银杏营养贮藏蛋白质的分离鉴定

采用光学和电子显微镜技术、SDS-PAGE技术、间接免疫酶标光镜定位和胶体金免疫电镜定位技术对银杏枝条中的营养贮藏蛋白质(VSPs)进行分离鉴定,并对其细胞学特性及动态变化规律进行初步研究。研究结果:运用制备型SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离并制备银杏32和36ku2种营养贮藏蛋白质抗原,通过免疫新西兰大白兔成功获得银杏32和36ku2种营养贮藏蛋白质的多克隆抗体。银杏VSPs主要分布于落叶期当年生枝条的次生韧皮部细胞中,呈现出团块状、颗粒状和均一状3种形态。在新梢生长期,积累在枝条中的VSPs逐渐降解消失,表现出明显的季节变化。     

银杏枝条营养贮藏蛋白质的组分及动态变化

采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术和电子显微镜技术,对银杏枝条营养贮藏蛋白质组分及其动态变化规律进行研究.结果表明:银杏营养贮藏蛋白质主要存在于枝条的树皮和木质部中;当年生枝条含量高于2年生枝条,树皮的含量高于木质部;枝条中营养贮藏蛋白质组分主要是分子质量为36 ku和32 ku的蛋白质;银杏营养贮藏蛋白质的动态变化分为积累和降解2个阶段,5月中旬新叶形成后即开始积累,12月份达到最高,翌年春季降解满足芽的萌发,至4月上旬逐渐消失.     

印度紫檀营养贮藏蛋白质的主要特性

采用光学和电子显微镜技术、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术分离鉴定热带落叶树木印度紫檀营养贮藏蛋白质(VSPs),并采用免疫印迹技术分析包括印度紫檀在内的5种热带树木VSPs之间的免疫相关性.结果表明:印度紫檀VSPs包括4种蛋白质,分子质量分别为33.5、28、21和19.5 ku;它们主要分布在枝条木薄壁细胞、木射线薄壁细胞、韧皮薄壁细胞和韧皮射线薄壁细胞、皮层薄壁细胞以及树干、大根的韧皮薄壁细胞和韧皮射线薄壁细胞中;它们的超微结构存在明显差异,大致可以分为电子致密的团块状、絮状和均一状3种形态,不同形态的VSPs存在于不同的贮藏蛋白质细胞中,具有细胞特异性;在新梢发育时期,积累在枝条中的VSPs明显消失,但积累在树干和大根中的VSPs和落叶期相比没有明显变化,积累在枝条中的营养贮藏蛋白质是新梢生长发育所需氮素的主要来源;同一科树木的营养贮藏蛋白质之间存在较强的免疫相关性,但不同科树木的营养贮藏蛋白质之间缺乏免疫相关性.树木营养贮藏蛋白质生化性质的多样性可能反映了生物学功能的多样性.     

银杏营养贮藏蛋白质的细胞学研究

采用透射电子显微技术,对银杏的末端小枝和根中贮藏蛋白质细胞进行了超微结构的观察,研究结果表明:银杏营养贮藏蛋白质主要在枝条和根次生韧皮部的韧皮薄壁细胞和韧皮射线细胞中积累;液泡中的蛋白质主要以絮状、不规则块状、颗粒状和均一细沙状的形式存在;落叶期,银杏枝条贮藏蛋白质大量积累。2月底3月初,随着芽的萌动和新梢的生长,枝条中贮藏蛋白质首先被动用,根中的贮藏蛋白质积累和动用都晚于枝条。5月份,新梢中也开始积累贮藏蛋白质;内质网、高尔基体、线粒体与贮藏蛋白质的降解过程有关。     

泡桐丛枝病发生特异相关蛋白质亚细胞定位及质谱鉴定

借助胶体金免疫电镜和质谱分析技术,利用制备的专化性抗体,进行豫杂一号泡桐丛枝病发生特异相关蛋白质(m 24 ku,pI 6.8)叶片和茎尖的亚细胞定位和质谱鉴定研究.结果显示:豫杂一号泡桐丛枝病发生特异相关蛋白质分布于健康苗叶片和茎尖细胞的细胞壁、液泡和叶绿体部位,患病幼苗叶片和茎尖细胞相同亚细胞器部位未发现该蛋白质的存在,进一步表明植原体侵染阻断了此蛋白的合成.此外,基质辅助激光解吸飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)分析该特异蛋白后,通过查询MSDB数据库初步断定该特异相关蛋白为水稻叶绿体分子伴侣Q6K822-ORYSA的同源蛋白.     

