枣子叶再生植株研究

以枣树‘雄性不育3号’未成熟胚的子叶为材料,建立了枣子叶再生植株体系。子叶愈伤诱导培养基为MS+蔗糖30 g/L+琼脂3.3 g/L,愈伤诱导率达到40%。从愈伤组织诱导不定芽的培养基为MS+蔗糖30 g/L+琼脂3.3 g/L+TDZ 1.5 mg/L,不定芽发生率为88.9%,不定芽数量与愈伤数量之比为3.5。生根培养基为MS+蔗糖30 g/L+琼脂3.0 g/L+IBA 1.0 mg/L,生根率达到33.3%。此外,培养温度显著影响玻璃化苗的生长。在24℃条件下培养30 d,仅有9.7%的玻璃化苗向正常植株转化,而在20℃培养条件下的玻璃化率仅为6.7%。附加30~80 g/L蔗糖的不同培养基上,玻璃化苗向正常苗转化情况无显著差异。     

正交试验优化虎舌红茎尖离体培养条件

采用正交设计及方差分析对影响虎舌红植株离体培养的因素进行优化研究,结果表明:最佳愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D0.7 mg/L+6-BA 0.2 mg/L+蔗糖28 g/L+琼脂6.0 g/L;不定芽诱导最佳培养基为MS+NAA0.2 mg/L+CPPU0.4 mg/L+AgNO34.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.0 g/L,分化率为96%,增殖率为5.5;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.4 mg/L+IBA 0.3 mg/L+蔗糖26 g/L+琼脂5.0 g/L,生根率为93%。     

紫果西番莲愈伤组织诱导分化及不定芽增殖研究

以紫果西番莲离体培养的子叶为实验材料,对其愈伤组织进行诱导、分化及不定芽增殖。结果表明:在愈伤组织诱导中,以MS培养基+2,4-D 1.0 mg/L+TDZ 0.5 mg/L+琼脂3.8 g/L+蔗糖30 g/L的诱导效果最好,其诱导率为73.33%。在愈伤组织不定芽诱导中,以MS培养基+2,4-D 0.5 mg/L+TDZ 2.0 mg/L+琼脂3.8 g/L+蔗糖30 g/L的诱导率最佳,为46.67%。对不定芽继续进行增殖培养,以MS培养基+6-BA 1.0 mg/L+IAA 0.3 mg/L+琼脂4.0 g/L+蔗糖30 g/L最佳,增殖倍数为2.97。从而建立了西番莲植株再生体系,可进行优良材料的离体快繁。     

贵长猕猴桃茎段高效再生体系的建立

以贵长猕猴桃茎段为外植体,研究不同激素组合培养基对愈伤组织诱导、不定芽分化增殖、无菌苗生根等的影响。结果表明,贵长猕猴桃茎段在MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 0.4 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂粉8 g/L培养基上愈伤组织诱导率相对最高,达100.0%,且愈伤组织生长状况相对较好,质地最优,呈黄白色湿润致密状,在MS+6-BA 5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂粉8 g/L培养基上不定芽出芽率相对最高,达83.33%,在MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+GA_3 0.4 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂粉8 g/L培养基上不定芽增殖率相对最高,达100%,继代培养6代时的平均繁殖系数达6.48;不定芽在含IBA 0.6 mg/L的1/2MS培养基上培养生根率相对最高,达到95.83%,且形成庞大的根系,50株试管苗经炼苗移栽成活率可达96.0%。     

红叶石楠离体培养与高效再生体系建立

以红叶石楠(Photinia×frasery)带芽茎段、叶片为外植体,对其启动培养、叶片愈伤诱导与分化、芽增殖、生根培养及试管苗驯化等技术进行了较为系统的研究,建立了红叶石楠离体培养的高效再生体系。结果表明,幼茎启动培养适宜培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L+GA0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,诱导率达63.3%;叶片愈伤诱导适宜的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D1.0mg/L+NAA1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,愈伤诱导率达86.0%;愈伤分化不定芽的适宜培养基为N6+6-BA1.5mg/L+IAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,诱导率达21.6%,增殖率为1.4倍;芽增殖培养适宜的培养基为MS+6-BA3.0mg/L+KT0.5mg/L+NAA0.3mg/L+GA0.7mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,最高增殖率达6.1倍;生根培养方法为用25mg/LNAA溶液浸泡0.5～1.0h后接种于1/2MS培养基中,生根率达93.4%以上;试管苗驯化的适宜混合基质为泥炭∶珍珠岩=3∶1,成活率可达96.7%。     

