苎麻茎皮cDNA文库的构建

以生长中期的苎麻茎皮为材料,提取总RNA,经纯化mRNA后,合成双链cDNA。双链cDNA加上EcoRI-SmaI接头后,用限制酶NotI酶切并除去小于400bp的短链cDNA,长的cDNA片段连接到EcoRI-NotI酶切载体pAP3neo上,获得滴度为2.6×104的苎麻cDNA文库,插入片段大部分分布在500bp～1500bp之间。该文库的建立为苎麻表皮功能性新基因的发现奠定了基础。     

香蕉果实cDNA文库的构建

将从处于一定成熟度的香蕉果肉中纯化出的mRNA反转录成cDNA。cDNA纯化后与EcoRI转接头相连,并插入λgt10载体,经体外包装,侵染大肠杆菌C600hfl菌株,从而构建了香蕉果实的cDNA文库。     

利用改进的Oligo-Capping法构建甘蔗茎全长cDNA文库

Oligo-Capping法是目前全长cDNA文库构建的重要方法之一.笔者在引进、消化和吸收的基础上,通过对特异引物和接头序列的设计,及cDNA扩增反应条件的优化,对该方法进行了一些切实可行的改进,形成了一套简便易行的技术体系.利用本研究中改进的Oligo-Capping法,成功地构建了甘蔗茎全长cDNA文库.综合评价结果表明,本研究中所构建的甘蔗茎全长cDNA文库的库容大于2.5x106cfu,重组率为91%,全长率高达88.9%.本文库的构建为进一步甘蔗茎中全长基因的克隆和功能基因的表达分析奠定了基础.     

小粒野生稻酵母双杂交cDNA文库的构建

采用酵母双杂交系统,利用SMART技术,在酵母菌株AH109中构建了小粒野生稻全长cDNA文库,文库容量约为1×106,插入片段平均大小约为640bp。该文库可以用于进一步的酵母双杂交筛选。     

苎麻茎皮表达序列标签(ESTs)分析

以生长中期的苎麻[Boehmeria nivea (L.) Gaud]茎皮为材料,构建库容量为2.2×105pfu/mL的cDNA文库并随机挑选部分克隆进行测序和生物信息学初步分析,得到275条有效序列.通过与NCBI等数据库比对分析,获得已知功能基因或具推测功能基因的EST91条,已知EST37条,新的EST147条,具已知或推测功能的ESTs大致分为9类,其中与蛋白质合成有关的ESTs所占比例最大.cDNA文库的构建和ESTs分析为苎麻功能基因组学研究提供了一条方便快捷的途径.     

花生种子全长cDNA文库的构建和鉴定

以花生品种闽花5号各发育时期的种子为材料分离mRNA,利用SMART技术合成双链cDNA。利用限制性内切酶SfiⅠ酶切。将经过分级分离得到的cDNA连接到质粒载体pDNR-LIB,成功构建花生种子全长cDNA文库。将所得到初级文库扩增后进行保存,检测扩增文库滴度为1.7×109cfu/mL。PCR鉴定重组子,发现重组率接近100%,插入片段集中分布在0.5~2.0 kb。插入片段的平均大小在1000 bp左右,这说明该文库既可以满足低丰度基因的筛选,也可保证获得全长cDNA。     

花生蛴螬中肠组织cDNA文库的构建

利用Qiagen试剂盒提取花生害虫华北大黑鳃金龟幼虫蛴螬中肠总RNA,并纯化mRNA,然后按照Stratagene试剂盒合成双链cDNA,经过凝胶柱层析,收集符合要求的cDNA片段,加工后与Uni-ZAP XR Vector连接,经Gigapack Ⅲ Gold体外包装,即获得蛴螬的cDNA文库,未扩增文库滴度1.95×106pfu/mL,重组率为99.7%,扩增后文库滴度达1.34×109pfu/mL,插入cDNA片段的长度平均为1.34kb,表明成功构建了高质量的蛴螬中肠cDNA文库。     

外源ABA处理大麦胚的均一化cDNA文库的构建

构建外源ABA处理大麦胚的均一化cDNA文库是利用酵母双杂交方法筛选与靶蛋白相互作用蛋白的前提条件。为给大麦抗逆基因的研究及抗逆转基因大麦材料的创制奠定基础,利用5μmol·L-1ABA和蒸馏水分别处理大麦种子0h、6h、12h、24h,剥取大麦的胚,用热酚法提取总RNA,利用SMART原理进行反转录PCR并进行均一化处理获得ds-cDNA。经SfiⅠ酶切的ds-cDNA与pGADT7-Rec载体连接后,转化大肠杆菌感受态细胞DH10B构建文库。结果表明,文库的容量为1.1×106,插入片段大于1 000bp,集中在1 000~3 000bp之间,符合酵母双杂交文库的要求。     

长雄野生稻地下茎cDNA文库的构建及EST分析

长雄野生稻(Oryza longisatminata)是广泛生长在热带非洲的1个野生种,具有明显的地下茎特征.为了探索控制其地下茎发育的相关基因及其他优异基因,初步构建了地下茎cDNA文库.文库指标显示:初始滴度为2.5×105cfu/μg,扩增滴度为2.9x108cfu/μg,库容为5x106cfu,重组率为82%;随机挑选80个单克隆进行测序,插入片段在400～1 000bp之间;对测序结果进行比对分析,获得了58个已报道有一定功能的EST序列,22个未见报道的EST序列;并利用PAUP4.0软件对序列进行了筛选分析.     

