影响土壤真菌多样性的土壤因素研究

本文研究了河北省蔬菜保护地土壤真菌多样性及其主要影响因素。鉴定出疫霉(Phytophthora) 、毛霉(Mucor)、共头霉（Syncephalastrum）、毛壳（Chaetomium kunze）、青霉（Penicillium）、曲霉（Aspergillus）、镰孢菌（Fusarium）、枝顶孢（Acremonium）、炭疽菌 (Colletorichum)、头孢霉(Cephalosporium)、被毛枝葡萄孢（Botryotrichum）、漆斑菌(Myrothecium)、被孢霉（Mortierella）、细基束梗霉（Cephalotrichum）、圆酵母（Torula）、粘帚霉（Gliocladium）、毁丝霉（Myceliophthora）、金孢（Chrysoporium）、轮枝菌（Vertillium）、弯颈霉（Tolypocladium）、腐质霉（Humicola）、葡萄穗霉（Stachybotrys）、木霉（Ttrichoderma）和丝核菌（Rhizoctonia）24属74种真菌。同时表明土壤因子中以速效钾、有机肥、含水量、土壤质地对真菌的种类和数量影响较大,尤其是有机肥含量与土壤真菌的数量和种类之间的相关系数可达0.97和0.96。而碱解氮和有效磷肥对真菌数量和种类影响没有规律性。     

罗田栗实致腐真菌的分离鉴定及拮抗菌筛选

采用组织分离法,从无症和显症的罗田板栗栗实中分离致腐真菌,再利用形态学特征与真菌ITS rDNA序列分析相结合的方法鉴定分离真菌。结果表明,分离真菌经鉴定分属11个种：匍枝根霉(Rhizopus stolonifer)、腐皮镰刀菌(Fusarium solani)、黑葡萄穗霉(Stachybotrys chartarum)、栗疫菌(Cryphonectria parasitica)、可可毛色二孢菌(Lasiodiplodia theobromae)、扩展青霉(Penicillium expansum)、黑曲霉(Aspergillus niger)、胶胞炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)、罗伦隐球酵母(Cryptococcus laurentii)、浅黄隐球酵母(Cryptococcus luteolus)、白假丝酵母(Candida albicans);其中栗疫菌(Cryphonectria parasitica)和扩展青霉(Penicillium expansum)的分离率最高。供筛的6株拮抗细菌的平板对峙实验表明：丁香假单孢杆菌和荧光假单胞杆菌对板栗致腐真菌有抑制作用,其中荧光假单孢杆菌对板栗主要致腐真菌ITS4和ITS6的抑制圈直径超过10mm。     

赤豆(Phaseolus angularis Wight)种子带菌检验

以河北省广泛栽培的6个赤豆品种为材料,进行种子带菌分析.利用洗涤检验法和琼脂平板法获得种子表面带菌21个属,其中数量较大的是:青霉属(Penicillium)、曲霉属(Aspergillus)、链格孢属(Alternaria)、镰刀菌属(Fusariun)、茎点霉属(Phoma)和枝孢属(Cladosporium).利用吸水纸法分离出种内寄藏真菌22个种隶属于18个属,还有一个未定名种.其中细交链孢(Alternaria alternata),蜡叶枝霉(Cladosporium herbarum),串珠镰刀菌(Fusarium moniliforme),半裸大孢变种(Fusarium semitectum var.majus)和微紫青霉(Penicillium janthinellum)的分离频率最高.同时还确定了各种菌在种子内部的定殖部位.     

苦荬菜种子携带真菌与种子活力关系分析

摘要：【目的】明确苦荬菜种子携带真菌种类,探讨携带真菌与种子活力的相关性。【方法】采用洗涤检测法和PDA平板法对来源不同的3批苦荬菜种子贮藏前后携带真菌的种类和数量进行检测,同时对种子活力进行测定。【结果】来源不同的供试苦荬菜种子外部带菌和内部带菌量和种类差异显著。供试苦荬菜种子外部携带携带主要菌群为曲霉属（Aspergillus sp.）、青霉属（Penicillium sp.）、镰刀菌属（Fusarium sp. ）、枝孢属（Cladosporium sp.）;内部寄藏真菌的主要种类有曲霉属（Aspergillus sp.）、青霉属（Penicillium sp.）、镰刀菌属（Fusarium sp. ）、侧茁霉属（Pullularia sp.）。种子贮藏12个月后其带菌量均低于贮藏前,3批种子带菌量之间没有差异显著性,活力却有明显的差异（P〈0.05〉;【结论】种子携带真菌与种子活力的相关性分析表明,种子所携带的真菌是影响苦荬菜种子生活力的重要因素之一。     