辣木离体再生体系的建立

以辣木种子为外植体,诱导获得无菌苗,然后通过用无菌苗的嫩茎诱导愈伤组织分化不定芽,再将不定芽诱导生根,获得完整植株,建立辣木的离体再生体系。结果表明,适合辣木种子诱导无菌苗的培养基为MS_0,诱导率达95%;适合无菌苗茎段诱导愈伤组织的培养基为MS+2,4-D 0.8 mg/L+KT 0.2 mg/L,诱导率达87.03%;适合愈伤组织分化不定芽及不定芽增殖的培养基为改良MS+6-BA0.6 mg/L+IAA 0.2 mg/L,芽分化率达83.33%,芽增殖系数达4.2;适合不定芽生根的培养基为1/3MS+IBA0.5 mg/L+NAA0.2 mg/L,生根率达92.7%,平均根数达5.78。     

番茄高效离体再生体系的建立

以中蔬四号番茄子叶和下胚轴为外植体进行离体培养,研究了不同激素及不同浓度的组合对愈伤诱导、不定芽分化及生根的影响。结果表明,MS+2,4-D0.2 mg/L+6-BA1.0 mg/L+蔗糖30 g/L诱导所得愈伤最好,MS+IAA0.2 mg/L+6-BA1.0 mg/L+蔗糖30 g/L诱导分化不定芽效果最佳,1/2 MS+蔗糖20 g/L是诱导不定芽生根的理想培养基。建立起高效番茄离体再生体系。     

野生梭梭的离体培养和植株再生

以野生梭梭带腋芽茎段为外植体进行离体再生研究,探讨不同植物生长调节剂、硝酸银和蔗糖的质量浓度对其愈伤组织诱导、不定芽分化和生根的影响。结果表明,野生梭梭带腋芽茎段愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.0 g/L,诱导率为100%;不定芽分化的最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+TDZ 1.0 mg/L+AgNO33.5 mg/L+蔗糖26 g/L+琼脂6.5 g/L,不定芽分化率为97.8%;影响野生梭梭再生的最主要因素是NAA,其次是TDZ和AgNO3,蔗糖影响最小。     

黄瓜离体培养植株再生技术及影响因素分析

以3个不同的黄瓜(Cucumbis sativus L.)品种作为试验材料,研究了不同苗龄外植体和激素组合对黄瓜离体再生的影响.结果表明,黄瓜离体再生最适外植体苗龄为5～6 d,苗龄太小或太大都不利于不定芽的诱导发生;激素在调控诱导不定芽方面起着决定性的作用,诱导不定芽分化的最适培养基为MS+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA+0.1 mg/L NAA,不定芽伸长后在MS+30 g/L,蔗糖+7 g/L琼脂+0.2 mg/L IAA+0.1 mg/L NAA的生根培养基上诱导不定根效果最佳.本试验条件下黄瓜植株再生率为76%.     

甜魔芋芽鞘分化及植株再生条件的研究

以甜魔芋芽鞘为外植体,进行愈伤组织诱导、芽分化及植株再生的研究.结果表明:芽鞘在培养基MS +6-BA0.6 mg/L + NAA 0.1 mg/L+蔗糖 30g/L上愈伤组织诱导率最高,达92.3 %;芽分化最适培养基是MS +6-BA 1.5 mg/L + NAA 0.5 mg/L+蔗糖 30g/L,分化率达93.8 %;切割后的芽在生根培养基1/2MS +NAA 0.1mg/ L+蔗糖 30g/L上,能100%形成完整植株.     