苎麻组织培养及遗传转化研究进展

概述了国内外苎麻组织培养的快速繁殖、器官发生、体细胞胚胎发生、原生质体培养、花药培养等几个方面以及遗传转化的研究进展,并对存在的问题和前景进行了讨论。     

苎麻组织培养及遗传转化研究进展

概述了国内外苎麻组织培养的快速繁殖、器官发生、体细胞胚胎发生、原生质体培养、花药培养等几个方面以及遗传转化的研究进展，并对存在的问题和前景进行了讨论。     

两种乙烯抑制剂对苎麻(Boehmeria nivea(L.) Gaud)性别及植物学性状的影响

用AVG和AgNO3诱导苎麻以控制其花的性别表现。用不同处理浓度AVG(300、100mg/L)、AgNO3(100、300、500m g/L),在苎麻生长到15节时开始处理,观察统计雌花、雄花形成的数量并进行统计分析,找出最佳处理水平。结果表明,乙烯抑制剂可以控制苎麻的性别表现。AVG300mg/L、AgNO3300mg/L为最佳诱导剂浓度。     

苎麻化学调控研究进展

综述了植物生长调节剂对苎麻生长发育的影响。苎麻生长发育的化学调控受不同生长调节剂的作用，不同生长调节剂对苎麻的生长发育表现出不同的生理效应，具体表现为对苎麻生长发育的促进作用、抑制作用及协调作用。并提出了今后发展植物生长调节剂的主要途径以及化学调控在苎麻生长发育上的乐观前景。     

苎麻韧皮纤维农艺变性刍论

本文借鉴纤维素纤维化学变性的成功经验，根据苎麻纤维细胞发育的基本特征，在对现有研究资料进行综合分析的基础上，提出了苎麻纤维农艺变性的新构想，进而对苎麻纤维农艺变性的总体目标、技术路线和关键技术，以及苎麻纤维素结晶与取向结构的遗传调控、栽培调控、化学调控进行了论述。     

两种乙烯抑制剂对苎麻(Boehmeria nivea(L.)Gaud)性别及植物学性状的影响

用AVG和AgNO3诱导苎麻以控制其花的性别表现。用不同处理浓度AVG（300、100mg／L）、AgNO3（100、300、500mg／L），在苎麻生长到15节时开始处理，观察统计雌花、雄花形成的数量并进行统计分析，找出最佳处理水平。结果表明，乙烯抑制剂可以控制苎麻的性别表现。AVG300mg／L、AgNO3300mg／L为最佳诱导剂浓度。     

不同苎麻品种纤维物理性能的差异及相关性的初步研究

比较研究107个不同苎麻品种纤维物理性能，结果表明：单株原麻干重、有效株、断裂功、纤维支数、断裂强力(强度)变异系数较大；单株原麻干重与纤维支数极显著负相关，与断裂强力(强度)显著正相关，与株高极显著正相关；纤维支数与断裂强力(强度)极显著负相关，与断裂伸长(伸长率)极显著负相关；纤维断裂强度(强度)与断裂伸长(伸长率)呈极显著正相关，与断裂功极显著正相关。     

苎麻化学调控研究进展

综述了植物生长调节剂对苎麻生长发育的影响.苎麻生长发育的化学调控受不同生长调节剂的作用,不同生长调节剂对苎麻的生长发育表现出不同的生理效应,具体表现为对苎麻生长发育的促进作用、抑制作用及协调作用.并提出了今后发展植物生长调节剂的主要途径以及化学调控在苎麻生长发育上的乐观前景.     

Ramie (Boehmeria nivea (L.) Gaud.) and Spanish Broom (Spartium junceum L.) fibres for composite materials: agronomical aspects,morphology and mechanical properties

The agronomic characteristics of Ramie and Spanish Broom were investigated for seven years in the pedoclimatic conditions of Central Italy. The chemical, physical and mechanical properties of these fibres were also examined in order to evaluate the feasibility to use them in composite materials. Results demonstrate that Ramie grown in the temperate environment can be harvested three times a year. The yield of green Ramie plants per annum was almost 10 000 g m⁻². The fresh Ramie plant is composed, by weight, of 30% green leaves and 70% green stems. The yield dry fibre is almost 3% of the green stems, giving a total yield of 200 g m⁻². Spanish Broom can reach a fresh biomass yield of 4000 g m⁻² per annum, represented by 53% of long slender terete green branches which constitutes the economic products. The dry yield per annum was about 1800 g m⁻² with a dry branchlets yield of 900 g m⁻². Ramie and Spanish Broom cortical fibres are multiple elementary fibres (ultimates) arranged in bundles. In Ramie, the elementary fibres are bound by gums and pectins, while in Spanish Broom they are bound together by lignin. Both species showed a thick secondary cell wall indicating a high cellulose content. Ramie ultimate fibres are flattened and irregular in shape, while those of Spanish Broom are more regular in shape. The diameter of the ultimates varies from 10 to 25 μm in Ramie, while the Spanish Broom ultimates ranges from 5 to 10 μm; the diameter of the whole bundle is about 50 μm for both species. Ramie fibre showed a content of lignin, pentosans and extractives lower than Spanish Broom. Both fibres had a high content of cellulose which, on the base of X-ray analysis, was evaluated to be in excess of 70%. Ramie and Spanish Broom fibres had tensile strength of 950 MPa and 700 MPa, respectively. The elastic moduli were ≈65 and ≈20 GPa, respectively, which well compare with the modulus of E-glass fibres (70–90 GPa). The strength of the fibre-matrix interface was measured using the single filament fragmentation technique and an epoxy resin as the polymer matrix. Values for carbon and glass fibres in the same resin were also measured for comparison. The interface strength for the vegetable fibres was higher than that of carbon and glass, likely due to a mechanical lock mechanism. These values confirm both fibres as potential replacement for man made fibres in composite materials.