筒鞘蛇菰内生真菌的分离及拮抗菌筛选

为了考察筒鞘蛇菰（Balanophora harlandii Hook. f.）内生真菌的类群组成,寻找高活性的抗菌物质,用组织块分离法和杯碟法筛选出能产生高抑菌活性的蛇菰内生真菌菌株。从神农架野生筒鞘蛇菰不同组织内共分离、纯化得到49株内生真菌,对其中生长良好的28株内生真菌归属于半知菌亚门丝孢纲的2目2科7个属,分别是丝核菌属（Rhizoctonia）、曲霉属（Aspergillus）、青霉属（Penicillium）、地霉属（Geotrichum）、小孢霉属（Microsporum）、从梗孢属（Monilia）和粉孢属(Oidium)。这28株内生真菌对于3种供试靶标细菌表现不同的抑菌活性,其中SG47菌株的抑菌作用较强。这些内生真菌能够产生丰富的抑菌活性物质,极具从中寻找新型杀菌剂或药物先导化合物的潜力。     

黄瓜种子带菌检测及杀菌剂消毒处理效果

采用离体平皿法对10个品种的黄瓜种子进行带菌检测,并测定5种杀菌剂和1种种衣剂对种子的消毒处理效果。结果表明,种子表面携带的优势菌群为青霉属(Pen icilliumspp.)、根霉属(Rhizopusspp.)、曲霉属(Aspergillusspp.)、枝孢属(C ladosporiumspp.)、交链孢属(Alternariaspp.)和镰孢霉属(Fusariumspp.);种子内部寄藏的真菌主要为根霉属、曲霉属、枝孢属和镰孢霉属;不同品种的种子表面携带真菌种类差异较大,而种子内部寄藏的真菌种类差异不明显;种壳带菌率一般高于种仁带菌率。15%噁.霜.福悬浮种衣剂、适乐时和福美双对种子的消毒效果优于甲霜灵、多菌灵、噁霉灵等供试药剂。     

新疆厚皮甜瓜采后病害及主要病原真菌的分离与鉴定

对新疆厚皮甜瓜金凤凰采后病害进行了分离、鉴定调查。从贮藏65天后的发病甜瓜中分离出3种真菌菌株,回接后,发现病症与自然发病症状一致,而且从接种病瓜上又重新分离得到了此病病原真菌。经鉴定和致病性确定,确认为链格孢属（Altenaria）、镰孢属（Fusarium）、青霉属（Penicillium）,而且是该品种采后主要致腐病原真菌。     

罗汉松和珙桐内生真菌的分离及其多样性研究

为了深刻认识罗汉松和珙桐内生真菌的多样性,分离了183株罗汉松和珙桐内生真菌,结合形态学和分子分类方法对分离内生真菌进行种属鉴定;采用限制性片段长度多态性(RFLP)方法研究分离菌株的遗传多样性。结果表明96株罗汉松内生真菌鉴定为曲霉属Aspergillus、刺盘孢属Colletotrichum、拟茎点霉属Phomopsis、丝枝霉属Aphanocladium、脉孢菌属Neurospora和无孢菌群,Shannon多样性指数为1.73;87株珙桐内生真菌分属于曲霉属Aspergillus、刺盘孢属Colletotrichum、拟茎点霉属Phomopsis、青霉属Penicillium、炭角菌属Xylaria sp.和无孢菌群,Shannon多样性指数为1.53。采用RFLP方法,对全部内生真菌rRNA基因间隔区(ITS)的核苷酸多样性进行了分析,罗汉松和珙桐内生真菌分别聚为22个分枝,同属的菌株聚在一起,同属菌株的RFLP分类相似性在93%以上。罗汉松和珙桐内生真菌中都有无孢菌群,部分菌株与鉴定菌株同处一个分枝中,其他相距较远的无孢菌可能为新的种属。本研究结果提示,罗汉松和珙桐内生真菌的多样性丰富。     

腐烂葡萄中微生物多样性及真菌毒素测定分析

以天津、北京、杭州等10个地区的葡萄园以及市场中的75份腐烂葡萄为研究对象，应用分子生物学手段进行葡萄表面微生物（细菌和真菌）多样性的核酸测序（包括16S区域扩增子和ITS区域扩增子）分析；同时基于次级代谢产物，使用高效液相色谱（HPLC）法对葡萄样本进行了21种真菌毒素的测定分析，以初步摸清主要风险危害，锁定风险菌株。结果表明，对表面微生物的核酸测序共获得细菌16S有效OTU信息732个和真菌ITS有效OTU信息4 336个，构建了葡萄表面菌相分子数据库，其中包括367种细菌和256种真菌，其主要病原菌为青霉、黑曲、链格孢菌、杂色曲霉、灰葡萄孢、炭疽和盾壳霉；通过真菌毒素测定分析，共检测出4种真菌毒素，分别为交链孢毒素AOH、交链孢毒素AME、交链孢毒素TeA和交链孢毒素TEN。     