树兰的组织培养研究

以树兰茎段为外植体,研究不同植物生长调节物质对其愈伤组织诱导、不定芽增殖及生根培养的影响。结果表明,茎段可同时诱导出愈伤组织、不定芽。愈伤组织诱导以NAA 0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L+6-BA 0.4 mg/L效果最好,愈伤组织诱导率达24.44%;以NAA 1.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L+6-BA 0.2 mg/L对不定芽的诱导效果最好;生根培养以1/2MS+NAA 1.0 mg/L+活性炭1.0 g/L+蔗糖25 g/L培养基最佳,生根率达93.06%。     

中国石竹叶片愈伤组织形成·分化及植株再生

[目的]为了研究中国石竹叶片愈伤组织的诱导及植株的再生。[方法]通过叶片愈伤组织诱导再分化和叶片直接诱导不定芽2种途径获得了石竹的再生植株。[结果]以植株中部带叶基的叶片愈伤组织诱导再分化效果最好。叶片愈伤组织在MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.3mg/L培养基中不定芽分化率最高(50%～60%)。幼叶在MS+NAA 0.3mg/L+6-BA1.0mg/L培养基上培养47d可直接诱导出不定芽。与愈伤组织分化成芽相比,幼叶直接诱导不定芽芽数少,但生长快,苗较高。最佳增殖培养基是MS+6-BA 0.2mg/L+IAA 0.2mg/L,最佳生根培养基是1/2MS+IBA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+0.2%活性碳。[结论]叶片作为外植体具有来源丰富、取材方便、操作简单的优点,探讨植物叶片的再生分化特性具有实际的意义。     

杂交构树组培快繁体系的建立

通过对杂交构树的组织培养,研究不同的灭菌方法和激素配比对愈伤组织的诱导、芽的增殖、壮苗及生根的影响。结果表明,最佳灭菌剂为0.5%的Hg Cl2,灭菌15 min后除菌率达到68.2%;诱导愈伤组织分化的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.8%琼脂+3%蔗糖;最佳壮苗培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.8%琼脂+3%蔗糖;最佳生根培养基为1/2 MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.8%琼脂+3%蔗糖;移栽的最佳基质为蛭石,移栽后成活率达到88%。     

桑树毛状根再生条件研究

为建立桑树毛状根的再生体系,以桑树毛状根作为外植体,研究不同质量浓度6-BA和NAA配比对桑树毛状根愈伤组织诱导和不定芽分化的影响,并对再生植株进行PCR检测。结果表明,桑树毛状根的最佳愈伤组织诱导培养基为MS+0.2mg/L 6-BA+2.0mg/L NAA,最佳不定芽分化培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA,3周愈伤组织不定芽分化率为16.7%。应用该不定芽获得再生植株的根系生长旺盛,叶片提取的基因组中含有rolB生根基因。     

绿萝组织培养和遗传转化条件优化

为优化绿萝离体再生条件，建立更高效的遗传转化体系，分别以绿萝叶片和叶柄为外植体，比较不同植物生长物质对绿萝不定芽诱导和植株离体再生的影响。并通过PCR技术克隆拟南芥AtFALDH基因，利用农杆菌介导法对绿萝愈伤组织进行遗传转化，比较不同转化条件下绿萝愈伤组织抗性不定芽诱导率。结果表明，绿萝叶柄愈伤组织和不定芽诱导效果均优于叶片。绿萝叶片愈伤组织诱导最适培养基为MS+0.5 mg/L TDZ+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L 2,4-D，该培养基下诱导率大约为61.5%；叶柄愈伤组织诱导最适培养基为MS+0.5 mg/L TDZ+0.5 mg/L NAA，该培养基下诱导率达到97.8%。绿萝叶片不定芽诱导最适培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA，该培养基下诱导率接近100%；叶柄不定芽诱导最适培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA，该培养基下诱导率约为100%，但叶柄来源的愈伤组织诱导产生的不定芽数量较多，而且生长更旺盛。生根最适培养基为1/2 MS+0.05 mg/L NAA，该培养基下生根...     

