亲缘关系较远。     

二起猪伪狂犬病的诊断及病毒分离

近年来,江西省部分猪场陆续发生猪伪狂犬病,造成较大的经济损失,已成为我省养猪业的主要传染病之一。1998年3～11月间,南昌市郊区两个养猪场分别发生疫病,经病毒分离及初步鉴定,确诊为伪狂犬病,但这二起猪伪狂犬病的流行病学、临诊症状及病理变化却差异甚大。报告如下。1　发病情况及临诊症状　A猪场有存栏母猪500余头,未进行伪狂犬病疫苗免疫。1998年3月25日,9窝1～7日龄仔猪突然发病,主要表现为高热(达41℃以上),步态不稳,随后疫情范围不断扩大,3月25日至4月29日,该场共产仔50余窝,因本病死亡的初生仔猪达200余头,且50日龄以内的仔猪也零…     

猪伪狂犬病病毒和鹦鹉热衣原体分离与鉴定

本文报道重庆某集约化种猪场爆发流产、死产胎儿中伪狂犬病毒（RB9901）和鹦鹉热衣原体（CR99株）分离鉴定结果,伪狂犬病病毒RB9901株能引起MDBK细胞典型细胞病变,被伪狂犬病病毒Fa株标准阳性血清中和,能引起家兔奇痒及死亡。鹦鹉热衣原体CR99株在鸡胚卵黄囊中生长良好,对青霉素敏感,对磺胺嘧啶不敏感,能引起妊娠豚鼠注产。     

一例牛急性感染伪狂犬病病毒的分离鉴定

山东东营地区某牛场发生以流涎、眼睑肿大、表现为神经症状为主的疾病,通过采集病牛鼻腔试子,提取病毒基因组DNA,感作乳仓鼠肾(BHK-21)细胞,经细胞传代培养出现明显特征病变。以伪狂犬病病毒(PRV)高度保守的gB基因扩增引物进行PCR扩增,获得特异性的DNA片段,连接PMD18-T载体,测序鉴定与PRV SC株同源性高达99%以上。确诊为牛感染伪狂犬病病毒。     

猪渗出性皮炎病原的分离鉴定

从疑似渗出性皮炎的哺乳仔猪体内分离到一株细菌,经革兰染色镜检以及TH-16S细菌生化鉴定系统和葡萄球菌16S rRNA、gap基因通用引物鉴定.结果表明,该菌株为葡萄球菌,gap基因的核苷酸同源性为99%.动物试验发现,试验小鼠出现躁动、被毛竖立、精神沉郁,18 h死亡,说明该菌株对小鼠具有致病力.     

广西陆川某猪场猪伪狂犬病病毒的分离鉴定及gE基因的分析

为了确诊猪伪狂犬病病毒(PRV)的感染,探讨目前广西猪群中流行的PRVgE基因的变异特征,为更好地防控猪伪狂犬病(PR)提供参考依据,本研究采集了广西陆川某猪场保育猪群发生呼吸道症状的肺脏组织,并用Vero细胞进行病毒分离,应用PCR方法对分离株的gE基因进行克隆和测序,根据测序结果证实分离到1个PRV毒株,命名为GXLC1。分离株在Vero细胞上增殖,细胞出现典型的病变;GXLC1株gE基因与GenBank上20株国内外具有代表性参考毒株的核苷酸序列同源性为97.1%~99.4%,氨基酸同源性为94.3%~99.6%;gE基因的遗传进化分析显示,GXLC1株与2012年的国内流行毒株亲缘关系较近,与欧美分离株亲缘关系较远;氨基酸序列分析显示,GXLC1株gE蛋白主要抗原表位区较之国内经典强毒株有3个氨基酸位点的变异,可能导致gE抗原性发生改变。本研究将分离到的1个PRV毒株进行了gE基因的分析,发现GXLC1株为近年来流行的变异株,gE蛋白在抗原表位区上有3个氨基酸位点的变异,这是否会影响GXLC1株毒力和抗原性的变化,还有待进一步研究;对gE基因变异特征的分析和病毒的分离为进一步丰富广西PRV的分子流行病学和疫苗的研制提供参考依据和重要材料。     

一起猪水肿病病原分离鉴定及药敏试验

为查明猪群的发病原因,对发病猪进行了临床剖检及实验室检测,通过分子病原学检测,排除了猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和猪伪狂犬病病毒(PRV)4种病原感染,并对病料进行了细菌分离鉴定与药敏试验。结果发现,所分离到的菌株培养特性及生化反应特性与大肠埃希菌基本一致,经进一步鉴定菌体抗原血清型均为O65和O68;药敏试验结果表明,分离株存在多重耐药现象,其对喹诺酮类、大环内酯类、青霉素类、氨曲南类药物均呈不同程度耐药,而其对氨基糖苷类、磺胺类药物均较敏感,进一步试验验证分离株均能产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)。     

一例猪伪狂犬病毒分离和鉴定

伪狂犬病(pseudorabies,PR)是猪疱疹病毒Ⅰ型引起的一种多种家畜感染得的急性传染病。其特征为发热、奇痒及脑脊髓炎.可引起妊娠母猪繁殖障碍、流产、死胎、呼吸症状。新生仔猪除出现神经症状外还可侵害消化系统。临床症状主要表现为腹泻、呕吐、生长不良等。在自然条件下猪、牛、绵羊、犬、猫、兔、鼠     