河北省冬小麦种子表面粘附真菌的分离鉴定

从唐山、秦皇岛等5个地区收集45个冬小麦品种（系），通过洗涤检验法和吸水纸培养检验法，在供试的45个冬小麦品种种子表面分离到9个属真菌。分别为；链格孢属的细链格孢菌（Alterndrid tenuis Nees）和小麦链格孢菌（A.triticold Prasada）、丹尼链格孢菌（A.dennisii M.B.Ellis）；离蠕孢属的小麦根腐离蠕孢菌9Bipoldris Sorokinidnd Shoem.）；镰刀菌属的禾谷镰刀菌（Fusdrtum grdminedrdm）和尖孢镰刀菌（F.oxysporum）；弯孢霉属（Curvularia）；突脐孢属（Exserohilum）；德氏霉属的小麦穗氏霉菌（Drechslerd tritici-repentis Shoemaker）；茎点霉属的勒韦茎点霉菌（Phomd leveillet Boerema）；哈氏霉属的顶孢哈氏霉菌（Hdrzia acremonioides Harz.）；侧隔霉属（Pleurophraium）。其中Alternaria分离频率最高，达58.06%，其次是Bipolaris和Fusarium，分别为22.11%和7.44%，对分离得到的各种孢子进行萌发率测定结果表明，离蠕孢属（Bipolaris）孢子萌发率最高，有6种真菌对小麦具有致病性。     

人参种子带菌检测及杀菌剂消毒处理效果

采用离体平皿法对10个人参种子样品进行种子表面和种子内部寄藏真菌检测,并测定4种杀菌剂和2种种衣剂对种子消毒处理效果。结果表明,种子样品携带真菌类群主要有青霉属(Penicilium spp.)、镰刀菌属(Fusarium spp.)、链格孢属(Alternaria spp.)、丝核菌属(Rhizoctonia spp.)优势真菌以及少量的头孢霉属(Cephalosporium sp.)、木霉属(Tri-choderma spp.)、根霉属(Rhizopus spp.)和曲霉属(Aspergillus spp.)等劣势真菌。人参种子带菌率较高,种壳带菌率为48%~100%,种子内部带菌率为40%~100%,不同地点的种子外部带菌种类差异明显,种胚寄藏的优势真菌种类和分离频率与种壳的结果基本一致。氟硅唑、福美双、适乐时和15%噁.霜.福种衣剂用于处理人参种子具有较好的表面消毒效果,优于甲霜灵和噁霉灵。     

木霉菌和番茄叶面主要微生物间的关系

对番茄叶表分离到的几种真菌和木霉菌BTW41(T.atroviride)之间相互关系作了初步研究,研究发现木霉菌具有较强的营养竞争能力,几种叶面真菌和木霉菌混合处理叶片试验中,黑曲霉菌混合木霉菌的处理会影响木霉菌在番茄叶表的定殖,使木霉菌在番茄叶表的定殖量减少,而其它几种真菌未使木霉菌定殖量减少。     

木霉菌和番茄叶表主要微生物间关系

对番茄叶表分离到的几种真菌和木霉菌BTW41(T.atroviride)之间相互关系作了初步研究,研究发现木霉菌具有较强的营养竞争能力,几种叶面真菌和木霉菌混合处理叶片试验中,黑曲霉菌混合木霉菌的处理会影响木霉菌在番茄叶表的定殖,使木霉菌在番茄叶表的定殖量减少,而其它几种真菌未使木霉菌定殖量减少。     

九种植物精油对黄曲霉抑制作用的比较

为筛选高效抑制黄曲霉的植物精油，采用固体培养和液体培养相结合的方式从黄曲霉生长速率及延滞期、菌体超微结构、黄曲霉毒素B1合成量等方面比较了9种植物精油（川穹、肉桂、大茴香、安息香、丁香、香茅、芫荽、百里香、柠檬草精油）对黄曲霉的抑制效果。结果表明：肉桂精油的抑菌效果最强，对黄曲霉生长和产毒的抑制率达100%，其次为柠檬草、丁香、百里香精油，能使黄曲霉生长的延滞期从(0.02±0.01) d延长至(11.27±0.34)~(12.64±0.08) d，并使生长速率降低了91.43%~97.83%，黄曲霉毒素B1合成量下降了86.74%~88.40%，同时观察到这4种精油对黄曲霉菌丝体和孢子造成严重损伤，引起细胞塌陷收缩，内容物泄漏。说明肉桂、柠檬草、丁香、百里香精油能有效抑制黄曲霉类真菌，可用于食品中黄曲霉类真菌及其毒素的控制。     