银杏种核贮藏保鲜技术的研究及应用进展

就银杏种核贮藏保鲜技术的研究和利用进行了综合评述，介绍了银杏采后化学、物理、生物等方面的种核贮藏保鲜技术，并详细说明了冷激、热激、辐射及臭氧处理对银杏种核的保鲜作用，同时对其它相关的主要新兴贮藏保鲜技术在银杏上的应用进行了分析和展望。     

白果的采收加工和保鲜贮藏

白果,即银杏的种实,富含营养,可供食用或药用,是我国传统的出口商品.白果的采收、加工和贮藏,直接影响到白果的产量、质量和经济效益,现将其相关技术简要介绍如下.     

文冠果体细胞胚发生中钙的超微细胞化学定位

用电镜细胞化学定位的方法,对文冠果种胚诱导体细胞胚发生过程中非胚性愈伤组织、胚性愈伤组织及球形胚、鱼雷胚发育期间Ca2 的分布动态进行超微结构水平上的定位比较研究.结果表明:非胚性细胞Ca2 的含量最少,集中分布在细胞壁和细胞间隙中;胚性愈伤组织的细胞Ca2 的含量明显增加,集中分布在液泡膜、质膜和细胞质中;球形胚时,质膜上Ca2 积累的颗粒较大,但量相对较少;鱼雷胚期ca2 的含量明显增多,集中分布在胚芽端和胚根端,胚根最外层细胞的外侧的细胞壁明显增厚,其细胞壁的外侧Ca2 分布多.推测Ca2 与文冠果体细胞胚发生过程中细胞的发育时期密切相关.     

银杏花粉研究进展

银杏是最古老的孑遗植物,银杏花粉是银杏重要的雄性细胞,是最精深的物质所在。从银杏花粉的形态及系统学地位、花粉的萌发生长、花粉产量、贮藏和生活力、花粉中的活性成分和银杏花粉制品开发研究等方面对银杏花粉的相关研究进行综述,提出银杏花粉形态的研究要多学科结合进一步深入,银杏花粉的萌发生长过程需要更深入探究,银杏花粉的贮藏与生活力的测定技术要探索更可行的方法,银杏花粉制品的开发需要进一步加强,为如何加快银杏花粉的研究步伐提供参考。     

不同梓属树种花器官蛋白电泳分析

为了分析与楸树自交不亲和有关的特异蛋白质特性,采用考马斯亮蓝染色法和SDS-PAGE技术研究了2种梓属树种(滇楸、楸树)花器官的蛋白质含量及蛋白质组分。结果表明:楸树-1(连云港种源)的花柱、子房、花萼蛋白质含量较低,滇楸和楸树-2(老山种源)较高,而楸树-1花瓣蛋白质含量略高于其他树种;同一树种不同器官蛋白质含量表现为子房>花萼>花柱>花瓣。蛋白组分分析表明,梓属各树种不同花器官内的蛋白质主要集中在12～45 ku之间,各器官共有蛋白20个左右,发现具有特异性的蛋白包括:楸树-1花柱42 ku蛋白,楸树-2花柱64和19 ku蛋白,滇楸花柱37 ku蛋白,以及楸树-2和滇楸花柱共有的58和24 ku蛋白;楸树-1子房41、38和23 ku蛋白;花萼中,88和65 ku蛋白为楸树-1所有,52、40、26 ku蛋白为楸树-2和滇楸特有。花瓣内蛋白带较少,仅发现63 ku蛋白为楸树-1特异蛋白。     

杜仲橡胶颗粒结合蛋白的分离、纯化及抗体制备

采用重复漂洗，离心法分离纯化了杜仲橡胶颗粒，SDS—PAGE分析发现杜仲橡胶颗粒含有十几种蛋白，其中以56ku、30ku2种蛋白的丰度较高，分别称之为EuRPP56和EuRPP30。对杜仲雌雄株的比较表明，杜仲雌株叶片、雌株树皮及果皮中橡胶颗粒蛋白均是EuRP30含量高于EuRPP56，而雄株叶片、雄株树皮中正相反。进一步分离纯化了杜仲橡胶颗粒中丰度较高的30ku蛋白，并制备了该蛋白的抗体。免疫细胞化学分析结果表明，在叶片的含胶细胞中有阳性反应，而其它细胞无阳性反应。以上工作为研究杜仲胶粒结合蛋白功能以及阐明杜仲胶生物合成机制奠定基础。     