云南猪关节炎细菌性病原的分离鉴定

本试验旨在了解云南4个猪场猪关节炎的细菌性病因及其耐药性.通过分离培养、生化试验、药敏试验、动物致病性试验及16S rRNA鉴定,对4个猪场出现猪关节炎症状的样品进行了分析.结果显示,A、B、C和D 4个猪场共96份样品中,检出金黄色葡萄球菌55份,阳性率分别为20.8%、83.3%、91.7%和33.3%;检出链球菌56份,阳性率分别为95.8%、21.7%、25.0%和83.3%;混合感染阳性率分别为20.8%、21.7%、25.0%和33.3%.因此,金黄色葡萄球菌是导致B、C两猪场猪关节炎的主要细菌性病原;链球菌是导致A、D两猪场猪关节炎的主要细菌性病原;两种细菌对菌必治、米诺环素和环丙沙星较敏感,对多种抗生素产生了耐药性.     

Isolation and Identification of Bacterial Pathogen of Pig Arthritis in Yunnan

This experiment was conducted to investigate the bacterial causes and drug resistance of pig arthritis of four farms in Yunnan.Through isolation and culture,biochemical test,drug sensitive test,animal pathogenicity experiment and 16S rRNA identification,we analyzed the samples from four farms with pig arthritis symptom.The results showed that in all 96 samples,55 samples were Staphylococcus aureus positive,the positive rates were 20.8%,83.3%,91.7% and 33.3% in A,B,C and D farms,respectively;56 samples were Streptococci positive,the positive rates were 95.8%,21.7%,25.0% and 83.3%,respectively;Mixed infection rates were 20.8%,21.7%,25.0% and 33.3%,respectively.Therefore,Staphylococcus aureus was the major bacterial pathogen which caused pig arthritis in B and C farms;Streptococci was the major bacterial pathogen which caused pig arthritis in A and D farms;Two kinds of bacteria were more sensitive to ceftriaxone,minocycline and ciprofloxacin,and resistant to multiple antibiotics.     

山东省一例山羊伪狂犬病的病原分离鉴定

2017年4月,山东省某羊场饲养的山羊发生疑似伪狂犬病疫情。为确诊引发疫情的病原,采集死亡山羊组织样品,匀浆处理后接种家兔,并进行病原分离、PCR鉴定、效价测定、电镜观察及主要毒力基因测序分析。结果显示:家兔接种病料上清液后出现奇痒、麻痹,最后死亡;Marc145细胞接种病例样品后,产生变亮、变大、破裂,呈"包涵体"样等PRV特征性细胞病变,细胞分离物伪狂犬病病毒(PRV)g E PCR检测结果为阳性,病毒效价可达10-7.50 TCID50/0.1 m L,电镜观察可见病毒粒子呈圆形,有囊膜,直径约150 nm,将其命名为SDPD-17株。测序发现该毒株g E糖蛋白48、497位各插入了1个天冬氨酸,有12个氨基酸位点发生点突变;g C蛋白氨基酸序列64～70位出现了7个氨基酸(AASTPAA)插入;TK基因无碱基插入或缺失。分离鉴定结果证实,该病例由PRV野毒感染所致。     

云南省部分地区规模猪场猪伪狂犬病流行病学调查

为调查云南省规模化猪场猪伪狂犬病流行情况,2016—2017年分别采用ELISA和PCR检测技术,对从云南省9个地区54个猪场采集的6 555份全血和381份疑似病料进行了血清学和病原学检测。抗体检测结果显示:血清样品的gB抗体阳性率为88.7%,gE抗体阳性率为13.5%;楚雄市的gB抗体阳性率最低(78.5%),但gE抗体阳性率(野毒感染率)最高(21.8%);大理市的gB抗体阳性率最高(95.1%),但野毒感染率最低(6.0%);第2季度野毒感染率最高,为20.3%。病原学检测结果显示:疑似病料病原检测平均阳性率为23.1%,其中母猪、保育猪和育肥猪分别为28.8%、23.4%和20.4%,公猪精液为25.0%,流产胎儿和仔猪为22.3%;玉溪市的病原检出率最高(52.6%),德宏市最低(16.4%);各季度的病原检出率无明显差异。调查结果表明,猪伪狂犬病在云南省仍有流行,部分地区较为严重,尤其是玉溪、宣威和西双版纳等地区;应重点加强对母猪、保育猪、仔猪以及公猪精液的防控;加强伪狂犬病免疫,提高gB抗体阳性率,有助于预防野毒感染。     

一例猪伪狂犬病毒的分离和鉴定

从送检的2日龄病猪脑部分离到1株病毒。该病毒接种的Balb／c小鼠出现了典型的伪狂犬病症状,接种BHK-21细胞48h后出现了圆缩、集聚,脱落等典型的细胞病变,猪狂犬病毒阳性血清能特异性的中和该分离病毒。根据GenBank公布的PRV的gE基因设计的引物能扩增出特异性片段,证实该病毒为伪狂犬病毒。