谷氨酰胺合成酶产酶菌株的筛选及酶学性质

通过对枯草杆菌、黑曲霉、米曲霉3种菌株的筛选,得到3种菌株具有产谷氨酰胺合成酶(GS)的能力,其中米曲霉产酶能力较高,对米曲霉菌株进行紫外线诱变使其产酶能力提高了15.6%。确定了米曲霉最佳超声波破碎条件为:功率400W,工作1s,间歇3s,超声20min。谷氨酰胺合成酶的最佳酶促反应时间为30min,最适pH值为6.5,最适温度为60℃,并且得出了Mg2+和Mn2+对维持酶活至关重要。     

肉苁蓉种子带菌检测研究

为研究不同产地肉苁蓉种子携带真菌优势菌群和带菌率的差异,采用平皿法对肉苁蓉种子进行外部（洗涤法和干种子法）、内部（种子消毒法与种仁消毒法）带菌检测。结果表明,肉苁蓉种子携带菌群主要为曲霉属（Aspergillus spp.）、交链孢属（Alternaria spp.）、镰孢属（Fusarium spp.）、青霉属（Penicillium spp.）及少量的散囊菌属（Eurotium spp.）。不同产地肉苁蓉种子携带菌群及带菌率差异不显著,但分离频率有一定差异。研究结果为肉苁蓉种子标准的制定提供参考。     

灵芝多糖抑菌活性初探

通过热水提取法提取灵芝多糖,得到灵芝粗多糖,并以3种植物病原菌(胡萝卜欧氏菌、指状青霉、灰葡萄孢)和5种食品有害菌(蜡状芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、黑曲霉和黑根霉)为供试菌,采用纸片琼脂法来测定灵芝粗多糖对供试菌的抑菌强度。结果表明,灵芝粗多糖对植物病原菌中的胡萝卜欧氏菌有较强的抑制作用;对指状青霉菌有一定的抑制作用,但抑制作用较弱;对灰葡萄孢几乎没有抑制作用;对食品有害菌中的枯草芽孢杆和蜡状芽孢杆菌有很强的抑制作用;对大肠杆菌和黑曲霉抑制作用相对较弱;对黑根霉几乎没有抑制作用。总体来看,灵芝多糖对细菌的抑菌活性强于真菌。     

西瓜砧木种传真菌的初步检测

采用洗涤离心法和PDA培养基法对14个西瓜砧木主栽品种进行了种传真菌检测.结果表明,种子表面携带的优势菌群主要为镰刀菌(Fusarium spp.)、青霉属(Penicillium spp.)、曲霉属(Aspergillus spp.)、根霉属(Rhizopus spp.)、链格孢属(Alternaria spp.)真菌.种子内部寄藏的真菌主要为镰刀菌、青霉属和曲霉属真菌,其中西瓜砧木种子内部寄藏镰刀菌为国内首次报道.不同品种的种子表面携带真菌种类差异较大,种子内部寄藏真菌种类差异不明显,种壳带菌率一般高于种胚带菌率.     

Biocontrol of fungi isolated from sour rot infected table grapes by Saccharomyces and other yeast species

Sour rot is an important disease of grapes caused by an etiologic complex of microorganisms in which filamentous fungi play a key role. Yeasts are used for biocontrol of pathogenic filamentous fungi on fruits. The major objective of this study was to assess in vivo on detached berries the effect of viticultural yeasts on phytopathogenic fungi involved in grape sour rot. Yeasts that were found to be effective in vivo against the fungi were assayed for their possible pathogenicity in humans: growth at 42 °C, pseudohyphal formation, adhesion, and phospholipase and protease activity. A total of 234 yeasts belonging to 14 genera were assayed against the following pathogens: Aspergillus caelatus, Aspergillus carbonarius, Aspergillus terreus, Aspergillus versicolor, Fusarium oxysporum, Penicillium comune, Rhizopus stolonifer and Ulocladium sp. Forty-three (16 Saccharomyces and 27 non-Saccharomyces) showed antagonistic properties against some of the fungi assayed in grapes at 25 °C. Yeast isolates determined as biocontrol agents under in vivo conditions were isolated from fermenting musts (35), viticultural soils (6) and grape berries (2). Twenty biocontrol agents did not show phenotypical characteristics associated with pathogenicity in humans.