干旱胁迫下外源ABA对观赏海棠叶片可溶性蛋白和脱水素积累的影响

以抗旱性较强的观赏海棠品种‘王族’和抗旱性较弱的品种‘红丽’幼树为试材,采用"喷施ABA+干旱处理"和"喷水+干旱处理(对照)"2个处理组,测试不同干旱条件下ABA处理的观赏海棠叶片相对含水量(RWC)、相对电导率(REC)、可溶性蛋白含量(SPC)、可溶性蛋白和脱水素表达情况。结果显示:与对照相比,ABA处理的‘王族’叶片RWC显著升高,REC和SPC显著降低,而‘红丽’的相应指标变化则相反。SDS-PAGE分析表明:ABA处理分别引起了干旱处理过程中‘王族’叶片14.8,18.0,46.2,50.9,78.1,145.2ku和‘红丽’叶片14.4,18.0,32.8,46.2,89.6,141.0ku可溶性蛋白的变化。免疫蛋白印迹法测定结果表明:干旱处理分别诱导‘王族’叶片14.8,51.0ku和‘红丽’叶片14.4,32.8ku脱水素的积累;ABA处理显著地的诱导2品种叶片干旱处理开始时脱水素的积累,并降低干旱处理7天后‘王族’叶片14.8,51.0ku和‘红丽’叶片14.4ku的积累。ABA能够诱导正常水分条件下观赏海棠叶片脱水素的表达,但当植株处于干旱胁迫时,ABA抑制其叶片中被诱导的脱水素的积累,并且此抑制作用与品种间抗旱性呈正相关性。     

Localization and quantitative determination of catechins and proanthocyanidins in the phloem of elm and cherry

The localization of catechins and proanthocyanidins in the phloem of elm (Ulmus minor Mill.) and cherry (Prunus avium L.) was determined histochemically by use of 4-dimethylaminocinnamaldehyde (DMACA) reagent. The two tree species showed a characteristic distribution of these phenols, which were most abundant in the phloem rays of cherry, but were largely confined to upright parenchyma cells of elm. Quantitative determination and qualitative separation of catechins and proanthocyanidins were performed using HPLC-CRD (chemical reaction detection), with 4-dimethylaminocinnamaldehyde as the staining reagent. Up to 14 different catechins and proanthocyanidins were found in both species.     

Changes in the morphology and functions of vacuoles during the death of ray parenchyma cells in <Emphasis Type="Italic">Cryptomeria japonica</Emphasis>

Changes in the morphology and functions of vacuoles provide useful information about the mechanism of cell death. In the present study, we monitored the morphology and contents of vacuoles during the death of ray parenchyma cells in the conifer Cryptomeria japonica. In differentiating xylem, ray parenchyma cells had large central vacuoles. In sapwood, vacuoles in ray parenchyma cells contained proteins, an indication that one of the main functions of these vacuoles might be protein storage. A dramatic decrease in the protein content of some vacuoles was detected in the intermediate wood before the initiation of vacuole rupture. Although vacuole rupture was detected from the intermediate wood to the outermost heartwood, some vacuoles were obviously enlarged in the inner intermediate wood. Condensed nuclei were first observed after the rupture of these large vacuoles in ray parenchyma cells. It seems plausible that the autolysis of the contents of ray parenchyma cells might be caused by the rupture of the enlarged vacuoles in the inner intermediate wood.     

樟子松木材组织染色研究

【目的】拓展木材显微切片的染色方法。【方法】比较研究了番红(Safranine O)、固绿(Fast Green FCF)和阿利新蓝(Alcian Blue 8GX)三种染料对樟子松木材切片的染色效果。【结果】单一染料染色时,番红对木质化程度高的厚壁细胞上色效果较好,阿利新蓝对木质化程度低的薄壁细胞上染较好,固绿介于两者之间。两种染料复染时,番红-固绿无法实现不同细胞的区分,仅呈现番红的颜色;而番红-阿利新蓝可以区分厚壁和薄壁细胞,厚壁细胞(管胞和射线管胞)呈红色,薄壁细胞(射线薄壁细胞和泌脂细胞)呈蓝绿色。进一步通过冰乙酸为复染提供一个酸性环境,改进了番红阿利新蓝双染方法。当冰乙酸含量为13%~17%时,能达到理想的染色效果,能够更加清晰地区分厚壁和薄壁细胞。分别将番红、固绿和新蓝用于已解离的管胞染色,新蓝对管胞的染色效果最好,番红染色效果比新蓝略差,固绿染色效果远低于新蓝和番红。【结论】番红对木质化程度高的厚壁管胞染色效果最好;新蓝对木质化程度低的薄壁细胞染色效果最好。改进后的番红-新蓝双染能清楚地区分木材中的厚壁和薄壁细胞。木材细胞对不同种类染料的响应各异,同时也受染色介质影响。研究结果为木材切片细胞识别提供简单高效的新方法。     

On the origin of phenolic compounds in the wood rays of Abies alba

Summary The development and localization of phenolic compounds in sapwood and heartwood of Abies alba Mill. have been studied using cytological and UV-microspectrophotometric methods. The synthesis of phenolic substances was apparently initiated in vesicles developing from rough ER of the ray parenchyma cells in sapwood. They are different from the phenolic material in the pit membrane and cell wall of heartwood. There was no indication to suggest that the polyphenols in the cell wall of heartwood were either derived from or identical with the phenolic substances in the lumina of ray cells.Dedicated to Prof. Dr. H. von Pechmann on the occasion of his 70th birthdayWe are thankful to Professor Dr. Walter Liese for his support and to Mrs. R. Schultze and Miss R. Endeward for technical assistance.