豌豆离体再生体系建立及遗传稳定性研究

【目的】提高速豌豆诱伤组织和不定芽的诱导率,建立豌豆高效离体再生体系.【方法】以半无叶型豌豆品种‘陇豌1号’和蔓生型豌豆品种‘S3008’的茎段为外植体,研究不同基因型、培养基激素配比对愈伤组织诱导、分化的影响.【结果】‘陇豌1号’茎段愈伤组织诱导率和分化率较高,分别达到88.7%和76.7%,‘S3008’茎段最高愈伤组织诱导率和分化率分别为86.7%和74.7%.诱导愈伤组织最适培养基是MS+2mg/L TDZ+0.2mg/L 2,4-D;诱导不定芽形成的最适培养基为MS+2mg/L TDZ+1mg/L 6-BA,平均不定芽数为4.3;在不定芽诱导生根培养基(1/2MS+20g/L蔗糖+1.5mg/L ABT)上,生根率为74.0%,移栽后再生植株成活率达86.0%.两个豌豆品种都能得到再生植株且繁殖系数高.【结论】本培养体系适宜豌豆离体再生.通过染色体分析,再生植株染色体数和供体亲本材料一致,初步表明再生植株遗传稳定.     

长寿花叶片离体快繁技术研究

以长寿花幼嫩叶片为外植体,研究不同灭菌时间对长寿花幼嫩叶片再生能力的影响以及不同激素配比对愈伤组织诱导、不定芽诱导和生根诱导的影响。结果表明:长寿花幼嫩叶片最佳的灭菌方式为75%酒精消毒30 s,无菌水冲洗4次,再用0.1%升汞消毒7 min,无菌水冲洗5次;愈伤组织诱导的最适培养基配方为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L;不定芽诱导分化的最适培养基配方为MS+6-BA2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;不定芽诱导生根的最适培养基配方为1/2 MS+IBA 0.2 mg/L。     

虎舌红茎尖高频再生体系的建立

以虎舌红(Ardisia mamillata Hance)幼嫩茎尖为外植体,采用正交设计及方差分析对影响虎舌红植株离体培养的因素进行了优化研究。结果表明:最佳愈伤组织诱导培养基为MS 2,4-D0.7mg/L 6-BA0.2mg/L 蔗糖28g/L 琼脂6.0g/L;不定芽诱导最佳培养基为MS NAA0.2mg/L CPPU0.4mg/L 蔗糖30g/L 琼脂6.0g/L,分化率为96%,增殖率为5.5;最佳生根培养基为1/2MS NAA0.4mg/L IBA0.3mg/L 蔗糖26g/L 琼脂5.0g/L,生根率为93%。     

新梨七号茎段组织培养再生植株的研究

从植物生长调节物质的不同配比、不同部位诱导不定芽以及炼苗移栽等几个方面对新梨七号离体茎段再生进行研究,获得茎段产生愈伤组织及不定芽再生的适宜培养基,分析以上因素对新梨七号再生体系建立的影响。结果表明,新梨七号的茎段最适宜愈伤诱导培养基为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 0.5mg/L,愈伤组织诱导率为100%;茎段诱导不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L,诱导率为95%,增殖倍数为7.29;最适宜不定芽生根培养基为1/2MS+IBA 2.5mg/L+蔗糖15g/L,生根率为90%;封口炼苗时间14d为最好,移栽时间7月最佳。     

安祖花组培快繁体系的建立

以安祖花阿里桑娜、阿米戈、亚特兰大和情人红为材料,通过设置不同的基本培养基和激素配比,研究愈伤组织诱导、不定芽诱导和生根情况,以筛选出最佳的培养基配方,建立安祖花组培快繁技术体系。结果表明,安祖花的成叶、叶柄、花茎、佛焰苞片的灭菌时间以氯化汞消毒15 min为宜,幼叶以10 min为宜;最佳愈伤组织诱导培养基为:1/3 MS(NH4NO3200 mg/L)+BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.05 mg/L+琼脂5 g/L+蔗糖30 g/L,其愈伤组织诱导率为100%;最佳不定芽分化培养基为:1/2 MS+6-BA 1 mg/L+琼脂5 g/L+蔗糖30 g/L;最佳生根培养基为:1/2 MS+IBA 0.05 mg/L+琼脂5 g/L+蔗糖30 g/L。试验结果为安祖花种苗的工厂化生产提供了参考。